学年安徽省师范大学附属中学高二下学期期中考试生物试题 解析版.docx

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学年安徽省师范大学附属中学高二下学期期中考试生物试题解析版

安徽师范大学附属中学2018-2019学年度第二学期期中考查

高二生物试题

一、选择题

1.下列有关基因工程的叙述中，不正确的是（　　）

A.基因工程可以定向改变生物的性状

B.基因的“剪刀”识别特定的DNA序列并在特定的位点切割DNA分子

C.基因的“针线”能缝合由同种限制酶切割产生的黏性末端

D.基因的运载体质粒只能从原核生物的细胞里获得

【答案】D

【解析】

【分析】

基因工程的工具：

限制酶、DNA连接酶、运载体。

【详解】基因工程可以定向改变生物的性状，A正确；基因的“剪刀”限制酶识别特定的DNA序列并在特定的位点切割DNA分子，产生黏性末端或平末端，B正确；基因的“针线”DNA连接米能缝合由同种限制酶切割产生的黏性末端，C正确；基因的运载体质粒主要来自原核生物，D错误。

故选D。

【点睛】基因工程的原理：

基因重组；优点：

可以定向改造生物的性状。

2.基因工程的正确操作步骤是（　　）

①目的基因与运载体相结合   

②将目的基因导入受体细胞

③目的基因的检测与鉴定    

④提取目的基因

A.③④②①B.②④①③C.④①②③D.③④①②

【答案】C

【解析】

基因工程主要包括四个步骤：

1、提取目的基因；2、目的基因与动载体结合；3、将目的基因导入受体细胞；4、目的基因的检测与鉴定，所以题中排序为④①②③，答案为C。

【考点定位】基因工程的原理及技术

3.关于PCR技术的说法不正确的是（　　）

A.PCR技术获取目的基因的前提是要有一段已知目的基因的核苷酸序列

B.PCR过程中只需要两个引物分子

C.PCR的主要过程包括变性、退火、延伸，其中延伸阶段需要Taq酶

D.PCR过程中DNA合成方向是5'到3'

【答案】B

【解析】

【分析】

PCR指在生物体外复制特定的DNA片段的核酸合成技术，通过该技术可以在短时间内大量扩增目的基因。

【详解】PCR技术获取目的基因的前提是要有一段已知目的基因的核苷酸序列，用于延伸子链，A正确；PCR过程中只需要两种引物分子，每条新的子链延伸都需要一个引物，B错误；PCR的主要过程包括变性、退火、延伸，其中延伸阶段需要Taq酶（耐高温的DNA聚合酶），C正确；PCR过程中DNA合成方向是5'到3'，D正确。

故选B。

4.下列关于基因工程技术的说法，错误的是（　　）

A.天然的质粒、噬菌体和动植物病毒一般不可以直接用作运载体

B.PCR反应中两种引物的碱基间应互补以保证与模板链的正常结合

C.载体质粒通常采用抗生素抗性基因作为标记基因

D.目的基因必须位于重组质粒的启动子和终止子之间才能表达

【答案】B

【解析】

【分析】

基因工程的工具：

限制酶、DNA连接酶、运载体。

PCR即多聚酶链式反应，原理是DNA双链的复制，需要耐高温的DNA聚合酶参与。

【详解】天然的质粒、噬菌体和动植物病毒通常需要经过改造，加上启动子、标记基因等序列才可以用作运载体，A正确；PCR反应中两种引物的碱基序列没有关系，B错误；载体质粒通常采用抗生素抗性基因作为标记基因，利用含抗生素的培养基进行筛选，C正确；目的基因必须位于重组质粒的启动子和终止子之间才能表达，启动子是RNA聚合酶识别的位点，D正确。

故选B。

5.下列哪项是将目的基因导入单子叶植物细胞的常用方法（　　）

A.基因枪法B.显微注射法C.农杆菌转化法D.感受态细胞法

【答案】A

【解析】

【分析】

目的基因导入受体细胞的方法：

农杆菌转化法、基因枪法、显微注射法、感受态细胞法等。

【详解】基因枪法适于单子叶植物，A正确；显微注射法适用于动物，B错误；农杆菌转化法主要用于双子叶植物，C错误；感受态细胞法适用于微生物细胞，D错误。

故选A。

【点睛】受体细胞的选择：

植物—体细胞或受精卵；动物-受精卵。

6.基因治疗是人类疾病治疗的一种崭新手段，下列有关叙述中正确的是（　　）

A.相对体外基因治疗，体内基因治疗效果较为可靠

B.基因治疗是把缺陷基因诱变成正常基因

C.基因可以治愈所有的单基因遗传病

D.基因治疗的靶细胞若是体细胞，则获得的性状不会遗传给下一代

【答案】D

【解析】

【分析】

基因治疗指把正常基因导入病人体内，使该基因的表达产物发挥功能，从而达到治疗疾病的目的，这是治疗遗传病的最有效的手段。

【详解】相对来说，体外基因治疗效果较为可靠，A错误；基因治疗是用正常基因替代缺陷基因，B错误；目前基因治疗处于初期的临床试验阶段，由于技术、伦理等因素的限制，基因治疗只能用于某些疾病的治疗，C错误；基因治疗的靶细胞若是体细胞，则获得的性状不会遗传给下一代，因为生殖细胞的基因型不变，D正确。

故选D。

7.中华鲟是地球上最古老的脊椎动物，被称为“活化石”．研究者试图通过蛋白质工程改造中华鲟体内的某些蛋白质，使其更加适应现在的水域环境．以下说法错误的是

A.该工程可以定向改变蛋白质分子的结构

B.改造蛋白质是通过改造基因结构而实现的

C.改造后的中华鲟和现有中华鲟仍是同一物种

D.改造后的中华鲟的后代不具有改造的蛋白质

【答案】D

【解析】

蛋白质工程能定向改造蛋白质分子的结构，使之更加符合人类需要，A正确；蛋白质工程的实质是通过改变基因的结构来改变蛋白质的功能的，B正确；改造后的中华鲟和现有中华鲟仍是同一物种，C正确；蛋白质工程改变的是基因，是可以遗传的，所以改造后的中华鲟的后代可能具有改造的蛋白质，D错误。

8.以下不能说明细胞全能性的实验是（）

A.玉米花粉粒培育出植株B.转入贮存蛋白基因的向日葵细胞培育出植株

C.烧伤病人的健康细胞培养出皮肤D.将番茄与马铃薯细胞融合并培育成植株

【答案】C

【解析】

【分析】

细胞全能性指已经分化的细胞仍然具有发育成完整个体的潜能。

全能性细胞，能发育成完整成熟的个体的细胞（如全能干细胞）。

细胞的全能性以产生个体为标志，若无个体产生，则不能体现细胞的全能性。

【详解】玉米花粉培育出植株，花粉是植物的生殖细胞，体现了细胞的全能性，A不符合题意；转入贮存蛋白基因的向日葵细胞培育出植株，是从细胞获得了植株，体现了细胞的全能性，B不符合题意；烧伤病人的健康细胞培养出皮肤，皮肤属于器官而不是个体，不能提现细胞全能性，C符合题意；将番茄与马铃薯细胞融合并培育成植株体现了细胞的全能性，D不符合题意。

因此选C选项。

9.下图为植物组织培养过程，有关说法正确的是（　　）

A.①→④过程培养基保持不变

B.②试管细胞全能性最高

C.愈伤组织的代谢类型是需氧自养型

D.④试管中培育出的个体都是纯合子

【答案】B

【解析】

【分析】

①→②脱分化，②→③再分化。

【详解】①→④过程培养基中的生长素和细胞分裂素的比例会发生改变，A错误；②试管愈伤组织细胞全能性最高，B正确；愈伤组织的代谢类型是需氧异养型，不能进行光合作用，C错误；④试管中培育出的个体不一定是纯合子，若原本植株是Aa，则体细胞经过组织培养产生的新植株基因型仍为Aa，D错误。

故选B。

10.下图为利用玉米的幼苗芽尖细胞（基因型为BbTt）进行实验的示意图。

下列有关叙述错误的是

A.实现过程①需要在无菌条件下进行B.植株C是单倍体，由配子发育而来

C.植株A与B基因型相同的概率是1/4D.过程②③都有染色体复制和着丝点分裂的变化

【答案】C

【解析】

【分析】

对题图进行分析可知，过程①表示组织培养，过程②表示减数分裂，过程③表示有丝分裂。

【详解】芽尖细胞经组织培养（过程①）形成幼苗1，组织培养需要在无菌条件下进行，A正确；植株C是花粉（雄配子）直接培育成，为单倍体，B正确；植株A产生雄配子的基因型及比例为：

BT∶Bt∶bT∶bt=1∶1∶1∶1，经秋水仙素处理后染色体数目加倍，故植株B的基因型及比例为BBTT∶BBtt∶bbTT∶bbtt=1∶1∶1∶1。

而植株A的基因型为BbTt，因此植株A与B基因型相同的概率为0，C错误；过程②③都有有丝分裂过程，都会进行染色体复制和着丝点分裂的，D正确。

故选C。

【点睛】准确判断题图中各生理过程是解答本题的关键。

11.“白菜—甘蓝”是用细胞工程的方法培育出来的蔬菜新品种，它具有生长期短、耐热性强和易于储藏等优点。

如图是“白菜—甘蓝”的杂交过程示意图。

以下说法正确的是（　　）

A.除去细胞壁形成原生质体，可运用的酶是纤维素酶、淀粉酶和果胶酶

B.通常可诱导上述原生质体相互融合的方法是PEG和灭活的病毒诱导

C.“白菜一甘蓝”杂种植株产生的变异属于染色体变异

D.愈伤组织形成“白菜—甘蓝”植物体必须经过脱分化和再分化两个过程

【答案】C

【解析】

【分析】

如图为植物体细胞杂交的过程，白菜细胞和甘蓝细胞先经过纤维素酶和果胶酶进行处理去除细胞壁，再进行原生质体的融合，再生细胞壁后经过组织培养获得杂种植株。

【详解】除去细胞壁形成原生质体，可运用的酶是纤维素酶、果胶酶，A错误；诱导上述原生质体相互融合的方法有PEG或电激法，B错误；“白菜一甘蓝”杂种植株产生的变异属于染色体变异，C正确；愈伤组织形成“白菜—甘蓝”植物体必须经过再分化两个过程，不需要经过脱分化，D错误。

故选C。

【点睛】植物细胞进行融合可以采用物理法或化学法；动物细胞融合可以采用物理法、化学法或生物法处理。

12.在下列各育种方式中，与组织培养技术无关的是

A.利用花药离体培养得到单倍体植株

B.用秋水仙素处理二倍体幼苗，获得四倍体植株

C.通过组织培养培育人工种子

D.通过体细胞杂交培养“番茄—马铃薯”杂种植株

【答案】B

【解析】

【分析】

植物组织培养依据的原理为植物体细胞的全能性，即已经分化的细胞仍然具有发育成完整植株的潜能。

植物组织培养的过程：

离体的植物组织，器官或细胞（外植体）脱分化形成愈伤组织，愈伤组织再分化形成胚状体，进一步发育植株（新植体）。

植物组织培养技术具有广泛的应用：

植物繁殖的新途径（快繁技术、作物脱毒、人工种子）、作物新品种的培育（单倍体育种、突变体的利用）、细胞产物的工厂化生产。

【详解】花药离体培养得到单倍体植株，将花粉培养成完整植株属于植物组织培养，A错误；用秋水仙素处理萌发的种子或幼苗后，由植株正常生长、发育就可获得多倍体植株，不需要采用植物组织培养技术，B正确；人工种子中的胚状体是经植物组织培养得到的，C错误；“番茄一马铃薯”杂种植株的培养过程包括植物体细胞杂交和植物组织培养，而将杂种细胞形成杂种植株的过程属于植物组织培养，D错误。

【点睛】熟悉植物组织培养技术的应用方面是解答本题的关键。

尤其要注意植物体细胞杂交技术的培育杂种植物的流程。

13.下列有关植物细胞工程应用的分析，不正确的是（　　）

A.愈伤组织细胞分裂旺盛，经诱变处理，有利于获得突变个体

B.将胚状体包埋在一个能提供营养的胶质中，再包裹人工薄膜，可以获得“人工种子”

C.同一株绿色开花植物的细胞，经培养获得的愈伤组织基因型完全相同

D.利用组织培养技术工业化生产人参皂甙，提高产量

【答案】C

【解析】

【分析】

植物细胞工程的应用：

微型繁殖、作物脱毒、制作人工种子。

【详解】愈伤组织细胞分裂旺盛，容易发生基因突变，有利于获得突变个体，A正确；将胚状体、不定芽、顶芽等经过人工薄膜包装可以获得“人工种子”，B正确；同一株绿色开花植物的细胞，花粉和体细胞经培养获得的愈伤组织基因型不相同，C错误；利用组织培养技术工业化生产人参皂甙，提高产量，D正确。

故选C。

14.一般来说，动物细胞体外培养需要满足以下条件（）

①无毒的环境②无菌的环境③使用合成培养基，但通常需加血浆、血清等天然成分

④温度与动物的体温相近⑤因在二氧化碳培养箱中培养，故不需要O2⑥适宜的PH

A.①②③④⑤⑥B.①②③④

C.①②④⑤⑥D.①②③④⑥

【答案】D

【解析】

【分析】

动物细胞培养（animalcellculture）就是从动物机体中取出相关的组织，将它分散成单个细胞（使用胰蛋白酶或胶原蛋白酶）然后，放在适宜的培养基中，让这些细胞生长和增殖。

【详解】①②动物细胞培养需要无菌、无毒的环境，①②正确；

③用于动物细胞培养的合成培养基需加入糖、氨基酸、促生长因子、无机盐、微量元素等，还需加入血清、血浆等天然物质，③正确； 

④⑥动物细胞培养需要适宜的温度和PH，其中温度要与动物体温相近，④⑥正确；

⑤动物细胞培养需要一定的气体环境，95%空气和5%的CO2，⑤错误。

故选D。

15.下列有关核移植的叙述中，正确的是

A.卵母细胞最好选择减数第一次分裂中期的卵母细胞

B.胚胎核移植难度明显高于体细胞核移植

C.供体细胞应选择传代10代以内的细胞

D.通过体细胞核移植方法生产的克隆动物是对体细胞动物进行了100%的复制

【答案】C

【解析】

【分析】

动物细胞培养过程中10代以内的细胞一般能保持正常的二倍体核型。

动物胚胎分化程度低，全能性的恢复更容易，而动物体细胞分化程度高，恢复全能性十分困难。

【详解】减数第二次分裂中期的卵母细胞才具备与精子受精的能力，故核移植时卵母细胞最好选择减数第二次分裂中期的卵母细胞，A错误；动物胚胎分化程度低，恢复全能性更容易，而动物体细胞分化程度高，恢复全能性十分困难，故动物体细胞核移植难度明显高于胚胎核移植，B错误；10代以内的细胞一般能保持正常的二倍体核型，故供体细胞应选择传代10代以内的细胞，C正确；生物的性状是由细胞核基因和细胞质基因共同控制的，体细胞核移植方法生产的克隆动物只是将核基因传递给了子代，质基因并没有传给子代，故对体细胞动物并不是进行了100%的复制，D错误。

故选C。

【点睛】熟悉核移植的过程是解题的关键。

16.生物技术的发展速度很快，已灭绝生物的“复生”将不再是神话．如果世界上最后一只野驴刚死亡，以下较易成为“复生”野驴的方法是（）

A.将野驴的体细胞取出，利用组织培养技术，经脱分化、再分化，培育成新个体

B.将野驴的体细胞两两融合，再经组织培养培育成新个体

C.将野驴的体细胞的细胞核移植到母家驴的去核卵母细胞中，再经胚胎移植孕育新个体

D.将野驴的基因导入家驴的受精卵中，培育成新个体

【答案】C

【解析】

【分析】

动物核移植指将动物的一个细胞的细胞核，移入一个已经去掉细胞核的卵母细胞中，使其重组并发育成一个新的胚胎，这个新的胚胎最终发育成动物个体，核移植得到的动物称为克隆动物。

【详解】复生野驴最简单有效的方法是核移植，即将野驴的体细胞的细胞核移植到母家驴的去核卵母细胞中，再经胚胎移植孕育新个体。

综上所述，ABD不符合题意，C符合题意。

故选C。

17.我国科学家以雌性猕猴胎儿成纤维细胞为核供体，成功克隆出两只猕猴，成为全球首例细胞克隆灵长类动物。

有关叙述错误的是（　　）

A.培育出的两只猕猴均为雌性

B.培育出的两只猕猴的基因组几乎完全相同

C.这项技术证明高度分化的动物体细胞具有全能性

D.克隆称猴的成功为大量培育灵长类遗传病模型动物提供可能

【答案】C

【解析】

【分析】

细胞全能性是指已经分化的细胞，仍然具有发育成完整生物体的潜能。

在多细胞生物中，每个体细胞的细胞核都含有个体发育的全部基因，只要条件许可，可发育成完整的个体。

【详解】雌性猕猴胎儿成纤维细胞为核供体，克隆出的两只猕猴均为雌性，A正确；培育出的两只猕猴都是来自于同一雌猴的体细胞，故其基因组几乎完全相同，B正确；这项技术证明高度分化的动物体细胞的细胞核具有全能性，C错误；克隆称猴的成功为大量培育灵长类遗传病模型动物提供可能，D正确；故选C。

18.植物体细胞杂交与动物细胞工程中所用技术与原理不相符的是

A.纤维素酶、果胶酶处理和胰蛋白酶处理一一酶的专一性

B.植物组织培养和动物细胞培养——细胞的全能性

C.原生质体融合和动物细胞融合一一生物膜的流动性

D.紫草细胞培养和动物细胞培养——细胞分裂

【答案】B

【解析】

【分析】

本题考查植物体细胞杂交与动物细胞工程中所用的技术与原理，意在考查考生能理解所学知识的要点的能力。

【详解】利用纤维素酶和果胶酶去除植物细胞壁和利用胰蛋白酶处理动物组织都利用了酶的专一性原理，A正确；植物组织培养的原理是植物细胞具有全能性，动物细胞培养的原理是细胞分裂，B错误；原生质体融合和动物细胞融合都依赖于生物膜的流动性，C正确；紫草细胞培养和杂交瘤细胞的培养的原理都是细胞分裂，D正确。

19.内细胞团出现的时期（）

A.原肠胚期B.卵裂期C.桑椹胚期D.囊胚期

【答案】D

【解析】

【分析】

胚胎发育的过程：

受精卵→卵裂期→桑椹胚→囊胚→原肠胚。

①卵裂期：

细胞进行有丝分裂，数量增加，胚胎总体积不增加；②桑椹胚：

32个细胞左右的胚胎（之前所有细胞都能发育成完整胚胎的潜能属全能细胞）；③囊胚：

细胞开始分化，其中个体较大的细胞叫内细胞团将来发育成胎儿的各种组织；而滋养层细胞将来发育成胎膜和胎盘；胚胎内部逐渐出现囊胚腔（注：

囊胚的扩大会导致透明带的破裂，胚胎伸展出来，这一过程叫孵化）；④原肠胚：

内细胞团表层形成外胚层，下方细胞形成内胚层，由内胚层包围的囊腔叫原肠腔。

（细胞分化在胚胎期达到最大限度）。

【详解】囊胚期细胞开始出现分化，但该时期细胞的全能性仍比较高，其中聚集在胚胎一端个体较大的细胞称为内细胞团，故选D。

20.下列有关透明带的叙述中，不正确的是（）

A.透明带破裂发生在囊胚期B.透明带是由卵丘细胞组成的

C.透明带位于放射冠和卵细胞膜之间D.透明带可被顶体酶水解

【答案】B

【解析】

孵化指的是囊胚时期胚胎从破裂的透明带中伸展出来，说明透明带破裂发生在囊胚期，A正确；透明带是非细胞的膜，而卵丘细胞组成放射冠，B错误；透明带位于放射冠和卵细胞膜之间，C正确；精子顶体释放的顶体酶可以水解透明带，D正确。

21.基因文库构建是基因工程操作中不可缺少的环节，关于基因文库的说法错误的是（　　）

A.某种生物的基因组文库比cDNA文库容量大

B.cDNA文库中含有基因中的启动子，而基因组文库中没有

C.真核生物基因组文库中含有内含子，而cDNA文库没有

D.cDNA文库中的基因一般均可在物种间交流，而基因组文库中的基因只有部分可以

【答案】B

【解析】

【分析】

基因文库指将含有某种生物不同基因的许多DNA片段，导入受体菌的群体中储存，各个受体菌分别含有这种生物的不同的基因，称为基因文库。

【详解】某种生物

基因组文库（含有全部基因）比cDNA文库（含部分基因）容量大，A正确；cDNA文库中不含有基因中的启动子，基因组文库中含有启动子，B错误；真核生物基因组文库中含有内含子，而cDNA文库没有，C正确；cDNA文库中的基因一般均可在物种间交流，而基因组文库中的基因只有部分可以，D正确。

故选B。

22.下图甲、乙、丙分别是目的基因、质粒载体、重组DNA（重组质粒）的三个示意图，限制酶有BglⅡ、EcoRⅠ和Sau3AⅠ。

要获得理想的可表达目的基因的重组DNA，最佳的限制酶组合方式是（　　）

A.用EcoRⅠ切割目的基因和质粒载体

B.用BglⅡ和EcoRⅠ切割目的基因和质粒载体

C.用BglⅡ和Sau3AⅠ切割目的基因和质粒载体

D.用EcoRⅠ和Sau3AⅠ切割目的基因和质粒载体

【答案】D

【解析】

【分析】

本题以图文结合为情境，考查学生对生基因工程的基本操作程序的相关知识的识记和理解能力，以及识图分析能力。

【详解】依题意并分析图示可知：

只有用EcoRⅠ和Sau3AⅠ切割目的基因和质粒载体，在构建的重组DNA（重组质粒）中，RNA聚合酶在插入目的基因上的移动方向才与图丙相同，A、B、C均错误，D正确。

23.下图是利用基因工程培育抗虫植物的示意图。

以下相关叙述,正确的是（　　）

A.Ti质粒与抗虫基因有互补的黏性末端,所以不用DNA连接酶可以直接拼接

B.③侵染植物细胞后，重组Ti质粒整合到④的染色体上

C.④的染色体上若含抗虫基因,则⑤就表现出抗虫性状

D.⑤只要表现出抗虫性状就表明植株发生了可遗传变异

【答案】D

【解析】

【分析】

转基因抗虫植物的培育过程：

首先构建重组Ti质粒，把重组质粒导入农杆菌；再用农杆菌转化植物细胞，获得抗虫植物。

【详解】Ti质粒与抗虫基因有互补的黏性末端,需要用DNA连接酶进行连接，A错误；③农杆菌侵染植物细胞后，重组Ti质粒上的T-DNA整合到④的染色体上，B错误；④的染色体上含抗虫基因，抗虫基因不一定表达，⑤不一定会表现出抗虫性状，C错误；⑤只要表现出抗虫性状，就说明抗虫基因表达了，即发生了可遗传变异，D正确。

故选D。

24.下表为几种限制酶识别的序列和切割的位点。

如下图，已知某DNA在目的基因的两端1、2、3、4四处有BamHⅠ或EcoRⅠ或PstⅠ的酶切位点。

现用PstⅠ和EcoRⅠ两种酶同时切割该DNA片段（假设所用的酶均可将识别位点完全切开），下列各种酶切位点情况中，可以防止酶切后单个含目的基因的DNA片段自身连接成环状的是（　　）

限制酶

BamHⅠ

EcoRⅠ

PstⅠ

识别序列和

切割位点

A.1为EcoRⅠ，2为BamHⅠ，3为EcoRⅠ，4为PstⅠ

B.1为BamHⅠ，2为EcoRⅠ，3为EcoRⅠ，4为PstⅠ

C.1为BamHⅠ，2为EcoRⅠ，3为PstⅠ，4为EcoRⅠ

D.1为EcoRⅠ，2为PstⅠ，3为PstⅠ，4为BamHⅠ

【答案】C

【解析】

【分析】

基因工程的工具：

限制酶、DNA连接酶、运载体。

【详解】若1为EcoRⅠ，2为BamHⅠ，3为EcoRⅠ，4为PstⅠ，用PstⅠ和EcoRⅠ两种酶同时切割后，目的基因两端的黏性末端是EcoRⅠ产生的，可以发生自身环化，A错误；若1为BamHⅠ，2为EcoRⅠ，3为EcoRⅠ，4为PstⅠ，用PstⅠ和EcoRⅠ两种酶同时切割后，目的基因两端均为EcoRⅠ切割的黏性末端，会发生自身环化，B错误；1为BamHⅠ，2为EcoRⅠ，3为PstⅠ，4为EcoRⅠ，用PstⅠ和EcoRⅠ两种酶同时切割后，目的基因两端的序列为用PstⅠ和EcoRⅠ切割后产生的不同的黏性末端，C正确；1为EcoRⅠ，2为PstⅠ，3为PstⅠ，4为BamHⅠ，用PstⅠ和EcoRⅠ两种酶同时切割后，目的基因两端均为PstⅠ切割的黏性末端，会发生自身环化，D错误。

故选C。

【点睛】用两种限制酶同时切割目的基因和质粒可以避免发生自身环化。

25.为了增加菊花花色类型，研究者从其他植物中克隆出花色基因C（如图），拟将其与质粒（如图）重组，再借助农杆菌导入菊花中。

下列操作与实验目的不符的是（　　）

A.用限制性核酸内切酶EcoRⅠ和连接酶构建重组质粒

B.用含C基因的农杆菌侵染菊花愈伤组织，将C基因导入细胞

C.在培养基中添加卡那霉素，筛选被转化的菊花细胞

D.用DNA分子杂交技术可以检测C基因是否导入到菊花细胞中

【答案】C

【解析】

【分析】

目的基因C两端的序列均为EcoRⅠ的识别序列，故应该选择EcoRⅠ切割质粒和目的基因。

【详解】用限制酶EcoRⅠ和DNA连接酶构建重组质粒，A正确；用含C基因的农杆菌侵染菊花愈伤组织，Ti质粒的T-DNA会携带C基因进入植物细胞，B正确；在培养基中添加潮霉素，筛选被转化的菊花细胞，C错误；用DNA分子杂交技术可以