中图版微生物培养技术 单元测试.docx
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中图版微生物培养技术单元测试
微生物培养技术
（时间:
100分钟,满分:
100分）
一、选择题（每小题2分,共50分）
1.下列叙述正确的是（ ）
A.培养基是为微生物的生长繁殖提供营养的基质
B.培养基只有两类:
液体培养基和固体培养基
C.固体培养基中加入少量水即可制成液体培养基
D.微生物在固体培养基上生长时,可以形成肉眼可见的单个细菌
解析:
培养基是为微生物生长繁殖提供营养的基质。
按培养基的形态分为固体培养基、半固体培养基和液体培养基。
固体培养基是液体培养基中加入凝固剂后制成的,加水不能再变成液体培养基。
单个细菌用肉眼看不见,肉眼可见的是培养基上形成的菌落。
答案:
A
2.用平板划线法或稀释涂布平板法接种大肠杆菌时（ ）
①可以用相同的培养基 ②都需要使用接种环进行接种
③都需要在火焰旁进行接种 ④都可以用来计数活菌
A.①②B.③④C.①③D.②④
解析:
平板划线法或稀释涂布平板法都使用固体培养基,故①正确;平板划线法采用接种环进行操作,而稀释涂布平板法采用涂布器进行操作,故②错误;无菌操作需要在火焰旁接种,避免空气中的微生物混入培养基,故③正确;平板划线法一般用于分离而不是计数,故④错误。
答案:
C
3.要从多种细菌中分离某种细菌,培养基要用（ ）
A.加入青霉素的培养基
B.加入高浓度食盐的培养基
C.固体培养基
D.液体培养基
解析:
固体培养基主要用于微生物分离、鉴定等。
液体培养基主要用于工业生产。
加入青霉素的选择培养基能抑制细菌和放线菌的生长,从而分离出酵母菌和霉菌。
加入高浓度食盐的培养基可抑制多种细菌生长,可分离出金黄色葡萄球菌。
本题没有说明分离哪种细菌,故应用固体培养基。
答案:
C
4.大肠杆菌能够在哪种培养基上生长繁殖?
（ ）
A.无氮培养基
B.分解尿素的细菌的选择培养基
C.纤维素分解菌的选择培养基
D.牛肉膏蛋白胨培养基
答案:
D
5.平板冷凝后要将平板倒置,其意义是（ ）
A.利于大肠杆菌的接种
B.防止杂菌污染
C.利于培养基的冷却
D.防止皿盖冷却水倒流入培养基
解析:
平板冷凝后若不倒置,蒸发后的水分冷却后凝集在皿盖上,会流入培养基,导致菌落连成一片。
答案:
D
6.下列关于灭菌和消毒的理解不正确的是（ ）
A.灭菌是指杀灭环境中的一切微生物,包括芽孢和孢子
B.消毒和灭菌实质上是完全相同的
C.接种环用灼烧法灭菌
D.常用灭菌方法有灼烧法、干热灭菌法、高压蒸汽灭菌法
解析:
消毒是使用较为温和的物理或化学方法仅杀死物体表面或内部一部分对人体有害的微生物（不包括芽孢和孢子）,灭菌则是使用强烈的理化因素杀死物体内外所有的微生物,包括芽孢和孢子。
答案:
B
7.制备各种牛肉膏蛋白胨固体培养基,关于倒平板的具体描述正确的是（ ）
①待培养基冷却至40℃左右时,在酒精灯火焰附近倒平板 ②将灭过菌的培养皿放在桌面上,左手拔出棉塞 ③右手拿锥形瓶,使瓶口迅速通过火焰 ④用左手打开皿盖放于桌上 ⑤右手将锥形瓶中培养基倒入培养皿,左手立即盖上培养皿的皿盖
A.①③④⑤B.④⑤
C.③⑤D.①②④
解析:
琼脂是一种多糖,在98℃以上可溶解于水,在45℃以下凝固,倒平板时高于50℃则会烫手,低于50℃时若不能及时操作,培养基会凝固。
无菌操作应贯穿于操作的全过程,倒平板时,用左手将培养皿打开一条缝隙,右手将培养基倒入培养皿,左手立即盖上皿盖。
答案:
C
8.下列有关细菌培养的叙述,正确的是（ ）
A.在琼脂固体培养基上长出的单个菌落含有多种细菌
B.在培养基中加入青霉素可抑制真菌而促进细菌生长
C.向液体培养基中通入氧气能促进破伤风杆菌的生长
D.在半固体培养基中接种细菌培养后可以观察其运动
解析:
菌落是由单个细菌细胞或一堆同种细胞在适宜固体培养基表面或内部生长繁殖到一定程度,形成肉眼可见的有一定形态结构等特征的子细胞群体,故只含一种细菌;青霉素是抗菌素,抑制细菌细胞壁的合成,对真菌不起作用;破伤风杆菌为严格厌氧型细菌,通入氧气,破伤风杆菌死亡。
答案:
D
9.在培养基的配制过程中,有如下步骤,其正确顺序为（ ）
①溶解 ②调pH ③加棉塞 ④包扎 ⑤培养基的分装
⑥称量
A.①②⑥⑤③④B.⑥①②⑤③④
C.⑥①②⑤④③D.①②⑤④⑥③
解析:
应先称量,溶解后调pH,分装后加棉塞,最后包扎。
答案:
B
10.下列属于菌落特征的是（ ）
①菌落的形状 ②菌落的大小 ③菌落的多少 ④隆起程度 ⑤颜色 ⑥有无荚膜
A.①②③④B.①②④⑤
C.②③④⑥D.①②③④⑤⑥
解析:
不同种类的细菌所形成的菌落大小、形状、光泽度、颜色、硬度、透明度等方面具有一定特征,所以,每种细菌在一定条件下所形成的菌落可以作为鉴定的重要依据。
单个的细菌用肉眼是看不见的,故细菌的个体特征（如⑥）不能作为菌种鉴定的依据。
答案:
B
11.将硝化细菌接种到下列培养基中,其中可以长出硝化细菌菌落的是（ ）
A.无氮培养基,试管密闭
B.无氮培养基,试管口用棉塞塞住
C.含氮培养基,试管密闭
D.含氮培养基,试管口用棉塞塞住
解析:
硝化细菌是自养需氧型微生物,利用无机氮源,因此培养硝化细菌需要含氮的培养基,试管口用棉塞塞住（可通气）。
答案:
D
12.下列关于微生物的培养和分离的叙述,不正确的是（ ）
A.细菌能在液体培养基中以二分裂方式迅速扩增
B.噬菌体或大肠杆菌可在蛋白胨培养基中增殖
C.灭菌的目的是消灭与培养菌竞争的杂菌
D.稀释涂布法分散细菌得到单菌落的效果更好
解析:
细菌的繁殖方式是二分裂;噬菌体是没有细胞结构的病毒,需要在活细胞中才能生活,在蛋白胨培养基中不能增殖;灭菌目的是防止杂菌和培养菌发生竞争。
答案:
B
13.下表表示某培养基的配方,下列叙述正确的是（ ）
成分
蛋白胨
葡萄糖
K2HPO4
伊红
美蓝
蒸馏水
含量
10g
10g
2g
0.4g
0.065g
1000mL
A.从物理性质看该培养基属于液体培养基,从用途看该培养基属于选择培养基
B.培养基中属于碳源的物质主要是葡萄糖,属于氮源的物质是蛋白胨
C.该培养基缺少提供生长因子的物质
D.对培养基调节至合适的pH后就可以接种菌种使用
解析:
从配方可知,该培养基为鉴别培养基,用于鉴别大肠杆菌;碳源主要是葡萄糖,氮源是蛋白胨,蛋白胨同时又可以为大肠杆菌提供生长因子;该培养基在使用前不仅要调节pH,而且要进行严格的灭菌。
答案:
B
14.“筛选”是分离和培养生物新类型常用的手段,下列有关技术中不能筛选成功的是（ ）
A.在全营养的普通培养基中,筛选大肠杆菌
B.在尿素固体培养基中,筛选能够分解尿素的微生物
C.用纤维素为唯一碳源的培养基,筛选能分解纤维素的微生物
D.在培养基中加入不同浓度的氯化钠,筛选抗盐突变体植物
解析:
全营养的普通培养基上多种细菌可生长,筛选不到纯的大肠杆菌。
答案:
A
15.下列有关培养基的配制原则,表述正确的是（ ）
A.任何培养基都必须含有碳源、氮源、矿质元素、生长因子
B.碳源和氮源必须具有一定比例,碳元素的含量最多,其次为氮元素
C.微生物的生长除受营养因素影响外,还受到pH、氧、渗透压的影响
D.营养物质的浓度越高越好
解析:
不同的微生物需要的营养不同,如自生固氮菌能利用空气中的N2,因而培养基中无需添加氮源;碳源和氮源须具有一定的比例,但碳元素不一定最多;营养物质浓度太高,会导致微生物失水。
答案:
C
16.三个培养皿中分别加入10mL不同的培养基,然后接种相同的大肠杆菌样液。
培养36h后,计算菌落数,结果如下表。
下列选项正确的是（ ）
培养皿
培养基成分
菌落数
Ⅰ
琼脂、葡萄糖
35
Ⅱ
琼脂、葡萄糖、生长因子
250
Ⅲ
琼脂、生长因子
0
A.该实验采用的是液体培养基
B.该实验采用平板划线法接种
C.Ⅰ和Ⅲ对照,说明大肠杆菌的生长不需要生长因子
D.Ⅱ和Ⅲ对照,说明大肠杆菌的生长需要葡萄糖
解析:
该培养基加入了琼脂,故为固体培养基,对微生物进行计数,宜采用稀释平板计数法（而不是平板划线法）接种;Ⅰ与Ⅲ对照,说明大肠杆菌生长需要葡萄糖,但不能证明是否需要生长因子;Ⅱ和Ⅲ对照,自变量是有无葡萄糖,说明大肠杆菌的生长需要葡萄糖。
答案:
D
17.下列有关平板划线操作的叙述,不正确的是（ ）
A.将接种环放在火焰上灼烧,直到接种环烧红
B.接种环在平板上划线位置是随机的
C.在挑取菌种前和接种完毕后均要将试管口通过火焰
D.最后将平板倒置,放入恒温箱中培养
解析:
A、C、D均属于正确的无菌操作步骤。
用接种环在培养基上划线时应把培养基划分成5个首尾相连的区域（第一区域与第五区域不相接）,划线位置不是随机的。
答案:
B
18.下列关于制备牛肉膏蛋白胨固体培养基的说法中,错误的是（ ）
A.操作顺序为称量、溶解、倒平板、灭菌
B.将称好的牛肉膏连同称量纸一同放入烧杯
C.待培养基冷却至50℃左右时进行倒平板
D.待平板冷却凝固约5~10min后将平板倒过来放置
解析:
制备牛肉膏蛋白胨固体培养基的步骤是称量、溶解、灭菌、倒平板,不能颠倒。
牛肉膏容易吸潮,所以当牛肉膏溶化并与称量纸分离后,用玻璃棒取出称量纸。
待培养基冷却至50℃左右时,进行倒平板。
平板冷却几分钟后还需倒置。
答案:
A
19.细菌培养过程中分别采用了高压蒸汽、酒精、火焰灼烧等几种不同的处理,这些方法依次用于杀灭哪些部位的杂菌?
（ ）
A.接种环、手、培养基
B.高压锅、手、接种环
C.培养基、手、接种环
D.接种环、手、高压锅
解析:
高压蒸汽灭菌锅是灭菌的一个设备,通常用于培养基的灭菌。
用酒精擦拭双手是消毒的一种方法。
火焰灼烧可以迅速彻底地灭菌,适用于微生物的接种工具,如接种环。
答案:
C
20.为探究落叶是否在土壤微生物的作用下腐烂,下列各项构成了一个实验设计,其中不符合实验目的的步骤是（ ）
A.可选择带有落叶的土壤为实验材料,筛选出落叶和土壤
B.将落叶平均分成两份,把土壤也平均分成两份
C.将灭菌的落叶设为实验组,不做处理的落叶设为对照组
D.将落叶分别埋入两组土壤中,观察腐烂情况
解析:
该实验是为了探究落叶的分解是否与土壤微生物有关,所以该实验的自变量是土壤微生物的有无,其他无关变量实验组和对照组均应保持一致。
答案:
C
21.在寻找目的菌株时,要根据它对生存环境的要求,到相应的环境中去寻找,下列不属于厌氧细菌生存环境的是（ ）
A.土壤深层B.人或动物体内
C.真空D.池塘淤泥
解析:
厌氧型微生物的生长繁殖不仅需要厌氧环境,同时还需要生存所必需的各种营养物质,如碳源、氮源、水、无机盐等。
真空环境只能提供无氧环境,却不能提供其他营养物质。
答案:
C
22.给无氮培养基接种土壤稀泥浆的方法是（ ）
A.打开培养皿盖,取一根接种环蘸取少许稀泥浆,轻轻地点接在培养基的表面上
B.取一根接种环在酒精灯的火焰上灭菌后蘸取少许稀泥浆,略微打开培养皿盖,在培养基的表面轻点
C.打开培养皿基,取一根接种环在酒精灯的火焰上灭菌后蘸取少许稀泥浆,在培养基的表面轻点
D.略微打开培养皿盖,取一根接种环在酒精灯的火焰上灭菌,冷却后蘸取少许稀泥浆,在培养基的表面轻点
解析:
接种过程中要防止外来杂菌的入侵,左手将培养皿盖打开一条缝隙,右手将接种环在火焰上灭菌,冷却后蘸取少许泥浆,在培养基的表面轻点,否则未冷却接种环蘸取稀泥浆会杀灭细菌。
答案:
D
23.培养基配制需要运用灭菌和消毒技术,但两者消灭的微生物种类和数量是不同的。
下列哪一项能正确表示消毒结果和灭菌结果之间的关系?
（ ）
解析:
消毒实际上是部分灭菌。
答案:
B
24.某实验小组欲从土壤中筛选出能分解淀粉的芽孢杆菌。
下列叙述不正确的是（ ）
A.采样与培养:
称量1g土样置于刚配制的液体培养基中,30℃振荡培养
B.接种:
为避免培养液中菌体浓度过高,需经过系列稀释后接种
C.选择:
所用的固体培养基,作为唯一碳源的是淀粉
D.筛选:
将适量的碘液滴加到平板中的菌落周围,出现透明圈的说明此种菌能分解淀粉
解析:
为了确保分离出的目的菌是从土壤中分离的,所用培养液和仪器等都要严格灭菌,所以刚配制的培养基必须经高压蒸汽灭菌处理才能使用。
答案:
A
25.用培养液培养三种细菌,让它们在三支不同的试管中生长,右图显示了细菌的生长层,如果此时往三支试管中通入氧气,则细菌的繁殖速度将是（ ）
A.甲不变,乙减慢,丙加快
B.甲加快,乙加快,丙减慢
C.甲减慢,乙减慢,丙加快
D.甲减慢,乙加快,丙减慢
解析:
甲试管内的细菌在试管上部,为好氧菌,乙试管内的细菌均匀分布,为兼性厌氧菌,丙试管内的细菌在试管底部,为厌氧菌。
向试管内通入空气,能够促进兼性厌氧菌和好氧菌的代谢,抑制厌氧菌的繁殖。
答案:
B
二、非选择题（共50分）
26.（10分）分析下面培养基的配方,回答下面的问题。
成分
含量/g
KH2PO4
1.4
Na2HPO4
2.1
MgSO4·7H2O
0.2
葡萄糖
10.0
尿素
1.0
琼脂
15.0
用蒸馏水定容到1000mL
（1）在该培养基的配方中,为微生物的生长提供碳源和氮源的分别是 和 。
（2）按物理性质划分该培养基属于 培养基,理由是培养基中含有 ;该类培养基常用于微生物的纯化、 和 。
（3）由于培养基中只有尿素一种 源,所以该培养基只能用于能够合成 的微生物的培养。
用此培养基培养土壤浸出液能够从土壤中筛选出 细菌。
（4）在微生物学中,将允许特定种类的微生物生长,并能抑制或阻止其他种类微生物生长的培养基,称作 培养基。
解析:
（1）碳源是提供碳元素的物质,氮源是提供氮元素的物质。
所以碳源是葡萄糖,氮源是尿素。
（2）根据物理性质可以将培养基分为固体培养基、液体培养基和半固体培养基,固体培养基中添加了琼脂作凝固剂,常用于微生物的纯化、分离和计数。
（3）绝大多数生物都能利用葡萄糖,但是,只有能合成脲酶的微生物才能分解尿素,所以此培养基对微生物有选择作用,选择对象是能够利用尿素的微生物。
（4）该培养基称为选择培养基。
答案:
（1）葡萄糖 尿素
（2）固体 凝固剂琼脂 分离 计数
（3）氮 脲酶 分解尿素的
（4）选择
27.（9分）下表为牛肉膏蛋白胨培养基的成分列表,据此回答下列问题。
成分
牛肉膏
蛋白胨
NaCl
H2O
含量
0.5g
1g
0.5g
100mL
（1）蛋白胨在培养基中的作用是 。
（2）要用此材料配制观察细菌菌落状况的培养基,还需添加的成分是 。
（3）培养基配制好后,分装前应进行的工作是 。
（4）从配制培养基直到培养完成,所采用的预防杂菌污染的方法是 。
（5）在培养基凝固前要搁置斜面,其目的是 。
解析:
蛋白胨中有大量的蛋白质降解而成的多肽类等物质,在培养基中提供碳源和氮源。
微生物菌落的形成是在固体培养基上,所以此培养基还需加琼脂。
配制好培养基后,必须先调pH,再分装,整个过程要严格无菌操作。
答案:
（1）提供碳源和氮源
（2）琼脂
（3）调整pH
（4）高压蒸汽灭菌、灼烧接种环、酒精擦手、在火焰旁接种、棉塞塞试管口等
（5）扩大接种面积
28.（11分）高效产生高温淀粉酶的嗜热菌,其筛选过程如下图所示。
（1）从用途上来说,Ⅰ号培养基属于 培养基;从物理状态上来说,Ⅱ号培养基属于固体培养基,配制时一般加入 作为凝固剂。
Ⅰ号培养基中除了加入淀粉外,还需加入另一种重要的营养成分 。
A.琼脂B.葡萄糖
C.硝酸铵 D.碳酸氢钠
（2）进行①过程的目的是 ;②过程所使用的接种方法是 法。
（3）Ⅰ、Ⅱ号培养基配制和灭菌时,灭菌与调节pH的先后顺序是 ;一般对配制的培养基采用 法灭菌。
（4）部分嗜热菌在Ⅰ号培养基上生长时可释放 分解培养基中的淀粉,在菌落周围形成透明圈;应挑出透明圈 （选填“大”或“小”）的菌落,接种到Ⅱ号培养基。
（5）一般对配制的培养基采用高压灭菌,其中“高压”是为了 。
解析:
由图中显示,在①前后试管中细菌数目减少,可推知此过程为稀释,②过程后使用划线法对细菌进行固体培养基培养,可推知此过程为分离纯化嗜热菌。
由图示可知表示过程是嗜热菌分离纯化的过程,Ⅰ号培养基为选择培养基。
在培养微生物的培养基中,碳源和氮源必不可少,所以除淀粉提供碳源外,还应加入硝酸铵提供氮源。
细菌芽孢是在极端环境中产生的,具有耐高温等特点,只有用高温高压,才能杀死细菌芽孢,防止培养基污染。
答案:
（1）选择 琼脂 C
（2）稀释 稀释涂布平板
（3）先调节pH,后灭菌 高压蒸汽灭菌
（4）淀粉酶 大
（5）杀死培养基中的细菌芽孢
29.（8分）饲养动物常用的植物饲料中含有难溶的植酸钙等物质,很难被动物吸收利用,还影响对其他营养物质的利用。
若在饲料中添加植酸酶,则能催化其水解成为可以吸收利用的磷酸盐等。
以下是科研人员从作物根部土壤中分离产植酸酶的菌株的过程示意图。
请分析作答。
（1）培养基中除了添加植酸钙以外,还应含有 、 、水、无机盐等基本营养物质。
（2）为防止杂菌污染,要对培养基和培养皿等进行 ,而且须将接种后的培养皿呈 状态放置。
（3）接种以前进行的一系列操作,目的是在培养皿表面形成 。
根据土壤样品的稀释倍数和接种稀释液的体积,统计平板上的 就能大致推测出样品中的活菌数。
（4）由于植酸钙的不溶解性,使培养基中形成白色浑浊。
产植酸酶的菌株会水解植酸钙,菌落的周围将形成透明的区域,根据透明区域的有无,可初步判断该菌是否产植酸酶。
实验结果显示A~E五种菌株中, 是产植酸酶的理想菌株。
（5）获得目的菌以后,若要用于植酸酶的生产,还需要进行 。
解析:
（3）根据题图知,接种前的操作是系列稀释,目的是涂布后在培养基表面形成单个菌落。
（4）五个菌落中A、C、E周围有透明圈出现,说明可以产出植酸酶。
三个菌落中只有E的透明圈宽度与菌落半径比最大,说明该菌株的产酶效率最高,是理想菌株。
（5）筛选到的菌株若要用于生产,还需要进行扩大培养。
答案:
（1）碳源 氮源
（2）（高压蒸汽）灭菌 倒置
（3）单个菌落 菌落数
（4）E
（5）扩大培养
30.（12分）〔2014四川高考理综,10（节选）〕有机农药苯磺隆是一种除草剂,长期使用会污染环境。
研究发现,苯磺隆能被土壤中某些微生物降解。
分离降解苯磺隆的菌株和探索其降解机制的实验过程如图甲、乙所示。
图甲
图乙
（1）微生物生长繁殖所需的主要营养物质有碳源、水、 四类,该实验所用的选择培养基只能以苯磺隆作为唯一碳源,其原因是 。
（2）纯化菌株时,通常使用的划线工具是 。
划线的某个平板培养后,第一划线区域的划线上都不间断地长满了菌,第二划线区域所划的第一条线上无菌落,其他划线上有菌落。
造成划线无菌落可能的操作失误有 。
（3）为探究苯磺隆的降解机制,将该菌种的培养液过滤离心,取上清液做图乙所示实验。
该实验的假设是 ,该实验设计是否合理?
为什么?
。
解析:
（1）微生物生长繁殖所需营养物质有碳源、氮源、水和无机盐四类。
该实验是要分离能降解苯磺隆的菌株,所以以苯磺隆作为唯一碳源。
（2）进行菌株纯化时,常用的划线工具是接种环。
用接种环进行第二区域划线前需灼烧灭菌,灭菌后的接种环温度过高,若不经冷却立即进行划线操作,会使第一条线上无活菌存在。
另外,若划线未从第一区域末端开始,也会导致题述的划线无菌落现象。
（3）据图可知,该实验的假设为该微生物产生的分解苯磺隆的物质是蛋白质,该实验的设计不合理,因为缺少空白对照实验。
答案:
（1）氮源和无机盐 只有能利用苯磺隆的微生物能正常生长繁殖
（2）接种环 ①接种环灼烧后未冷却;②划线未从第一区域末端开始
（3）目的菌株能分泌降解苯磺隆的蛋白质 不合理,缺少空白对照
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