实验四果蝇的形态与生活史观看.docx
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实验四果蝇的形态与生活史观看
实验四:
一般果蝇的形态和生活史观看
一、目的:
1.了解果蝇的生活习性;
2.把握果蝇培育基的配置方式;
3.把握果蝇饲养治理的方式;
4.鉴定果蝇的雌雄性别和突变性状。
二、原理:
果蝇,别名:
fruitfly 双名法:
Drosophilamelanogaster。
果蝇属于动物界、节肢动物门、昆虫纲、双翅目、果蝇科、果蝇属。
双翅目昆虫具有一对发达、膜质的前翅,后翅特化为一对平稳棒。
果蝇的生活周期长短与温度紧密相关,30℃以上的温度能史果蝇不育和死亡,低温那么史它生活周期延长。
同时生活力也降低,故果蝇培育的最适温度为23-25℃。
果蝇在水果摊或果园里常能够见到,但它并非是以水果为生的,而是食生长在水果上的酵母菌。
因此,实验室内凡是能发酵的基质都可作为果蝇饲养的饲料。
较好的配方如下:
A:
糖克、加琼脂克、再加水38ml,煮沸溶解。
B:
玉米粉克、加水38ml、加热搅拌均匀后,再加克酵母粉。
A和B混合加热成糊状后,再加丙酸,即可分装到培育瓶中。
除此之外还有米粉饲料和香蕉饲料也能够用来培育果蝇。
果蝇用做实验材料的优势是生活周期短,每12天左右即可完成一个世代。
繁衍力较强,每一个受精的雌蝇都可产卵400-500个,因此在短周期内可取得多数子代,有利于遗传学分析。
培育条件简易可行,突变型多属形态变异,廉价观看。
因此,在遗传学中取得普遍应用,是一种模式生物。
果蝇的雌、雄分辨要紧有以下依据:
雌:
形体较大;腹部结尾色浅,腹部反面成五条黑色条纹;腹部结尾稍尖;六个腹片,腹部底部产卵管呈圆锥状凸出。
雄:
形体较大;腹部结尾黑色,腹背三条条纹,最后一条极宽并延伸到腹面呈一明显黑斑;腹部结尾呈钝圆形;四个腹片,腹尖底部为交尾器,呈现黑色,圆形外观;在第一对足的跗节基部有性梳(黑色鬃毛结构,形似一小梳)。
果蝇突变性状常见的有:
棒眼、褐眼、卷曲翅、小翅、白眼、黑檀体、黄体、残翅、叉毛、黑体、黑色眼、焦刚毛等等。
1.二仪器、材料及试剂:
设备:
高压蒸汽灭菌锅、恒温培育箱(DNP-9272型)、锑锅、电炉、烧杯(500ml)、培育瓶(50ml锥形瓶)、双筒解剖镜、棉花塞、玻璃棒、镊子、漏斗、滤纸、石棉网
材料:
黑腹果蝇
试剂:
乙醚、酒精、酵母粉、琼脂、玉米粉、白糖、蒸馏水
1.三步骤
2.搜集果蝇
将烂水果放在饮料瓶内引诱果蝇,待搜集到必然数量的果蝇后盖上瓶盖。
1.培育基的配置
A:
糖 克、琼脂 克、蒸馏水 38ml
B:
玉米粉 克、蒸馏水 38ml、酵母粉 克
每一个饲养瓶内分装约20ml左右,依照组员数依照配方比例算出所需物品量称取物品,按组分别离放入两个大烧杯中。
A杯:
煮沸溶解,B杯:
玉米粉加水加热搅拌均匀后再加酵母粉。
A、B混合加热成糊状后,加(依照放大比例加)丙酸,即可分装到饲养瓶中。
每一饲养瓶装好后,当即塞上塞子,放在一旁备用。
1.培育基灭菌:
分装完成后,将剪好的滤纸(用于吸收水分和供给幼虫化蛹的场所)和饲养瓶一同放入高压灭菌锅内灭菌30分钟。
灭菌时严格依照高压灭菌锅灭菌规那么进行。
1.果蝇的接种:
将灭好菌的滤纸在无菌操作条件下插入饲养瓶中,塞好棉塞放在一旁备用。
果蝇的麻醉:
将果蝇从搜集中转移到麻醉瓶中进行麻醉,搜集瓶中有腐臭的水果,若是在搜集瓶中麻醉,果蝇会粘在腐臭的水果上,不易操作。
具体步骤如下:
A:
轻拍搜集瓶,是果蝇落于其底部;
B:
取下搜集瓶盖,将其与麻醉瓶紧密对接:
C:
左手紧握两瓶接口处,转动是搜集瓶斜向上:
D:
右手轻拍搜集瓶是将果蝇震落到麻醉瓶中;
E:
分开两瓶,盖好麻醉瓶盖;
F:
将麻醉瓶的果蝇轻拍到瓶底,迅速打开盖子,用镊子夹住蘸有乙醚的棉球塞住瓶口,待大多数果蝇行动迟缓或再也不爬动后拿开棉球,用毛笔将果蝇转移到白瓷板上。
若是果蝇翅膀与躯体成45°时,说明麻醉过度,果蝇已经死亡;
G:
用毛笔在无菌操作条件下降果蝇接种到饲养瓶中,每一个饲养瓶分样6-12只左右,接种完成后,将饲养瓶放入恒温箱中培育,温度设为25℃。
1.果蝇形态和生活史观看
(1)雌、雄果蝇的辨别:
♀
♂
体型较大
体型较小
腹部结尾色浅,腹部反面成五条黑色条纹
腹部结尾黑色,腹背三条条纹,最后一条极宽并延伸到腹面呈一明显黑斑;
腹部结尾稍尖;
腹部结尾呈钝圆形;
六个腹片,腹部底部产卵管呈圆锥状凸出
四个腹片,腹尖底部为交尾器,呈现黑色,圆形外观;在第一对足的跗节基部有性梳
以下图注释:
左:
雄性果蝇的左前足?
?
中:
跗节基部的性梳?
?
?
右:
雌果蝇无性梳
C、基节 TR、转节?
F、腿节?
TI、胫节?
TA、跗节
雄 雌 左 右
(2)果蝇个时期的形态特点:
卵:
卵白色,长椭圆形,长约,在反面的前端伸出一对触丝,它能使卵附着在柔软的食物上,不至于深陷到食物中去。
幼虫:
一龄—二龄—三龄,幼虫从卵中孵化出来后,通过两次蜕皮到第三龄期,体长可达4~5mm。
在解剖镜下观看可见一端稍尖为头部,而且有一黑点即口器,稍后有一对半透明的唾腺,每条唾腺前有一条唾腺管向前延伸,然后会合成一条导管通向消化道。
神经节位于消化道前端的上方。
蛹:
幼虫生活七天左右即化蛹,化蛹前从培育基中爬出附在瓶壁上,渐次形成一个棱形的蛹。
起初颜色淡黄、柔软,以后慢慢硬化,变成深褐色,这就显示即将羽化了。
成虫:
刚羽化出的果蝇,躯体狭长,翅尚未展开,躯体较白嫩,现在野生型体色与黑檀体体色都是一样的,没有多大区别。
不久,蝇体变成粗短椭圆形,双翅展开,体色加深,如野生型果蝇的体色成为灰褐色,突变型黑檀体果蝇的体色成为乌黑色。
生活史图如下:
(3)果蝇常见突变性状观看:
棒眼
复眼呈狭小垂直棒状,小眼数量多
褐眼
眼呈褐色
卷曲翅
翅膀向上弯曲
小翅
翅膀小,长度不超过躯体
白眼
复眼白色
黑檀体
躯体呈乌木色,黑亮
黑体
体黑色,比黑檀体深
黄体
全身呈浅黄色
残翅
翅膀明显退化,部份残留,不能飞
叉毛
毛和刚毛分叉、弯曲
猩红眼
复眼呈敞亮猩红色
黑色眼
羽化时呈现褐色并生化成深黑色
焦刚毛
刚毛卷曲如烧焦状
1.处女蝇的搜集:
果蝇雌体生殖器官有受精囊,可保留交配所得的大量精子,能使往后产下的卵受精。
因此在做杂交时,雌体必需选用途女蝇。
雌蝇羽化出来8--12小时内一样可不能交配。
咱们选择在那个时刻段内所搜集的雌体,均属处女蝇,可安心做为杂交亲本用。
雄体可事前搜集好,放在一个新的培育瓶中,也可等搜集处处女蝇后再搜集雄蝇。
在实验交配进程中,由于雌蝇两天内不产卵,因此雄蝇能够直接放处处女蝇培育瓶中(也能够放在盛有食物的小瓶中暂养两天,直到雌蝇将要产卵时放回培育瓶中)。
贴好标签,写好交配日期。
当两亲本在新的培育瓶中生活7~8天后(25℃),可见培育基面上有许多幼虫在爬动,这是子代的幼虫,这时可将两亲本倒出,以避免和子代混淆。
当子一代果蝇羽化出来后,要观看性状和计数。
同时,依照要求可进行F1代自交或测交项目,杂交F1代的计数平安期是自培育开始的20天内,再晚些可能搜集到F2子蝇。
7、果蝇生活史周期观看记录表:
13:
05:
40 ℃ 礼拜天
号
1
2
3
4
5
6
7
8
9
0
亲本
3
6
6
6
8
4
2
3
6
5
卵
0
0
0
0
0
0
0
0
0
0
幼虫
0
0
0
0
0
0
0
0
0
0
蛹
0
0
0
0
0
0
0
0
0
0
℃ 礼拜二
号
1
2
3
4
5
6
7
8
9
0
亲本
3
6
6
6
8
4
2
3
6
5
卵
≈20
≈10
0
≈40
≈20
≈20
≈30
≈0
≈20
≈10
幼虫
0
0
0
0
0
0
0
0
0
0
蛹
0
0
0
0
0
0
0
0
0
0
℃ 礼拜三
号
1
2
3
4
5
6
7
8
9
0
亲本
2
6
6
6
7
4
2
3
5
5
卵
≈35
≈20
0
≈45
≈42
≈30
≈25
≈0
≈40
≈28
幼虫
5
0
0
2
5
5
3
0
12
4
蛹
0
0
0
0
0
0
0
0
0
0
℃ 礼拜四
号
1
2
3
4
5
6
7
8
9
0
亲本
2
6
6
6
7
4
2
3
5
5
卵
≈25
≈15
0
≈30
≈25
≈15
≈10
0
≈30
≈20
幼虫
18
8
0
15
21
19
16
0
17
15
蛹
0
0
0
0
0
0
0
0
0
0
℃ 礼拜五
号
1
2
3
4
5
6
7
8
9
0
亲本
2
5
4
6
7
4
2
3
5
5
卵
≈20
≈10
0
≈20
≈20
≈15
≈10
0
≈25
≈18
幼虫
22
15
0
18
22
18
15
0
20
15
蛹
0
0
0
0
0
0
0
0
0
0
℃ 礼拜六
号
1
2
3
4
5
6
7
8
9
0
亲本
2
7
10
6
3
0
2
6
5
5
卵
≈10
≈8
0
≈18
≈20
≈10
≈10
0
≈18
≈15
幼虫
21
6
0
15
16
15
16
0
15
13
蛹
7
10
0
31
5
1
1
0
2
3
℃ 礼拜天
号
1
2
3
4
5
6
7
8
9
0
亲本
1
6
7
6
2
0
1
5
6
5
卵
≈10
≈10
5
≈10
≈10
≈10
≈10
≈15
≈10
≈10
幼虫
15
5
0
5
22
15
15
6
18
10
蛹
9
10
0
18
5
1
1
0
2
13
℃ 礼拜一
号
1
2
3
4
5
6
7
8
9
0
亲本
1
7
7
5
2
0
1
5
5
5
卵
由于培育基颜色慢慢变白、且有水汽,故数不出卵的数量
幼虫
7
7
3
6
18
15
20
5
20
8
蛹
27
10
0
18
5
1
1
1
2
20
℃ 礼拜二
号
1
2
3
4
5
6
7
8
9
0
亲本
3
6
6
6
8
4
2
5
5
5
卵
由于培育基颜色慢慢变白、且有水汽,故数不出卵的数量
幼虫
4
0
0
5
15
12
19
5
18
5
蛹
32
10
2
23
5
3
2
1
3
24
℃ 礼拜三
号
1
2
3
4
5
6
7
8
9
0
亲本
1
5
7
5
1
0
1
5
5
5
卵
由于培育基颜色慢慢变白、且有水汽,故数不出卵的数量
幼虫
1
0
0
3
8
7
11
5
15
0
蛹
40
15
2
30
11
8
7
1
3
31
℃ 礼拜四
号
1
2
3
4
5
6
7
8
9
0
成虫
23
11
7
30
1
0
1
4
4
32
卵
由于培育基颜色慢慢变白、且有水汽,故数不出卵的数量
蛹
17
15
2
6
17
15
7
1
3
8
1.一结果讨论级分析:
(1)在培育起始两天内,咱们培育瓶中部份果蝇死亡。
果蝇的形态和生活史观看,第一得从果蝇的培育开始讨论。
要使培育的果蝇能正常生存、繁衍就必需有足够的养分供给、适合的环境条件等。
因此,果蝇的培育进程中有几个关键的环节若是把握不行,将不能使果蝇正常生长,乃至会致使部份或全数果蝇死亡。
因此,应专门注意一下三点:
玉米粉的溶解
玉米粉必然要先用凉水拌匀后再加热,不能直接倒入加热的培育基中,不然容易聚集成团,不易溶解。
配制的培育基容易显现块状,不易于果蝇的利用。
添加酵母的时刻
酵母为活性物质,高温易失活。
因此应当在培育基冷却到50℃左右时加入到培育基中,切勿将酵母粉加入到培育基中直接煮沸。
培育温度
果蝇的培育温度要以具体利用情形而定,在遗传学教学实验中,由于实验时刻相对较短,要求果蝇的繁衍速度相对就较快,因此能够在23~25℃的条件下培育,而保种那么应在18℃左右下培育,以避免培育基消耗过快,减少转接次数。
依照以上配置要求,咱们在配制培育基的进程中放了两个错误。
第一,就酵母的添加来讲,咱们在做实验时是把酵母粉和培育基其它成份放在一路加热成糊状的,温度远远超过了50℃。
故无益于果蝇的生长,培育期间一直有果蝇死亡。
(2)果蝇麻醉过度致使一部份果蝇死亡。
在果蝇接种进程中,要注意果蝇具有以下一些特性:
一是具有趋光性,二是喜爱向上爬。
把握了这些特性,咱们就能够很方便地将果蝇转移到另外一个培育瓶中。
若是还不能顺利的转移果蝇,就得麻醉果蝇后在转接。
将麻醉瓶的果蝇轻拍到瓶底,旋转瓶子使瓶口斜向下,迅速打开盖子,用镊子夹住蘸有乙醚的棉球塞住瓶口,待大多数果蝇行动迟缓或再也不爬动后拿开棉球,用毛笔将果蝇转移到白瓷板上。
若是果蝇翅膀与躯体成45°时,说明麻醉过度,果蝇已经死亡。
(3)培育瓶中果蝇雌雄分派不均,果蝇数量限制致使有的培育瓶中全为雌果蝇或雄果蝇或培育瓶中果蝇数量太少无益于繁衍。
有的培育瓶中显现没有后代或子代数量很少的情形。
显现这些问题,第一是果蝇搜集的问题。
由于搜集到的果蝇数量不够多,致使每一个培育瓶中分养得果蝇数量不足,有的培育瓶只分到3或4只,由于各类缘故致使这些果蝇死亡后就没有多余的果蝇即时接种至培育瓶中,使生活史观看不同步,从而阻碍观看结果。
第二确实是接种时粗心大意,没有认真的将果蝇按必然的雌雄比例接种进培育瓶中,致使有的培育瓶中全为雌蝇或全为雄蝇,不能繁育后代,阻碍对其生活史的观看。
(4)数据记录不够准确。
在咱们观看记录进程中,由于卵吸附在培育基中肉眼很难分辨,故数数的时候只能取估量值。
在幼虫期,幼虫处处爬动可能会显现少数或多数的情形,而蛹到成虫时期,数出得蛹数量更是不靠得住,有的虫体已经离开了蛹,只剩下一个空壳,咱们只要少不注意就会把空壳给进去等等因素都会致使数据记录不准确。