预混料几种指标化验方法.docx

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预混料几种指标化验方法

预混料几种指标化验方法

饲料中粗蛋白质的测定方法

一、适用范围：

本标准适用于配合饲料、浓缩饲料和单一饲料。

不能直接区别试样中的蛋白氮和非蛋白氮。

二、原理：

各种饲料的有机物质在还原性催化剂（硫酸铜：

硫酸钾=1：

10）的作用下，用浓硫酸进行消化作用，使蛋白质及其它有机态氮（在一定处理下也包括硝酸态氮）都转变成氨离子（NH4+）并与硫酸化合成硫酸铵；而非含氮物质则以二氧化碳、水蒸汽、二氧化硫状态逸出。

消化液在浓硫酸的作用下进行蒸馏，释放出的铵态氮用硼酸溶液吸收，并与之结合成为四硼酸铵，然后以甲基红溴甲酚绿混合作指示剂，用盐酸标准溶液（0.05mol/L）滴定，求出氮的含量，根据不同的饲料再乘以一定的系数（通常用6.25系数计算），即为粗蛋白质的含量。

本法不能区别蛋白氮和非蛋白氮，只能部分回收硝酸盐和亚硝酸盐等含量化合物。

在测定结果中除蛋白质外，还有氨基酸、酰胺、铵盐和部分硝酸盐、亚硝酸盐等，故以粗蛋白质表示之。

三、试剂和溶液：

本方法除特殊注明外，试剂均为分析纯，水均为蒸馏水。

1、硫酸：

含量为98%，无氮。

2、混合催化剂：

硫酸铜（5个结晶水）：

硫酸钾=1：

10粉碎过40目混匀。

3、氢氧化钠：

400g/L溶液。

4、硼酸：

20g/L溶液。

5、混合指示剂：

甲基红1g/L乙醇溶液；溴甲酚绿5g/L乙醇溶液。

两溶液等体积混合，在阴凉处保存期三个月。

6、盐酸标准溶液：

0.05mol/L盐酸标准溶液：

取4.2ml盐酸，用蒸馏水定容至1000ml。

7、蔗糖。

8、硫酸铵：

干燥。

四、仪器设备：

1、实验室用样品粉碎机或研钵。

2、分析筛：

孔径0.45mm（40目）。

3、分析天平：

感量0.0001g。

4、消煮炉。

5、滴定管：

酸式10ml、25ml。

6、凯氏蒸馏装置：

半微量水蒸汽蒸馏式

7、锥形瓶：

150ml。

8、容量瓶：

100ml。

五、试样的选取与制备：

选取具有代表性的试样用四分法缩减至50g，粉碎后全部通过40目筛。

六、测定步骤：

1.试样的消煮：

称取试样0.45g，准确至0.0002g，无损地放入预先加入6.4g混合催化剂的消煮管中，混合均匀，再加入12ml硫酸和2粒玻璃珠，将消煮管放入消煮炉中加热，温度控制在420℃，当溶液呈透明的蓝绿色时，再继续加热2.5小时。

2.转移定容：

消煮完全后，将消煮管取出待消煮液完全呈淡蓝色时，先用蒸馏水少量多次冲洗弯颈漏斗及消煮管口，用腕力摇动消煮管，然后倒入100ml容量瓶内，用少量蒸馏水多次冲洗消煮管及用于转移的漏斗内外壁，待冷却后，定容至刻度，作为试样分解液。

3.氨的蒸馏：

半微量蒸馏法

将蒸汽发生器内加入2/3位置蒸馏水及玻璃珠或炉渣、4ml左右浓硫酸和几滴0.1%甲基红指示剂，使呈橙色，提供酸性环境。

向反应室内注入适量蒸馏水，关闭反应室进液漏斗处铁夹和废液室出液处铁夹，待蒸馏瓶内液体将要沸腾时，打开冷凝管端接的自来水龙头，当冷凝管末端流出水开始蒸馏。

先用待测液润洗移液管，再准确移取试样分解液5ml注入反应室中，用20ml硼酸吸收液在冷凝管末端吸收（液面下吸收），再加10ml氢氧化钠入反应室，用少量水冲洗进样入口，并用水封注进液口，防止漏气。

待硼酸吸收液完全成蓝色时，计时4分钟后，离开液面再蒸馏1分钟，用蒸馏水冲洗冷凝管末端，洗液均需流入锥形瓶内，然后停止蒸馏。

4.滴定：

取下蒸馏后的吸收液立即用0.05mol/L盐酸标准溶液滴定由蓝绿色变为灰红色终点。

5.空白测定：

称取蔗糖0.45g代替试样进行空白测定。

七、测定结果计算：

1、

（V2-V1）c×0.0140×6.25

计算：

mV`/V

粗蛋白质=×100

式中V2—滴定试样时所需盐酸标准溶液体积（ml）;

V1—滴定空白时所需盐酸标准溶液体积（ml）;

c—盐酸标准溶液浓度（mol/L）;

m—试样质量（g）；

V—试样分解液体积（ml）;

V`—试样分解液蒸馏用体积（ml）;

0.0140—与1.00ml盐酸标准溶液[c（HCl）=1.00mol/L]相当的、以克表示的氮的质量；

6.25—氮换算成蛋白质的平均系数。

2、重复性：

每个试样取两个平行样进行测定，以其算术平均值为结果。

当粗蛋白质含量在25%以上时，允许相对偏差为1%；当粗蛋白质含量在10%-25%之间时，允许相对偏差为2%；当粗蛋白质含量在10%以下时，允许相对偏差为3%。

八、蒸馏步骤的检验：

精确称取0.2g硫酸铵代替试样，按半微量蒸馏法进行蒸馏，测得硫酸铵含量应为21.19±0.2%，否则应检查装置的气密性及加碱、滴定各步骤是否正确。

附：

0.05mol/L盐酸标准溶液的标定。

饲料中水分的测定方法

一、适用范围：

本方法适用于配合饲料、浓缩饲料和单一饲料中水分的含量测定。

二、原理：

试样在130℃-135℃烘箱内，在一个大气压下烘干，直至恒重，逸失的重量为水分。

三、仪器设备：

1、实验室用样品粉碎机或研钵。

2、分样筛：

孔径0.45mm（40目）。

3、分析天平：

感量0.0001g。

4、电热式恒温烘箱：

可控制温度130℃-135℃。

5、称样皿：

铝质。

6、干燥器：

用变色硅胶作干燥剂。

四、试样的选取与制备：

选取具有代表性的试样用四分法缩减至50g，粉碎后全部通过40目筛。

五、测定步骤：

1、铝盒恒重：

将铝盒刷洗干净至烘箱内在135℃条件下干燥1.5小时，取出置干燥器内干燥30分钟，称重。

2、测定：

用已恒重铝盒精确称取两份平行试样，每份2g左右，不盖铝盒盖放入烘箱内，在135℃烘箱中烘40分钟，取出，盖好铝盒盖，在干燥

器中冷却30分钟，称重。

六、测定结果的计算：

1、计算：

水分（%）=m1-m2×100

m1-m0

式中m1—135℃烘干前试样及称样皿质量（g）;

m2—135℃烘干后试样及称样皿质量（g）;

m0—已恒重的称样皿质量（g）。

2、重复性：

每个试样应取两个平行样进行测定，以其算术平均值为结果。

两个平行样测定值相差不得超过0.2%，否则应重做。

饲料中水溶性氯化物的测定方法

一、适用范围：

本方法适用于各种配合饲料，单一饲料。

二、原理：

使试样中存在的氯化物溶于水，用标准的硝酸银溶液滴定，在PH为6.5-10.52环境中与氯化物发生沉淀反应，以铬酸钾为指示剂，溶液颜色为桔红色时即为终点。

三、试剂与溶液：

使用试剂除特殊规定外均为分析纯，水为蒸馏水。

1、铬酸钾溶液：

100g/L；

2、硝酸；

3、硫酸铁指示剂：

250g/L的硫酸铁水溶液，过滤除去不溶物，与等体积浓硝酸混合均匀;

4、硫氰酸铵：

[CNH4SCN=0.1mol/L]7.6g硫氰酸铵溶于1000ml水中。

5、氯化钠标准贮备液：

称取5.8454g经500℃灼烧1小时的基准级氯化钠溶于水中，定容至1000ml，此氯化钠标准贮备液浓度为0.1000mol/L。

6、硝酸银标准溶液：

[CAgNO3=0.1mol/L]称取17.5g硝酸银溶于1000ml水中，贮于棕色瓶中。

四、仪器设备：

1、实验室用样品粉碎机或研钵；

2、分样筛：

孔径0.45mm（40目）；

3、分析天平：

感量0.0001g；

4、刻度移液管：

20ml,1ml,2ml,5ml；

5、量筒：

50ml；

6、酸式滴定管：

25ml（棕色）、25ml（白色）；

7、单标线吸管：

10ml,20ml,25ml；

8、容量瓶：

200ml，1000ml,100ml；

9、锥形瓶：

250ml。

五、样品的选取与制备：

选取有代表性的样品，用四分法缩减至50g，粉碎至40目。

六、测定步骤：

1、称样：

精确称取样品5g左右（原料食盐精确称取0.2g左右），置于洁净干燥编号的锥形瓶内，每个样品取两个平行样。

2、溶解：

用容量瓶量取200ml水至于锥形瓶内，注水时要使容量瓶口贴着锥形瓶内壁，同时摇动容量瓶，前15分钟，每隔5分钟摇一次锥形瓶，后15分钟静置，静置完立即吸取上清液。

3、吸液：

将20ml吸管用上清液清洗二次后吸取上清液20ml，注入盛有50ml水的锥形瓶内。

4、滴定：

吸取铬酸钾1ml于锥形瓶内，摇匀，用标准硝酸银溶液滴定至桔红色即为终点。

七、结果的计算与表达：

NaCl%=58.45×C（V-V0）×100/1000

m×（20/200）

式中58.45—氯化钠摩尔质量，g/mol；

C—硝酸银标准溶液的浓度，mol/L；

V—硝酸银溶液的体积，ml；

V0—空白用硝酸银溶液的体积，ml；

M—样品质量，g。

附：

0.1mol/L硝酸银标准溶液的标定。

饲料中粗灰分的测定方法

一、适用范围：

本方法适用于配合饲料及各种单一饲料中粗灰分的测定。

二、原理：

试料在550℃灼烧后所得残渣，用质量百分率来表示。

残渣中主要是氧化物、盐类等矿物质，也包括混入饲料中的砂石、土等，故称粗灰分。

三、仪器与设备：

1、实验室用样品粉碎机或研钵。

2、分样筛：

孔径0.45mm（40目）。

3、分析天平：

分度值0.0001g。

4、高温炉：

可控制炉温在550±20℃。

5、坩埚：

瓷质，容积50ml。

6、干燥剂：

用变色硅胶作干燥剂。

四、试样的选取和制备：

取具有代表性试样，用四分法缩减至50g，粉碎至40目。

五、测定步骤：

1、坩埚恒重：

将干净坩埚放入高温炉，在550℃下灼烧

3小时，打开茂福炉门2-3分钟，取出坩埚放入干燥器中冷却30分钟，称其质量，即为坩埚恒重。

2、测定：

在已恒重的坩埚中称取2.5g试样，准确至

0.0002g，在电炉上小火炭化，在炭化过程中，应将试样在低温状态加热灼烧至无烟，然后再放入高温炉中于550±20℃下灼烧3小时，打

开茂福炉门2-3分钟，取出放入干燥器中冷却30分钟，称重。

六、计算结果和表达：

1、计算：

粗灰分（%）=m2-m0×100

m1-m0

式中：

m0—为恒重空坩埚质量（g）；

m1—为坩埚加试样的质量（g）；

m2—为灰化后坩埚加灰分的质量（g）。

2、允许差：

每个试样应称2份平行样进行测定，以其算术

平均值为分析结果。

粗灰分在5%以上，允许相对偏差为1%；粗灰分含量在5%以下，允许相对偏差为5%。

饲料中钙的测定方法

一、适用范围：

本法适用配合饲料和单一饲料。

二、原理：

将试样中有机物破坏，钙变成溶于水的离子，用三乙醇胺、乙二胺、盐酸羟胺和淀粉溶液消除干扰离子的影响。

在碱性溶液中以钙黄绿素为指示剂，用乙二胺四乙酸二钠（EDTA）标准滴定溶液络合滴定钙，以EDTA标准滴定溶液消耗的体积计算钙的含量。

三、试剂和溶液：

本标准中所用试剂除特殊要求外，均为分析纯。

实验用水应为蒸馏水或等纯度水。

1、硝酸。

2、高氯酸。

3、盐酸羟胺。

4、盐酸溶液：

（1+3）溶液。

5、200g/L氢氧化钾水溶液。

6、三乙醇胺水溶液（1+1）。

7、乙二胺水溶液（1+1）。

8、淀粉溶液（10g/L）：

称取1g可溶性淀粉入200ml烧杯中，加5ml水润湿，加95ml沸水搅匀，煮沸，冷却备用。

现配现用。

9、孔雀石绿水溶液（1g/L）。

10、钙黄绿素-甲基百里香酚蓝指示剂：

0.1g钙黄绿素和0.12g甲基百里香酚蓝，5g氯化钾研细混匀。

贮存于磨口瓶中备用。

11、钙标准溶液：

1mg/ml。

称取2.497g干燥至恒重的基准级碳酸钙，溶于40ml盐酸中，加热赶除二氧化碳，冷却，用水转移至1000ml容量瓶中，定容。

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12、EDTA标准滴定溶液（0.0004g/L）：

称取3.8gEDTA于200ml烧杯中，加200ml水，加热溶解。

冷却，转入1000ml容量瓶中用水稀释至刻度，摇匀。

四、仪器与设备：

1、实验室用样品粉碎机或研钵。

2、分样筛：

孔径0.45mm（40目）。

3、分析天平：

分度值0.0001g。

4、高温炉：

可控制炉温在550±20℃。

5、坩埚：

瓷质，容积50ml。

6、凯式烧瓶：

150ml。

7、可调小电炉：

1000W。

8、容量瓶：

100ml。

9、滴定管：

酸式25ml。

10、移液管：

1ml。

11、量杯：

10ml;20ml。

12、锥形瓶：

150ml。

五、试样的选取和制备：

取具有代表性试样，用四分法缩减至50g，粉碎至40目。

六、测定步骤：

1、试样的分解：

（1）干法：

用于有机物质。

称取2.5g试样，准确至0.0002g，在电炉上小火炭化，在炭化过程中，应将试样在较低温度状态加热灼烧至无烟，然后升温灼烧至样品无炭粒，再放入高温炉中于550±20℃下灼烧3小时，取出，在空气中冷却后，加入1：

3的盐酸10ml和浓硝酸4滴，小火煮沸10分钟，将此溶液转入容量瓶，定容，即为试样分解液。

（2）湿法：

用于无机物质。

称取磷酸氢钙0.5g，其它试样称取1.5g于凯

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式烧瓶中，精确至0.0002g，加入浓硝酸10ml、高氯酸10ml，盖上弯颈漏斗，加热煮沸至黄烟逸尽，冷却后加蒸馏水20ml，煮沸5分钟，驱逐二氧化氮，冷却后转入容量瓶，用蒸馏水定容至刻度，摇匀，即为试样分解液。

2、试样的测定：

准确移取试样分解液1ml于锥形瓶中，加水50ml，加淀粉溶液10ml、三乙醇胺2ml、乙二胺1ml、1滴孔雀石绿、氢氧化钾10ml、0.1g盐酸羟胺，加钙黄绿素少许，在黑色背景下立即用EDTA标准溶液滴定至绿色荧光消失呈现至紫红色为滴定终点。

七、测定结果计算与表达：

1、计算：

Ca（%）=TV2V0×100

mV1

式中：

T—EDTA标准滴定溶液对钙的滴定度，g/ml；

V0—试样分解液的总体积（ml）；

V1—分取试样分解液的体积（ml）；

V2—实际消耗EDTA标准滴定溶液的体积（ml）；

m—试样的质量（g）。

2、重复性：

每个试样取两个平行样进行测定，以其算术

平均值为结果。

含钙量在5%以上时，允许相对偏差3%；含钙量1%—5%时，允许相对偏差5%；含钙量1%以下时，允许相对偏差10%。

附：

0.0004g/LEDTA标准溶液的标定：

饲料中总磷的测定

一、适用范围：

本方法适用于配合饲料和单一饲料。

二、原理：

将试样中的有机物破坏，使磷游离出来，在酸性溶液中，用钒钼酸铵处理，生成黄色的磷钒钼酸铵[（NH4）3PO4NH4VO4-16MoO3]，在波长420nm下进行比色测定。

三、试剂与溶液：

本方法所用试剂除特殊说明外，均为分析纯。

水为蒸馏水或同等纯度的水。

1、盐酸溶液：

1+3水溶液。

2、硝酸。

3、高氯酸。

4、钒钼酸铵显色剂：

称取偏钒酸铵1.25g加少量水加热溶解，加硝酸250ml。

另称取钼酸铵25g，加水400ml溶解之，在冷却的条件下，将两种溶液混合，倒入1000ml容量瓶，定容，再倒入棕色磨口瓶避光保存，若生成沉淀则不能继续使用。

5、磷标准液：

将磷酸二氢钾在105℃干燥1小时，在干燥器中冷却后称取0.2195g置于小烧杯中，加入适量水溶解后，加硝酸3ml，转移至1000ml容量瓶中定容，摇匀。

即为50ug/ml的磷标准液。

四、仪器与设备：

1、实验室用样品粉碎机或研钵。

2、分样筛：

孔径0.45mm（40目）。

3、分析天平：

分度值0.0001g。

4、高温炉：

可控制炉温在550±20℃。

5、坩埚：

瓷质，容积50ml。

6、凯式烧瓶：

150ml。

7、可调小电炉：

1000W。

8、容量瓶：

100ml、50ml。

9、移液管：

1ml,2ml,3ml,5ml,10ml。

10、分光光度计：

10mm比色皿，可在420nm波长下测定吸光度。

11、量杯：

10ml;20ml。

五、试样的选取和制备：

取具有代表性试样，用四分法缩减至50g，粉碎至40目。

六、测定步骤：

1、试样的分解：

（1）、干法：

用于有机物质。

称取2.5g试样，准确至0.0002g，在电炉上小火炭化，在炭化过程中，应将试样在低温状态加热灼烧至无烟，再放入高温炉中于550±20℃下灼烧3小时，取出，在空气中冷却后，加入1：

3的盐酸10ml

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和浓硝酸4滴，小火煮沸10分钟，冷却后将此溶液转入100ml容量瓶，定容，即为试样分解液。

（2）、湿法：

用于无机物质。

精确称取磷酸氢钙0.5g，其它试样称取1.5g于凯式烧瓶中，精确至0.0002g，加入浓硝酸10ml、高氯酸10ml，盖上弯颈漏斗，加热煮沸至黄烟逸尽，冷却后加蒸馏水20ml，煮沸5分钟，驱逐二氧化氮，冷却后转入容量瓶，用蒸馏水定容至刻度，摇匀，即为试样分解液。

2、标准曲线的绘制：

准确移取磷标准液0、1.0、3.0、5.0、7.0、9.0、

11.0、13.0ml于50ml容量瓶中，各加入钒钼酸铵显色剂10ml，用水稀释至刻度，摇匀，常温下放置10分钟，以0ml溶液为参比，用10mm比色池，在420nm波长下，用分光光度计测定各溶液的浓度（或吸光度）。

打印机会打印出一条回归曲线的截距N和斜率M，以及相关系数R，（或以磷含量为横坐标，吸光度为纵坐标绘制标准曲线）。

3、试样的测定：

准确移取试样分解液1ml于50ml容量瓶中，加入钒钼酸铵显色剂10ml，按六、2方法显色和比色测定。

测得试样分解液的浓度值（或吸光度值），直接代入公式计算（或用标准曲线查得试样分解液的含磷量后代入公式计算）。

七测定结果的计算和表达：

1、计算：

P%=C—C0

2m

式中：

C—试样分解液的浓度值。

C0—空白溶液的浓度值。

m—试样的质量，g。

或P%=X

mV×100

式中：

m—试样的质量，g。

X—由标准曲线查得试样分解液总磷含量（ug）。

V—移取试样分解液体积（ml）。

2、允许差：

每个试样称取两个平行样进行测定，以其算术平均值为测定结果。

磷含量小于0.5%时,允许相对偏差为10%,磷含量大于0.5%时，允许相对偏差为3%。

预混合饲料混合均匀度测定方法

一、适用范围：

本标准适用于有铁源的预混合饲料混合均匀度的测定。

二、原理：

本法通过预混合饲料中铁含量的差异来反映各组分分布的均匀性。

本法通过盐酸羟胺将样品液中的铁还原成二价铁，再与显色剂邻菲啰啉反应，生成橙红色的络合物，以比色法测定铁的含量。

三、仪器与设备：

1、分析天平。

2、可见分光光度计。

3、烧杯、移液管、容量瓶等。

四、试剂：

1、盐酸。

2、邻菲啰啉溶液：

溶解0.1g邻菲啰啉于约80ml80℃的蒸馏水中，冷却后用蒸馏水稀释至100ml，保存于棕色瓶中，并置于冰箱内稳定数周。

3、盐酸羟胺溶液：

溶解10g盐酸羟胺于蒸馏水中，用蒸馏水稀释至100ml，保存于棕色瓶中，并置于冰箱中，可稳定数周。

4、乙酸盐缓冲溶液：

溶解8.3g无水乙酸钠于蒸馏水，加入12ml冰乙酸，并用蒸馏水稀释至100ml。

五、样品的采集与制备：

1、本法所需的样品系预混合饲料成品，必须单独采制。

2、每批饲料抽取10个有代表性的实验室样品，每一实验室样品为50克。

各实验室样品的布点必须考虑代表性，取样前不允许翻动或再混合。

3、将上述每个实验室样品在试验充分混匀，以四分法从中分取1—10克（视含铁量而不同）试样进行测定。

六、测定步骤：

精确称取试样1—10g于烧杯中，加20ml浓盐酸，充分混匀后用蒸馏水稀释至100ml，使样品中无机铁直接溶解，待溶液澄清后吸取上清液1ml（含铁量约在40ug以下，否则要少称样或少用上清液，若溶液混浊，则应过滤）于25ml容量瓶中，加入盐酸羟胺溶液1ml，充分混匀，5分钟后加入乙酸盐缓冲溶液5ml，摇匀后再加入邻菲啰啉溶液1ml，用蒸馏水稀释至25ml，充分混匀，放置30分钟，以蒸馏水作参比溶液，用分光光度计在510nm波长处测定其吸光度。

五、测定结果的计算与分析：

1、计算：

记录各次的光密度值，算其平均值X、标准差S。

由平均值与标准差计算变异系数CV：

CV%=S×100

X

2、分析：

预混合饲料混合均匀度好，其变异系数应不大于5%。

氯化胆碱含量的测定

适用范围：

本方法适用于植物性物质作载体的50%氯化胆碱粉剂中氯化胆碱含量的测定。

方法一高氯酸非水滴定法

一、原理：

样品中所含氯化胆碱用甲醇萃取出来，蒸发掉溶剂后，再用非水滴定法测定其中的氯化胆碱含量。

二、试剂和溶液：

1、甲醇。

2、冰乙酸：

优级纯，纯度＞99.6%。

3、乙酸汞试液：

50g/L。

取5g乙酸汞研细，加100ml温热的冰乙酸溶解。

本试液应置于棕色瓶内，密闭保存。

4、结晶紫指示剂：

2g/L。

取0.2g结晶紫，加100ml冰乙酸。

5、高氯酸标准溶液：

C（HClO4）=0.1mol/L。

三、仪器与设备：

酸式滴定管：

25ml。

四、测定步骤：

1、试样的制备：

精确称取干燥的样品0.7g，置于250ml锥形瓶中，加40ml甲醇，充分摇动30分钟后过滤，再分别用20ml、15ml、15ml甲醇洗涤沉淀三次，将滤液和洗液合并，在水浴上蒸发至干，备用。

2、将上述制备的试样用20ml冰乙酸加热溶解后，再加2ml乙酸酐，10ml

乙酸汞试液和两滴结晶紫指示液，摇匀，用高氯酸标准溶液滴定至溶液呈纯蓝色。

同时进行空白试验。

五、测定结果的计算与分析：

1、计算：

氯化胆碱质量百分含量（X1）按下式计算：

X1=C0（V-V0）139.63×100

m×1000

式中：

C0—高氯酸标准溶液的浓度，mol/L。

V—滴定试样时消耗的高氯酸溶液的体积，ml。

V0—滴定空白时消耗的高氯酸溶液的体积，ml。

m—试样的质量，g。

139.63—氯化胆碱的分子量。

2、允许差：

两次平行测定结果绝对值不大于0.2%，取其算术平均值为测定结果。

方法二提氮法

一、原理：

试样中总的含氮量减去载体及水溶氮的含氮量，再除以系数10.03即为氯化胆碱的含量。

二、仪器与试剂：

同粗蛋白质的测定。

三、测定步骤：

1、精确称取0.45g左右样品测其含氮量，即为总氮N总。

2、精确称取1g左右样品，放入带有定性滤纸的漏斗中，用蒸馏水冲洗10次左右，取出滤纸及残留物烘干，以凯氏定氮法测定含氮量，即为载体含氮量N1。

3、精确称取3g左右样品，用蒸馏水溶解，定容100ml，放置0.5小时后，取上清液5ml进行蒸馏，测其含氮量，即为水溶氮N2。

四、测定结果的计算与分析：

1、计算：

氮化胆碱含量%=N总-N1-N2

10.03

2、允许差：

两次平行测定结果绝对值不大于1%，取其算术平均值为测定结果。

方法三银量法（莫尔法）

一、原理：

同盐的测定。

三、仪器与试剂：

同盐的测定。

四、测定步骤：

精确称取样品2g左右，置于250ml锥形瓶中，加蒸馏水200ml，前15分钟每隔5分钟摇一次，后15分钟静置，然后取上清液20ml放入装有50ml蒸馏水的锥形瓶中，加1ml100