选修三知识点复习.docx
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选修三知识点复习
选修三复习
第1章第1节基因工程知识点
一.基因工程的概念理解
（1）操作环境：
体外——关键步骤“表达载体的构建”的环境。
（2）优点：
①与杂交育种相比：
克服远缘杂交不亲和障碍。
②与诱变育种相比：
定向改造生物性状。
（3）操作水平：
分子水平。
（4）原理:
基因重组。
二.基因工程的操作工具
1.限制性核酸内切酶——“分子手术刀”
（1）来源:
主要是从原核生物中分离纯化出来的。
（2）化学本质：
蛋白质。
（3）作用特点：
特异性,即限制酶可识别特定的脱氧核苷酸序列,切割特定位点。
（4）切割的化学键为磷酸二酯键。
（5）在切割目的基因和载体时一般要求用同一种限制酶,目的是产生相同的黏性末端。
（6）将一个基因从DNA分子上切割下来,需要2个限制酶,同时产生4个黏性末端。
（7）不同DNA分子用同一种限制酶切割产生的黏性末端都相同,同一个DNA分子用不同的限制酶产生的黏性末端不相同。
2.DNA连接酶——“分子缝合针”
（1）种类
常用类型
E·coliDNA连接酶
T4DNA连接酶
来源
大肠杆菌
T4噬菌体
功能
连接黏性末端
连接黏性末端或平末端
结果
恢复被限制酶切开的两个核苷酸之间的磷酸二酯键
（2）DNA连接酶与DNA聚合酶的比较
DNA连接酶
DNA聚合酶
作用实质
都是催化两个脱氧核苷酸之间形成磷酸二酯键
是否需模板
不需要
需要
连接DNA链
双链
单链
作用过程
在两个DNA片段之间形成磷酸二酯键
将单个核苷酸加到已存在的核酸片段的3′端的羟基上,形成磷酸二酯键
作用结果
将两个DNA片段连接成重组DNA分子
合成新的DNA分子
3.基因进入受体细胞的载体——“分子运输车”
（1）类型：
最常用载体:
质粒（①质粒本质是DNA,不是细胞器;②特点:
小型环状
其他载体:
λ噬菌体的衍生物、动植物病毒等
（2）功能：
将目的基因导入受体细胞
（3）应具备条件：
①能在宿主细胞内稳定保存并大量复制；
②有一个至多个限制酶的切割位点,以便于与外源基因连接
③有特殊的标记基因,供重组DNA的检测和鉴定
第1章第2节基因工程的基本操作步骤
一.基因工程的基本操作步骤主要包括四个步骤：
目的基因的获取、基因表达载体的构建、将目的基因导入受体细胞、目的基因的检测与鉴定。
1.获取目的基因的方法
（1）从基因文库中获取目的基因
（2）利用PCR技术扩增目的基因
（3）化学方法直接人工合成
2.基因表达载体的构建
（1）表达载体的组成：
目的基因+启动子+终止子+标记基因+复制原点。
（2）各个组成的作用
启动子：
一段有特殊结构的DNA片段，位于基因的首端，是RNA聚合酶识别和结合的
部位，驱动基因转录出mRNA，最终获得所需的蛋白质。
终止子：
也是一段有特殊结构的DNA片段，位于基因的尾端，能使转录在所需要的地方
停下来。
标记基因：
作用是为了鉴定受体细胞中是否含有目的基因，从而将含有目的基因的细胞筛
选出来，如抗生素抗性基因。
（3）构建表达载体的目的：
使目的基因在受体细胞中稳定存在，并且可以遗传给下一代；
同时使目的基因能够表达和发挥作用。
3.将目的基因导入受体细胞
4.目的基因的检测与鉴定：
目的基因成功表达的标志：
通过转录翻译合成蛋白质
（1）分子水平检测
①导入检测：
DNA分子杂交技术，用放射性同位素标记的含目的基因的DNA片段作探针，
观察是否显示出杂交带。
②转录检测：
分子杂交法，用标记的目的基因作探针与mRNA杂交，观察是否显示出杂交带。
③翻译检测：
抗原─抗体杂交法，观察是否显示出杂交带。
（2）个体生物学水平鉴定：
对转基因生物进行抗虫或抗病的接种实验，以确定是否具有抗性以
及抗性的程度。
二、思维扩展
1.构建表达载体时，若只用一种限制酶切割目的基因和载体，可能有3种结果：
目的基因的两端结合成环状DNA，载体的两端结合成环状DNA，目的基因和载体结合成表达载体。
2.基因探针:
是一段带有检测标记，且序列已知的，与目的基因互补的核酸序列（可以是DNA,也可以是RNA）。
3.联系前面有关细胞器功能的知识，思考一下若要生产人的糖蛋白，可以用大肠杆菌吗？
提示：
有些蛋白质肽链上有共价结合的糖链，这些糖链是在内质网和高尔基体上加工完成的，内质网和高尔基体存在于真核细胞中，大肠杆菌不存在这两种细胞器，因此，在大肠杆菌中生产这种糖蛋白是不可能的。
4.β-珠蛋白是动物血红蛋白的重要组成成分。
当它的成分异常时，动物有可能患某种疾病，如镰刀形细胞贫血症。
假如让你用基因工程的方法，使大肠杆菌生产出鼠的β-珠蛋白，想一想，应如何进行设计？
提示：
⑴.从小鼠中克隆出β—珠蛋白基因的编码序（CDNA）。
⑵.将cDNA前接上在大肠杆菌中可以适用的启动子，另外加上抗四环素的基因，构建成一个表达载体。
⑶.将表达载体导入无四环素抗性的大肠杆菌中，然后在含有四环素的培养基上培养大肠杆菌。
如果表达载体未进入大肠杆菌中，大肠杆菌会因不含有抗四环素基因而死掉；如果培养基上长出了大肠杆菌菌落，则表明β—珠蛋白基因已进入。
⑷.培养进入了β—珠蛋白基因的大肠杆菌，收集菌体，破碎后从中提取β—珠蛋白。
5.原核细胞和真核细胞的基因结构
基因工程的应用
转基因生物
目的基因
成果举例
植
物
基
因
工
程
抗虫转基因植物
抗虫基因：
Bt毒蛋白基因、蛋白酶抑制剂基因、淀粉酶抑制剂基因、植物凝集素基因
抗虫水稻、抗虫棉、抗虫玉米
抗病转基因植物
抗病毒基因：
病毒外壳蛋白基因、病毒的复制酶基因；抗真菌基因：
几丁质酶基因、抗毒素合成基因
抗病毒烟草、抗病毒小麦、抗病毒番茄、抗病毒甜椒
抗逆转基因植物
抗逆转基因：
渗透压调节基因、抗冻蛋白基因、抗除草剂基因
抗盐碱和抗干旱的烟草、抗寒番茄、抗除草剂的大豆和玉米
改良品质的转基因植物
优良性状基因：
提高必需氨基酸含量的蛋白质编码基因、控制番茄成熟的基因、与花青素代谢有关的基因
高赖氨酸玉米、耐储存番茄、新花色矮牵牛
动
物
基
因
工
程
提高生长速度的转基因动物
外源生长激素基因
转基因绵羊、转基因鲤鱼
生产药物的转基因动物
药用蛋白基因＋乳腺蛋白基因的启动子
乳腺生物反应器
改善畜产品品质转基因动物
肠乳糖酶基因
乳汁中含乳糖较少的转基因牛
作器官移植供体转基因动物
外源的抗原决定基因表达的调节因子或除去供体的抗原决定基因
利用克隆技术培育没有免疫排斥反应的猪器官
基因
治疗
体外基因治疗
腺苷酸脱氨酶基因
治疗复合型免疫缺陷症
体内基因治疗
治疗囊性纤维化病基因
治疗遗传性囊性纤维化病
专题22.2.1动物细胞培养
一．动物细胞培养
1．概念：
动物细胞培养就是从动物机体中取出相关的组织，将它分散成单个细胞，然后放在适宜的培养基中，让这些细胞生长和增殖。
2．动物细胞培养的过程：
取健康动物组织块（动物胚胎或幼龄动物的器官或组织）→剪碎→用胰蛋白酶或胶原蛋白酶处理分散成单个细胞→制成细胞悬液→转入培养瓶中进行原代培养→贴满瓶壁的细胞重新用胰蛋白酶或胶原蛋白酶处理分散成单个细胞继续传代培养。
注意以下问题：
（1）为什么选用动物胚胎或幼龄个体的器官或组织做动物细胞培养材料？
因为这些组织或器官上的细胞生命力旺盛，分裂能力强
（2）进行动物细胞传代培养时用胰蛋白酶分散细胞，说明细胞间的物质主要是什么成分？
用胃蛋白酶行吗？
细胞间的物质主要是蛋白质。
用胃蛋白酶不行。
胰蛋白酶真的不会把细胞消化掉吗？
为什么？
胰蛋白酶除了可以消化细胞间的蛋白外，长时间的作用也会消化细胞膜蛋白，对细胞有损伤作用，因此必须控制好胰蛋白酶的消化时间。
（3）动物细胞培养能否像绿色植物组织培养那样最终培养成新个体？
不能，动物细胞培养只能使细胞数目增多，不能发育成新的动物个体。
（4）动物细胞培养液的主要成分是什么？
较植物组培培养基有何独特之处？
主要成分：
葡萄糖、氨基酸、促生长因子、无机盐、微量元素和动物血清、血浆等。
独特之处有：
1、液体培养基2、成分中有动物血清、血浆等。
（5）细胞株和细胞系的区别：
细胞株：
原代培养的细胞一般传至10代左右细胞生长停滞，大部分细胞衰老死亡，少数细胞存活到40～50代，这种传代细胞为细胞株。
细胞系：
细胞株传代至50代后又出现细胞生长停滞状态，只有部分细胞由于细胞核型发生改变，克服细胞寿命的极限获得不死性，并朝着等同于癌细胞的方向发展，使其在培养条件下可以无限制传代，这种传代细胞为细胞系。
（6）动物细胞工程常用的技术手段：
动物细胞培养技术、动物细胞核移植技术、动物细胞融合技术、单克隆抗体技术
（7）什么是原代培养、传代培养？
为什么要进行传代培养？
原代培养：
取材（动物组织）→细胞分散→初次培养
传代培养：
培养的细胞→细胞分散→分瓶继续培养
进行传代培养的原因：
接触抑制
（8）动物细胞培养的特点：
细胞贴壁和接触抑制
悬液中分散的细胞很快就贴附在瓶壁上，称为细胞贴壁。
细胞数目不断增多，当贴壁细胞分裂生长到表面相互抑制时，细胞就会停止分裂增殖，这种现象称为细胞的接触抑制。
二．动物细胞培养的条件和应用
1．动物细胞培养需要满足以下条件
①无菌、无毒的环境：
培养液应进行无菌处理。
通常还要在培养液中添加一定量的抗生素，以防培养过程中的污染。
此外，应定期更换培养液，防止代谢产物积累对细胞自身造成危害。
②营养：
合成培养基成分：
糖、氨基酸、促生长因子、无机盐、微量元素等。
通常需加入血清、血浆等天然成分。
③温度：
适宜温度：
哺乳动物多是36.5℃＋0.5℃；pH：
7.2～7.4。
④气体环境：
95%空气＋5%CO2。
O2是细胞代谢所必需的，CO2的主要作用是维持培养液的pH。
2．动物细胞培养技术的应用：
制备病毒疫苗、制备单克隆抗体、检测有毒物质、培养医学研究的各种细胞。
核移植技术——知识点
1.动物核移植的概念
将动物的一个细胞的细胞核，移入一个已经去掉细胞核的卵母细胞中，使其重组并发育成一个新的胚胎，这个新的胚胎最终发育为动物个体。
哺乳动物核移植可分为胚胎细胞核移植和体细胞核移植。
2.体细胞核移植的过程
取具有优良性状细胞供体
个体的供体细胞培养细胞细胞构建重
收集卵巢，采体外减数第二次去核的卵融合组胚胎
集卵母细胞培养分裂中期母细胞
得到克隆动物（与供体的遗传物质基本相同）移入受体（代孕）母体内
3.体细胞核移植技术的应用前景
（1）加速家畜遗传改良进程，促进优良畜群繁育；
（2）增加濒危动物的存活数量；
（3）生产珍贵的医用蛋白；
（4）用于组织器官的移植（由转基因克隆动物提供或人的核移植胚胎干细胞经过诱导分化形成的组织、器官提供）；
（5）用于科学研究。
4.体细胞核移植技术存在的问题
（1）成熟率非常低
（2）克隆动物存在健康问题；（3）克隆动物食品的安全性争议等。
5.为什么动物体细胞核移植的难度明显高于胚胎细胞核移植？
因为与胚胎细胞相比，动物体细胞分化程度高，恢复其全能性十分困难。
6.受体细胞为什么选用卵母细胞？
因为卵母细胞体积大，易操作，而且含有促使细胞核表达全能性的物质和营养条件。
7.克隆动物细胞内遗传物质的构成及其遗传性状
动物体细胞移植产生的新个体的亲本有三个：
体细胞核移植供体、卵母细胞细胞质供体、代孕母体。
新个体细胞核基因型与体细胞核供体完全一样，因此新个体性状与体细胞核供体基本相同。
卵母细胞的细胞质中也有少量的DNA，新个体性状与卵母细胞细胞质供体有一些地方相同。
代孕母体没有为新个体提供遗传物质，新个体性状与代孕母体基本没有联系。
专题二第2节动物细胞融合和单克隆抗体知识点
1.动物细胞融合也称细胞杂交，是指两个或多个动物细胞结合形成一个细胞的过程。
融合后形成的具有原来两个或多个细胞遗传信息的单核细胞，称为杂交细胞。
2.动物细胞融合的原理：
细胞膜的流动性。
3.诱导动物细胞融合的方法与植物原生质体融合的方法类似，常用的诱导因素有聚乙二醇（PEG）、灭活的病毒、电激等。
4.动物细胞融合的意义：
克服了远缘杂交不亲和的障碍，成为研究细胞遗传、细胞免疫、肿瘤和生物新品种培育的重要手段。
5.动物细胞融合最重要的用途：
制备单克隆抗体的技术之一
6.一个B淋巴细胞（浆细胞）只分泌一种特异性抗体，从血清中分离出的抗体产量低、纯度低、特异性差。
7.杂交瘤细胞的特点：
既能大量繁殖，又能产生专一的抗体。
8.单克隆抗体的优点：
特异性强、灵敏度高、并能大量制备。
9.第一次筛选用选择性培养基，目的是筛选出杂交瘤细胞。
10.经选择性培养的杂交瘤细胞还需要进行克隆化培养和抗体检测，第二次筛选的目的是在杂交瘤细胞中筛选出能产生所需抗体的杂交瘤细胞
11.杂交瘤细胞培养的方式：
在体外条件下做大规模培养或注射到小鼠腹腔内增殖。
12．单克隆抗体可以从细胞培养液或小鼠腹水中大量提取。
13.单克隆抗体的应用：
①作为诊断试剂：
准确识别各种抗原物质的细微差异，并跟一定抗原发生特异性结合，具有准确、高效、简易、快速的优点。
②用于治疗疾病和运载药物：
主要用于治疗癌症治疗，可制成“生物导弹”，也有少量用于治疗其它疾病。
14.单克隆抗体制备的过程中用于融合的细胞名称是已免疫的B淋巴细胞（浆细胞）和骨髓瘤细胞，两两融合的细胞有3种.
15.单克隆抗体制备过程中需注意的几个问题：
①灭活是指用物理或化学手段使病毒或细菌失去感染能力，但是并不破坏这些病原体的抗原结构。
②除了受到注射的抗原的刺激，小鼠在生活过程中还可能受到其他抗原的刺激，因此从小鼠体内取出的多个B淋巴细胞可能产生多种不同抗体，所以进行第二次筛选是非常必要的。
③单克隆抗体制备过程中，进行了多次动物细胞培养的操作，说明动物细胞培养是动物细胞工程的基础。
专题三第1节体内受精和早期胚胎发育知识点
1.胚胎工程指对动物早期胚胎或配子所进行的多种显微操作和处理技术，如胚胎移植、体外受精、胚胎分割、胚胎干细胞培养等技术。
经过处理后获得的胚胎，还需要移植到雌性动物体内生产后代，以满足人类的各种需求。
操作对象：
早期胚胎和配子
技术手段：
胚胎移植、体外受精、胚胎分割、胚胎干细胞培养
理论基础：
哺乳动物的受精和早期胚胎的发育规律
2.精子的发生场所是睾丸的曲细精管。
3.精子的发生时期：
从初情期开始（相当于人的青春期）直到生殖机能衰退。
4.精子的发生过程：
①初级精母细胞的形成：
精原细胞进行数次有丝分裂，产生大量的精原细胞，其中部分精原细胞经过染色体复制和其他物质的合成，进一步形成初级精母细胞。
②精细胞的形成：
初级精母细胞经过减数第一次分裂形成2个次级精母细胞，再经过减数第二次分裂形成4个精细胞。
③变形：
细胞核变为精子头的主要部分，高尔基体发育为头部的顶体，中心体演变为精子的尾，线粒体聚集在尾的基部形成线粒体鞘。
5.精子的形状：
成熟的精子外形似蝌蚪，分为头、颈和尾三部分。
不同种动物精子的形态相似，大小略有不同，与动物的体型大小无关。
6.卵子的发生场所是雌性动物的卵巢内。
7.卵子的发生时期是胎儿期（性别分化以后）开始，到生殖机能衰退结束。
8.卵子的发生过程：
卵原细胞经过有丝分裂形成初级卵母细胞→经过减数第一次分裂形成次级卵母细胞→经过减数第二次分裂形成卵子。
9.排卵指卵子从卵泡中排出。
10.卵子完成受精的标志是在卵细胞膜和透明带的间隙可以观察到两个极体。
11.精子和卵子在发生上最重要的区别：
哺乳动物卵泡的形成和在卵巢内的储备，是在出生前（即胎儿期）完成
12．卵巢：
雌性动物的生殖器官。
卵泡：
在卵巢中由卵泡细胞将初级卵母细胞包围而成。
卵子：
是卵泡成熟后释放出的卵母细胞。
13.受精是精子与卵子结合形成合子即受精卵的过程。
分为受精前的准备阶段和受精阶段。
14．受精场所：
在雌性的输卵管完成的。
15．受精过程：
1.准备阶段：
⑴精子获能：
精子必须在雌性动物生殖道内发生相应生理反应后，才能获得受精能力。
（2）卵子的准备
哺乳动物排出的卵子成熟程度不同，有的可能是初级卵母细胞（如：
马、犬），有的可能是次级卵母细胞（如猪、羊、牛），它们都要在输卵管内达到减数第二次分裂中期时，卵子才具备与精子受精的能力。
2.受精阶段：
主要包括精子穿越放射冠和透明带，进入卵细胞膜，原核形成和融合。
①顶体反应：
精子获能后与卵子相遇时，使顶体内的酶释放，溶解卵丘细胞之间的物质，形成精子穿越放射冠的通道的过程。
②透明带反应：
精子经孔道穿越透明带，接触卵细胞膜，随即产生阻止后来的精子进入透明带的生理反应。
③卵细胞膜反应（卵黄膜封闭作用）：
当精子与卵黄膜接触后，立即被卵细胞膜表面的微绒毛抱合，并相互融合，精子入卵。
此时卵黄膜立即发生一种生理反应，拒绝其他精子再进入卵内。
④原核形成及配子结合：
精子入卵后，尾部脱离，原有核膜破裂，随后形成一个新的核膜，最后形成一个雄原核。
与此同时，被激活的卵子完成减数第二次分裂，排出第二极体后，形成雌原核。
两核充分发育后合并，形成一个含二倍染色体的合子，受精过程到此结束。
16．受精完成的标志是雌雄原核融合形成合子。
17.卵裂期的特点：
细胞的数量不断增加，但胚胎的总体积并不增加，或略有缩小,但核内遗传物质并未减少。
18．早期胚胎发育的几个阶段
（1）桑椹胚：
是指细胞数目达到32个左右的胚胎，形似桑椹而得名。
该时期之前的细胞属于全能细胞。
（2）囊胚：
①细胞开始出现分化，内细胞团将来发育成胎儿的各种组织，滋养层细胞将来发育成胎膜和胎盘。
②胚胎的内部出现含液体的囊腔——囊胚腔，随着囊胚进一步扩大，透明带破裂，称为孵化。
（3）原肠胚：
内细胞团表层的细胞形成外胚层，下方的细胞形成内胚层，由内胚层包围的囊腔叫原肠腔。
19.胚胎发育的起点是受精卵分裂，在输卵管内完成受精作用时即已开始，直至发育成为成熟的胎儿。
20.胚胎工程中所涉及到的各种场所
专题三3.2体外受精和早期胚胎培养
一.试管动物技术
1.概念：
是指通过人工操作使卵子和精子在体外条件下成熟和受精、并通过培养发育为早期胚胎，再经过移植产生后代的技术。
2.发展这种技术意义：
试管动物技术可以实现良种动物的快速大量繁殖。
这项技术中首先要做的是体外受精和早期胚胎的培养。
二.体外受精
哺乳动物体外受精主要包括_卵母细胞的采集_、_精子的采集和获能_、_受精等几个主要步骤。
1.卵母细胞的采集和培养
（1）采集：
方法一：
用促性腺激素处理，使其排出更多的卵子，然后，从输卵管中冲取卵子，直接与获能的精子在体外受精。
方法二：
从屠宰的母畜卵巢中直接采集卵母细胞。
适用于大家畜和大动物，如牛。
方法三：
借助超声波探测仪、内窥镜、腹腔镜等工具，从活体动物的卵巢中吸取卵母细胞。
这种直接从活体动物的卵巢中采集卵母细胞，叫活体采卵。
（2）卵母细胞的培养：
采集的卵母细胞都要在体外人工培养成熟后，才能与获取的精子受精。
2.精子的采集和获能
（1）采集的方法:
假阴道法、手握法和电刺激等
（2）获能处理:
培养法：
把精子放入人工配制的获能液中，培养一段时间后就能获能。
（适用对象：
啮齿动物、家兔和猪）
化学法：
把精子放入一定浓度的肝素或钙离子载体A23187溶液中，化学药物诱导精子获能。
（适用对象：
牛、羊）
3.受精：
获能的精子和培养成熟的卵子，一般情况下都可以在获能溶液或专用的受精溶液中完成受精过程。
精子和卵子一般要放在培养液的小滴内共同培养一段时间才能完成受精。
三．胚胎的早期培养
1.条件：
受精卵在发育培养液中培养
2.培养液成分：
无机盐、有机盐、_维生素_、激素、氨基酸、核苷酸等营养成分，以及_动物的血清__等物质。
3.胚胎发育到适宜的阶段，可以取出向受体移植或冷冻保存__。
注意：
1.受精卵的发育培养：
检查受精状况和受精卵的发育能力。
2.试管婴儿和母亲正常怀孕，生产的过程有何异同？
相同之处：
都通过有性生殖产生，在母体子宫内发育形成胎儿
不同之处：
受精作用在体外，并在体外发育成早期胚胎进行胚胎移植
3．以牛为例，从屠宰场收集卵巢中的卵母细胞进行体外受精的应用效果如何？
目前，从屠宰场废弃的卵巢中，每个卵巢平均可采集10枚左右可用卵母细胞，经体外培养成熟和受精后约可获4枚可用的胚胎，经过移植给受体母牛，最终可得到1～2头犊牛。
牛的体外受精胚胎的工厂化生产已在一些发达国家开展。
四．试管牛的培育过程：
第三节胚胎工程的应用及前景
一、胚胎移植
1.胚胎移植的概念：
将雌性动物的早期胚胎，或者通过体外受精及其他方式得到的胚胎，移植到同种的、生理状态相同的其他雌性动物的体内，使之继续发育为新个体的技术。
（1）供体：
提供胚胎的个体受体：
接受胚胎的个体。
（2）本质：
生产胚胎的供体和孕育胚胎的受体共同繁殖后代的过程。
（3）地位：
是胚胎工程其他技术的最后一道工序。
注：
①胚胎分割移植为无性生殖；②胚胎移植是有性生殖还是无性生殖，取决于胚胎是由受精卵形成的，还是由核移植技术形成的重组细胞发育而成或胚胎分割形成的。
2.胚胎移植的生理学基础：
生理学基础
意义
哺乳动物在发情排卵后的最初一段时期，不论是否妊娠，同种动物的供、受体生殖器官的生理变化相同
为供体的胚胎移入受体提供了相同的生理环境
早期胚胎形成后，在一定时间内不会与母体子宫建立组织上的联系，而是处于游离状态
为胚胎的收集提供了可能
受体对移入子宫的外来胚胎基本上不发生免疫排斥反应
为胚胎在受体内的存活提供了可能
供体胚胎可与受体子宫建立正常的生理和组织联系，但供体胚胎的遗传特性在孕育过程中不受任何影响
为移植后胚胎的继续发育提供了营养等方面的保障
3.胚胎移植的基本程序（以牛胚胎移植为例）
注意：
a.应选择遗传性能和生产性能均优秀的个体作供体，有健康体质和正常繁殖能力的个体作受体。
b.受精卵的获得既可进行体内受精，也可进行人工授精。
c.冲卵后，对胚胎进行质量检查，胚胎应发育到桑椹胚或囊胚阶段。
收集的胚胎可直接向受体移植，也可放入－196℃的液氮中保存。
d.胚胎的移植方法包括手术法和非手术法。
4.胚胎移植的意义：
可以充分发挥雌性优良个体的繁殖潜力。
（1）良种畜群迅速扩大，加速了育种工作和品种改良；
（2）胚胎移植不受时间、地域限制，节省了购买种畜的费用；
（3）在肉用家畜的生产中，一次给受体移入多个胚胎，可增加双胎和多胎的比例；
（4）利用胚胎冷冻保存技术，建立胚胎库，保存品种资源和濒危物种。
二、胚胎分割
1.胚胎分割的概念：
是指采用机械方法将早期胚胎切割成2等份、4等份或8等份等，经移植获得同卵双胎或多胎的技术。
2.胚胎分割的基本操作:
（1）主要仪器设备：
实体显微镜和显微操作仪
（2）基本操作过程：
选择发育良好、形态正常的桑椹胚或囊胚，移入盛有操作液的培养皿中，用分割针或分割刀进行分割。
（在对囊胚阶段的胚胎进行分割时，要注意将内细胞团均等分割。
）
3.胚胎分割的现状和意义
（1）现状：
已在多种动物如小鼠、家兔、绵羊等中取得成功，但仍存在一些问题，如刚出生的动物体重偏低，毛色和斑纹上还存在差异等。
目前，最常
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