分子生物学期末考试复习题.docx
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分子生物学期末考试复习题
一、判断题
1、原核细胞和真核细胞的差别之一是前者无染色体结构，后者有染色体结构。
（√）
2、基因组是指某一种生物所具有的全部基因的总称。
（×）
3、真核生物基因的大小通常是外显子的数目和长度决定的。
（×）
4、在所有的真核生物中，含子的长度和序列是高度保守的。
（×）
5、酵母的基因普遍要比人的基因小，因此，酵母基因组编码的蛋白质普遍要比人基因组编码的蛋白质要小。
（×）
6、在自由的四种核苷酸混合溶液中，任何碱基之间都可以形成氢键而发生配对。
×
7、PCR只能扩增双链DNA，不能扩增单链DNA。
（×）
8、富含GC的DNA双螺旋比富含AT的DNA双螺旋稳定的主要原因是GC碱基对比AT碱基对多一个氢键。
（√）
9、用氯化铯梯度超离心纯化质粒DNA时，蛋白质在离心管的最上部，RNA悬浮在中间，而DNA沉在底部。
（×）
10、mRNA的剪接总是产生套索结构。
（×）
11、冈崎片段只由DNA组成。
（×）
12、端粒酶带有自己的DNA模板。
（×）
13、细胞的DNA复制既需要DNA聚合酶，也需要RNA聚合酶。
（×）
14、同源重组和位点特异性重组都形成Holliday中间体结构。
（√）
15、与tRNA相连的氨基酸本身在决定何种氨基酸参入到正在延伸的肽链上不起任何作用。
（√）
16、转座重组既可以导致基因的失活，也可以导致基因的激活。
（√）
17、只有用相同的限制性酶获得的DNA片段末端才能用DNA连接酶连接起来。
×
18、在一个基因的编码区发生的核苷酸的插入或缺失总是导致移码突变。
×
19、PCR和末端终止法测序都需要RNA引物。
（×）
20、只有用相同的限制性酶获得的DNA片段末端才能用DNA连接酶连接起来。
×
21、管家基因在细胞里始终表达，因此没有也不需要对其表达进行调控。
（×）
22、含子在剪接反应中被切除，所以一种蛋白质的基因如果在含子发生突变，一般不会影响到这种蛋白质的功能。
（√）
23、限制性酶只能切开双链DNA。
（√）
24、RNA病毒因为无DNA基因组，其生活史省去了从DNA到RNA的过程。
×
25、细菌中弱化子的作用方式是在翻译水平来控制转录。
（×）
26、单核苷酸多态性（SNP）可导致限制性片段长度多态性（RFLP）。
√
27、激活蛋白参与正调控，其浓度越高，激活基因表达的效果就越好。
（×）
28、CCGG和GGCC序列受同一种限制性酶的识别、切割。
（×）
29、如果将细胞质中的mRNA导入到线粒体基质翻译，通常得不到有功能的蛋白质产物。
（×）
30、含子大都是遗传“垃圾”，所以在RNA剪接的时候不必进行精确的切除。
×
31、密码子第一位碱基发生的突变要比第三位发生的突变的危害要大得多。
√
32、抑制转肽酶活性的抗生素通常与核糖体的大亚基结合。
（√）
33、根据摆动法则，tRNA上的反密码子在第三个位置的核苷酸处于摇摆的位置。
×
34、核糖体大亚基的主要功能是催化肽键的形成，而小亚基主要是结合mRNA和tRNA。
（×）
35、Southern印迹和Northern印迹的主要差别是前者使用特定的DNA分子为探针，后者使用RNA分子为探针。
（×）
36、编码区以外的突变不会导致细胞或生物体表型改变。
（×）
37、T4DNA连接酶和E.coli连接酶作用时都需要ATP和NAD+作为辅助因子。
（×）
38、DNA多态性就是限制性片段长度多态性。
（×）
二、单项选择题
1、有关蛋白质组不正确的叙述是（C）A、翻译后加工可导致同一个翻译产物形成几种不同的蛋白质B、蛋白质之间的相互作用可形成组织特异性蛋白质复合物C、环境因素对一个细胞的蛋白质组无影响D、一个病态细胞的蛋白质组可能与一个健康细胞的蛋白质组有所不同
2、下列哪项不是原核生物DNA复制是所必需的（C）
A.单链结合蛋白.BDNA聚合酶ⅢC.DNA聚合酶ⅡD.DnaG蛋白E.ATP
3、噬菌体基因组DNA上的碱基发生糖基化和甲基化修饰的主要功能是（B）A、促进基因组DNA整合到宿主基因组上
B、保护病毒DNA不受到限制性酶的水解
C、有利于核酸正确的排列D、稳定DNA，防止突变
4、双螺旋DNA具有的典型特征包括（C）A、沿着一条链是大沟，另外一条链是小沟B、碱基对的排列与螺旋轴平行C、嘌呤碱基和嘧啶碱基的数目相同D、螺旋的方向总是右手
5、在许多不同物种中，具有高度保守的序列一般是（D）A、假基因B、特定的间隔序列C、不重要的蛋白质的基因D、非常重要的蛋白质的基因
6、原核生物DNA复制不需要（D）A、DNA聚合酶ⅠB、DNA解链酶C、DNA连接酶D、端粒酶
7、大肠杆菌染色体DNA复制所需要的DNA聚合酶有（D）A、DNA聚合酶ⅠB、DNA聚合酶ⅡC、DNA聚合酶ⅢD、DNA聚合酶Ⅰ和Ⅲ
8、DNA连接酶需要被连接的两个DNA片段分别具有（A）A、3’-OH和5’-
B、5’-OH和3’-
C、3’-OH和5’-OHD、5’-
和3’-
9、端粒酶是一种（C）A、依赖于DNA的DNA聚合酶B、依赖于DNA的RNA聚合酶C、依赖于RNA的DNA聚合酶D、依赖于RNA的RNA聚合酶
10、细胞的突变主要发生在（A）A、DNA复制B、DNA修复C、转录D、翻译
11、碱基类似物导致DNA发生突变的主要原因是（C）
A、插入到碱基之间，使DNA发生断裂B、使C变成TC、能够与不同的碱基配对D、促进DNA的脱嘌呤
12、SNP的实质是（C）
A．碱基缺失B．碱基插入C．碱基替换D．移码突变E．转录异常
13、在正常的生长条件下，某一细菌基因的启动子的普里布诺框由TCGACT突变成TATACT，由此而引起该基因转录水平发生变化，以下正确的是（A）A、该基因的转录增加B、该基因的转录降低C、该基因不能转录D、该基因的转录没有变化
14、如果你想设计一种新的抗菌药物，其作用对象是原核细胞的RNA聚合酶，那么，你所设计的药物作用的最佳靶点应该是（C）A、α亚基B、β亚基C、ω亚基D、σ因子
15、真核细胞的TATA框（B）A、与-35区一道起作用B、存在于所有编码蛋白质基因的启动子上C、将RNA聚合酶定位到启动子上D、存在于-10区
16、原核细胞受RNA聚合酶全酶浓度的提高而加速的转录步骤是（B）
A、封闭的转录起始复合物的形成B、启动子清空C、转录延伸D、转录终止
17、RNA聚合酶和DNA聚合酶所具有的共同性质是（C）A、都需要模板和引物B、都具有自我校对的活性C、都需要Mg2+D、都能够导致DNA发生解链
18、以下属于转录后基因表达调控的机制是（C）A、DNA分子上的C发生甲基化修饰B、转录因子与启动子结合C、RNA分子上的C脱氨基转变成UD、基因扩增
19、大肠杆菌16SrRNA的3’端序列是5’-CACCUCCUUAOH-3’，那么mRNA分子上的SD序列是（D）A、UCCUUB、UCCUCCC、GGAAUD、AGGAGG
20、在核糖体上，mRNA的结合部位和转肽酶的活性中心分别位于（D）A、两个亚基之间；大亚基B、两个亚基之间；小亚基C、大亚基；小亚基D、小亚基；大亚基
21、在一个真核细胞，由一种特定的mRNA翻译出来的蛋白质的量部分取决于（B）
A、DNA甲基化的程度B、mRNA降解的速率C、某些转录因子的存在D、mRNA含有的含子的数目
22、已知双链DNA的结构基因中，信息链的部分序列是5'AGGCTGACC3'，其编码的RNA相应序列是（D）
A.5'AGGCTGACC3'B.5'UCCGACUGG3'C.5'AGGCUGACC3'
D.5'GGUCAGCCU3'E.5'CCAGUCGGA3'
23、以下关于RNAi的叙述中，错误的是（D）A、可特异性地导致mRNA的降解B、可特异性地抑制mRNA的翻译C、只存在于真核生物D、通常抑制特定mRNA的转录
24、一种典型的限制性酶切割DNA，切点切开后的结构是（C）A、上面一条链是5’-
，下面一条链是3’-
B、上面一条链是3’-
，下面一条链是5’-
C、两条链都是5’-
D、两条链都是3’-
25、PCR实验不需要的成分是（A）A、RNA引物B、DNA模板C、dNTPD、变性和复性循环
26、以下用来确定人肝细胞所有的基因的表达水平的技术手段是（C）A、Northern印迹B、Western印迹C、基因芯片D、噬菌体展示
6、下列最可能是限制性酶识别位点的碱基序列是（B）A、AGTCB、ACGTC、ATCGD、AACC
27、在大肠杆菌中用于表达外源基因的载体在启动子下游通常含有SD序列，这个序列的作用是（A）A、为核糖体提供识别位点B、提供转录位点
C、增强启动子活性D、提高RNA稳定性
28、原核和真核生物共有的转录调控序列是（B）
A.poly（A）信号B.启动子C.操纵子D.终止子E.增强子
29.上游启动子元件是（A）
A.一段核酸序列B.TATA盒的组成部分C.位于转录起始点下游D.不一定被转录E.转录后可以被剪接加工
30.关于开放读框叙述正确的是（A）
A.是mRNA的组成部分B.部有间隔序列C.真核生物的开放读框往往串联在一起
D.部靠近5'端含有翻译起始调控序列E.由三联体反密码子连续排列而成
31.哪种情况会导致移码突变（C）
A.倒位B.颠换C.插入一个碱基D.连续缺失三个碱基E.以上都不对
三、填空
1、1．在DNA合成中负责复制和修复的酶是 DNA聚合酶Ⅲ 。
2．染色体中参与复制的活性区呈Y开结构，称为 复制叉 。
3．在DNA复制和修复过程中，修补DNA螺旋上缺口的酶称为 DNA聚合酶Ⅰ
在DNA复制过程中，连续合成的子链称为前导链 ，另一条非连续合成的子链称为 后滞链 。
4在DNA修复过程中，需要第二种酶，DNA连接酶，作用是将DNA中相邻的碱基连接起来。
原核生物DNA聚合酶具有外切核酸酶的活性。
有两种外切核酸酶的活性，它们分别从5‘-3’和3‘-5’降解DNA。
DNA聚合酶Ⅱ只有3‘-5’外切核酸酶活性。
5．如果DNA聚合酶把一个不正确的核苷酸加到3′端，一个含3′→5′活性的独立催化区会将这个错配碱基切去。
这个催化区称为 校正核酸外切酶 酶。
6．DNA后随链合成的起始要一段短的 RNA引物 ，它是由 DNA引发酶 以核糖核苷酸为底物合成的。
四简答
切除修复：
通过切除－修复切酶使DNA损伤消除的修复方法。
一般是切去损伤区，然后在DNA聚合酶的作用下以露出的单链为模板合成新的互补链，最后用连接酶将缺口连接起来。
sos修复：
SOS修复是指DNA受到严重损伤、细胞处于危急状态时所诱导的一种DNA修复方式，修复结果只是能维持基因组的完整性，提高细胞的生成率，但留下的错误较多，故又称为错误倾向修复，使细胞有较高的突变率
同源重组：
同源重组是指发生在非姐妹染色单体之间或同一染色体上含有同源序列的DNA分子之间或分子之的重新组合。
同源重组反应通常根据交叉分子或Holliday结构的形成和拆分分为三个阶段，即前联会体阶段、联会体形成和Holliday结构的拆分。
位点特异性重组：
DNA节段的相对位置发生了移动，从而得到不同的结果─DNA序列发生重排。
位点特异性重组不依赖于DNA顺序的同源性（虽然亦可有很短的同源序列），而依赖于能与某些酶相结合的DNA序列的存在。
逆转录酶：
以RNA为模板指导三磷酸脱氧核苷酸合成互补DNA（cDNA）的酶。
选择性剪接：
（也叫可变剪接）是指从一个mRNA前体过不同的剪接方式。
选择不同的剪接位点组合产生不同的mRNA剪接异构体的过程，而最终的蛋白产物会表现出不同或者是相互拮抗的功能和结构特性，或者，在相同的细胞中由于表达水平的不同而导致不同的表型。
RNA编辑：
在mRNA水平上改变遗传信息的过程。
具体说来，指基因转录产生的mRNA分子中，由于核苷酸的缺失，插入或置换，基因转录物的序列不与基因编码序列互补，使翻译生成的蛋白质的氨基酸组成，不同于基因序列中的编码信息现象。
开放阅读框：
是结构基因的正常核苷酸序列，从起始密码子到终止密码子的阅读框可编码完整的多肽链，其间不存在使翻译中断的终止密码子。
SD序列：
mRNA中用于结合原核生物核糖体的序列。
分子伴侣：
细胞核能与组蛋白结合并能介导核小体有序组装的核质素。
广泛存在于原核生物和真核生物的一类保守蛋白，分布于细胞的各个区域。
衰减子：
是位于细菌操纵子上游的一段核苷酸序列。
原核生物过翻译前导肽而实现控制DNA的转录的调控方式称衰减作用。
RNA干扰：
在进化过程中高度保守的、由双链RNA诱发的、同源mRNA高效特异性降解的现象。
增色效应：
由于DNA变性引起的光吸收增加，也就是变性后DNA溶液的紫外吸收作用增强的效应。
减色效应：
若变性DNA复性形成双螺旋结构后，其260nm紫外吸收会降低,这种现象叫减色效应
限制性核酸切酶：
是可以识别DNA的特异序列，并在识别位点或其周围切割双链DNA的一类切酶，简称限制酶。
启动子：
是基因（gene）的一个组成部分，控制基因表达（转录）的起始时间和表达的程度。
终止子：
是给予RNA聚合酶转录终止信号的DNA序列
Southern杂交、Northern杂交、FISH、Western杂交区别
Southern杂交（637）：
利用标记的核酸做探针，与转化细胞的DNA进行杂交，直接筛选和鉴定目的序列克隆
Northern杂交（637）：
利用标记的核酸做探针，与转化细胞的RNA进行杂交，直接筛选和鉴定目的序列克隆
FISH：
荧光标记的原位杂交技术，一种用能和染色体特定序列高度特异性结合的荧光标记的探针来鉴定和定位染色体上特定DNA序列的存在或缺失
Western杂交：
利用标记的抗体和特定目标蛋白结合以检测组织匀浆样本或提取物样本中特定蛋的一种技术
蛋白质糖基化类型与功能
一,类型：
N-糖基化,O-糖基化
二，功能：
（火把一定分解）
1.活性必需介导某些蛋白质的生物活性起直接作用（HCG）
2.靶向转运帮助目的蛋白到达其功能场所（溶酶体酶转运）
3.分子识别直接参与配体-受体识别，底物-酶结合（某些细胞因子受体与细胞因子的识别）
4.结构稳定寡糖有助于稳定蛋白质构象，保护其免受蛋白酶攻击，延长寿命。
5.易于溶解增强蛋白质的水溶性
6.定向嵌膜避免膜蛋白在转运和发挥作用时翻转
蛋白质泛素化的生理意义：
在蛋白质的定位、代、功能、调节和降解中都起着十分重要的作用.参与细胞周期、增殖、凋亡、分化、转移、基因表达、转录调节、信号传递、损伤修复、炎症免疫等几乎一切生命活动的调控.通过泛素化的修饰能使一些生命过程中起决定作用的酶特定识别要作用的蛋白质以发生作用,意义重大.
原核基因表达在翻译水平上的调控机制:
（SM饭饭盒饭）
1、SD序列（核糖体结合位点）的影响
2、mRNA的稳定性
3、翻译阻遏
4、反义RNA
5、核糖开关
6、翻译移码
真核细胞翻译水平的调控方式有哪些：
（是M小框林干）
（1）对翻译起始的调控，包括阻遏蛋白的调控、翻译起始因子（IF）的功能调控、起始密码子及上游5’-UTR和下游3’-UTR对翻译的调控；
（2）mRNA稳定性与翻译控制；
（3）小分子RNA对翻译的影响。
（4）上游开放阅读框
（5）翻译起始因子，核糖体蛋白磷酸化
（6）RNA干扰
五综述就本学期自己所学知识,谈谈分子生物学在中医中药研究中的应用
分子生物学是从分子水平来研究生命现象的一门基础学科.把分子生物学的新技术引入到中医药研究中,不仅为阐释中医药理论、加深对疾病本质的认识、探讨中药的作用机理和研制新药提供了一种新的研究工具和手段,而且还将启迪新的思想和发展新的诊疗技术,并将对中医药学的变革和进步起到巨大的推动作用.
Sextama盒：
原核生物启动子上-35bp处的TTGACA区，又称-35区。
RNA聚合酶转录起始的识别序列。
Probnow盒：
原核生物中，在启动子上游有一个由5-6个核苷酸组成的共有序列位于起点上游10bp处，所以又称—10序列，是转录的解旋功能部位，具有高度保守性和一致性。
TATA盒：
是构成真核生物启动子的元件之一。
其一致顺序为TATAATAAT（非模板链序列）。
它约在多数真核生物基因转录起始点上游约-30bp（-25~-32bp）处，基本上由A-T碱基对组成，是决定基因转录始的选择，为RNA聚合酶的结合处之一，RNA聚合酶与TATA框牢固结合之后才能开始转录。
共翻译转运：
质网膜上的膜结合核糖体在合成蛋白质时，由于蛋白质N端的信号序列的作用，使得在多肽链合成完成之前就在进行转运。
翻译后转运：
合成的蛋白质穿过生物膜的转移。
游离核糖体上合成的蛋白质必须等蛋白质完全合成并释放到胞质溶胶后才能被转运,所以将这种转运方式称为翻译后转运。
顺式作用原件：
存在于基因旁侧序列中能影响基因表达的序列。
顺式作用元件包括启动子、增强子、调控序列和可诱导元件等，它们的作用是参与基因表达的调控。
：
反式作用因子：
是指能直接或间接地识别或结合在各类顺式作用元件核心序列上参与调控靶基因转录效率的蛋白质。
多为转录因子
正调控：
当阻遏蛋白从操纵基因上脱离后，激活蛋白与启动子结合以及和RNA聚合酶的相互作用，帮助结构基因的转录起始，促进相应蛋白的合成。
负调控：
是指阻遏蛋白与操纵基因的结合，阻止了RNA聚合酶对操纵子结构基因的转录。
锌指结构：
一种常出现在DNA结合蛋白中的一种结构基元。
是由一个含有大约30个氨基酸的环和一个与环上的4个Cys或2个Cys和2个His配位的Zn2+构成，形成的结构像手指状。
亮氨酸拉链：
出现在DNA结合蛋白质和其它蛋白质中的一种结构基元，即模体。
当来自同一个或不同多肽链的两个两用性的α-螺旋的疏水面相互作用形成一个圈对圈的二聚体结构时就形成了亮氨酸拉链。
原位PCR：
在组织细胞里进行PCR反应，它结合了具有细胞定位能力的原位杂交和高度特异敏感的PCR技术的优点，是细胞学科研与临床诊断领域里的一项有较大潜力的新技术。
多重PCR：
又称多重引物PCR或复合PCR，它是在同一PCR反应体系里加上二对以上引物，同时扩增出多个核酸片段的PCR反应，其反应原理，反应试剂和操作过程与一般PCR相同·。
PCR—RFLP：
RFLP是指基因型之间限制性片段长度的差异，这种差异是由限制性酶切位点上碱基的插入、缺失、重排或点突变所引起的。
PCR-SSCP：
指单链构象多态性检测是一种基于DNA构象差别来检测点突变的方法。
定量PCR：
是指用外标法（荧光杂交探针保证特异性）通过监测PCR过程（监测扩增效率）达到精确定量起始模板数的目的，同时以对照有效排除假阴性结果（扩增效率为零）。
逆转录PCR：
是聚合酶链式反应（PCR）的一种广泛应用的变形。
在RT-PCR中，一条RNA链被逆转录成为互补DNA，再以此为模板通过PCR进行DNA扩增。
真核细胞染色质水平调控的方式有哪些6
1.染色质活化
2.染色质缺失
3.基因扩增
4.基因重排
5.基因组印记
6.组蛋白修饰和DNA的甲基化
简述基因诊断常用的方法技术（和PD鸡心）
①核酸杂交是从核酸分子混合液中检测特定大小的核酸分子的传统方法。
②PCR技术扩增微量核酸，用于检测已知序列或已知部分序列的基因，简便快捷，成本低廉。
③DNA测序目前在实验室手工测序常用Sanger双脱氧链终止法。
④基因芯片技术基因芯片技术是近年来发展十分迅速的大规模、高通量分子检测技术。
其基本原理是核酸杂交，其基本过程是将许多特定的寡核苷酸片段或基因片段作为探针，有规律的排列固定于支持物上，形成矩阵点。
PCR原理
该技术是在模板DNA、引物和四种脱氧核糖核苷酸存在下，依赖于DNA聚合酶的酶促合成反应。
DNA聚合酶以单链DNA为模板，借助一小段双链DNA来启动合成，通过一个或两个人工合成的寡核苷酸引物与单链DNA模板中的一段互补序列结合，形成部分双链。
在适宜的温度和环境下，DNA聚合酶将脱氧单核苷酸加到引物3´-OH末端，并以此为起始点，沿模板5´→3´方向延伸，合成一条新的DNA互补链。
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