高中生物必修1必修3重点实验汇编.docx
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高中生物必修1必修3重点实验汇编
高中生物必修1——必修3实验汇编
必修一《分子与细胞》
﹡实验一用显微镜观察多种多样的细胞P7
1、显微镜的使用:
取镜安放→对光→放置玻片标本→低倍找物像→移中央→换高倍镜→调细准焦螺旋→高倍观察→收放
(1)低倍镜使用:
(观察任何标本都必须先用低倍镜,且标本应透明)
(2)高倍镜使用:
先使用低倍镜确定目标→移动装片,使目标位于视野中央→转动转换器,换用高倍镜→调焦(转动细准焦螺旋)(视野较暗,可调反光镜或光圈)
2、显微镜使用注意事项:
(1)成像特点:
放大倒立的虚像,物象移动方向与载玻片移动方向相反
(2)放大倍数计算:
物镜的放大倍数×目镱的放大倍数。
放大倍数指的是物体的长或宽。
(3)低倍镜下成像特点:
物像小、细胞数目多、视野亮。
高倍镜下成像特点:
物像大、细胞数目少、视野暗。
(4)放大倍数的判断方法:
目镜:
镜头长放大倍数小,镜头短放大倍数大。
物镜:
镜头长放大倍数大,镜头短放大倍数小。
物镜与装片之间的距离:
距离近放大倍数大,距离远放大倍数小。
(5)判断污物所在位置:
分别移动载玻片、物镜和转动目镜,观察污物是否移动来判断。
(6)低倍镜使用过程中,下降镜筒时必须双眼侧视镜筒,防止镜头撞到玻片。
低倍镜找到物像后,换上高倍镜时,观察过程中只能使用细准焦螺旋。
﹡实验二检测生物组织中还原糖、脂肪和蛋白质P18
1、原理:
化学试剂能使生物组织中的有关有机物产生特定的颜色反应。
还原性糖(单糖、除蔗糖外的二糖)+斐林试剂+水浴加热:
砖红色沉淀
脂肪+苏丹Ⅲ:
橘黄色 淀粉+碘:
蓝色(而非沉淀)
脂肪+苏丹Ⅳ:
红色(显微镜观察)
蛋白质+双缩脲试剂:
紫色反应(而非沉淀)
2、还原糖的检测
还原性糖:
有还原性基团—游离醛基或酮基的糖;如单糖(葡萄糖、果糖等)、二糖(麦芽糖、乳糖等)
非还原性糖:
多糖(淀粉、纤维素、糖原)、蔗糖
(1)材料:
还原糖含量高,白色或近于白色,如苹果,梨,白萝卜、葡萄(甘蔗、甜菜、绿叶不可!
)
(2)试剂:
斐林试剂(甲液:
0.1g/mL的NaOH溶液,乙液:
0.05g/mL的CuSO4溶液),现配现用。
(3)步骤:
取样液2mL于试管中→加入刚配的斐林试剂1mL(斐林试剂甲液和乙液等量混合均匀后再加入)→水浴加热2min左右→观察颜色变化(浅蓝色→棕色→砖红色)
3、脂肪的检测
(1)材料的选取:
含脂肪量越高的组织越好,如花生的子叶。
(2)步骤:
制作切片(切片越薄越好)将最薄的花生切片放在载玻片中央
↓
染色(滴苏丹Ⅲ染液2~3滴切片上→2~3min后吸去染液→滴体积分数50%的酒精洗去浮色→吸去多余的酒精)
↓
制作装片(滴1~2滴清水于材料切片上→盖上盖玻片)
↓
镜检鉴定(显微镜对光→低倍镜观察→高倍镜观察染成橘黄色的脂肪颗粒)
4、蛋白质的检测
(1)试剂:
双缩脲试剂(A液:
0.1g/mL的NaOH溶液,B液:
0.01g/mL的CuSO4溶液)双缩脲试剂的A液和B液先后加入。
(2)步骤:
试管中加样液2mL→加双缩脲试剂A液1mL,摇匀→加双缩尿试剂B液4滴,摇匀→观察颜色变化(紫色)
﹡实验三观察DNA和RNA在细胞中的分布P26
实验原理:
甲基绿与吡罗红混合染色,甲基绿使DNA呈绿色,吡罗红使RNA呈红色
实验步骤
步骤
器材与试剂
作用与原理
(1)制片
①将牙签刮下的口腔上皮细胞置于
载玻片上0.9%的NaCl溶液中
②载玻片烘干
1.0.9%的NaCl溶液防止细胞破裂,
2.维持细胞形态。
3.烘干使细胞固定在载玻片上
(2)水解
8%HCl中30℃保温5分钟
盐酸能改变细胞膜的通透性,加速染色剂进入细胞,同时使染色体中的DNA与蛋白质分离。
(3)冲洗
用蒸馏水缓流冲洗10分钟
冲洗的目的:
洗去盐酸;
缓水冲洗:
防止细胞被水流冲走。
(4)染色
2滴吡罗红甲基绿染色5分钟
甲基绿使DNA染上绿色
吡罗红使RNA染上红色
(5)观察
显微镜下观察
实验结果:
细胞核呈绿色,细胞质呈红色.
分布:
真核生物的DNA主要分布在细胞核中,线粒体和叶绿体内也含有少量的DNA;
RNA主要分布在细胞质中。
﹡实验四:
体验制备细胞膜的方法
1、原理:
细胞膜的流动性和半透性
2、材料:
猪(或牛、羊、人)的新鲜的红细胞稀释液(血液加适量的生理盐水)
3、步骤:
(1)吸取红细胞稀释液,滴在载玻片上,盖上盖玻片,制成临时装片
(2)在高倍镜下观察,待观察清晰时,在盖玻片的一侧滴一滴蒸馏水,同时在另一侧用吸水纸小心吸引,注意不要把细胞吸跑。
上述操作均在载物台上进行,并持续观察细胞的变化。
可以看到近水的部分红细胞发生变化;凹陷消失,细胞体积增大,很快细胞破裂,内容物流出。
4、考点提示:
(1)选择动物细胞进行实验的原因:
动物细胞无细胞壁。
(2)选择哺乳动物成熟红细胞进行实验的原因:
人和其他哺乳动物成熟红细胞无细胞核和众多的细胞器(膜),可以得到较纯净的细胞膜。
(3)细胞破裂后,用什么方法获得较纯的细胞膜:
将涨破的细胞溶液,经过离心分离得到细胞膜。
(4)如何获得植物细胞膜:
先用纤维素酶和果胶酶将植物细胞壁水解得到原生质体;再将原生质体放入清水中,水自由扩散进入,原生质体涨破;最后经过离心分离得到植物细胞膜。
(5)稀释及稀释的时候用生理盐水的原因:
稀释后,可以减少血液中的血浆蛋白等杂物。
用生理盐水是为了保持渗透压,防止在稀释的时候就发生细胞破裂。
﹡实验五用高倍镜观察线粒体和叶绿体P47
1、材料:
新鲜藓类叶、黑藻叶或菠菜叶,口腔上皮细胞临时装片
2、原理:
叶绿体在显微镜下直接观察,绿色,球形或椭球形。
用健那绿染液染色后的口腔上皮细胞中线粒体成蓝绿色,细胞质接近无色。
3、实验步骤:
叶绿体的观察
步骤
操作方法
目的与作用
(1)取材
①新鲜的藓类的叶
②菠菜叶下表皮略带一些叶肉
①藓类叶为单层细胞
②下表皮容易撕取,要略带些叶肉
(2)制片
注意叶片不能太干了,保持有水的状态
以免影响细胞活性
(3)观察
叶绿体呈椭圆形,可随细胞质的流动而流动。
叶绿体在弱光下以最大面积(长轴)转向光源,在强光下以最小面积(短轴)转向光源。
线粒体的观察
(1)取材
漱口,口腔内侧壁上轻刮几下
(2)染色
将口腔细胞放在健那绿液滴上
(3)观察
盖上盖玻片,显微镜下观察,线粒体被染成蓝绿色
问题
1、为什么不用植物细胞来观察线粒体?
植物线粒体相对较少,叶绿体颜色易掩盖线粒体被染成的蓝绿色。
2、如果观察发现染色不足,如何补色?
在盖玻片一侧滴加健那绿液,另一侧用吸水纸吸
3、用健那绿染液染色为何不用改变细胞膜通透性?
健那绿染液是活细胞中线粒体染色的专一性染料,染色后可在显微镜下观察到生活状态的线粒体形态和分布。
﹡实验六通过模拟实验探究膜的透性P60
目的要求:
1.概述扩散作用含义。
2.说明生物膜具有选择透过性。
3.尝试模拟实验方法。
实验原理:
1、扩散作用——物质从相对含量多(高)的地方到相对含量少(低)的地方的自由运动。
2、半透膜:
某些物质可以透过,而另一些物质不能透过的多孔性薄膜,包括生物膜和物理性膜。
如动物的膀胱膜、肠衣、卵壳膜、玻璃纸等。
可以用半透膜将不同浓度的溶液分隔开,然后通过观察溶液液面的变化,来观察半透膜的选择透过特性,进而通过类比分析得出生物膜的透性。
3、渗透作用:
水分子或其它溶剂分子通过半透膜,从相对含量高的地方向相对含量低的地方扩散。
即水分子从低浓度溶液到高浓度溶液的扩散。
4、渗透作用发生的条件:
半透膜、浓度差
实验装置:
实验结论:
A组和B组实验说明渗透作用必须具有半透膜;A组和C组实验说明渗透作用必须具有浓度差。
注意事项:
水分子的扩散是双向的,只是在整体上或结果上从低浓度溶液向高浓度溶液扩散
﹡实验七植物细胞的吸水和失水P61
1、原理:
成熟(有明显液泡)的植物细胞能够与外界溶液组成一个渗透系统,通过渗透作用的方式吸水或失水
①植物细胞的原生质层相当于一层半透膜
②细胞液浓度>细胞外溶液浓度时,细胞吸水;细胞液浓度<细胞外溶液浓度时,细胞失水
③细胞壁与原生质层的伸缩能力不同
2、质壁分离条件:
细胞液与外界溶液浓度差,有原生质层(半透膜)
3、材料:
紫色洋葱鳞片叶外表皮细胞(具紫色大液泡),质量浓度0.3g/mL的蔗糖溶液,清水等。
中央液泡大小
原生质层的位置
细胞大小
蔗糖溶液
清水
4、步骤:
制作洋葱鳞片叶外表皮细胞临时装片→观察→盖玻片一侧滴蔗糖溶液,另一侧用吸水纸吸引→观察(液泡由大到小,颜色由浅变深,原生质层与细胞壁分离)→盖玻片一侧滴清水,另一侧用吸水纸吸引→观察(质壁分离复原)
5、记录表:
6、注意问题:
(1)细胞发生质壁分离后,细胞壁与细胞膜之间的空隙充满的是0.3mg/mL蔗糖溶液。
(2)动物细胞能发生渗透作用但不会发生质壁分离。
(3)选材:
选取紫色洋葱鳞片叶外表皮。
其细胞液为紫色,在显微镜下与无色透明的细胞壁容易区分,观察到的质壁分离和复原效果明显。
另外,取新鲜水绵、黑藻叶、南瓜表皮也可以做这个实验。
(4)试剂:
选用0.3g/ml蔗糖糖溶液。
浓度过高,细胞质壁分离速度虽然很快,但不久就会将细胞杀死,细胞不能进行质壁分离复原;若浓度过低,则不能引起细胞质壁分离或速度太慢。
另外,8%食盐溶液、5%的硝酸钾溶液、一定浓度的尿素、甘油……也可使用,但后面三者在引起质壁分离后可自动复原。
(5)时间的控制:
做好质壁分离的实验后,不久就要做质壁分离复原实验。
避免使质壁分离的细胞长时间处于较高浓度的外界溶液中,细胞过度失水而导致死亡。
从而观察不到质壁分离复原的现象。
(6)应用:
①可以用于测定细胞液的浓度②可以用于判断细胞的死活
﹡实验八比较过氧化在不同条件下的分解P78
1、原理:
催化剂能降低反应的活化能,Fe3+和过氧化氢酶能催化过氧化氢的分解。
即:
2H2O2→2H2O+O2(有气泡产生)
2、材料:
质量分数为20%的猪肝研磨液,新配制的体积分数为3%的过氧化氢溶液,质量分数为3.5%的FeCl3溶液
3、方法步骤:
(1)取4支洁净试管,分别编号1,2,3,4,向试管内分别加入2ml过氧化氢溶液。
(2)将2号试管放在90℃左右的水浴中加热,观察气泡情况,并与1号试管作比较。
(3)向3号试管内滴2滴FeCl3溶液,向4号试管内滴入2滴肝脏研磨液,观察哪支试管产生的气泡多
(4)2-3min后,将点燃的卫生香分别放在3、4号试管内液面上方,观察哪支试管中的卫生香燃烧更猛烈
4、实验结论:
(1)加热能促进H2O2的分解,提高反应速率;
(2)酶有催化作用,与无机催化剂相比,酶具有高效性。
5、注意:
要选新鲜肝脏(细菌影响活性)
肝脏要制成研磨液(接触面积)
滴入肝脏研磨液与FeCl3溶液时不能用同一吸管(防止混合影响实验效果)
插入卫生香时不能碰触到气泡(以免使卫生香因潮湿而熄灭)
﹡实验九探究影响酶活性的条件P83
1、材料:
新配制的淀粉酶溶液,新鲜肝脏研磨液,可溶性淀粉溶液,过氧化氢溶液等。
2、内容:
(1)探究温度对酶活性的影响
原理:
淀粉遇碘后,形成蓝色的复合物。
淀粉酶使淀粉水解成麦芽糖,麦芽糖遇碘后,不形成蓝色的复合物
步骤
项目
试管1
试管2
试管3
1
加入可溶性淀粉溶液
2mL
2mL
2mL
2
放置在不同温度环境下5分钟
0℃
100℃
60℃
3
加入新配置的淀粉酶溶液
1mL
1mL
1mL
4
滴入碘液
2滴
2滴
2滴
5
观察结果
变蓝
变蓝
不变蓝
自变量:
不同的温度(可以设计几组不同的温度,如10、20、30、40等)
因变量:
底物分解速度或产物生成速度
无关变量:
酶浓度、试剂量、PH、底物浓度等
在温度对酶活性的影响的实验中,三支试管的条件,除温度外均相同。
3号试管处在60℃的温度条件下,酶活性最大,试管中的淀粉被分解,滴入碘液后不会变蓝。
2号试管的温度条件是100℃,这样高温度条件下,淀粉酶已失去活性,1号试管的温度条件是O℃,低温抑制淀粉酶的活性。
所以2号和1号试管中的淀粉都没有被分解,滴上碘液后都会变蓝,此实验可以证明:
酶的催化作用需要适宜的温度条件,温度过高和过低都将影响酶的活性。
(2)探究pH对酶活性的影响
实验1:
原理:
过氧化氢(H2O2)在过氧化氢酶的催化作用下,可以分解成水和氧气,可以放入带火星的木条,看能否复燃来检测是否有氧气产生。
步骤
项目
试管1
试管2
试管3
1
加入过氧化氢溶液
2mL
2mL
2mL
2
加入蒸馏水
1mL
—
—
3
加入盐酸溶液
—
1mL
—
4
加入NaOH溶液
—
—
1mL
5
滴加肝脏研磨液
2滴
2滴
2滴
6
37℃水浴
5min
5min
5min
7
检
验
放入带火星的木条
复燃
不复燃
不复燃
试管内气泡产生量
有气泡产生
没有气泡
产生
没有气泡
产生
2号试管内加入了盐酸,溶液的pH较低,3号试管内加入了氢氧化钠,溶液的pH较高,在过低或过高pH环境中,过氧化氢酶失去活性,不能使过氧化氢分解,没有氧气产生而1号试管没有加入酸或碱,溶液近似中性,过氧化氢酶将过氧化氢分解成水和氧气,使木条复燃。
实验2
原理:
淀粉在淀粉酶的作用下,被分解成麦芽糖,麦芽糖能与斐林试剂发生氧化还原反应,生成砖红色沉淀
步骤
项目
试管1
试管2
试管3
1
加入可溶性淀粉溶液
2mL
2mL
2mL
2
加入蒸馏水
1mL
—
—
3
加入盐酸溶液
—
1mL
—
4
加入NaOH溶液
—
—
1mL
5
加入新配置的淀粉酶溶液
2滴
2滴
2滴
6
60℃水浴
5min
5min
5min
7
加入斐林试剂
2mL
2mL
2mL
8
50℃-60℃水浴
2min
2min
2min
9
观察结果
有砖红色沉淀
无
无
实验现象记录如下:
1号试管有砖红色沉淀生成,2号试管无砖红色沉淀生成,3号试管无砖红色沉淀生成。
2号试管内加入了盐酸,溶液的pH较低,3号试管内加入了氢氧化钠,溶液的pH较高,在这样的pH环境中,淀粉酶失去活性,不能使淀粉分解,所以试管中加人斐林试剂后并无砖红色沉淀生成。
1号试管内没有加入酸或碱,溶液近似中性,这样的pH适于淀粉酶发挥催化作用,所以淀粉被分解并与斐林试剂反应,生成砖红色沉淀。
以上实验可以证明,酶的催化作用需要适宜的pH,pH偏低或偏高都能影响酶的活性
﹡实验十探究酵母菌细胞呼吸的方式P91
1、原理
a.酵母菌是一种单细胞真菌(真核生物),在有氧和无氧的条件下都能生存,属于兼性厌氧菌,便于用来研究细胞呼吸的不同方式。
b.
c.CO2可使澄清石灰水变浑浊,也可使溴麝香草酚蓝水溶液由蓝变绿再变黄。
根据石灰水的浑浊程度或溴麝香草酚蓝水溶液变成黄色的时间长短,可以比较酵母菌产生的CO2量的多少,从而定性分析酵母菌的呼吸类型。
d.酵母菌无氧呼吸产生的酒精,在酸性条件下容易与橙色的重铬酸钾发生反应生成灰绿色的硫酸铬。
3C2H5OH+2K2Cr2O7+8H2SO4=3CH3COOH+2K2SO4+2Cr4(SO4)3+11H2O
2、装置:
(见课本)下图为“探究酵母菌细胞呼吸的方式”的实验装置图
甲:
有氧呼吸装置 乙:
无氧呼吸装置
ABCDE
分析:
A瓶加入的试剂是NaOH,其目的是:
使进入B瓶的空气先经过NaOH处理,排除空气中CO2对实验结果的干扰。
C瓶和E瓶加入的试剂是澄清石灰水(或溴麝香草酚蓝水溶液),其作用是:
检测CO2的产生
D瓶应封口放置一段时间后,再连通E瓶,其原因是:
D瓶应封口放置一段时间后,酵母菌会将瓶中的氧气消耗完。
再连通E瓶,就可以确保通入澄清石灰水(或溴麝香草酚蓝水溶液)的CO2是酵母菌的无氧呼吸所产生的
3、结论
酵母菌在有氧和无氧条件下均能进行细胞呼吸。
在有氧条件下,通过有氧呼吸产生大量的二氧化碳和水;在无氧条件下,通过无氧呼吸产生酒精和少量的CO2。
因此,细胞呼吸方式可分为有氧呼吸和无氧呼吸两种类型。
4、注意事项
(1)注意控制好有氧和无氧的条件。
一般方法:
通过橡皮球(或气泵)持续通入空气使酵母菌处于有氧环境。
B瓶则应封口放置一段时间,待酵母菌消耗完氧气后,将前一段时间产生的CO2排掉,再连通盛有澄清石灰水的锥形瓶,以确保是无氧呼吸产生的CO2使澄清的石灰水变浑浊。
另外,可在B瓶液面覆盖石蜡油隔绝空气。
(2)配制酵母菌培养液时,必须将煮沸(除氧、灭菌)的葡萄糖溶液冷却到常温后才可以加入新鲜的食用酵母菌(出芽生殖快,细胞呼吸旺盛,实验效果明显)。
(3)应用:
利用重铬酸钾可以检测酒精的原理来检测司机是否喝了酒。
具体做法是:
让司机呼出的气体直接接触到载有用浓硫酸处理过的重铬酸钾或三氧化铬的硅胶(二者均为橙色),如果呼出的气体中含有酒精,会生成灰绿色的硫酸铬。
﹡实验十一绿叶中色素的提取和分离P97
1、原理:
叶绿体中的色素能溶解在有机溶剂丙酮或无水乙醇——提取色素
各色素在层析液中的溶解度不同,随层析液在滤纸上扩散速度不同。
溶解度高的随层析液在滤纸上扩散的快,反之则慢——分离色素
2、步骤:
(1)提取绿叶中色素:
称取绿叶5g→剪碎置于研钵→放入少许SiO2和CaCO3→加入10mL丙酮→充分研磨→过滤→收集滤液(试管口用棉塞塞严)
(2)制备滤纸条:
(3)画滤液细线:
均匀,直,细,重复若干次
(4)分离色素:
滤纸条轻轻插入盛有层析液的小烧杯中,用培养皿盖住小烧杯。
不能让滤液细线触及层析液
(5)观察和记录:
3、结果分析:
滤纸条上从上到下依次为:
橙黄色(胡萝卜素)、黄色(叶黄素)、蓝绿色(叶绿素a)、黄绿色(叶绿素b).
(橙黄色)最快(溶解度最大)
(黄色)
(蓝绿色)最宽(最多)
(黄绿色)最慢(溶解度最小)
4、注意:
实验过程
注意事项
操作目的
提取色素
1
选取新鲜、叶色浓绿的叶片
保证含有较多的色素
2
研磨时加入少许二氧化硅
使研磨得充分
3
研磨时加入少许碳酸钙
防止研磨过程中色素受到破坏
4
研磨时加入10mL无水乙醇
提取(溶解)叶绿体中色素
分离色素
1
滤液细线要细、直、齐
使分离的色素带平整、不重叠
2
滤液细线干燥后重复画2-3次
保证含有较多的色素
3
加入3mL左右的层析液
分离叶绿体中色素
4
滤液细线不能触及层析液
防止色素溶解到层析液中,使滤纸条上不出现色素带,导致实验失败。
5、色素的位置和功能
叶绿体中的色素存在于叶绿体类囊体薄膜上。
叶绿素a和叶绿素b主要吸收红光和蓝紫光;
胡萝卜素和叶黄素主要吸收蓝紫光及保护叶绿素免受强光伤害的作用。
Mg是构成叶绿素分子必需的元素。
﹡实验十二细胞大小与物质运输的关系P110
原理:
1、利用边长不同的琼脂块模拟大小不同的细胞。
2、利用NaOH模拟细胞外营养物质,NaOH和酚酞相遇呈紫红色。
当与琼脂相遇时,其中酚酞变成紫红色,因此,从颜色上的变化就知道NaOH扩散得有多远。
在一定时间内,NaOH在琼脂块的每一侧扩散的距离大致相同。
3、相对表面积=表面积/体积
4、NaOH扩散的效率=NaOH扩散的体积/整个琼脂块的总体积
步骤:
1、制备琼脂块:
用塑料餐刀切取三块边长分别为3cm、2cm、1cm的含酚酞的琼脂块正方体
2、浸泡:
质量分数为0.1%的NaOH溶液,浸泡10min
3、切割:
捞取、吸干并用塑料餐刀切成两半
4、测量、记录与计算,得出结果
结果:
琼脂块的边长/cm
表面积/cm2
体积/cm3
相对表面积
(表面积/体积)
NaOH扩散的深度/cm
NaOH扩散的体积/琼脂块的体积
3
54
27
2
1
19/27
2
24
8
3
1
7/8
1
6
1
6
1
分析:
琼脂块的表面积与体积之比(相对表面积)随着琼脂块的增大而减小,NaOH扩散的
体积与整个琼脂块的体积之比也随着琼脂块的增大而减小.
结论:
细胞体积越大,其相对表面积越小,细胞的物质运输的效率就越低。
细胞表面积限
制了细胞的长大。
1.细胞为什么要分裂?
或细胞为什么这么小?
(1)增大细胞膜表面积与体积比,有利于物质的运输(营养吸收与废物排出)以保证细胞
随着细胞生长,细胞体积增大,而细胞表面积和体积之比(表面积/体积)却在变小。
而活细胞不断进行新陈代谢,细胞表面担负着输入养分,排出废物的重任。
表面积/体积比值的下降,意味着代谢速率的受限和下降。
所以,细胞分裂是细胞生长过程中保持足够表面积,维持一定的生长速率的重要措施。
(2)保证适宜的核质关系,使细胞质能在细胞核的控制范围内。
即:
防止细胞核”负担”过重
2.卵细胞是一种特殊的细胞,因为它含有许多供胚胎发育的营养物质——卵黄,而使细胞
体积增大了许多倍。
但卵细胞一般与外界交换物质少,故表面积与体积的比例特殊。
﹡实验十三观察细胞的有丝分裂P115
1、材料:
洋葱根尖(葱,蒜)
质量分数为15%的盐酸,体积分数为95%的酒精,质量浓度为0.01g/ml或0.02g/ml的龙胆紫溶液(将龙胆紫溶解在质量分数2%的醋酸溶液中配制而成)或醋酸洋红液
2、步骤:
(一)洋葱根尖的培养
(二)装片的制作:
制作流程:
解离→漂洗→染色→制片
过程
方法
时间
目的
解离
上午10时至下午2时,剪去洋葱根尖2-3mm,立即放入盛入有盐酸和酒精混合液(1:
1)的玻璃皿中,在温室下解离。
3-5min
用药液使组织中的细胞相互分离开来
漂洗
待根尖酥软后,用镊子取出,放入盛入清水的玻璃皿中漂洗。
约10min
洗去药液,防止解离过度;并有利于染色。
染色
把根尖放进盛有质量浓度为0.01g/ml或0.02g/ml的龙胆紫溶液(或醋酸洋红液)的玻璃皿中染色。
3-5min
染料能使染色体着色。
制片
用镊子将这段根尖取出来,放在载玻片上,加一滴清水,并用镊子尖把根尖能碎,盖上盖玻片,在盖玻片上再加一片载玻片。
然后,用拇指轻轻的按压载玻片。
使细胞分散开来,有利于观察
(三)观察
a低倍镜观察:
找到分生区细胞,其特点是细胞呈正方形,排列紧密,有的细胞正在分裂
b高倍镜观察:
在低倍镜观察的基础上换高倍镜,直到看清细胞的物象为止
c仔细观察:
先到中期,再找其余各期,注意染色体的特点
d移动观察:
慢慢移动装片,完整地观察各个时期
4、绘图
5、记录:
记录表
细胞周期
样本1
样本2
总数
每一时期的细胞数/计数细胞的总数
间期
分裂期
前期
中期
后期
末期
计数细胞的总数
注意:
(1)无法持续观察一个细胞从分裂间期到末期的全过程,因为解离时细胞已经死亡