生计答案.docx
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生计答案
第一章绪论
1.生物技术的定义和种类?
指人们以现代生命科学为基础,结合其他基础学科的科学原理,采用先进的工程技术手段,按照预先设计改造生物体或加工生物原料,为人类生产出所需产品或达到某种目的。
分类:
基因工程、细胞工程、酶工程、发酵工程、蛋白质工程等新技术。
2.食品生物技术的定义?
其核心和基础是?
食品生物技术(foodbiotechnology)是现代生物技术在食品领域中的应用,是指以现代生命科学的研究成果为基础,结合现代工程技术手段和其他学科的研究成果,用全新的方法和手段设计新型的食品和食品原料。
在某种意义上,基于现代分子生物学基础上的基因工程是食品生物技术的核心和基础,它贯穿于细胞工程、酶工程、发酵工程、蛋白质工程、生物工程下游技术和现代分子检测的技术之中。
3.为什么说生物技术是一门综合性的学科,它与其他学科有什么关系?
现代生物技术是所有自然科学领域中涵盖范围最广的学科之一。
它以包括分子生物学、细胞生物学、微生物学、免疫生物学、人体生理学、动物生理学、植物生理学、微生物生理学、生物化学、生物物理学、遗传学等几乎所有生物科学的次级学科为支撑,又结合了诸如化学、化学工程学、数学、微电子技术、计算机科学、信息学等生物学领域之外的尖端基础学科,从而形成一门多学科互相渗透的综合性学科
第二章基因工程
1.基因的化学本质是如何被发现和证明的?
人们对基因的认识是不断发展的。
19世纪60年代,遗传学家孟德尔就提出了生物的性状是由遗传因子控制的观点,但这仅仅是一种逻辑推理的产物。
20世纪初期,遗传学家摩尔根通过果蝇的遗传实验,认识到基因存在于染色体上,并且在染色体上是呈线性排列,从而得出了染色体是基因载体的结论。
20世纪50年代以后,随着分子遗传学的发展,尤其是沃森和克里克提出双螺旋结构以后,人们才真正认识了基因的本质,即基因是具有遗传效应的DNA片断。
2.DNA的组成,结构和功能。
主要由4脱氧核糖核苷酸和磷酸二酯键构成。
DNA的一级结构指DNA分子中脱氧核苷酸的连接方式和排列顺序;二级结构指DNA的右手双螺旋结构;三级结构指在双螺旋结构上进一步盘曲成更复杂的结构。
DNA是遗传信息的携带者。
3..真核基因和原核基因编码区的区别.
原核细胞的基因,编码区连续,结构简单
真核细胞的基因,编码区间隔、不连续,由内含子和外显子交替构成,结构复杂。
4..基因工程,食品基因工程的基本定义。
基因工程:
NA重组技术(recombinantDNAtechnology)
用人工的方法把不同生物的遗传物质(基因)分离出来,在体外进行剪切、拼接、重组(离不开酶),形成重组体,然后再把重组体引入宿主细胞中复制表达,从而达到改造生物品种或性状,大量生产出人类所需要的生物品种和产物。
食品基因工程:
将一些用传统育种方法无法培育出的性状通过基因工程的手段引入微生物、动物、植物等食品原料,通过基因工程改进食品生产工艺和流程、生产食品添加剂和功能食品等。
5.基因工程研究的理论依据
不同基因具有相同的物质基础;基因是可以切割的;基因是可以转移的;多肽与基因之间存在对应关系;遗传密码是通用的;基因可以通过复制把遗传信息传递给下一代。
6.基因工程的基本条件是什么
1用于核酸操作的工具酶
2用于基因克隆的载体
3用于基因转移的受体菌或细胞
7.基因工程的工具酶有哪些?
限制性内切酶DNA连接酶DNA聚合酶碱性磷酸酯酶S1核酸酶逆转录酶
8..限制性核酸内切酶的定义、分类及Ⅱ型限制性核酸内切酶命名
定义:
能在特定部位限制性地切割DNA分子的酶
Ⅰ型限制性内切酶:
多聚体蛋白质,具有切割DNA的功能,作用时需要ATP、Mg2+和S-腺苷蛋氨酸(SAM)的存在
Ⅱ型限制性内切酶:
一类分子质量较小的单体蛋白,作用时仅需Mg2+存在即可,可在特殊位点切割DNA,产生具有黏性末端或其他形式的DNA分子片段
Ⅲ型限制性内切酶:
一些具有独特的识别方式和切割方法的内切酶
命名:
用具有某种限制性内切酶的有机体学名缩写来命名,即:
有机体属名的第一个字母(大写,斜体)和种名的前两个字幕(小写,斜体)构成基本名称;株系数字通常都省略,但如果酶是存在于一种特殊的菌株中,在基本名称后面还应该加上菌株的名称符号;罗马数字用来表示从同一个细菌中分离出来的不同限制性内切酶。
9.Ⅱ型限制性核酸内切酶的基本特性及主要用途?
常见的Ⅱ型限制性核酸内切酶有哪些?
基本特性:
是一类分子量较小的单体蛋白,作用时仅需要Mg2+,存在即可维持活性,它可在特殊位点切割DNA,产生具有粘性末端或其他形式的的DNA分子片段,是分解和重建DNA基本工具。
主要用途:
1、在特异位点上切割DNA,产生特异的限制性内切酶切割的DNA片段。
2、建立DNA分子的限制性内切酶物理图谱。
3、构建基因文库。
4、用限制性内切酶切出相同的粘性末端,以便重组DNA。
常见的:
EcoRⅠ、HindⅠ、HindⅡ、HindⅢ。
10.稀切酶、同裂酶和同尾酶的区别?
稀切酶:
识别序列长;识别序列富含GC或AT
同裂酶:
来源不同但识别序列相同
同尾酶:
识别序列不同但切割后所得粘性末端相同
11.完全消化和局部消化的概念及其应用?
完全消化:
从理论上,识别序列n个碱基的核酸内切限制酶,对DNA的切割能达到每隔4n切割一次的水平。
但是这种理论上的完全消化在事实上是难以存在的。
因此通常所说的完全消化,是指DNA分子中所存在的某种限制酶的所有限制位点,均被该酶彻底切割的酶切消化反应。
局部消化:
限制性核酸内切酶对DNA的消化不十分完全,获得平均相对分子质量大小有所增加的限制片段产物。
完全消化得到的小分子量的片断在电泳中容易分离目的片断。
局部消化得到的大分子量的片断可用于基因文库的构建。
12.DNA连接酶的概念?
常见的DNA连接酶有哪两种?
能将两段DNA拼接起来的酶叫DNA连接酶。
常见的有T4DNA和大肠杆菌连接酶。
13.聚合酶定义:
指生物催化合成脱氧核糖核酸(DNA)和核糖核酸(RNA)的一类酶的统称。
常用的DNA聚合酶:
大肠杆菌DNA聚合酶Ⅰ(全酶)、大肠杆菌DNA聚合酶Ⅰ大片段(Klenow片段)、T4噬菌体DNA聚合酶、T7噬菌体DNA聚合酶及其改造的侧序列、耐热DNA聚合酶(TapDNA)、末段转移酶。
耐热DNA聚合酶的特点:
①它是一种耐热、依赖DNA、可用基因工程技术生产并销售的DNA聚合酶,②它具有依赖聚合物5'→3'外切核酸酶活性。
耐热DNA聚合酶的应用:
DNA测序、聚合酶链式反应(PCR)对DNA片段进行体外扩增。
14.碱性磷酸酯酶的作用:
①去除DNA和RNA的5'-磷酸基,然后在T4多聚核苷酸酶催化下,用[α-32P]ATP进行末端标记,继而 进行序列分析;②去除载体DNA的5'磷酸基,防止自我环化,降低成本,提高重组DNA检出率。
常用碱性磷酸酶及其来源:
从大肠杆菌中提取出的BAP,另一种是从牛小肠提取的CIP。
15.基因工程载体定义:
目的基因要进入宿主细胞的一种重要方式是通过载体
(vector或者carrier)的运载作用实现的。
常见的基因工程载体:
细菌质粒载体、农杆菌质粒载体、λ噬菌体载体、柯氏质粒载体和病毒载体。
载体的生物学特性和必须具备的基本条件:
①能在宿主细胞内进行独立和稳定的DNA自我复制。
在外源DNA插入其DNA后,仍能保持稳定的复制状态和遗传特性。
②易于从宿主细胞中分离,并进行纯化。
③在其DNA序列中有适当的限制性内切酶单一切位点。
这些位点位于DNA复制的非必须区内,可以再这些位点上插入外源DNA,但不影响载体自身DNA的复制。
④具有能够直接观察的表性特征(有报告基因),在插入外源DNA后,这些特征可以作为从组DNA选择的标志。
16.PBR322的元件:
含有两个抗生素抗性基因(抗氨苄青霉素和抗四环素);还有单一的BamHⅠ,HindⅢ和SalⅠ的识别位点,这3个位点都在四环素抗性基因内;另一个单一的PstⅠ识别在氨苄青霉素抗性基因内。
PBR322带有一个复制起始点。
17.基因工程中,质粒的抗菌素抗性选择原理及其应用?
原理:
1、不带有抗菌素抗性基因的受菌体不能在含有抗菌素的培养基(选择培养基)中生长;2、当带有抗菌素抗性基因的载体进入受体菌后,受体菌才能生长。
应用:
DNA连接,鉴别和筛选含目的基因的细胞。
18.基因工程的操作过程。
操作过程:
1、采用酶切cDNA文库人工合成或PCR扩增,分离制取目的基因片段;2、采用核算限制性内切酶Ⅱ同时剪切目的基因和克隆载体;3、在T4DNA连接酶作用下将目的基因载体连接而成重组DNA;4、把重组DNA分子导入受体细胞,并在一起扩增而成克隆子;5、标记分析和筛选出获得重组的DNA分子的克隆受体细胞;6、进一步扩增、转化和表达,最终生成优良性状的菌种或人类所需要的产品。
19.基因工程中目的基因指的是什么?
获得目的基因的方法有哪些?
如何利用PCR法获得目的基因?
目的基因:
又叫靶基因,是指根据基因工程的目的而设计做需要的某些DNA分子片段,它含有一种或几种遗传信息的全套密码
方法:
(1)目的基因的直接分离法①限制性内切酶酶切法②物理化学发(A.密度梯度离心法B.单链酶法C.分子杂交法)③逆转录获取法
(2)基因文库筛选法①鸟枪法②基因组文库法③cDNA文库法
(3)聚合酶链式反应(PCR)法
(4)基因的化学合成法
PCR基本过程:
①变性,将模板DNA置于95℃的高温下,使双链DNA的双链解开变成单链DNA
②退火,将反应体系的温度降低到55℃左右,使得一对引物能分别与变性后的两条模板链相配对
③延伸,将反映体系温度升高到TaqDNA聚合酶的最是温度72℃,然后以目的基因为模板合成新的DNA链
反复30个循环左右,即可扩增得到目的的DNA序列
20.PCR法反应体系的基本原理、反应条件是什么?
包括哪几大步骤?
用PCR扩增某一基因,必须预先得到什么样的信息?
原理:
首先使双链DNA在反应液中热变性而分开成单链,然后在低温下与两个引物进行退火,使引物与单链DNA配对结合,再在中温下利用TaqDNA聚合酶的聚合活性及热稳定性进行聚合反应,循环30次后即可扩增DNA序列数量
反应条件:
①要有被分离目的基因的DNA双链两段序列相互补的DNA引物
②具有热稳定性的酶
③dNTP
④作为模板的DNA序列
⑤反应缓冲液
包括变性、退火、延伸三大步骤
用PCR扩增某一基因,必须预先得到的信息:
一段已知序列的DNA引物。
21.什么是受体细胞、感受态受体细胞?
重组DNA导入受体细胞的方法有哪些?
受体细胞也叫宿主细胞,指能够摄取外源DNA并使其稳定遗传的细胞。
感受态受体细胞是指经过适当处理后容易接受外来DNA进入的受体细胞。
重组DNA导入受体细胞的方法,大体上可分为:
①转化,②转染③微注射技术④微弹技术⑤电转化法⑥脂质体介导法⑦其他方法。
22.什么叫转化?
常用的转化方法有哪些?
C诱导完整细胞的转化实现的原理是什么?
写出该法的基本步骤。
转化是使重组体DNA分子在热休克的短暂时间内被导入受体。
常用的方法有:
①磷酸钙沉淀法,基因枪法、原生质体法、脂质体法、花粉管通道法、电激转化法、PEG介导转化方法等,其中基因枪转化法是代表。
农杆菌介导和病毒介导。
用钙离子实质是增加了细胞膜的通透性,打开细胞壁通道。
操作:
1、将快速生长的大肠杆菌置于经低温(0℃)预处理的低渗氯化钙溶液中,便会造成细胞膨胀,同时Ca2+会使细胞膜磷脂双分子层形成液晶结构,促使细胞外膜与内膜间隙中的部分核酸酶解离开来,离开所在区域,诱导细胞成为感受态细胞。
细胞膜通透性发生变化,极易与外源DNA相粘附并在细胞表面形成抗脱氧核糖核酸酶的羟基-磷酸钙复合物。
2、.此时,将该体系转移到42℃下做短暂的热刺激(90s),细胞膜的液晶结构会发生剧烈扰动,并随机出现许多间隙,外源DNA就可能被细胞吸收。
进入细胞的外源DNA分子通过复制、表达,实现遗传信息的转移,使受体细胞出现新的遗传性状。
3、将转化后的细胞在选择性培养基上培养,筛选出带有外源DNA分子的阳性克隆。
课件结合网上资料
23.转化子与非转化子、重组子与非重组子、目的重组子与非目的重组子的区别。
转化子是接纳载体或重组分子的转化细胞,非转化子未接纳载体或重组分子的非转化细胞;重组子含有重组DNA分子的转化子,非重组子仅含有空载载体分子的转化子;目的重组子含有目的基因的重组子,非目的重组子不含目的基因的重组子。
24.目的重组子筛选的方法有哪些?
(1)根据载体表型特征筛选重组子
基因工程中使用的所有载体分子,都带有一个可选择的遗传标记或表型特征。
抗药性基因的插入失活作用
(2)根据插入序列的表型特征筛选重组子
基因原理:
转化进来的外源DNA编码的基因,如果能够对寄主菌株所具有的突变发生体内抑制或互补效应,就能使被转化的寄主细胞表现出对外源基因编码的表型特征。
(3)根据报告基因筛选重组体
报告基因:
是一种编码可被检测的蛋白质或酶的基因,也就是一个表达产物非常容易被鉴定的基因。
基本原理:
在构建目的基因时将一种报告基因构建在一起,当目的基因转化受体细胞时,报告基因一同被转入,这种报告基因是受体细胞基因组所没有的,而且具有易于检验的表型。
25.转化细胞扩增的目的是什么?
是为了由原来的二倍体核型变成多倍体/异倍体核型,细胞的生长特性也随之发生改变而获得永生化,失去接触抑制,可无限繁殖传代
26.设计淀粉酶目的基因重组子筛选的方法。
采用显色筛选法。
以大肠杆菌质粒pUC18为载体,它携带lacZ’基因,可发生蓝色反应,将外源淀粉酶目的基因克隆在pUC18的lacZ’标记基因内部,使之灭活,此时重组子呈Apr、lacZ-,淡黄色菌落,而非重组子则呈Apr、lacZ+,蓝色菌落,即可分离。
27.基因工程在食品产业中的应用实例。
课本80-93页
1利用基因工程将优良性状引入微生物、动物、植物,获得优良的食品原料。
2利用基因工程改进食品生产工艺和流程。
3利用基因工程生产高附加值食品成分和食品添加剂。
4改造食品微生物
5改善食品原料的品质
6生产酶制剂
7改良食品加工工艺
8生产功能性食品
9改良动物食品性状
10导入ACC合成酶反义基因的番茄
11利用转基因动物技术提高动物的生长速度。
1982年Palmiter等将大鼠的生长激素基因导入小鼠的基因组中,转基因小鼠长成巨型小鼠。
随后不同来源的生长激素基因被导入小鼠中,研究表明,外源生长激素基因的表达可大大促进转基因动物的生长速度。
将人的生长激素基因导入猪的基因组后,猪的生长周期显著缩短,且饲料的利用率和瘦肉的比重大幅度提高,因而具有较高的经济价值。
澳大利亚将生长激素基因转入绵羊基因组中,获得的转基因羊生长速度比一般的绵羊快三分之一,体型大50%。
中国科学院水生生物研究所在世界上率先开展鱼类基因转移和育种工作,成功地将人生长激素基因导入鲤鱼的基因组中,所获得的转基因鱼能够有效表达人生长激素基因,并表现快速生长效应,有的转基因鱼在生长9个月后比对照鱼重1.5kg。
12转基因动物作为生物反应器
传统的基因工程产品是通过微生物发酵而获得的,其主要缺陷是表达蛋白不能正确折叠而丧失生物学活性,并且生产成本昂贵。
利用哺乳动物细胞系表达外源蛋白则细胞培养困难,表达量低,同样生产成本昂贵。
利用转基因动物作为生物反应器生产人类蛋白质药物,其质量大大优于通过微生物发酵获得的产品,并且生产成本可以大大降低。
转基因动物生物反应器主要包括动物乳腺生物反应器和动物血液生物反应器等。
随着全球人口不断增加,人口过多与粮食相对不足的矛盾越来越突出,如何提高粮食的产量以满足人类不断增长的需要是新世纪农业面临的重要问题。
另一方面,随着人们生活水平的不断提高,人们越来越关注食物的口味、口感和营养价值等因素。
这些实际需要为植物基因工程的发展提供了广阔的空间,另一方面,植物基因工程也为提高作物产量、改良作物品质提供了一条崭新的途径。
13提高植物性食品氨基酸含量(如Lys)
增加食品甜味(如应乐果蛋白monellin,咀嚼甜味比蔗糖甜10万倍,其结构为AB,A由45个aa的肽链,B为50个aa的肽链,AB易解离失去甜味,通过基因工程解决这一问题)
改造油料作物(提高PUFA的含量,提高抗氧化剂的含量)
改良蛋白质品质
改善果蔬的采后品质
抗早衰转基因植物。
植物叶片是进行光合作用的器官。
叶片的过早衰老会引起作物产量和质量的严重下降,利用基因工程技术,使转基因植物抑制乙烯的合成或促进细胞分裂素的合成,可达到延缓植物衰老的结果。
14改进果糖和乙醇生产方法
15利用基因工程降低大麦中醇溶蛋白含量,从而改进啤酒生产工艺,提高啤酒质量。
16生产氨基酸
第三章细胞工程
1.细胞工程的定义和分类?
定义:
根据需求设计改变细胞的遗传基础,通过细胞培养技术、细胞融合技术等,大量培养细胞乃至完整个体的技术。
根据其研究对象不同,分为植物细胞工程、动物细胞工程和微生物细胞工程。
2.细胞工程的核心理论是什么?
其具体内涵是什么?
细胞工程的核心理论是细胞全能性。
细胞不仅具有发育成完整植株或个体的潜能,而且具有在细胞水平上表达出有用次生代谢产物等多方面的能力。
3.细胞工程的基本操作技术有哪些?
a)无菌操作技术是细胞工程培养中最重要的、最基本的要求。
各项操作应在无毒害、无污染的培养环境中进行。
培养基、器皿材料、接种工具、操作环境、培养室和超净工作台等各个环节都应注意。
b)细胞培养技术动物、植物、微生物细胞在体外无菌条件下的保存、生长、分裂和繁殖,并在培养过程中不再形成组织的技术。
c)细胞融合技术在一定条件下,将两个或多个异源细胞或原生质体互相接触,其细胞膜发生分子重排,导致细胞合并、染色体等遗传物质重组的过程。
4.细胞培养的定义?
广义的细胞培养和食品工业意义上的细胞培养区别和联系?
a)细胞培养,既包括微生物细胞的培养,细胞培养技术可以由一个细胞经过大量培养成为简单的单细胞或极少分化的多细胞,这是克隆技术必不可少的环节,而且细胞培养本身就是细胞的克隆。
通过细胞培养得到大量的细胞或其代谢产物。
b)广义的细胞培养技术:
在无菌条件下,将细胞离体的单个游离细胞在人工控制的环境里培养,以获得再生的完整动植物体或生产具有经济价值的其它生物产品的技术。
食品工业意义的细胞培养:
使细胞悬浮培养或固定化培养增殖,以获得大量细胞或有价值的初级、次级代谢产物,为食品工业提供服务。
5.植物细胞培养基最典型的特点是什么?
(不确定)
植物细胞能在简单的合成培养基上生长
6.植物细胞培养的一般程序。
整体植株——植物组织或器官——外植体——在固体培养基上诱发愈伤组织——愈伤组织继代培养——悬浮培养
7.外植体:
由活植物体上切取下来以进行培养的那部分组织或器官
愈伤组织:
原指植物体受伤时产生于伤口周围的组织。
现多指切取植物体的一部分,置于含有生长素和细胞分裂素的培养液中培养,诱导产生的无定形的组织团块
(石睿)
8.植物细胞的悬浮培养的定义、优点和方式
定义:
在食品工业中应用的植物细胞培养主要是指细胞悬浮培养,即利用愈伤组织或单细胞或微小细胞团悬浮在液体培养基中进行增殖培养并分离提取植物细胞产生的次生代谢产物。
在培养过程中细胞或小的细胞团必须保持较好的分散状态。
方式:
分批培养法、半连续培养法、连续培养法、浊度恒定法、化学恒定法
9.植物细胞的连续式悬浮培养定义、特点
连续培养法
定义:
采用连续培养反应器,在投料和接种培养一段时间后,以一定速度连续采集细胞与培养液,并以同样速度供给新鲜培养基,此种培养方式可使细胞生长环境长期维持恒定。
连续培养的特点:
①不会发生营养不良的现象;②细胞长期处于对数生长期,细胞增殖速度快;③适于大规模工业化生产。
要维持系统无菌状态,技术条件要求相当苛刻。
10.什么是植物细胞的固化细胞培养?
固化细胞培养的优点是什么?
固定化细胞培养:
把细胞固定在一种惰性基质上,而营养液可以在细胞间流动。
惰性基质:
琼脂、藻酸盐、聚丙烯酰胺、纤维等。
固定化培养法的特点:
(1)细胞所受切变力小;
(2)易于控制培养条件及获得次生代谢产物;
(3)便于操作;
(4)便于次生代谢产物的收集。
11.植物细胞培养的反应器有哪几类?
间接式反应器、连续搅拌釜式反应器、填充床反应器、流化床反应器、其他类型等。
12.举例说明植物细胞培养在食品中的应用?
【1】生产香料。
例,在洋葱细胞培养中,从蒜碱酶抑制剂羟基胺中提取出了香料物质的前体—烷基半胱氨酸磺胺化合物。
【2】生产调料。
例,在甜叶菊的培养细胞中能积累甜菊苷,此物质是一种天然填料剂,味道是蔗糖的300倍。
【3】生产食品添加剂。
【4】生产天然食品。
【5】生产植物药。
13.动物细胞培养、原代培养、传代培养的定义。
【1】动物细胞培养:
离散的动物活细胞在体外人工无菌条件下的生长增殖,在整个过程中细胞不出现分化,不再形成组织。
【2】原代培养:
从供体取得组织细胞后在体外进行的首次培养。
【3】传代培养:
细胞由原培养瓶内分离稀释后转到新的培养瓶的过程。
14..动物细胞培养的一般程序.
动物细胞培养的一般程序:
组织切碎(动物胚胎或幼龄组织器官)→酶处理得单个细胞(why?
)→细胞悬液→培养(原代培养)→再扩大培养(传代培养)
15.什么是接触抑制?
适用于哪种细胞?
接触抑制对细胞培养有什么指导意义?
接触抑制:
细胞在生长过程中达到相互接触时停止分裂的现象。
适用于处于停止期的细胞;一般认为接触抑制是细胞间的一种识别作用,对多细胞动物的形态形成与稳定具有重要性的作用
16.动物细胞培养基的组成有什么典型的特征?
为什么在动物培养基中常常加入血清?
答:
单个动物细胞(原生动物这种极其简单的除外)在自然条件下不可能存活的,要培养其单个细胞自然要给它更高的条件。
故动物细胞培养基成分必须有:
葡萄糖、氨基酸、无机盐、有机添加剂、激素和生长因子、维生素等,根据细胞的特性还会加一些特殊物质。
加入血清的目的(P115)
1:
血清中的血小板可能是血清中的主要生长因子。
2:
血清中的生长激素与生长调节素相结合具有促使细胞分裂的作用。
3:
血清中还含有氢化可的松,能促进细胞贴壁和分裂。
总之其内含有的蛋白质多肽激素对细胞的培养和生长是有利的。
17.动物细胞培养基的分类及其优缺点?
(P115~P116)
天然培养基:
主要取自动物体液或组织,如血清、血浆、组织提取液等。
优点:
营养成分丰富,培养效果好
缺点:
成分复杂,来源受限,影响对某些实验产物的提取和实验结果的分析,易发生支原体污染。
合成培养基:
根据动物体内细胞生存所需物质的种类和数量,用人工方法模拟合成的培养基。
主要成分:
氨基酸、维生素、碳水化合物、无机盐和其它一些辅助物质。
优点:
标准化生产,组分和含量相对固定;成本低。
缺点:
缺少某些成分,只能维持细胞生存,不能完全满足体外细胞生长和繁殖需要,因此仍需加入一定比例的天然培养基。
无血清培养基:
在基础培养基中补充各种必需因子,如激素、生长因子、结合蛋白、贴壁和扩展因子等,从而代替血清。
组成:
基础培养基和替代血清的补充成分。
胰岛素和转铁蛋白是所有细胞株所必需的。
无血清培养基尚处于研究阶段,难以推广。
18.动物细胞的分类及特点?
(P114)
培养的细胞可分为两大类:
悬浮型和帖附型。
特点:
悬浮型细胞生长时细胞呈悬浮状态。
帖附型细胞生长是帖附于支持物上一类细胞。
19.动物细胞培养的方