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第二章核酸的结构与功能教学提纲

商洛职业技术学院教案教案首页

课程名称

生物化学

序次

3

专业班级

2009级护理

授课教师

王文玉

职称

副教授

类型理论

学时2

授课题目

(章,节)

第二章核酸的结构与功能

第一节核酸的化学组成第二节DNA的结构与功能

第三节RNA的结构与功能第四节DNA的理化性质

教学目的

与要求

1.掌握两类核酸化学组成的异同和核酸的基本结构单位。

2.掌握核酸的基本单位、、单核苷酸在核酸中的连接方式。

3.熟悉多磷酸核苷酸的结构特点。

4.掌握核酸一级结构的概念和DNA双螺旋结构的要点。

5.了解DNA勺三级结构和功能。

6.掌握细胞内RNA勺主要种类及mRNAtRNArRNA的功能。

7.核酸变性、复性及分子杂交的概念。

8.熟悉核酸一般的理化性质;核酸酶。

教学重点

1.核酸的化学组成和基本单位,DNA勺各级结构。

2.细胞内RNA的主要种类及mRNAtRNArRNA的功能;

3.核酸变性、复性

教学难点

1.DNA的双螺旋结构及核小体结构。

2.核酸变性、复性及分子杂交

教学方法

和手段

课堂讲述和多媒体教学相结合

复习内容

1.蛋白质的各级结构及维持各级结构的化学键。

2.蛋白质的两性电离和等电点、蛋白质变性。

(5分钟)。

使用教材

全国医药类高职高专“十二五”规划教材《生物化学》邱烈王文玉主编,第四军医大学卫生出版社,2010年1月第1版。

实验指导为本校自编《生物化学实验指导》。

教案续页

基本内

辅助手段和时间分配

二章核酸的结构与功能

核酸分为脱氧核糖核酸(DNA和核糖核酸

(RNA)。

DNA存在于细

胞核和线粒体内,是遗传信息的载体;RNA存在于细胞核和细胞质内,

参与细胞内遗传物质的表达。

病毒的RNA也可作为遗传信息的载体。

第一节核酸的化学组成

25分钟

核酸的元素组成:

C、H、ON、P。

核酸水解产生核苷酸。

核苷酸完全水解可释放出等量的碱基、戊

糖和磷酸。

因此,核酸的基本组成单位是核苷酸。

而核苷酸则由碱基、

戊糖和磷酸3种成分连接而成。

一、碱基

嘌呤:

A、G;嘧啶:

C、U、T。

胸腺嘧啶只存在于DNA分子中,

挂图或幻灯

尿嘧啶只存在于RNA分子中。

核酸分子中除含有

A、GC、U或T等

片:

嘌呤和

碱基外,某些核酸中还含有其它碱基,称为稀有碱基,如黄嘌呤、次

嘧啶的化学

黄嘌呤、二氢尿嘧啶、甲基胞嘧啶等。

结构

嘌呤和嘧啶环中都有共轭双键,对260nm左右的紫外光有较强的

吸收,这一重要特性被用于核酸、核苷酸、核苷和碱基的定性和定量

分析。

N

IH2

O

N/

vNH

I

\X

J

£

NH、N^NH

NNH2

腺嘌呤(adenine,A)鸟嘌呤(guanine,G)

nh2

O

HV

胞嘧啶(C)

尿嘧啶Uracil,U)

尿嘧啶(U)

胸腺嘧啶ymine,T)

胸腺嘧啶(T)

 

挂图或幻灯

、戊糖

片:

核苷和

脱氧核苷

核酸中的戊糖有两类,即B-D-核糖和B-D-2-脱氧核糖。

D-核

糖存在于RNA中,D-2-脱氧核糖存在于DNA中。

为了和碱基的碳原子相区别,戊糖中的碳原子顺序用“C-1/,C-2/”表示。

挂图或幻灯

片:

构成核

D-2-脱氧核糖

酸的碱基、

 

三、核甘

核苷与相应

核苷酸的代

糖苷键是由戊糖的第1位碳原子上的羟基和嘧啶的第

1位氮原子

核苷是碱基与戊糖以糖苷键相连接所形成的化合物。

或嘌呤的第9位氮原子的氢脱水缩合而成。

核甘根据所含的碱基和戊糖来命名。

核苷:

AR,GR,UR,CR

脱氧核苷:

dAR,dGR,dTR,dCR

HO_

挂图或幻灯

片:

核苷酸

和环腺苷酸

的结构

 

 

四、核苷酸

核苷与磷酸通过磷酸酯键相连形成的化合物称为核苷酸。

核苷酸可分为两大类:

即核糖核苷酸和脱氧核糖核苷酸

脱氧核苷酸:

dAMP,dGMP,dTMP,dCMP

NH

HO—P—O—CH

核苷酸:

AMP,GMP,UMP,CMP

OH

OHOH

体内重要的游离核苷酸及其衍生物核苷酸除参与构成核酸外,

还具有多种重要的生理功能。

多磷酸核苷酸:

NMPNDPNTR含1个磷酸基团的核苷酸为核苷一磷酸(NMP,含2个或3个磷酸基团的核苷酸分别为核苷二磷酸(NDP或核苷三磷酸(NTP)。

环化核苷酸:

cAMPcGMP是重要的调节因子。

含核苷酸的生物活性物质:

NAD+、NADP、CoA-SHFAD等都

含有AMP

五、核酸中核苷酸的连接方式

核苷酸之间是通过5,磷酸二酯键连接的,即前一个核苷酸的3/羟基与后一个核苷酸的5,磷酸基脱水形成的化学键。

许多核苷酸借助3/5,磷酸二酯键连接形成了没有分支的线性大分子的多核苷酸链。

构成多核苷酸链主链的是戊糖和磷酸。

第二节DNA的结构与功能

20分钟

一、DNA的一级结构

DNA勺一级结构是指DNA分子中脱氧核苷酸的排列顺序。

由于脱氧核苷酸彼此的差别在于碱基部分,因此DNA的一级结构即为DNA分子中碱基的排列顺序。

DNA分子的每条多核苷酸链有两个末端,具有游离磷酸基的一端为5,末端,有游离羟基的一端为3,末端,书写时是从5,末端到3,末端。

二、DNA的二级结构

DNA勺碱基组成具有以下特点:

1腺嘌呤与胸腺嘧啶及鸟嘌呤与胞嘧啶的摩尔数相等;

2嘌呤碱和嘧啶碱的摩尔数相等(A+G=T+C)

3不同种属的生物碱基组成不同;

4同一个体的不同器官、不同组织的DNA碱基组成相同。

上述称为Chargaff规则。

DNA的二级结构为双螺旋结构。

1953年Watson和Crick提出了

著名的DNA双螺旋结构模型,其要点是:

1.DNA分子是由两条反向平行的多核苷酸链以右手螺旋方式围绕

同一中心轴盘绕而成的双螺旋结构。

2.在两条链中,磷酸与脱氧核糖链位于螺旋外侧,碱基位于螺旋内侧。

两条链之间的碱基处在同一平面,构成碱基平面,碱基平面彼此平行、互相重叠,并垂直于双螺旋的中心轴,螺旋表面形成大沟和小沟。

3.双螺旋的直径为2nm每两个相邻碱基对之间的距离为0.34nm,其旋转夹角为36°,螺旋每旋转一周含10对碱基,螺距为3.4nm。

4.两条多核苷酸链之间的碱基通过氢键配对,A-T之间形成2个

氢键,G-C之间形成3个氢键。

双螺旋结构的稳定靠氢键和碱基堆积

力维系。

挂图或幻灯

片:

DNA双

螺旋结构

、DNA的超级结构

超螺旋结构DNA双螺旋链再盘绕即形成超螺旋结构。

正超螺旋盘绕方向与DNA双螺旋方同相同

挂图或幻灯

片:

DNA的

超螺旋结构

负超螺旋盘绕方向与DNA双螺旋方向相反

意义:

DNA超螺旋结构整体或局部的拓扑学变化及其调控对于DNA复制和RNA专录过程具有关键作用。

真核生物染色体DNA是线性双螺旋结构,染色质DNA与组蛋白组成核小体。

许多核小体形成的串珠样线性结构再进一步盘曲成直径为30nm的纤维样结构,再经过几次卷曲,形成染色体结构。

四、DNA的功能

DNA是遗传信息的载体,是复制和转录的模版。

“基因”就是DNA中的碱基序列。

一个生物体的全部基因序列称为基因组。

“基因”中

DNA勺碱基序列决定了其表达的蛋白质的氨基酸的序列。

第三节RNA结构与功能

RNA在生命活动中具有重要作用,它和蛋白质共同负责基因的表达过程的调控。

20分钟

、mRNA

挂图或幻灯片:

细胞内主要RNA的分布与功能

挂图或幻灯

片:

mRNA5

帽子结构

细胞核内初合成的是不均一核RNAhnRNA是mRNA勺前体,hnRNA经过剪切加工转变为成熟的mRNA

1.添加帽子结构

2.添加多聚腺苷酸尾巴

 

帽子结构和多聚A尾的功能:

①mRN舷内向胞质的转位。

②mRNA的稳定性维系。

③翻译起始的调控

mRNA勺功能:

把DNA所携带的遗传信息,按碱基互补配对原则,抄录并传送至核糖体,用以决定其合成蛋白质的氨基酸排列顺序。

、tRNA

占细胞总RNA的15%由70-90个核苷酸组成的一类小分子RNA其主要功能是在蛋白质合成过程中作为各种氨基酸的载体,并按mRNA

挂图或幻灯

片:

tRNA的

上的遗传密码顺序“对号入座”地将其转给蛋白质

tRNA的结构特点

1.

稀有碱基

稀有碱基含10~20%稀有碱基,如DHU

2.3'末端为一CCA-OH5'末端大多数为G

 

3.二级结构呈三叶早型结构

4.DHU环、TWC环和反密码子环

5.三级结构呈倒L型

^—accaoagggc

一二二

幻灯片:

tRNA的二级结构与三级结构

UI

CIG

CIG

CIGA

UISCTP

C—GCAPA

Guuc<

CUCUCGUA

G8CAAGAegAsAAGD

DH

反密码于

蔚母HINA的一级结构与二级第构

tRNA的功能:

活化、搬运氨基酸到核糖体,参与蛋白质的翻译

 

三、rRNA

挂图或幻灯片:

生物

18SrRNA的

二级结构

核糖体RNA是细胞内含量最多的RNA占细胞总RNA勺80%以上。

rRNA与蛋白质结合形成的核糖体是蛋白质合成的场所。

原核生物含有三种rRNA真核生物含有四种rRNA在蛋白质合成过程中,各种rRNA本身并无单独执行功能的能力,必须与多种蛋白质结合成核糖体后才能发挥作用。

rRNA的功能:

参与组成核蛋白体,作为蛋白质生物合成的场所。

起着装配机的作用。

四、小分子核内RNA

snRNA是一类碱基数目小于300的小分子RNA参与mRNA勺剪切加工。

除了上述三种RNA外细胞的不同部位存在的许多其他种类的小分子RNA统称为非mRN/小RNA(snmRNAs)

snmRNA的种类:

核内小RNA、核仁小RNA、胞质小RNA、催化性小RNA、小片段干涉RNA。

snmRNA的功能:

参与hnRNA和rRNA的加工和转运。

五、核酶

锤头核酶的

结构

概念:

核酶(ribozyme)是指一类具有催化作用的RNA

种类:

(1)内含子的自我剪接型

(2)异体催化的剪切型

(3)自体催化的剪切型

(4)催化肽键的形成

有些rRNA具有催化功能,具有酶的性质。

核酶一级结构没有规律,二级结构呈锤头状。

15分钟

第三节核酸的理化性质

、核酸的一般性质

核酸是两性电解质,真核生物核酸多呈线性大分子。

核酸溶液的黏度比较大,核酸粘度降低或消失,即意味着变性或降解。

DNA分子的长度与直径之比达到107,极易在机械力的作用下发生断裂。

核酸的沉降特性。

、核酸的紫外吸收

核酸分子中的碱基含有共轭双键,有紫外吸收的性质,其最大吸收峰值在260nm利用核酸的紫外吸收特性,可以用紫外分光光度法对DNA和RNA4行定性和定量分析。

128

湖光系数

U騷A

8X1-

220240260280300320nm

波长

各种碱基的紫外吸收光谱<pH7.0)

三、核酸的变性与复性

(一)DNA的变性(denaturation)

定义:

在某些理化因素作用下,DNA双链解开成两条单链的过程。

方法:

过量酸,碱,加热,变性试剂如尿素、酰胺以及某些有

机溶剂如乙醇、丙酮等。

变性后其它理化性质变化:

OD260增高、粘度下降、比旋度下降、浮力密度升高、酸碱滴定曲线改变、生物活性丧失。

增色效应:

DNA变性时其溶液OD26C增高的现象。

热变性

 

挂图或幻灯

片:

DNA解

链温度

 

解链曲线:

如果在连续加热DNA的过程中以温度对A260(A260代表溶液在260nm处的吸光率)值作图,所得的曲线称为解链曲线。

Tm值:

变性是在一个相当窄的温度范围内完成,在这一范围内,紫外光吸收值达到最大值的50%寸的温度称为DNA的解链温度,又称融解温度(Tm)。

其大小与G+C含量成正比。

(二)DNA的复性与分子杂交

1.DNA复性(renaturation)

定义:

在适当条件下,变性DNA勺两条互补链可恢复天然的双螺旋构象,这一现象称为复性。

热变性的DNA经缓慢冷却后即可复性,这一过程称为退火。

减色效应:

DNA复性时,其溶液OD260笔低。

2.核酸分子杂交(hybridization)

在DNA变性后的复性过程中,如果将不同种类的DNA单链分子或

RNA分子放在同一溶液中,只要两种单链分子之间存在着一定程度的碱基配对关系,在适宜的条件(温度及离子强度)下,就可以在不同的分子间形成杂化双链。

这种现象称为核酸分子杂交。

这种杂化双链可以在不同的DNA与DNA之间形成,也可以在DNA和RNA分子间或者RNA与RNA分子间形成。

核酸分子杂交的应用:

(1)研究DNA分子中某一种基因的位置

(2)定两种核酸分子间的序列相似性

(3)检测某些专一序列在待检样品中存在与否

(4)是基因芯片技术的基础

1

教案末页

小结

5分钟

通过这一课的学习,重点掌握DNA勺化学组成,基本单位,核酸的一级结构,掌握DNA勺双螺旋结构,了解核小体和DNA勺三级结构。

重点掌握mRNAtRNArRNA的结构特点和功能。

掌握核酸变性、复性及分子杂交的概念;核酸一般的理化性质。

复习思考

及作业题

1.组成核酸的基本成分有哪些?

2.组成核酸的基本单位是什么?

他们是如何连接的?

3.组成两类核酸的主要核苷酸有哪些?

4.DNA双螺旋结构的要点有哪些?

5.核酸分子杂交的基本原理。

6.mRNAtRNArRNA的结构特点及功能。

下次教学

预习要点

1.酶催化作用的特点,

2.酶的活性中心,酶原及酶原的激活。

3.同工酶,变构调节,化学修饰调节

主要经验

重点介绍核酸的组成、结构功能,使学生对其结构有较深入了解,为讲解基因表达及调控打下基础。

本次课教学目的明确,基础知识准确,符合大纲要求。

能合理地组织教材,突出重点,解决难点,便于学生理解并掌握系统的知识。

存在问题

改进措施

核酸的结构比较复杂,需认真复习。

合理地组织教材,突出重点,解决难点,便于学生理解并掌握。

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