九新城疫防治技术规范.docx

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九新城疫防治技术规范

九、新城疫防治技术规范

新城疫（NewcastleDisease，ND），是由副粘病毒科副粘病毒亚科腮腺炎病毒属的禽副粘病毒I型引起的高度接触性禽类烈性传染病。

世界动物卫生组织（OIE）将其列为必须报告的动物疫病，我国将其列为一类动物疫病。

为预防、控制和扑灭新城疫，依据《中华人民共和国动物防疫法》、《重大动物疫情应急条例》、《国家突发重大动物疫情应急预案》及有关的法律法规，制定本规范。

1适用范围

本规范规定了新城疫的诊断、疫情报告、疫情处理、预防措施、控制和消灭标准。

本规范适用于中华人民共和国境内的一切从事禽类饲养、经营和禽类产品生产、经营，以及从事动物防疫活动的单位和个人。

2诊断

依据本病流行病学特点、临床症状、病理变化、实验室检验等可做出诊断,必要时由国家指定实验室进行毒力鉴定。

2.1流行特点

鸡、火鸡、鹌鹑、鸽子、鸭、鹅等多种家禽及野禽均易感，各种日龄的禽类均可感染。

非免疫易感禽群感染时，发病率、死亡率可高达90%以上；免疫效果不好的禽群感染时症状不典型，发病率、死亡率较低。

本病传播途径主要是消化道和呼吸道。

传染源主要为感染禽及其粪便和口、鼻、眼的分泌物。

被污染的水、饲料、器械、器具和带毒的野生飞禽、昆虫及有关人员等均可成为主要的传播媒介。

2.2临床症状

2.2.1本规范规定本病的潜伏期为21天。

临床症状差异较大，严重程度主要取决于感染毒株的毒力、免疫状态、感染途径、品种、日龄、其它病原混合感染情况及环境因素等。

根据病毒感染禽所表现临床症状的不同，可将新城疫病毒分为5种致病型：

嗜内脏速发型（Viscerotropicvelogenic）：

以消化道出血性病变为主要特征，死亡率高；

嗜神经速发型（NeurogenicVelogenic）：

以呼吸道和神经症状为主要特征，死亡率高；

中发型（Mesogenic）：

以呼吸道和神经症状为主要特征，死亡率低；

缓发型（Lentogenicorrespiratory）：

以轻度或亚临床性呼吸道感染为主要特征；

无症状肠道型（Asymptomaticenteric）：

以亚临床性肠道感染为主要特征。

2.2.2典型症状

2.2.2.1发病急、死亡率高；

2.2.2.2体温升高、极度精神沉郁、呼吸困难、食欲下降；

2.2.2.3粪便稀薄，呈黄绿色或黄白色；

2.2.2.4发病后期可出现各种神经症状，多表现为扭颈、翅膀麻痹等。

2.2.2.5在免疫禽群表现为产蛋下降。

2.3病理学诊断

2.3.1剖检病变

2.3.1.1全身黏膜和浆膜出血，以呼吸道和消化道最为严重；

2.3.1.2腺胃黏膜水肿，乳头和乳头间有出血点；

2.3.1.3盲肠扁桃体肿大、出血、坏死；

2.3.1.4十二指肠和直肠黏膜出血，有的可见纤维素性坏死病变；

2.3.1.5脑膜充血和出血；鼻道、喉、气管黏膜充血，偶有出血，肺可见淤血和水肿。

2.3.2组织学病变

2.3.2.1多种脏器的血管充血、出血，消化道黏膜血管充血、出血，喉气管、支气管黏膜纤毛脱落，血管充血、出血，有大量淋巴细胞浸润；

2.3.2.2中枢神经系统可见非化脓性脑炎，神经元变性，血管周围有淋巴细胞和胶质细胞浸润形成的血管套。

2.4实验室诊断

实验室病原学诊断必须在相应级别的生物安全实验室进行。

2.4.1病原学诊断

病毒分离与鉴定（见GB16550、附件1）

2.4.1.1鸡胚死亡时间（MDT）低于90h；

2.4.1.2采用脑内接种致病指数测定（ICPI），ICPI达到0.7以上者；

2.4.1.3F蛋白裂解位点序列测定试验，分离毒株F1蛋白N末端117位为苯丙酸氨酸（F），F2蛋白C末端有多个碱性氨基酸的；

2.4.1.4静脉接种致病指数测定（IVPI）试验，IVPI值为2.0以上的。

2.4.2血清学诊断

微量红细胞凝集抑制试验（HI）（参见GB16550）。

2.5结果判定

2.5.1疑似新城疫

符合2.1和临床症状2.2.2.1，且至少有临床症状2.2.2.2、2.2.2.3、2.2.2.4、2.2.2.5或/和剖检病变2.3.1.1、2.3.1.2、2.3.1.3、2.3.1.4、2.3.1.5或/和组织学病变2.3.2.1、2.3.2.2之一的，且能排除高致病性禽流感和中毒性疾病的。

2.5.2确诊

非免疫禽符合结果判定2.5.1，且符合血清学诊断2.4.2的；或符合病原学诊断2.4.1.1、2.4.1.2、2.4.1.3、2.4.1.4之一的；

免疫禽符合结果2.5.1，且符合病原学诊断2.4.1.1、2.4.1.2、2.4.1.3、2.4.1.4之一的。

3疫情报告

3.1任何单位和个人发现患有本病或疑似本病的禽类，都应当立即向当地动物防疫监督机构报告。

3.2当地动物防疫监督机构接到疫情报告后，按国家动物疫情报告管理的有关规定执行。

4疫情处理

根据流行病学、临床症状、剖检病变，结合血清学检测做出的临床诊断结果可作为疫情处理的依据。

4.1发现可疑新城疫疫情时，畜主应立即将病禽（场）隔离，并限制其移动。

动物防疫监督机构要及时派员到现场进行调查核实，诊断为疑似新城疫时，立即采取隔离、消毒、限制移动等临时性措施。

同时要及时将病料送省级动物防疫监督机构实验室确诊。

4.2当确诊新城疫疫情后，当地县级以上人民政府兽医主管部门应当立即划定疫点、疫区、受威胁区，并采取相应措施；同时，及时报请同级人民政府对疫区实行封锁，逐级上报至国务院兽医主管部门，并通报毗邻地区。

国务院兽医行政管理部门根据确诊结果，确认新城疫疫情。

4.2.1划定疫点、疫区、受威胁区

由所在地县级以上（含县级）兽医主管部门划定疫点、疫区、受威胁区。

疫点：

指患病禽类所在的地点。

一般是指患病禽类所在的禽场（户）或其它有关屠宰、经营单位；如为农村散养，应将自然村划为疫点。

疫区：

指以疫点边缘外延3公里范围内区域。

疫区划分时，应注意考虑当地的饲养环境和天然屏障（如河流、山脉等）。

受威胁区：

指疫区边缘外延5公里范围内的区域。

4.2.2封锁

由县级以上兽医主管部门报请同级人民政府决定对疫区实行封锁；人民政府在接到封锁报告后，应立即做出决定，发布封锁令。

4.2.3疫点、疫区、受威胁区采取的措施

疫点：

扑杀所有的病禽和同群禽只，并对所有病死禽、被扑杀禽及其禽类产品按照GB16548规定进行无害化处理；对禽类排泄物、被污染或可能污染饲料和垫料、污水等均需进行无害化处理；对被污染的物品、交通工具、用具、禽舍、场地进行严格彻底消毒；限制人员出入，严禁禽、车辆进出，严禁禽类产品及可能污染的物品运出。

疫区：

对疫区进行封锁，在疫区周围设置警示标志，在出入疫区的交通路口设置动物检疫消毒站（临时动物防疫监督检查站），对出入的人员和车辆进行消毒；对易感禽只实施紧急强制免疫，确保达到免疫保护水平；关闭活禽及禽类产品交易市场，禁止易感活禽进出和易感禽类产品运出；对禽类排泄物、被污染饲料、垫料、污水等按国家规定标准进行无害化处理；对被污染的物品、交通工具、用具、禽舍、场地进行严格彻底消毒。

受威胁区：

对易感禽只（未免禽只或免疫未达到免疫保护水平的禽只）实施紧急强制免疫，确保达到免疫保护水平；对禽类实行疫情监测和免疫效果监测。

4.2.4紧急监测

对疫区、受威胁区内的禽群必须进行临床检查和血清学监测。

4.2.5疫源分析与追踪调查

根据流行病学调查结果，分析疫源及其可能扩散、流行的情况。

对可能存在的传染源，以及在疫情潜伏期和发病期间售（运）出的禽类及其产品、可疑污染物（包括粪便、垫料、饲料等）等应当立即开展追踪调查，一经查明立即按照GB16548规定进行无害化处理。

4.2.6封锁令的解除

疫区内没有新的病例发生，疫点内所有病死禽、被扑杀的同群禽及其禽类产品按规定处理21天后，对有关场所和物品进行彻底消毒，经动物防疫监督机构审验合格后，由当地兽医主管部门提出申请，由原发布封锁令的人民政府发布解除封锁令。

4.2.7处理记录

对处理疫情的全过程必须做好详细的记录（包括文字、图片和影像等），并完整建档。

5预防

以免疫为主，采取“扑杀与免疫相结合”的综合性防治措施。

5.1饲养管理与环境控制

饲养、生产、经营等场所必须符合《动物防疫条件审核管理办法》（农业部[2002]15号令）规定的动物防疫条件，并加强种禽调运检疫管理。

饲养场实行全进全出饲养方式，控制人员、车辆和相关物品出入，严格执行清洁和消毒程序。

养禽场要设有防止外来禽鸟进入的设施，并有健全的灭鼠设施和措施。

5.2消毒

各饲养场、屠宰厂（场）、动物防疫监督检查站等要建立严格的卫生（消毒）管理制度。

禽舍、禽场环境、用具、饮水等应进行定期严格消毒；养禽场出入口处应设置消毒池，内置有效消毒剂。

5.3免疫

国家对新城疫实施全面免疫政策。

免疫按农业部制定的免疫方案规定的程序进行。

所用疫苗必须是经国务院兽医主管部门批准使用的新城疫疫苗。

5.4监测

5.4.1由县级以上动物防疫监督机构组织实施。

5.4.2监测方法

未免疫区域：

流行病学调查、血清学监测，结合病原学监测。

已免疫区域：

以病原学监测为主，结合血清学监测。

5.4.3监测对象：

鸡、火鸡、鹅、鹌鹑、鸽、鸭等易感禽类。

5.4.4监测范围和比例

5.4.4.1对所有原种、曾祖代、祖代和父母代养禽场，及商品代养禽场每年要进行两次监测；散养禽不定期抽检。

5.4.4.2血清学监测：

原种、曾祖代、祖代和父母代种禽场的监测，每批次按照0.1%的比例采样；有出口任务的规模养殖场，每批次按照0.5%比例进行监测；商品代养禽场，每批次（群）按照0.05%的比例进行监测。

每批次（群）监测数量不得少于20份。

饲养场（户）可参照上述比例进行检测。

5.4.4.3病原学监测：

每群采10只以上禽的气管和泄殖腔棉拭子，放在同一容器内，混合为一个样品进行检测。

5.4.4.3监测预警

各级动物防疫监督机构对监测结果及相关信息进行风险分析，做好预警预报。

5.4.4.5监测结果处理

监测结果要及时汇总，由省级动物防疫监督机构定期上报中国动物疫病预防控制中心。

5.5检疫

5.5.1按照GB16550执行。

5.5.2国内异地引入种禽及精液、种蛋时，应取得原产地动物防疫监督机构的检疫合格证明。

到达引入地后，种禽必须隔离饲养21天以上，并由当地动物防疫监督机构进行检测，合格后方可混群饲养。

从国外引入种禽及精液、种蛋时，按国家有关规定执行。

6控制和消灭标准

6.1免疫无新城疫区

6.1.1该区域首先要达到国家无规定疫病区基本条件。

6.1.2有定期和快速（详实）的动物疫情报告记录。

6.1.3该区域在过去3年内未发生过新城疫。

6.1.4该区域和缓冲带实施强制免疫，免疫密度100%，所用疫苗必须符合国家兽医主管部门规定的弱毒疫苗（ICPI小于或等于0.4）或灭活疫苗。

6.1.5该区域和缓冲带须具有运行有效的监测体系，过去3年内实施疫病和免疫效果监测，未检出ICPI大于0.4的病原，免疫效果确实。

6.1.6若免疫无疫区内发生新城疫时，在具备有效的疫情监测条件下,对最后一例病禽扑杀后6个月，方可重新申请免疫无新城疫区。

6.1.7所有的报告、记录等材料详实、准确和齐全。

6.2非免疫无新城疫区

6.2.1该区域首先要达到国家无规定疫病区基本条件。

6.2.2有定期和快速（详实）的动物疫情报告记录。

6.2.3在过去3年内没有发生过新城疫，并且在过去6个月内，没有进行过免疫接种；另外，该地区在停止免疫接种后，没有引进免疫接种过的禽类。

6.2.4在该区具有有效的监测体系和监测带，过去3年内实施疫病监测，未检出ICPI大于0.4的病原或新城疫HI试验滴度小于23。

6.2.5当发生疫情后，重新达到无疫区须做到：

采取扑杀措施及血清学监测情况下最后一例病例被扑杀3个月后，或采取扑杀措施、血清学监测及紧急免疫情况下最后一只免疫禽被屠宰后6个月后重新执行（认定），并达到6.2.3、6.2.4的规定。

6.2.6所有的报告、记录等材料详实、准确和齐全。

附件1

新城疫病原分离与鉴定

当临床诊断有新城疫发生时，应从发病禽或死亡禽采集病料，进行病原分离、鉴定和毒力测定。

1样品的采集、保存及运输

1.1样品采集

1.1.1采集原则。

采集样品时，必须严格按照无菌程序操作。

采自于不同发病禽或死亡禽的病料应分别保存和标记。

每群至少采集5只发病禽或死亡禽的样品。

1.1.2样品内容

发病禽：

采集气管拭子和泄殖腔拭子（或粪便）；

死亡禽：

以脑为主；也可采集脾、肺、气囊等组织。

1.2样品保存

1.2.1样品置于样品保存液（0.01MPBS溶液，含抗生素且pH为7.0～7.4）中，抗生素视样品种类和情况而定。

对组织和气管拭子保存液应含青霉素（1000IU/mL）、链霉素（1mg/mL），或卡那霉素（50μg/mL）、制霉菌素（1000IU/mL）；对泄殖腔拭子（或粪便）保存液的抗菌素浓度应提高5倍。

1.2.2采集的样品应尽快处理，如果没有处理条件，样品可在4℃保存4天；若超过4天，需置-20℃保存。

1.3样品运输

所有样品必须置于密闭容器，并贴有详细标签，以最快捷的方式送检（如：

航空快递等）。

如果在24小时内无法送达，则应用干冰致冷送检。

1.4样品采集、保存及运输按照《高致病性动物病原微生物菌（毒）种或者样本运输包装规范》（农业部公告第503号）执行。

2病毒分离与鉴定

2.1病毒分离与鉴定：

按照GB16550附录A3.3、A4.1、A4.2进行。

2.2病原毒力测定

2.2.1最小病毒致死量引起鸡胚死亡平均时间（MDT）测定试验

按照GB16550附录A4.3进行；

依据MDT可将NDV分离株分为强毒力型（死亡时间≤60小时）；中等毒力型（60小时＜死亡时间≤90小时；温和型（死亡时间＞90小时）。

2.2.2脑内致病指数（ICPI）测定试验

收获接种过病毒的SPF鸡胚的尿囊液，测定其血凝价>24，将含毒尿囊液用等渗灭菌生理盐水作10倍稀释（切忌使用抗生素），将此稀释病毒液以0.05mL/羽脑内接种出壳24～40小时的SPF雏鸡10只,2只同样雏鸡0.05mL/羽接种稀释液作对照（对照鸡不应发病，也不计入试验鸡）。

每24小时观察一次，共观察8天。

每次观察应给鸡打分，正常鸡记作0，病鸡记作1，死鸡记为2（死亡鸡在其死后的每日观察结果都记为2）。

ICPI值=每只鸡在8天内所有分值之和／（10只鸡×8天），如指数为2.0，说明所有鸡24小时内死亡；指数为0.0，说明8天观察期内没有鸡表现临床症状。

当ICPI达到0.7或0.7以上者可判为新城疫中强毒感染。

2.2.3F蛋白裂解位点序列测定试验

NDV糖蛋白的裂解活性是决定NDV病原性的基本条件,F基因裂解位点的核苷酸序列分析,发现在112～117位点处,强毒株为112Arg-Arg-Gln-Lys（或Arg）-Arg-PHe117;弱毒株为112Gly-Arg（或Lys）-Gln-Gly-Arg-Leu117这是NDV致病的分子基础。

个别鸽源变异株（PPMV-1）112Gly-Arg-Gln-Lys-Arg-PHe117,但ICPI值却较高。

因此，在115、116位为一对碱性氨基酸和117位为苯丙氨酸（PHe）和113位为碱性氨基酸是强毒株特有结构。

根据对NDVF基因112-117位的核苷酸序列即可判定其是否为强毒株。

（Arg-精氨酸；Gly-甘氨酸；Gln-谷氨酰胺；Leu-亮氨酸；Lys-赖氨酸）。

分离毒株F1蛋白N末端117位为苯丙氨酸（F），F2蛋白C末端有多个碱性氨基酸的可判为新城疫感染。

“多个碱性氨基酸”是指113至116位至少有3个精氨酸或赖氨酸（氨基酸残基是从后F0蛋白基因的N末端开始计数的，113至116对应于裂解位点的-4至-1位）。

2.2.4静脉致病指数（IVPI）测定试验

收获接种病毒的SPF鸡胚的感染性尿囊液，测定其血凝价>24，将含毒尿囊液用等渗灭菌生理盐水作10倍稀释（切忌使用抗生素），将此稀释病毒液以0.1mL/羽静脉接种10只6周龄的SPF鸡，2只同样鸡只接种0.1mL稀释液作对照（对照鸡不应发病，也不计入试验鸡）。

每24小时观察一次，共观察10天。

每次观察后给试验鸡打分，正常鸡记作0，病鸡记作1，瘫痪鸡或出现其它神经症状记作2，死亡鸡记3（每只死亡鸡在其死后的每日观察中仍记3）。

IVPI值=每只鸡在10天内所有数字之和／（10只鸡×10天），如指数为3.00，说明所有鸡24小时内死亡；指数为0.00，说明10天观察期内没有鸡表现临床症状。

IVPI达到2.0或2.0以上者可判为新城疫中强毒感染。

附件2

消毒

1消毒前的准备

1.1消毒前必须清除有机物、污物、粪便、饲料、垫料等；

1.2消毒药品必须选用对新城疫病毒有效的，如烧碱、醛类、氧化剂类、氯制剂类、双季胺盐类等；

1.3备有喷雾器、火焰喷射枪、消毒车辆、消毒防护用具（如口罩、手套、防护靴等）、消毒容器等；

1.4注意消毒剂不可混用（配伍禁忌）。

2消毒范围

禽舍地面及内外墙壁，舍外环境；饲养、饮水等用具，运输等设施设备以及其它一切可能被污染的场所和设施设备。

3消毒方法

3.1金属设施设备的消毒，可采取火焰、熏蒸等方法消毒；

3.2棚舍、场地、车辆等，可采用消毒液清洗、喷洒等方法消毒；

3.3养禽场的饲料、垫料等，可采取深埋发酵处理或焚烧等方法消毒；

3.4粪便等可采取堆积密封发酵或焚烧等方法消毒；

3.5饲养、管理人员可采取淋浴等方法消毒；

3.6衣、帽、鞋等可能被污染的物品，可采取浸泡、高压灭菌等方法消毒；

3.7疫区范围内办公室、饲养人员的宿舍、公共食堂等场所，可采用喷洒的方法消毒；

3.8屠宰加工、贮藏等场所以及区域内池塘等水域的消毒可采取相应的方法进行，并避免造成有害物质的污染。