常用缓冲溶液的配制方法.docx
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常用缓冲溶液的配制方法
常用缓冲溶液的配制方法
1．甘氨酸–盐酸缓冲液（0.05mol/L）
X毫升0.2mol/L甘氨酸+Y毫升0.2mol/LHCI，再加水稀释至200毫升
pH
X
Y
pH
X
Y
2.0
2.4
2.6
2.8
50
50
50
50
44.0
32.4
24.2
16.8
3.0
3.2
3.4
3.6
50
50
50
50
11.4
8.2
6.4
5.0
甘氨酸分子量=75.07，0.2mol/L甘氨酸溶液含15.01克/升。
2．邻苯二甲酸–盐酸缓冲液（0.05mol/L）
X毫升0.2mol/L邻苯二甲酸氢钾+0.2mol/LHCl，再加水稀释到20毫升
pH（20℃）
X
Y
pH（20℃）
X
Y
2.2
2.4
2.6
2.8
3.0
5
5
5
5
5
4.070
3.960
3.295
2.642
2.022
3.2
3.4
3.6
3.8
5
5
5
5
1.470
0.990
0.597
0.263
邻苯二甲酸氢钾分子量=204.23，0.2mol/L邻苯二甲酸氢溶液含40.85克/升
3．磷酸氢二钠–柠檬酸缓冲液
pH
0.2mol/LNa2HPO4
（毫升）
0.1mol/L
柠檬酸
（毫升）
pH
0.2mol/LNa2HPO4
（毫升）
0.1mol/L
柠檬酸
（毫升）
2.2
2.4
2.6
2.8
3.0
3.2
3.4
3.6
3.8
4.0
4.2
4.4
4.6
4.8
5.0
0.40
1.24
2.18
3.17
4.11
4.94
5.70
6.44
7.10
7.71
8.28
8.82
9.35
9.86
10.30
10.60
18.76
17.82
16.83
15.89
15.06
14.30
13.56
12.90
12.29
11.72
11.18
10.65
10.14
9.70
5.2
5.4
5.6
5.8
6.0
6.2
6.4
6.6
6.8
7.0
7.2
7.4
7.6
7.8
8.0
10.72
11.15
11.60
12.09
12.63
13.22
13.85
14.55
15.45
16.47
17.39
18.17
18.73
19.15
19.45
9.28
8.85
8.40
7.91
7.37
6.78
6.15
5.45
4.55
3.53
2.61
1.83
1.27
0.85
0.55
Na2HPO4分子量=14.98，0.2mol/L溶液为28.40克/升。
Na2HPO4·2H2O分子量=178.05，0.2mol/L溶液含35.01克/升。
C4H2O7·H2O分子量=210.14，0.1mol/L溶液为21.01克/升。
4．柠檬酸–氢氧化钠-盐酸缓冲液
pH
钠离子浓度
（mol/L）
柠檬酸（克）
C6H8O7·H2O
氢氧化钠（克）
NaOH97%
盐酸（毫升）
HCl（浓）
最终体积（升）①
2.2
3.1
3.3
4.3
5.3
5.8
6.5
0.20
0.20
0.20
0.20
0.35
0.45
0.38
210
210
210
210
245
285
266
84
83
83
83
144
186
156
160
116
106
45
68
105
126
10
10
10
10
10
10
10
① 使用时可以每升中加入1克克酚，若最后pH值有变化，再用少量50% 氢氧化钠溶液或浓盐酸调节，冰箱保存。
5．柠檬酸–柠檬酸钠缓冲液（0.1mol/L）
pH
0.1 mol/L
柠檬酸
（毫升）
0.1 mol/L
柠檬酸钠
（毫升）
pH
0.1 mol/L
柠檬酸
（毫升）
0.1 mol/L
柠檬酸钠
（毫升）
3.0
3.2
3.4
3.6
3.8
4.0
4.2
4.4
4.6
4.8
18.6
17.2
16.0
14.9
14.0
13.1
12.3
11.4
10.3
9.2
1.4
2.8
4.0
5.1
6.0
6.9
7.7
8.6
9.7
10.8
5.0
5.2
5.4
5.6
5.8
6.0
6.2
6.4
6.6
8.2
7.3
6.4
5.5
4.7
3.8
2.8
2.0
1.4
11.8
12.7
13.6
14.5
15.3
16.2
17.2
18.0
18.6
柠檬酸C6H8O7·H2O：
分子量210.14，0.1mol/L溶液为21.01克/升。
柠檬酸钠Na3C6H5O7·2H2O：
分子量294.12，0.1mol/L溶液为29.41克/毫升。
6．乙酸–乙酸钠缓冲液（0.2mol/L）
pH（18℃）
0.2 mol/L
NaAc
（毫升）
0.3 mol/L
HAc
（毫升）
pH（18℃）
0.2 mol/L
NaAc
（毫升）
0.3 mol/L
HAc
（毫升）
2.6
3.8
4.0
4.2
4.4
4.6
0.75
1.20
1.80
2.65
3.70
4.90
9.25
8.80
8.20
7.35
6.30
5.10
4.8
5.0
5.2
5.4
5.6
5.8
5.90
7.00
7.90
8.60
9.10
9.40
4.10
3.00
2.10
1.40
0.90
0.60
Na2Ac·3H2O分子量=136.09，0.2mol/L溶液为27.22克/升。
7．磷酸盐缓冲液
（1）磷酸氢二钠–磷酸二氢钠缓冲液（0.2）
pH
0.2 mol/L
Na2HPO4
（毫升）
0.3 mol/L
NaH2PO4
（毫升）
pH
0.2 mol/L
Na2HPO4
（毫升）
0.3 mol/L
NaH2PO4
（毫升）
5.8
5.9
6.0
6.1
6.2
6.3
6.4
6.5
6.6
6.7
6.8
6.9
8.0
10.0
12.3
15.0
18.5
22.5
26.5
31.5
37.5
43.5
49.5
55.0
92.0
90.0
87.7
85.0
81.5
77.5
73.5
68.5
62.5
56.5
51.0
45.0
7.0
7.1
7.2
7.3
7.4
7.5
7.6
7.7
7.8
7.9
8.0
61.0
67.0
72.0
77.0
81.0
84.0
87.0
89.5
91.5
93.0
94.7
39.0
33.0
28.0
23.0
19.0
16.0
13.0
10.5
8.5
7.0
5.3
Na2HPO4·2H2O分子量=178.05，0.2mol/L溶液为85.61克/升。
Na2HPO4·12H2O分子量=358.22，0.2mol/L溶液为71.64克/升。
Na2HPO4·2H2O分子量=156.03，0.2mol/L溶液为31.21克/升。
（2）磷酸氢二钠–磷酸二氢钾缓冲液（1/15mol/L）
pH
mol/L/15Na2HPO4
（毫升）
mol/L//15KH2PO4
（毫升）
pH
mol/L//15Na2HPO4
（毫升）
mol/L//15KH2PO4
（毫升）
4.92
5.29
5.91
6.24
6.47
6.64
6.81
6.98
0.10
0.50
1.00
2.00
3.00
4.00
5.00
6.00
9.90
9.50
9.00
8.00
7.00
6.00
5.00
4.00
7.17
7.38
7.73
8.04
8.34
8.67
8.18
7.00
8.00
9.00
9.50
9.75
9.90
10.00
3.00
2.00
1.00
0.50
0.25
0.10
0
Na2HPO4·2H2O分子量=178.05，1/15M溶液为11.876克/升。
KH2PO4分子量=136.09，1/15M溶液为9.078克/升。
8．磷酸二氢钾–氢氧化钠缓冲液（0.05M）
X毫升0.2MK2PO4+Y毫升0.2NNaOH加水稀释至29毫升
pH（20℃）
X（毫升）
Y（毫升）
pH（20℃）
X（毫升）
Y（毫升）
5.8
6.0
6.2
6.4
6.6
6.8
5
5
5
5
5
5
0.372
0.570
0.860
1.260
1.780
2.365
7.0
7.2
7.4
7.6
7.8
8.0
5
5
5
5
5
5
2.963
3.500
3.950
4.280
4.520
4.680
9．巴比妥钠-盐酸缓冲液（18℃）
pH
0.04M巴比妥钠溶液
0.2V盐酸
pH
0.04M巴比妥钠溶液（毫升）
0.2N盐酸（毫升）
6.8
7.0
7.2
7.4
7.6
7.8
8.0
8.2
100
100
100
100
100
100
100
100
18.4
17.8
16.7
15.3
13.4
11.47
9.39
7.21
8.4
8.6
8.8
9.0
9.2
9.4
9.6
100
100
100
100
100
100
100
100
5.21
3.82
2.52
1.65
1.13
0.70
0.35
巴比妥钠盐分子量=206.18;0.04M溶液为8.25克/升
10．Tris–盐酸缓冲液（0.05M，25℃）
50毫升0.1M三羟甲基氨基甲烷（Tris）溶液与X毫升0.1N盐酸混匀后，加水稀释至100毫升。
pH
X（毫升）
pH
X（毫升）
7.10
7.20
7.30
7.40
7.50
7.60
7.70
7.80
7.90
8.00
45.7
44.7
43.4
42.0
40.3
38.5
36.6
34.5
32.0
29.2
8.10
8.20
8.30
8.40
8.50
8.60
8.70
8.80
8.90
26.2
22.9
19.9
17.2
14.7
12.4
10.3
8.5
7.0
三羟甲基氨基甲烷（Tris）HOCH2CH2OH
C
HOCH2NH2
分子量=121.14;
0.1M溶液为12.114克/升。
Tris溶液可从空气中吸收二氧化碳，使用时注意将瓶盖严。
11．硼酸–硼砂缓冲液（0.2M硼酸根）
pH
0.05M硼砂（毫升）
0.2M硼砂（毫升）
pH
0.05M硼砂（毫升）
0.2M硼酸（毫升）
7.4
7.6
7.8
8.0
1.0
1.5
2.0
3.0
9.0
8.5
8.0
7.0
8.2
8.4
8.7
9.0
3.5
4.5
6.0
8.0
6.5
5.5
4.0
2.0
硼砂Na2B4O7·H2O,分子量=381.43;0.05M溶液（=0.2M硼酸根）含19.07克/升。
硼酸H2BO3,分子量=61.84,0.2M溶液为12.37克/升。
硼砂易失去结晶水，必须在带塞的瓶中保存。
11．硼酸-硼砂缓冲液（0.2M硼酸根）
pH
0.05M硼砂（毫升）
0.2M硼酸（毫升）
pH
0.05M硼砂（毫升）
0.2M硼酸（毫升）
7.4
7.6
7.8
8.0
1.0
1.5
2.0
3.0
9.0
8.5
8.0
7.0
8.2
8.4
8.7
9.0
3.5
4.5
6.0
8.0
6.5
5.5
4.0
2.0
硼砂Na2B4O7·10H2O,分子量=381.43;0.05M溶液（=0.2M硼酸根）含19.07克/升。
硼酸H2BO3，分子量=61.84,0.2M溶液为12.37克/升。
硼砂易失去结晶水，必须在带塞的瓶中保存。
12．甘氨酸–氢氧化钠缓冲液（0.05M）
X毫升0.2M甘氨酸+Y毫升0.2NnaOH加水稀释至200毫升
pH
X
Y
pH
X
Y
8.6
8.8
9.0
9.2
9.4
50
50
50
50
50
4.0
6.0
8.8
12.0
16.8
9.6
9.8
10.0
10.4
10.6
50
50
50
50
50
22.4
27.2
32.0
38.6
45.5
甘氨酸分子量=75.07;0.2M溶液含15.01克/升。
13．硼砂-氢氧化钠缓冲液（0.05M硼酸根）
X毫升0.05M硼砂+Y毫升0.2NNaOH加水稀释至200毫升
pH
X
Y
pH
X
Y
9.3
9.4
9.6
50
50
50
6.0
11.0
23.0
9.8
10.0
10.1
50
50
50
34.0
43.0
46.0
硼砂Na2B4O7·10H2O,分子量=381.43;0.05M溶液为19.07克/升。
14．碳酸钠-碳酸氢钠缓冲液（0.1M）
Ca2+、Mg2+存在时不得使用
pH
0.1MNa2CO3（毫升）
0.1MN2HCO3（毫升）
20℃
37℃
9.16
9.40
9.51
9.78
9.90
10.14
10.28
10.53
10.83
8.77
9.12
9.40
9.50
9.72
9.90
10.08
10.28
10.57
1
2
3
4
5
6
7
8
9
9
8
7
6
5
4
3
2
1
Na2CO2·10H2O分子量=286.2;0.1M溶液为28.62克/升。
N2HCO3分子量=84.0;0.1M溶液为8.40克/升。
15．“PBS”缓冲液
PH
7.6
7.4
7.2
7.0
H2O
NaCl
Na2HPO4
NaH2PO4
1000
8.5
2.2
0.1
1000
8.5
2.2
0.2
1000
8.5
2.2
0.3
100ml
8.5g
2.2g
0.4g
附录四常用缓冲溶液的配制
（一）磷酸氢二钠-柠檬酸缓冲液
pH
0.2mol/L
Na2HPO4（mL）
0.1mol/L
柠檬酸（mL）
pH
0.2mol/L
Na2HPO4（mL）
0.1 mol/L
柠檬酸（mL）
2.2
2.4
2.6
2.8
3.0
3.2
3.4
3.6
3.8
4.0
4.2
4.4
4.6
4.8
5.0
0.40
1.24
2.18
3.17
4.11
4.94
5.70
6.44
7.10
7.71
8.28
8.82
9.35
9.86
10.30
19.60
18.76
17.82
16.83
15.89
15.06
14.30
13.56
12.90
12.29
11.72
11.18
10.65
10.14
9.70
5.2
5.4
5.6
5.8
6.0
6.2
6.4
6.6
6.8
7.0
7.2
7.4
7.6
7.8
8.0
10.72
11.15
11.60
12.09
12.63
13.22
13.85
14.55
15.45
16.47
17.39
18.17
18.73
19.15
19.45
9.28
8.85
8.40
7.91
7.37
6.78
6.15
5.45
4.55
3.53
2.61
1.83
1.27
0.85
0.55
Na2HPO4分子量＝141.98；0.2mol/L溶液为28.40g/L。
Na2HPO4·2H2O分子量＝178.05；0.2mol/L溶液为35.61g/L。
Na2HPO4·12H2O分子量＝358.22；0.2mol/L溶液为71.64g/L。
C6H8O7·H2O分子量＝210.14；0.1mol/L溶液为21.01g/L。
（二）柠檬酸-柠檬酸钠缓冲液（0.1mol/L）
pH
0.1 mol/L
柠檬酸（mL）
0.1mol/L
柠檬酸钠（mL）
pH
0.1mol/L
柠檬酸（mL）
0.1mol/L
柠檬酸钠（mL）
3.0
18.6
1.4
5.0
8.2
11.8
3.2
17.2
2.8
5.2
7.3
12.7
3.4
16.0
4.0
5.4
6.4
13.6
3.6
14.9
5.1
5.6
5.5
14.5
3.8
14.0
6.0
5.8
4.7
15.3
4.0
13.1
6.9
6.0
3.8
16.2
4.2
12.3
7.7
6.2
2.8
17.2
4.4
11.4
8.6
6.4
2.0
18.0
4.6
10.3
9.7
6.6
1.4
18.6
4.8
9.2
10.8
柠檬酸：
C6H8O7·H2O分子量＝210.14；0.1mol/L溶液为21.01g/L。
柠檬酸钠：
Na3C6H5O7·2H2O分子量＝294.12；0.1mol/L溶液为29.41g/L。
（三）醋酸-醋酸钠缓冲液（0.2mol/L）
pH
（18℃）
0.2mol/L
NaAc （mL）
0.2mol/L
HAc （mL）
pH
（18℃）
0.2mol/L
NaAc （mL）
0.2mol/L
HAc （mL）
3.6
0.75
9.35
4.8
5.90
4.10
3.8
1.20
8.80
5.0
7.00
3.00
4.0
1.80
8.20
5.2
7.90
2.10
4.2
2.65
7.35
5.4
8.60
1.40
4.4
3.70
6.30
5.6
9.10
0.90
4.6
4.90
5.10
5.8
6.40
0.60
NaAc·3H2O分子量＝136.09；0.2mol/L溶液为27.22g/L。
冰乙酸11.8mL稀释至1L（需标定）。
（四）磷酸二氢钾-氢氧化钠缓冲液（0.05mol/L）
X毫升0.2mol/LKH2PO4+Y毫升0.2mol/LNaOH加水稀释至20毫升。
pH （20℃）
X （mL）
Y （mL）
pH （20℃）
X （mL）
Y （mL）
5.8
5
0.372
7.0
5
2.963
6.0
5
0.570
7.2
5
3.500
6.2
5
0.860
7.4
3.950
6.4
5
1.260
7.6
5
4.280
6.6
5
1.780
7.8
5
4.520
6.8
5
2.365
8.0
5
4.680
（五）磷酸氢二钠-磷酸二氢钠缓冲液（0.2mol/L）
pH
0.2mol/L
Na2HPO4 （mL）
0.2mol/L
NaH2PO4（mL）
pH
0.2mol/L
Na2HPO4 （mL）
0.2mol/L
NaH2PO4（mL）
5.8
8.0
92.0
7.0
61.0
39.0
5.9
10.0
90.0
7.1
67.0
33.0
6.0
12.3
87.7
7.2
72.0
28.0
6.1
15.0
85.0
7.3
77.0
23.0
6.2
18.5
81.5
7.4
81.0
19.0
6.3
22.5
77.5
7.5
84.0
16.0
6.4
26.5
73.5
7.6
87.0
13.0
6.5
31.5
68.5
7.7
89.5
10.5
6.6
37.5
62.5
7.8
91.5
8.5
6.7
43.5
56.5
7.9
93.0
7.0
6.8
49.0
51.0
8.0
94.7
5.3
6.9
55.0
45.0
Na2HPO4·2H2O分子量＝178.05；0.2mol/L溶液为35.61g/L。
Na2HPO4·12H2O分子量＝358.22；0.2mol/L溶液为71.64g/L。
NaH2PO4·H2O分子量＝138.01；0.2mol/L溶液为27.6g/L。
NaH2PO4·2H2O分子量＝156.03；0.2mol/L溶液为31.21g/L。
（六）巴比妥纳-盐酸缓冲液
pH
（18℃）
0.04mol/L
巴比妥钠
（mL）
0.2mol/L
HCl（mL）
PH
（18℃）
0.04mol/L
巴比妥钠
（mL）
0.2mol/L
HCl（mL）
6.8
100
18.4
8.4
100
5.21
7.0
100
17.8
8.6
100
3.82
7.2
100
16.7
8.8
100
2.52
7.4
100
15.3
9.0
100
1.65
7.6
100
13.4
9.2
100
1.13
7.8
100
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