生物2年模拟专题33生物技术在食品加工及其他方面应用.docx
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生物2年模拟专题33生物技术在食品加工及其他方面应用
专题33生物技术在食品加工及其他方面应用
一、基础题组（选择题5道，非选择题5道）
1．月季组织培养选材部位最佳的是
A．幼嫩的花瓣 B．枝条基部的芽 C．枝条中部的芽 D．幼嫩的叶
[答案]C
[解析]月季芽在茎段上的位置对嫩茎的增殖、生根及移栽成活率有影响，接近枝条顶端的芽和紧挨着枝条基部的芽发育最慢，而枝条中部的芽发育比较快；幼嫩花瓣和幼嫩的叶具有分裂能力，但不如芽的强
[评析]
2．某名贵花卉用种子繁殖会发生性状分离，为了防止性状分离并快速繁殖，可以利用该植物体的一部分器官或组织进行离体培养，发育出完整的植株。
进行离体培养时不应采用该植株的
A．茎尖 B．子房壁 C．叶片 D．花粉粒
[答案]D
[解析]繁殖名贵花卉是为了保留亲本的性状，应通过无性繁殖，利用植物细胞的全能性，不能改变其遗传物质。
而花粉粒已经过减数分裂，遗传物质是该植物体细胞的一半，所以培养该植株不能用花粉粒。
[评析]
3．标准的PCR过程一般分为变性、复性、延伸三大步，这三大步需要的温度依次是（）
A．95℃、55℃、72℃ B．72℃、50℃、92℃
C．50℃、92℃、72℃ D．80℃、50℃、72℃
[答案]A
[解析]当温度上升到90℃（90℃～96℃）以上时，双链DNA解聚为单链，称之为变性；当温度下降到50℃（40℃～60℃）左右时，两种引物通过碱基互补配对与两条单链DNA结合；当温度上升到72℃（70℃～75℃）左右时，溶液中的四种脱氧核苷酸（A、T、C、G）在TaqDNA聚合酶的作用下，根据碱基互补配对原则合成新的DNA链，称为延伸。
[评析]本题考查PCR过程中变性、复性、延伸时的温度范围，属于识记层次，试题难度较小。
4．凝胶色谱法分离蛋白质的原理是
A．根据蛋白质分子的大小
B．根据蛋白质相对分子质量的大小
C．根据蛋白质所带电荷的多少
D．根据蛋白质溶解度的大小
[答案]B
[解析]凝胶色谱法是根据相对分子质量的大小分离蛋白质的有效方法，凝胶色谱法所用的凝胶是一种微小的多孔球体，在小球内部有许多贯穿的通道，相对分子质量较小的蛋白质容易进入凝胶内部的通道，路程较长。
移动速度较慢湘对分子质量较大的蛋白质只能在凝胶外部移动，路程较短，移动速度较快。
相对分子质量不同的蛋白质分子因此得以分离。
[评析]本题考查凝胶色谱法分离蛋白质的原理，属于理解层次，试题难度一般。
5．有关血红蛋白提取和分离的操作中，正确的是
A．可采集猪血作为实验材料 B．用蒸馏水反复洗涤红细胞
C．血红蛋白释放后应低速短时间离心 D．用电泳法提取血红蛋白
[答案]A
[解析]红细胞用生理盐水洗涤。
采用低速短时间离心可将血浆和血细胞分离，而血红蛋白释放后通常采用2000r/min的速度离心10分钟，已达到分离血红蛋白溶液的目的。
[评析]本题考查血红蛋白提取和分离的基本操作，属于理解层次，试题难度一般。
6．阅读下列材料后请回答：
材料1微繁殖技术又称快速繁殖技术，就是将植物体的一部分组织小块进行培养，并诱导分化成大量的小植株，从而达到快速无性繁殖的目的。
20m2的培养室内最多可容纳100万件试管苗。
这一技术已有几十年的历史，现已基本成熟，并形成诸如工厂化生产兰花这样的产值巨大的工业生产体系。
材料2植物的去病毒技术是微繁殖的一个分支，植物病毒严重地影响着农业生产，对于无性繁殖的植株来说，一旦感染上病毒就会代代相传，日趋严重。
但在茎尖分生组织中，细胞繁殖十分迅速，病毒还来不及侵入，因此就成为植物体相对无病毒的特殊区域。
（1）利用微繁殖技术繁殖植物的方法称为 。
（2）利用微繁殖技术繁殖植物的优点是 。
（3）若要进行兰花无病毒植株的培育，首先要选择外植体，选择对象为兰花的 。
（4）对外植体进行消毒用 、 消毒剂。
消毒时间分别为 、 以保证外植体的活性。
若消毒时间太短消毒不彻底；若消毒时间过长，容易使外植体受损伤，克服外植体培养过程中的 是实验成败的关键。
（5）探索愈伤组织诱导分化的条件需要做大量的工作。
实践表明在MS培养基上添加激素的 、 、 、 等都会影响实验结果。
另外不同的植物对各种环境条件的要求往往不同，除上述因素外， 、 、
等也影响实验结果。
[答案]
（1）植物的组织培养
（2）繁殖速度快、周期短，不受季节气候、自然灾害等因素的影响，并可实现工厂化生产
（3）茎尖分生组织
（4）70％的酒精 0.1％的氯化汞 6～7s 1～2min 污染问题
（5）种类浓度使用的先后顺序 用量比例pH温度光照
[解析]微繁殖技术核心内容是植物组织培养技术，其原理为植物细胞的全能性，其培育过程与一般组织培养类似。
[评析]本题考查植物组织培养的相关知识，属于理解层次，试题难度适中。
7．下图表示月季的花药接入试管后，在一定条件下形成试管苗的培育过程，请据图回答下列问题：
（1）要促进花粉粒细胞分裂生长，培养基中应用细胞分裂素和 两类激素。
后者对根有促进作用的最适宜浓度是 。
（2）愈伤组织是花粉细胞不断分裂后形成的不规则细胞团，愈伤组织形成中，必须从培养基中获得 、 和小分子有机物等营养
（3）愈伤组织分化形成根和芽，再由芽发育成茎和叶，这一过程必须给予 ，原因是 利用光能制造有机物，供试管苗生长发育，而此时培养基中除了氮、磷、钾外，必不可少的元素应是 。
[答案]
（1）生长素10-10mol/L
（2）水 无机盐 （3）光照 叶绿体 镁
[解析]利用花药培养试管苗的过程中，除了营养全面的培养基外，还要一定的pH、温度等。
组织细胞先脱分化形成愈伤组织，然后愈伤组织再分化形成试管苗（单倍体幼苗）。
[评析]本题考查月季花药的培育过程，属于理解层次，试题难度一般。
8．回答下列有关“DNA的粗提取和鉴定”实验的问题：
（1）DNA粗提取所依据的原理是 。
（2）DNA粗提取的实验中使用冷却的95%酒精的目的是 ，该实验中向盛有鸡血细胞液的烧杯中加入蒸馏水的目的是 ，向溶有DNA的2mol/LNacl溶液中加入蒸馏水，溶液中会出现粘稠物，当黏稠物不再增加时，这时溶液中Nacl的物质的量的浓度相当于 。
（3）在提取洋葱的DNA时，在切碎的洋葱中加入一定的洗涤剂和食盐，进行充分的搅拌和研磨，过滤后收集研磨液。
加入洗涤剂和食盐的作用分别是 、 。
（4）在DNA粗提取与鉴定的实验中，选择适当浓度的NaCl溶液就能充分溶解DNA而使杂质沉淀，或析出DNA过滤去除溶液中的可溶性杂质。
请在右图中作出DNA在NaCl溶液中的溶解度曲线。
（5）在某些深海鱼中发现的抗冻蛋白基因afp对提高农作物的抗寒能力有较好的应用价值，该基因可以从这些鱼的DNA中扩增得到。
试述在提取和纯化DNA时影响提纯效果的因素及其依据。
（列举两点）
[答案]
（1）DNA在NaCl溶液中的溶解度随NaCl浓度的变化而改变
（2）使DNA析出 使细胞破裂 0.14mol/L
（3）能溶解细胞膜，有利于DNA的释放 有利于DNA的溶解
（4）如图
（5）①选择NaCl溶液的合适浓度，利用DNA和其它杂质在不同NaCl溶液中溶解度不同的特性，达到分离目的；
②加入一定量酒精，使部分蛋白质杂质溶解于酒精，与DNA分离；
③加入蛋白酶，除去蛋白质杂质的干扰；
④控制DNA提取的温度，使大多数蛋白质杂质变性。
[解析]DNA在NaCL溶液中的溶解浓度随NaCL溶液的浓度不同而变化。
当NaCl的质量浓度为0．14mol/L时，DNA的溶解度最低。
利用这一原理，可以使溶解在NaCL溶液中的DNA析出。
用95%的冷酒精的目的是因为DNA不溶于冷酒精，而其他物质可以溶解在酒精中，使含杂质较少的DNA丝状物可以析出，悬浮于溶液中；向盛有鸡血细胞液的烧杯中加入蒸馏水是为了使血细胞吸水膨胀破裂，加水后必须充分搅拌，不应少于5min，使血细胞充分破。
裂洗涤剂是一些离子去污剂，能溶解细胞膜，有利于DNA的释放；食盐的主要成分是NaCl，有利于DNA的溶解。
DNA的提取和纯化的方法可根据DNA和蛋白质的特性来选择。
[评析]本题综合考查DNA的粗提取和鉴定的实验原理、实验步骤以及应用，属于理解层次，试题难度一般。
9．PCR（多聚酶链式反应）技术是一项在生物体外复制特定的DNA片段的核酸合成技术，下图表示合成过程，请据图分析回答：
（1）A过程高温使DNA变性解旋，对该过程的原理叙述，正确的是
A．该过程用到耐高温的解旋酶破坏氢键
B．该过程用到限制酶破坏磷酸二酯键
C．该过程不需要解旋酶的作用
D．该过程与人体细胞的过程完全相同
（2）C过程要用到的酶是 。
这种酶在高温下仍保持活性，因此在PCR扩增时可以 加入， （需要/不需要）再添加。
PCR反应除提供酶外，还需要满足的基本条件有：
。
（3）如果把模板DNA的两条链用15N标记，游离的脱氧核苷酸不做标记，控制“94℃—55℃—72℃”温度循环3次，则在形成的子代DNA中含有15N标记的DNA占 。
（4）如果模板DNA分子共有a个碱基对，其中含有胞嘧啶m个，则该DNA复制10次，需要加入胸腺嘧啶脱氧核苷酸 个。
（5）PCR中由碱基错配引起的变异属于 。
假设对一个DNA进行扩增，第一次循环时某一条模板链上发生碱基错配，则扩增若干次后检测所用DNA的扩增片段，与原DNA相应片段相同的占 。
[答案]
（1）C
（2）TaqDNA聚合酶 一次 不需要 DNA模板，分别与两条模板链相结合的两种引物，四种脱氧核苷酸，同时通过控制温度使DNA复制在体外反复进行。
（3）25％
（4）（210－1）（a－m）
（5）基因突变 50％
[解析]
（1）高温所起的作用类似于解旋酶，使DNA的双链被打开成单链结构。
（2）C过程为PCR技术的延伸阶段，当温度由55℃上升到72℃左右时，溶液中的四种脱氧核苷酸在TaqDNA聚合酶的作用下合成新的DNA链。
TaqDNA聚合酶是耐热的，高温下不变性，因此一次性加入即可。
（3）PCR技术遵循半保留复制的特点，经过三次循环复制，共产生23个DNA分子，其中有2个DNA分子含有15N标记，因此在形成的子代DNA中含有15N标记的DNA占25％。
（4）在一个双链DNA分子中，C＋T占碱基总数的一半，因此T的数目为a－m，复制10次，增加了210－1个DNA分子，因此需要补充T的数目为（210－1）（a－m）。
（5）基因突变发生于基因中的碱基对的改变，对一个DNA分子进行扩增，第一次循环时某一条模板链上发生碱基错配，以后按正常配对方式进行扩增，错配链作模板扩增的都是错误的DNA分子，原正常链作模板扩增得到的DNA分子都是正常的DNA分子，因此扩增若干次后检测所用DNA的扩增片段，与原DNA相应片段相同的占50％。
[评析]本题考查PCR技术的过程和半保留复制的特点，属于理解分析层次，试题难度适中。
10．红细胞含有大量血红蛋白，红细胞的机能主要是由血红蛋白完成。
我们可以选用猪、牛、羊等动物的血液进行实验，来提取和分离血红蛋白，请回答下列有关问题：
（1）实验前取新鲜的血液，要切记在采血容器中预先加入柠檬酸钠，取血回来，马上进行离心，收集血红蛋白溶液。
①其中加入柠檬酸钠的目的是 。
②此过程即是样品处理，它应包括红细胞洗涤、 、分离血红蛋白溶液。
③洗涤红细胞的目的是 。
（2）收集的血红蛋白溶液在透析袋中透析，这就是样品的粗分离。
①透析的目的是 。
②透析的原理是 。
（3）然后通过凝胶色谱法将样品进一步纯化，最后经SDS—聚丙烯酰胺凝胶电脉进行纯度鉴定。
其中通过凝胶色谱法将样品纯化的目的是 。
[答案]
（1）①防止血液凝固②血红蛋白的释放③去除杂蛋白
（2）去除相对分子质量较小的杂质透析袋能使小分子自由进出，而大分子则保留在袋内
（3）通过凝胶色谱法去除相对分子质量较大的杂质
[解析]
（1）柠檬酸钠是一种抗凝剂，加入柠檬酸钠可以防止血液凝固；样品处理包括红细胞的洗涤、血红蛋白的释放、分离血红蛋白溶液；洗涤红细胞的目的是去除杂蛋白，以利于后续步骤的分离纯化。
（2）透析袋一般是用硝酸纤维素制成的，透析袋能使小分子自由进出，而将大分子保留在袋内，透析可以去除样品中分子量较小的杂质或用于更换样品的缓冲液。
（3）凝胶色谱法是根据相对分子质量的大小分离蛋白质的方法，因此通过凝胶色谱法去除相对分子质量较大的杂质。
[评析]本题考查血红蛋白的分离和鉴定的基本原理及实验流程，属于理解层次，试题难度一般。
二、能力提升题组（选择题5道，非选择题5道）
1．（2009厦门模拟）植物组织培养所需营养的叙述，不正确的是
A．MS培养基既含硝态氮又含铵态氮
B．维生素以辅酶的形式参与生物催化剂酶系活动
C．植物生长调节物质包括生长素、细胞分裂素及赤霉素等
D．植物组织培养过程中无需从外部供糖
[答案]D
[解析]通常植物本身能进行光合作用，产生糖类，不需从外部供给糖，但在植物组织培养进行异养的状况下，大多不能进行光合作用来合成糖类，因此必须在培养基中添加糖，作为碳素来源和能量来源。
[评析]
2．（2010汕头模拟）关于被子植物花粉的形成，下列说法正确的是
A．花粉粒是花粉母细胞经有丝分裂形成的
B．花粉的发育要经历四分体、单核期和双核期
C．花粉发育经历的四分体时期与减数分裂第一次分裂的四分体时期含义相同
D．花粉母细胞形成花粉粒中精子的过程是一系列减数分裂的过程
[答案]B
[解析]被子植物花粉的发育过程是花粉母细胞经减数分裂形成4个单核花粉粒，核位于细胞的中央，它们从解体的绒毡层细胞取得营养，不断地长大。
随着细胞的扩大，细胞核由中央位置移向细胞一侧，然后每个花粉粒的细胞核进行一次有丝分裂形成一个花粉管细胞核和一个生殖细胞核，进而形成的生殖细胞再进行一个有丝分裂生成两个精子。
花粉发育过程中的四分体时期是指4个单倍体细胞连在一起，而高等动物减数分裂的四分体是指联会后的每对同源染色体含有四条染色单体。
[评析]本题考查被子植物花粉的发育过程以及与高等动物减数分裂的比较，属于理解分析层次，试题难度适中。
3．（2009青岛模拟）关于测定亚硝酸盐含量的操作，错误的是
A．质量浓度为4mg/mL的对氨基苯磺酸溶液呈酸性
B．对氨基苯磺酸溶液和N一1一萘基乙二胺盐酸盐溶液，应避光保存
C．质量浓度为5μg/mL的亚硝酸钠溶液应保持弱碱性环境
D．制备样品处理液时，加入氢氧化铝目的是中和氢氧化钠
[答案]D
[解析]对氨基苯磺酸溶液和N—1一萘基乙二胺盐酸盐溶液都呈酸性，能保证其稳定性，且应低温密闭保存；亚硝酸钠标准液配制过程中应加入NH4Cl缓冲液，保持弱碱性环境以免形成亚硝酸挥发；制备样品处理液，加入氢氧化铝的目的是使滤液中色素脱色，使滤液变得无色透明。
[评析]本题考查测定亚硝酸盐含量的基本操作，属于理解层次，试题难度一般。
4．（2010沈阳模拟）下列关于PCR的描述，不正确的是
A．PCR技术的原理是DNA复制
B．是一酶促反应，需耐高温的解旋酶和DNA聚合酶
C．一个DNA片段经PCR扩增，可形成2n个DNA片段（n代表循环次数）
D．PCR利用了DNA的热变性来控制DNA的解聚与结合
[答案]B
[解析]PCR是一种体外迅速扩增DNA片段的技术，它以极少量的DNA为模板，以四种脱氧核苷酸为原料，在引物作用下使DNA聚合酶从引物的3′端连接脱氧核苷酸，短时间内迅速复制上百万份的DNA拷贝。
PCR利用DNA在不同温度下变性解聚或复性的特性来解旋并结合引物，不需要用解旋酶来解旋。
[评析]本题考查PCR技术的原理，属于理解层次，试题难度一般。
5．（2010海口模拟）在血红蛋白的提取和分离实验中，下列操作正确的是
A．分离红细胞时需去除上层透明的黄色血浆
B．红细胞释放出血红蛋白时只需加入蒸馏水
C．分离血红蛋白溶液是低速短时间离心
D．洗脱时，待红色蛋白质下移即开始收集流出液
[答案]A
[解析]血红蛋白的释放：
加蒸馏水到原血液的体积，再加40%体积的甲苯，充分搅拌10min，红细胞破裂释放出血红蛋白，B选项错误；分离血红蛋白溶液是以2000r/min的速度离心10min，从而将溶液分成四层，所以C选项错误；洗脱时，待红色蛋白质接近色谱柱底端时，用试管收集流出液，因此D选项错误。
[评析]本题考查血红蛋白的提取和分离的实验操作，属于理解层次，试题难度一般。
6．（2009广州模拟）下图是月季花药离体培养产生花粉植株的两种途径，请据图回答有关问题：
（1）选用的材料合适与否是成功诱导出花粉植株的重要因素，一般来说选用 期的花粉可提高成功率。
选择花粉时，一般要通过 来确定花粉是否处于合适的发育期，这时需要对花粉的细胞核进行染色，常用的染色剂是 。
（2）上图中花药经脱分化产生胚状体还是愈伤组织主要取决于培养基中 。
（3）胚状体与愈伤组织在结构上的主要区别在于愈伤组织的细胞排列疏松无规则，是一种高度
的薄壁细胞，胚状体与 发育形成的胚有类似的结构，即具有胚芽、胚轴和胚根。
（4）无菌技术也是成功诱导出花粉植株的重要因素，请说明下列各项需要消毒，还是需要灭菌。
①培养基，②培养皿，③接种环，④花蕾，⑤实验操作者的双手，⑥三角锥形瓶。
（填编号）需要灭菌， （填编号）需要消毒。
（5）试管苗移栽到土壤前，通常要进行壮苗处理，应如何壮苗？
。
[答案]
（1）单核镜检（显微镜观察）醋酸洋红
（2）激素的种类及其浓度配比
（3）液泡化正常受精卵（或受精卵）
（4）①②③⑥需要灭菌④⑤需要消毒
（5）将试管苗移栽到经消毒过的培养基中生活一段时间，等幼苗长壮后再移栽到土壤中。
[解析]
（1）并不是任何时期的花粉都可以培养产生愈伤组织或胚状体，只有花粉发育到一定时期对离体的刺激才最敏感。
对大多数植物而言，单核中期至晚期的花粉最容易形成花粉胚或花粉愈伤组织。
在培养花药之前，通常用的有醋酸洋红染色制片法制片镜检以确定花粉发育时期。
（2）花药培养产生花粉植株一般有两种途径：
其一是花药中的花粉通过胚状体阶段发育为小植株；其二是花药中花粉在诱导培养基上先形成愈伤组织，再诱导其分化成植株。
两种途径并无绝对界限，主要取决于培养基中的激素种类及其浓度配比。
（3）愈伤组织是一团高度液泡化的薄壁细胞，植物组织培养得到的胚状体与正常受精卵发育成的胚均有胚芽、胚根和胚轴。
（4）灭菌是用理化方法杀死环境中所有的微生物细胞、芽胞和孢子。
消毒是杀死物体表面的病原微生物。
在微生物培养过程中通常对培养基、培养皿、接种环、三角锥形瓶，进行灭菌处理，对花蕾、实验操作者的双手进行消毒处理。
[评析]本题是对植物组织培养的综合考查，属于理解层次，试题难度适中。
7．（2010济南模拟）乙醇等“绿色能源”的开发备受关注。
利用玉米秸秆等生产燃料酒精已成为大势所趋。
（1）植物组织培养可实现玉米等的大规模快速繁殖，图解如下，由外植体通过植物组织培养技术培育成完整植物，这项技术利用了 原理，通过组织培养技术进行植物繁育，可以很好地保持亲本的优良性状，原因是 。
A、B分别代表 和 ，过程①、②分别表示 和 。
（2）在玉米组织培养过程中，有关说法不正确的是（）
A．培育出的玉米植株个体都是纯合子
B．A细胞全能性最高
C．从外植体到A的过程不需要光照
D．从外植体到完整植株，细胞分裂都是有丝分裂
（3）具有耐高糖和耐酸特性的酵母菌是理想的酒精发酵菌种，对野生酵母菌进行诱变后通过筛选可以得到具有这些特性的突变菌，诱变及筛选过程如下：
步骤1：
野生菌液体培养一段时间后接受紫外线照射诱变处理。
步骤2：
制备选择培养基。
在基本培养基的基础上，注意 和 ，加琼脂后灭菌，制成固体平板。
步骤3：
将紫外线照射后的菌液稀释涂布平板。
步骤4：
根据 筛选出突变菌。
（4）上述步骤2、3和4的依据分别是 。
（5）突变菌往往带有一些特殊的基因。
在获得这些基因的过程中，PCR技术相当重要。
PCR扩增反应中加入引物和DNA聚合酶的作用分别是什么？
[答案]
（1）植物细胞全能性 子代遗传物质与亲代相同，不会像有性生殖一样出现性状分离 愈伤组织 胚状体 脱分化 再分化
（2）A
（3）添加高浓度蔗糖（或葡萄糖） 调低pH 是否能在选择培养基上生长
（4）提供高糖和酸性环境；获得单菌落；能生长代表该菌落具有耐高糖和耐酸的特性
（5）引物的作用是为DNA聚合酶发挥作用提供位点；DNA聚合酶的作用是从引物3′端开始催化DNA单链的延伸。
[解析]
（1）图解表示植物组织培养过程，其原理是植物细胞的全能性，由于整个过程均为有丝分裂，因此亲子代遗传物质相同，从而保持亲本的优良性状。
外植体通过脱分化形成愈伤组织，愈伤组织再通过再分化形成胚状体或丛芽，因此A为愈伤组织，B为胚状体，过程①表示脱分化，过程②表示再分化。
（2）通过脱分化形成愈伤组织的过程中，没有叶绿体的形成，因此不需要光照；玉米种子均为杂合子。
（3）选择培养基是指加入某种化学物质，抑制不需要的微生物的生长，从而促进所需要的微生物的生长。
（4）该酵母菌具有耐高糖和耐酸的特性，根据这一特性可以加以改变培养基中糖的含量和pH的大小，进而筛选出目的菌。
（5）PCR反应中，引物的作用是使DNA聚合酶能够从引物的3′端开始连接脱氧核苷酸；DNA聚合酶的作用是催化合成DNA子链。
[评析]本题综合考查植物组织培养技术、微生物的筛选和PCR技术，属于综合分析层次，试题难度适中。
8．（2010南京模拟）PCR技术有效地解决了因为样品中DNA含量太低而难以对样品进行研究的问题，而被广泛应用，此过程需要一种TaqDNA聚合酶。
请回答有关问题：
（1）体内DNA复制过程中用解旋酶打开双链DNA，而PCR技术中应用 。
（2）TaqDNA聚合酶是从水生耐热细菌Taq中分离的。
①为什么Taq细菌能从热泉中被筛选出来呢？
。
②TaqDNA聚合酶的功能是 。
③TaqDNA聚合酶的化学本质为蛋白质，可用 法和 法进行分离。
（3）从土壤中分离分解尿素的细菌时，应采取的措施是 ，原因是 。
（4）与体内DNA复制相比较，PCR反应要在 中才能进行，并且要严格控制 条件。
（5）PCR中加入的引物有 种，加入引物的作用是 。
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