miRNA的作用机制及功能研究进展.docx

miRNA的作用机制及功能研究进展.docx

《miRNA的作用机制及功能研究进展.docx》由会员分享，可在线阅读，更多相关《miRNA的作用机制及功能研究进展.docx（6页珍藏版）》请在冰豆网上搜索。

miRNA的作用机制及功能研究进展

中国科学　C辑:

生命科学２0０9年第39卷第１期:

１0９11３lifｅ、ｓciｃhina、109《中国科学》杂志社SCIENCE　INCHINAPＲESＳMiｃｒoRNA作用机制的新 赵爽刘默芳　中国科学院上海生命科学院生物化学与细胞生物学所分子生物学国家重点实验室上海20０03１联系人　E—ｍａiｌ:

　ｍflｉｕｓibs、ac。

cn收稿日期:

20０８-09—04接受日期:

２008－１１－2８　国家重点基础发展计划批准号:

20０5CB724６03和国家自然科学基金批准号:

3０7７０４74资助项目摘要miｃroRNAmｉRNA是一种非蛋白质的新型基因表达调控因子对真核生物基因表达起特别重要的调控作用。

关于miRNＡ的及作用机制方面的是当前生命科学的前沿热点 人员陆续提出了一些假说模型诸如翻译起始抑制、翻译起始后抑制、mＲNＡ降解、P小体ProcessinｇBｏdｙSGStressGｒanｕles颗粒扣押靶mRNA等来阐述mｉRNA　如何抑制其靶基因的表达、此外　最近还有文献报道了一些全新的ｍiRNA作用方式如去抑制和ｍｉRNA激活作用等。

　本文将简要介绍一些miRNA作用机制的新及相关作用模型、关键词　miRNA　负调控去抑制正调控P小体SG颗粒　准确的基因表达调控对生物体的生长发育和至关重要　基因表达调控异常是疾病发生的主要原因、在过去的数十年间对基因表达调控的主要集中在蛋白质转录因子介导的基因表达调控方面、 发现　它们通过激活或抑制基因转录控制基因的表达在基因组信息转化为分子效应和生物效应过程中发挥着重要的作用。

　最近　在动、植物及病毒等生物中发现了一系列小分子非编码RNAsmａllｎｏnｃoｄing　RNA　包括miRNAmicrｏＲNA　siRNAsｍaｌliｎterｆerinｇ　RNA　piRNAｐｉwi—ｉnｔeractingＲＮＡ和eｓiRNAendogｅnouｓｓiRNA等　它们分别在转录水平、转录后水平及表观遗传水平等方面控制基因的表达组成了RNＡ调控网络调控包括细胞增殖、分化和凋亡等一系列生理进程影响生物体的生长发育　并与多种人类疾病的发生紧密相关1、这些小分子RNA的发现　揭示了真核生物一种新的基因表达调控方式、　miＲNA是小分子非编码RＮＡ家族的重要成员。

miRNＡ与ｓｉRＮA共用生成途径和作用途径中多种蛋白质因子、但二者也有一些明显的区别如ｓiRNA主要是由外源提供的小分子RNA通过引发靶mRNA的切割负调控靶基因的表达而ｍiRＮA是基因组编码的内源性小分子RNA通常在翻译水平负调控靶ｍRＮA的表达。

ｍiRＮA基因由ＲＮＡ聚合酶Ⅱ或/和Ⅲ转录23、动物miRＮＡ加工成熟一般需要两个RＮａsｅⅢ家族酶—-Drosha和Dicｅr参与。

最近发现ＡgｏAｒ—gｏnａute蛋白在miＲNA加工成熟中也发挥作用４、mｉRＮA调控是通过RＮA诱导基因沉默复合物RNＡ—　ｉnducｅdｓilｅnciｎg　ｐlexRISＣ完成的复合物的核心成员是Ago　家族蛋白还有一些未知、非RISC核酸酶活性必需的蛋白成分　如FXRPRＮA解旋酶等　也存在于复合物中56。

　通常认为　miRＮA与Ａgo1结合组成miRNA效应器复合物miRNA-RISCｍiRＩSC执行靶mRNA翻译抑制而ｓｉＲNＡ与Agｏ2结合组成ｓiＲＩSC执行靶ｍRＮA降解７。

最近有人对这种ｍiRNＡ/ｓiRNA分选模型进行了校正认为ｍｉRNＡ/siRNA都能够被Aｇo1或Ａｇｏ2结合8９这为miRＮA介导切割提供了可行性。

过去认为Dｉcer生产的miRＮA:

miＲNA双链mｉRＮA作为向导链被组装入ｍiＲISＣ互补链ｍiRＮA则被迅速降解、　但最赵爽等:

MicroRＮA作用机制的新 110近发现尽管miRNA种类不如对应的mｉRNA丰富但它们常常以适当的生理水平存在并同样能够被Ａgo蛋白结合10。

miRNＡ主要是通过5′端被称为种子序列Sｅed　Sｅquence的7ｎt序列与位于靶ｍＲNA3′UＴR的miRNA调控元件mｉRNＡＲｅｇｕｌａtoryElｅmenｔMＲＥ相互作用　识别靶mRNA11、　一些靶mRNA的其他特征如MＲE附近富含AU序列、靶ｍRＮA与miＲNＡ的１31６位碱基配对、ＭRE距离终止密码子15nt以外、不位于长3′UTR的中间、邻近共表达miRNA的识别位点等可增加ｍｉRNA的作用效率12、mｉＲNA与靶ｍRNＡ之间的配对程度决定了ｍiRＩSC抑制靶ｍＲNA的方式:

　高度配对的ｍiRNA如大部分植物mｉRNA将通过类似于ｓiRNA的作用机制导致靶mRＮA切割和降解相反在动物中大部分mｉＲNA与靶mＲＮA不完全配对　则估计是通过翻译抑制发挥作用。

　在过去的几年间 者陆续提出了一些不同的、甚至互相矛盾的假说模型来解释ｍiRＮA如何抑制其靶基因表达、但对ｍiRＮＡ准确的作用机制目前还没有统一的观点、本文将简述mｉRＮＡ作用机制的新及miRNA的一些新。

1　miＲNA翻译起始抑制机制关于mｉＲNA翻译起始抑制机制目前主要有3种观点:

第一种观点认为ｍｉRNA估计通过抑制全能性核糖体的组装而阻断翻译起始13。

因为发现被miRNA沉默的ｍRNA没有或鲜有偶联完整的核糖体部分者认为miRNＡ估计通过抑制全能性核糖体的组装而阻断翻译起始13。

这种观点被至少两个新近的证据支持:

Ｔherｍaｎn等人14在一个体外中发现　果蝇的miＲ-2抑制全能性核糖体的前体—４8S翻译复合物的组装该复合物添加６０S亚基后即形成全能性核糖体　Chendrimａda等人15发现EＩF６是一种能够抑制核糖体40S和６０S亚基结合、阻断8０S全　能性核糖体形成的蛋白　与Ago/RISC直截了当相互作用　同时在哺乳动物和线虫中缺失ＥIF6影响mｉRNA介导基因沉默、然而ＲＩＳＣ是否通过与EＩF6相互作用诱导40S和60S核糖体解聚还有待于进一步的、第二种观点依照miRNＡ抑制要求靶mＲNAm７Ｇ帽子的存在认为miＲISC估计抑制翻译起始复合物的形成１３1６、这个假说最近也找到了一些新证据:

 者在一个体外系统中发现增加eＩＦ4Ｆ复合物含有m7G帽子结合蛋白、翻译起始因子ｅIＦ4E水平可回复miRＮA翻译抑制17与之一致的是另一个组18发现Ago2中间结构域类似于eIF4E具有结合m７Ｇ帽子的活性推测经ｍiRNＡ招募到靶mRＮA3′UTＲ的Ago２与起始复合物eIF4E/G竞争结合m7G帽子从而抑制翻译起始复合物的形成。

此外mｉRＮA还估计通过阻止ｐolyA结合蛋白polｙAbｉnding　protｅinPABP与ｍRＮA结合影响翻译起始、Wakiyama等人19发现miRNA引起靶ｍRNA脱腺嘌呤反应ｄeａdenylatｉon　导致ｍRNＡ的ｐolyA尾巴缩短但ｍRNA的稳定性好像并不受影响　只是pｏｌyA尾巴缩短使ＰＡＢP结合mRNＡ受阻从而影响了翻译起始、２ｍiＲNA翻译起始后抑制　尽管上述证据支持miRNＡ抑制翻译起始但也有发现一些被mｉRＮA抑制的mRＮA与翻译活跃性的多核糖体偶联说明有一些miRNA的抑制作用不是发生在翻译起始2021、此外Pｅtersen等人２2发现经内部核糖体进入位点Iｎｔeｒｎaｌ　Ribosome　Ｅｎ—trｙSiteIRES起始、不依赖于mRNA　m7G帽子的翻译也能够被miRNA抑制这进一步证明miRNA抑制是发生在翻译起始之后、尽管这些证明了miＲNA沉默作用确实是发生在翻译起始后、新生多肽完成前但关于mｉRNA究竟如何在翻译起始后发挥抑制作用目前还没有一致的结论、 者推测miＲＮＡ估计引起新生多肽链的翻译同步降解21　或者是在翻译延伸过程中ｍiRNA引发大量的核糖体脱落及高频次的翻译提早终止产生的不完整多肽产物则被迅速降解2２、３　miRＮA介导mRNA衰减Wu等人２３首先发现miRＮA能够诱导与之不完全配对靶ｍRNＡ的衰减下调靶ｍＲNA的水平。

这种miＲＮA诱导mRNA衰减的作用机制被随后的证据所支持24如在斑马鱼的早期胚胎发育中　ｍiR－43０控制母本mRNA的代谢　表明ｍiRNA介导的mRNA衰减机制具有生理学意义25、与之一致的是Aｇo蛋白被发现定位于细胞中降解mRＮA的ＲＮA颗粒RNA中国科学C辑:

生命科学　200９年第39卷第1期　１11granulｅs如P小体pｒocｅsｓingｂodies中这些ＲNA颗粒中包含常规的mRNA降解酶如脱腺嘌呤酶、脱帽酶、核酸外切酶等提示这些mRNA降解酶估计参与miRNA介导的mRNＡ衰减2627、此外　miRＩSＣ的核心成分-—Ago家族蛋白有多种异构体其中一些成员的内切酶活性也估计协助mｉRNA介导的ｍRNA的切割和/或衰减24２8。

总之这些证据都表明　miRNA能够直截了当或间接介导靶mＲNA的降解这改变了最初认为的mｉRNA调控仅翻译抑制作用的观点。

4ＲNA颗粒扣押、降解或储存靶mRNA胞浆的RNA颗粒如P小体和SGSｔressGｒan-ulｅｓ颗粒在转录后水平的基因表达调控中具有重要的作用它们是细胞储存处于翻译抑制状态mRNA的场所、　在此ｍRNA被降解或/和释放重新进入翻译机器２9、P小体含有多种mRNA衰减机器的组分　被认为是细胞的mRNA代谢场所SG颗粒特异性地在受胁迫条件下形成因此被命名为胁迫颗粒StressGrａｎｕlｅ、从组成成分看来SG颗粒更倾向于沉默ｍRNA翻译　而不降解mRNA。

P小体和ＳG颗粒常常相互并列动态关联二者含有一些相同的组分如帽子结合蛋白eIF4Ｅ和翻译抑制子rck／p5４但它们的成分并不完全相同暗示估计有差别、因为发现它们与ｍiRNA作用相关联估计是miRＮA的胞内作用场所这两种RNＡ颗粒最近受到特别关注。

一些证据表明在miRNＡ存在下miRIＳC中的核心组分及与mｉRISＣ结合的mRＮＡ定位于Ｐ小体和ＳＧ颗粒中262730、而且　有证据表明P小体的形成与ＲNA沉默相关联抑制Ｐ小体的形成将抑制miRNA介导的翻译抑制反过来抑制RISC也同样抑制P小体的形成更值得注意的是　一些证明ｓiRNA/ｍｉRＮＡ都能够在哺乳动物细胞和果蝇细胞中诱导P小体的形成31、　鉴于P小体和SG颗粒的内在联系能够推测P小体和SG颗粒估计执行相互联系但又不同的、推测被ｍｉRISC结合的mRNＡ进入P小体和ＳG颗粒中　即被这些RNＡ颗粒中的翻译抑制子剥夺了与核糖体和翻译机器结合的估计性从而使mＲNA处于翻译抑制状态达到了基因沉默的目的、然而扣押的ｍRNA下一步命运如何尽管不少的证据支持ｍiＲNA介导靶ｍRＮA的衰减但也发现　在特别多情况下ｍｉRNA仅降低了靶基因的蛋白水平靶基因的mRNA水平却无明显变化。

这使得我们有理由推测在靶mＲNA被扣押到RＮA颗粒解除翻译后估计随即会进行一个mRNA　衰减或储存的分拣步骤、P小体和SG颗粒极有估计分工执行mRNA降解和储存、在某些胁迫条件下miＲISC结合的mRNＡ是否有估计首先被送到ＳＧ颗粒被抑制翻译和临时储存　然后在细胞估算mＲＮA确实已过量后再转运到富含mRNA代谢酶的P小体中进行降解事实上在mｉRNＡ存在下Agｏ蛋白与SG颗粒呈动态联系　SG颗粒中的酶发挥翻译沉默而不是ｍＲNA衰减的作用30、还有发现一些诱导SＧ颗粒形成的胁迫作用确实减少了P小体的形成和mRNＡ衰减32。

但目前还不清楚miRISC偶联mRNA在胁迫条件下聚积到SG颗粒中的生理作用是什么、5　miRＮA正调控和去抑制　最近的发现了一些新型的miRＮA作用方式如miＲNA正调控和去抑制等。

　首先Vaｓuｄevaｎ实验室３３、6。

535发现mｉRNA不总是基因表达的负调控因子在一些条件下miＲNＡ也上调基因表达、　他们发现在细胞周期过程中　miRＮＡ效应在抑制作用和活化作用间摆动。

在静态细胞中G０期　ｍiRＮA活化翻译和上调基因表达　而在其他细胞循环/增殖期则接着发挥抑制作用３５、miRＮA激活作用与富含腺嘌呤/尿嘧啶元件AU　riｃh　element　ARE相关33、　ARE是miＲNA活化翻译的信号在ｍiRNＡ指导下　miＲＩSC复合物成员如ＡｇoFXＲP被招募到ARＥ上　激活翻译、上调基因表达3４、　ARＥ元件是一种mRＮA不稳定元件位于ｍRNＡ3′ＵTR严重影响其宿主mRＮＡ的稳定性、 已发现AＲE元件介导的mRNA衰减调控与mｉＲNA介导的mRNA衰减调控有多种联系３6、另外　最近发现在一些条件下ｍiＲ—10a也正调控基因表达、ｍiR—1０a结合到核糖体蛋白ｍＲNＡ　5′UTR促进其翻译提高核糖体蛋白合成从而刺激核糖体生成进而正调控总蛋白质的合成37。

 发现ｍiRＮＡ的抑制作用是可逆的一些ＲＮA结合蛋白估计在这一过程中发挥重要作用３８、　在人体细胞中观察到胁迫条件下被ｍｉRＮA抑制赵爽等:

MｉcroＲＮA作用机制的新 １12的mRＮＡ能够去抑制重新进入翻译机器HuR　一个ARE元件结合蛋白估计通过促进miRIＳC-靶ｍRNA复合体解离和Ｐ小体解聚去除ｍiRNA的抑制作用３9、　另一个RNA结合蛋白Ｄnd１在生殖系细胞中与miRＮＡ紧密联系　它估计通过结合在mRNＡ的Ｕ丰富区U—ｒiｃhmRNＡregiｏｎ　屏蔽ｍiRNA的结合位点阻止miRNＡ接近靶mＲNA解除miR—430家族的抑制效应４0。

最近　Sandberｇ等人４1还报道了一种逃避mｉRNA抑制的新方式、他们发现一些在增殖细胞中表达的mRNＡ3′ＵTR保守性地缩短导致miRＮA的靶位点减少　从而幸免了miRＮＡ的负调控作用。

本实验室对mｉR－1５5与它的一个靶基因在部分乳腺癌中同时高表达的原因进行了调查发现在一个乳腺癌样本中该mRNA与ｍｉR—15５种子序列配对的第8位A估计通过RNＡ编辑被转变成I／G导致该靶基因不再受miR-１55的抑制　提示ＲＮＡ编辑也估计在mｉRＮA的去抑制中发挥作用未发表资料、　总之　这些新的miRNA调控方式改变了我们过去将miRNA等同于基因表达负调控因子的观点提示ｍiＲNA的调控作用具有多样性　估计被动态调节、这些新的ｍiRＮＡ作用方式扩大和加深了我们对mｉRNA调控作用的认识和理解、6小结和展望众多的证据表明　在不同条件下mｉRNA确实以不同的作用机制抑制靶基因表达、然而目前还不明白ｍiRNＡ究竟是如何选择沉默的机制或通路的这估计由特定的miRＮA和靶基因或特定的组织和细胞来决定的　也估计受控于不同的信号通路、同样　还有以下问题需要回答:

miRISC中其他成分和辅助因子的作用是什么mｉRＩSC结合的靶mRＮA是如何分选为衰减和储存的　在胁迫条件下miRISC结合的靶mRNＡ聚积到ＳG颗粒中的生理作用是什么　胞浆中的RNA颗粒是如何形成的细胞中有多少种与miRNA沉默作用相关的RNＡ颗粒这些颗粒的组成成分是什么这些问题的答案将使我们更全面、更准确地了解miRNA的作用机制。

　对新型小分子非编码RＮA的发现及机制的将是非编码RNA领域的重要发展方向。

目前我们对ｍiRNA的调控作用已有一定的认识但对其他几种内源小分子非编码RＮA如ｐiRＮAｅsiRNA等的和作用机制还知之甚少、在过去的一年多本组致力于ｐiｗｉ—ｐiRＮＡ相互作用的 初步的结果表明pｉRNA估计通过调控组蛋白乙酰化修饰在表观遗传学水平调控基因表达同时估计参与细胞周期的调控未发表资料、　非编码RNA是后基因组时代重要的科学问题阐明小分子非编码RNA的和作用机制将有助于我们深入了解基因组的表达调控、参考文献　1　GｕaｒｎierｉＤＪＤileonｅＲJ、MicroRNAs:

　ａneｗcｌassｏf　ｇｅne　regｕlatorｓ、Ａｎn　Mｅd２008403:

197—２08２LeeYKimＭHanJ　eｔaｌ。

ＭiｃroRNＡgｅnes　aｒｅtransｃｒｉｂed　ｂyＲNApolｙmeｒａseⅡ、　ＥＭBＯＪ２00423２０:

4051—40603BｏｒchｅrtGMLanierWDaviｄsｏｎBL。

RNAｐolymeｒaｓｅⅢｔranscｒibｅshumanmicroRNＡs。

ＮａtStｒuctMolBｉｏl20０6１3１2:

　109７—11０１4DｉederiｃhsS　HabeｒDA、Duaｌ　rolｅ　fｏｒarｇonauｔesinmｉcｒｏRNＡ　proｃｅssｉngａnｄ　posttｒaｎscriptｉonalregulaｔioｎof　mｉｃｒoRNA　expres—ｓion、Cell20０７1３16:

1０97—１1085　HutｖａｇnerG　ＳｉｍａrｄＭ　J、　Arｇｏnａuｔeproteiｎs:

ｋeyplayｅrsinRNＡｓileｎcing、NatRｅvMoｌCelｌ　Biｏl200８９1:

２2-326ＦaｒaziTAJｕｒanｅkＳA　TｕschｌT、Thｅgrowingcataｌogｏfsmａｌl　RNAｓand　tｈｅiｒ　asｓociaｔion　withdistinct　Ａrｇonaｕte/Pｉwifamilyｍembers。

Ｄevelopmｅnt20081357:

　1201—１214　７Oｋａmura　ＫIshiｚｕkaASiomiＨetal、Distincｔrｏlesfor　Ａrgｏnauｔｅ　pｒoｔeins　iｎｓｍalｌRNA—dirｅcted　ＲNＡcleａvａgeｐａｔhｗａｙｓ、ＧenesDeｖ　200４1８14:

1655—16668ＦorstｅmanｎK　HorwiｃhMDWeｅLetａｌ。

DrosｏｐｈｉlamiｃｒoRＮＡsaresorｔediｎtofunctioｎａｌlyｄｉｓtinctargonａuteplexesaftｅr　proｄuctionby　dicer－1、Cｅll　200７1302:

28７-29７9　ＴomariYDuT　ZａmｏｒｅPD、SortｉngofDrosopｈiｌａ　sｍall　ｓilencingＲNＡｓ。

　Celｌ2007　1302:

２99—３０810Oｋamｕra　K　PhilｌiｐsM　D　Tyleｒ　D　Meｔａl、Thereｇｕlatoryａｃtivｉtｙ　oｆ　mｉｃｒoRＮAspecｉeｓｈasｓubstanｔiａｌｉnflｕｅnｃe　ｏnmｉcroRNAａｎd3　UTRｅvolutｉｏn、　ＮatＳｔrucｔ　MolBiol2008１5４:

　3５4-3631１LewisＢPBuｒgｅC　BBartel　DP、Coｎseｒvｅdseｅdpaｉrｉnｇofｔen　ｆｌanｋedｂｙadenosiｎesinｄicａｔesthatthousanｄsof　hｕmaｎgenｅs　are中国科学C辑:

生命科学2０0９年第39卷第１期113ｍicrｏＲＮA　ｔａrgｅtｓ。

Celｌ２0051201:

１5—20１2Griｍｓon　AFaｒhKKJｏthstｏnＷ　K　etａl、ＭicroRNAtaｒgｅtiｎg　sｐeciｆicitｙ　inmaｍmals:

determinａnｔsbeｙondseedｐairｉnｇ。

　MｏlCｅll　２0072７1:

9１—1０513　PｉｌｌaiＲSBhatｔacｈaryyaＳNArtuｓ　C　Get　al。

InhibitionoftraｎslationａｌｉnｉtiatｉonｂyLet—7　MiｃｒoRＮＡ　in　ｈｕmancelｌｓ、　Sｃiｅnｃｅ200５３09５74０:

1５73—１57６１4ThermanｎＲ　HentｚeMW、Droｓoｐhila　miR－２indｕcespseudo—poｌｙsomｅｓａndinhｉbitstraｎｓlａtｉonｉｎｉtiation。

Nａtuｒe20074477１4６:

875—87815CｈenｄrｉmadaＴ　P　FｉnｎKJJiＸetaｌ、MicroRNAｓileｎcingthrｏugh　RISＣ　recruitmentofeＩＦ6、Nature200７447:

8２３—828　16ＨumpｈｒeysＤTＷｅsｔmanＢJMartinD　Ietaｌ。

MicrｏRＮAsｃｏnｔroｌtraｎsｌａｔion　iｎitiatｉonby　iｎhiｂitingeuｋaｒｙoticｉnitiationｆaｃtor4E/capandｐolyAｔaｉlfunctｉoｎ。

ProcNaｔl　ＡcａdＳｃｉＵＳA200５１0２4７:

　16961—１696617　MaｔhonnetG　FabianMRSｖitkinY　Vetａl。

　MiｃroRNAｉｎhibitiｏnoｆtｒａnslatiｏｎ　ｉnitｉａtiｏniｎvitrobｙtａrｇetｉｎgthecaｐ－bindｉng－pｌex　eIF４F、Ｓcｉencｅ2007３１7５845:

1764-1767　1８ＫiriａkiｄouＭTanGSＬaｍprｉnaｋiSetａl、ＡnｍRＮＡｍ7Gcapｂinｄing—likｅｍotif　ｗithin　humａnＡｇo2rｅprｅsses　traｎｓlatiｏn。

Ceｌl　２０07129６:

　1141—115１１９　WakｉyａmaMＴakiｍｏtoKOｈarａ　O　etal。

　Let—７ｍicｒoRNA－mediaｔｅｄmＲNAdeａdenylationandtｒａnslatｉonalrｅpｒessionin　a　maｍ－malｉaｎcell—ｆreesystem、GeｎesDｅv200７211５:

1857—186２２０　ＯlsenPHAmbros　V、　Theｌin—4ｒｅgulaｔｏｒｙRNＡｃontrolｓdeｖｅｌopｍｅntal　tｉmiｎｇ　inCaｅｎorhabditiｓeleｇａns　bybｌockingLＩN－1４ｐro—ｔｅinｓyntｈesｉsａｆｔerthｅinitiaｔionoｆtｒanslation。

DｅvBｉｏl１９992162:

６71—6８0２1NottrotｔS　ＳiｍarｄMJRichter　JD、　Hｕmａnlet－7aｍiＲNA　bｌocks　ｐroteinpｒｏdｕcｔｉｏnoｎaｃtｉvelytrａｎslating　ｐoｌyribosoｍes。

NatStrucｔ　ＭolBｉol20０６　１312:

110８—１１1422PeｔｅrseｎCPＢｏrdeleaｕ　ＭＥPeｌlｅtierＪ　ｅtal、　Sho