海洋哺乳动物临床实验室医学.docx

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海洋哺乳动物临床实验室医学

海洋哺乳动物临床实验室医学

（Marine MammalClinicalLaboratoryMedicine）

GregoryD.Bassart和LeslieA.Dierauf

海洋哺乳动物临床病理学仍处于幼龄期，进行过完全彻底研究的没有九种动物，对海洋哺乳动物进行采血会产生一些明显的问题：

如动物的大小、动物所处的水环境以及其难操作性。

就须鲸（BaleenWhales）来讲，其庞大的个体使人们很难获得一些基本的生理学资料。

即使在捕鲸船上获得的血液样品，通常也被海水所污染。

有关血液的基线值（Baselinevalues）也还不完全可靠，临床医生必须清楚地认识到本章所建立的血液学指标仅仅只是一些参考，在确定任何一个特定指标不正常之前，每一个临床医生对其自身所医疗的每一个动物必须建立个体基线值。

在海豚的血像（hemograms）中,白细胞指数（WBCindices）不仅在同种动物之间存在差异，而且还和文献所列出的值有所不同。

假如某种动物原先的血像已经确定，即使WBC计数落在正常的文献记载范围内，但对某海豚个体来说实质上存在着明显的白细胞增多（Leukocytosis）。

建议对每一动物个体一年至少采集两个血样，因为临床医学需要获得多个数据库。

如血常规样品在每一个动物个体常被作为定期健康检查的组成部分，Banish和Gilmartin在对僧海豚（monkseal）进行群体研究时，采得的成对血样，分别送到两个不同的实验室进行血清化学分析，研究结果表明，两个试验室测得的LDH、ALT、AST、GGT和甘油三酯（trigyceride）水平存在明显差异。

因此必须考虑影响所测定值的因素，如环境的、生理的、医疗的和实验室质量控制条件等都会影响所测定的值。

Ronald在对冠海豹（hoodedseal）研究时发现，其血液学中总蛋白（totalprotein）、清蛋白（albumin）、肌酸酐（creatinine）、胆固醇（cholesterol）、磷等参数值会受季节性的影响，他推测这些值的变化时由于动物甲状腺素（Thyroid）和皮质激素（Cortisol）水平的季节性波动以及换毛期间摄食量变化引起的。

年龄也影响血液学指标，总蛋白、胆固醇、肌酸酐、尿酸（Uricacid）、碱性磷酸酶（Alkalinephosphatase）、钙（Calcium）和磷—所有这些指标都涉及到动物的生长和成熟。

许多康复和展示机构已发现当地人医院和私人兽医实验室以一定的成本进行海兽血液样品和组织样品的临床病理学试验，做这些实验的动机不仅出自于个人对海兽保护的关心，而且出自于为未来建立基线值的需要。

人类医疗机构常常在紧急状态下进行“快速”检查（Statexamination），假如单纯只为了这个因素，与人类医疗机构联合是很值得的。

为了动物本身以及工作人员的安全以及用于保定动物的化学药物的安全，一个临床医生必须对所采集的血液量做出正确的判断。

假如可能，常规样品可从饥饿一个晚上的动物中采集，这样可以消除食后脂血（postprandiallipemia）的发生，血脂可造成溶血，并可人为地造成血浆蛋白质、血红蛋白水平和肝脏酶的含量升高，从血凝块离心分离血清如延迟15分钟以上，则会降低血钠、钾、肌酸酐、血液尿氮（BUN）和球蛋白质，同时会升高血钙（Calcium）、血磷（Phosphorus）、总蛋白（Totalprotein）和清蛋白（Albumin）的值。

除开其他方面指出的外，在本章中的血液学值和血清化学值都来源于体质比较好的健康动物和临床上物理检查正常的动物。

雄性和雌性动物、年轻动物和成年动物是代表性动物，但所有动物除开在其他方面指出的以外，都是长期饲养海水环境中的。

无论那种可能的情况，血液化学参数值将会提供一个参数值范围，比较宽的参数值范围将列于一些表格中，这些范围是正常的变化或表明个别动物处于亚临床疾病状态，在每个表格中的“n=”代表着计算参数值范围时的最小样本数。

人工饲养状态下的动物需要生理学调节，并反映在血液参数值中，这些生理调节影响本章所列出的参数值的程度很难精确的判断，在常规体检过程中，对每一个动物个体有必要建立其正常的基线值。

对疾病过程诊断或动物对药物反应的诊断将依据这个基线值的偏差（Deviation）。

海洋哺乳动物的血液采集（Bloodcollectioninmarinemammals）

由于处理海洋哺乳动物比较困难，因此静脉采血的仪器设备应事先装备好，并在处理动物之前放置在身边，这些仪器设备包括：

1．  机械保定设备（Mechanicalrestraintequipment）；

2．  化学保定设备（Chemicalrestraintequipment）；

3．  各种不同长度和规格的针头（Needlesofvaryinglengthsandgauges）；

4．  不同规格的注射器（Syringesofvaryingsizes）；

5．  Betadine溶液（喷瓶或棉签）；

6．  采血管（各种类型）；

7．  标记用记号笔（Markerpenciloflabels）；

8．  提交样品的实验室表格（Laboratoryformsforsubmissionofsamples）。

采血点（Bloodcollectionsites）

鲸类动物（cetaceans）的采血点

尾鳍的中央尾静脉（Centraltailveinofflukes）

尾柄静脉（Caudalpeduncle）

胸鳍静脉（Pectoralflippervein）

背鳍静脉（Dorsalfinvein）

幼龄动物：

使用1英寸长,18-20号的针头

成年动物使用1.5-3.5英寸，18-20号的针头

   中央尾静脉（Centraltailvein）、胸鳍静脉（Pectoralflippervein）和背鳍静脉（dorsalfinvein）都是动脉周围静脉丛系统（Venousretssystems）的组成部分，因而当使用这些采血点时，不难获得动静的混合血样。

背鳍静脉对于患慢性疾病的小动物来说是极好的采血点，因为背鳍静脉采血可以不需要将池水放干而进行多次采血，并且动物不会产生反感（resentment），而且对工作人员来说，背鳍静脉采血要比尾鳍采血安全许多。

鳍脚类动物的采血点

海狮（Dtariids）和海象（Ddohenids）的采血点：

尾臀静脉（Caudalglutealvein）

后鳍的趾间静脉（Interdigitalveinsofhindflipper）

上腔静脉（precavalvein）

幼龄动物：

使用1英寸长18号针头

成年动物：

使用3.5英寸长18号针头

海豹的采血点（phocids）

脊椎内硬膜外静脉（Extraduralintravertebralvein）

腹侧（足底）趾间静脉（后鳍）（vetralinterdigitalveins）

幼龄动物：

使用1英寸18-29号针头

成年动物使用3.5英寸，18号针头

海牛（Manatee）的采血点

臂头静脉丛（Brachialvenousplenus）

尾鳍腹侧静脉（Ventralflukevein）

所有年龄的动物一律使用1-1.5英寸长18-20号的针头

臂头静脉丛（Brachialvenousplexus）是最好的采血地点，尾鳍腹侧静脉除非动物处于严重抑制状态以外，对采血者来说不安全。

海獭的采血点（SeaOtters）

内侧股静脉（Medialaspectoffemoralvein）（股骨近端1/3处）

颈静脉（Jugularvein）

所有年龄的动物都使用1英寸长19-20号的针头

北极熊的采血点（PolarBears）

头静脉（Cephalicvein）

股静脉或股动脉（Femoralveinorartery）

所有年龄的动物都使用1.5英寸长18-19号的针头

红细胞血像（Erythrograms）

进行潜水的哺乳动物其红细胞（RBC）增大，冠海豹（hoodedseal）的红细胞要比人的红细胞大60%，其血红蛋白浓度也比人高30%。

海牛（Manatee）的红细胞要比海豚的红细胞大，红细胞（RBC）的大小与动物体重不成正比例，血液的体积也是一样，这已在某些陆地动物有过报道。

与家畜相比，存在于外周血液里的海洋如动物红细胞更肥大，更象面饼状，Ridgway在研究中感受到鲸类动物的红细胞比陆生哺乳动物的红细胞容易破碎。

与其它哺乳动物相比，海洋哺乳动物的红细胞总数最低，新生儿与成年动物相比，刚出生的动物其红细胞计数（RBCcounts）和血红蛋白（Hb）浓度要高一些，随着动物体重的增加和学会潜水，其值会下降。

因此，为了适应增加氧的需要，动物会产生较高的平均细胞体积（MeancorpuscularvolumeMCV）和较高的平均细胞血红蛋白（MeacorpuscularhemoglolinMch）值，在海兽中，较大的心脏体积和血液体积与增加携带氧的能力相平行。

用老式Coulter计数器获得的海洋哺乳动物的血细胞比容值（hematocritvalues）需要用实际微量血细胞比容值（Microhematocrit）或离心获得的血细胞压积（PackedcellvolumesPCV）进行校正。

因为这些老式仪器是依据陆生哺乳动物的RBC的大小和血红蛋白（Hb）的含量来计算血细胞比容的，然而由于海洋哺乳动物RBC的大小和血红蛋白的含量变化要比陆生动物的大得多和高得多，Coulter计数器计算出的血细胞比容值要比实际值高得多。

    红细胞总数的临床意义

  脱水（Dehydration）

  人类潜水员或登山运动员

  贫血（1O）

  贫血（20到慢性感染）

  白血病（Leukemia）

  营养不良（B12或叶酸缺乏）

表1 海洋哺乳动物红细胞对潜水的反应

MarineMammal  Erythrocytic   AdaptationstoDiving

动物种类

项目

 陆生动物（Terrestialmammals）

    海兽（Marinemammals）

 RBC（直径Ц）

3-9

7-10

 RBC（106/mm3）

5-13

2-6

 红细胞比密（%）

28-50

30-70

 血红蛋白（g/dl）   

8-19

12-25

 血液体积（占体

重的百分比%）

8

10-22

      红细胞指数（Erythrocytelndices）

MCV*（用毫微微升即10-15表示，infemloliters）=（PCV×10）÷RBC计数

MCH（微微克，Inpicogram）=（Hb×10）÷RBC计数

MCHC（g/dl）=（HB×100）÷PCV

*：

抗凝剂草酸钾能造成红细胞收缩，这样会人为地导致MCV增加。

   海洋哺乳动物的RBC必须与PCV和血红蛋白的含量同时考虑，以判断是否异常，在所有的哺乳动物中，RBC总数、PCV和HB的含量，不同动物之间会有直接的不同。

假如PCV降低，则可能发生贫血，贫血是某些潜在疾病的信号，其病因应通过其它诊断措施作进一步研究，贫血是一些疾病过程中较常见的继发反应，贫血可分为再生性贫血（多染细胞增多和具有网织红细胞及未成熟的红细胞）和非再生性贫血即骨髓不再产生新的红细胞，贫血的这种分类可以帮助动物的预后（Prognosis），多染细胞增多（Polychromasia）是再生性贫血既好又简单的指示器，网织红细胞计数（Reticulocytecount），由于试验变化的差异而不可靠。

假如存在溶血（溶血性贫血），一般来说网织红细胞的反应要比单纯的血液丧失要大。

非再生性贫血则表明是骨髓的机能障碍，预后应警惕，此时应进行骨髓穿刺（bonemarrowaspirate）（见第13章），尽管骨髓穿刺是一个学术性的工作，但由于预后常常必须警惕，这一工作必要时也必须作，红细胞指数（RBCIndices）能确定贫血是小红细胞（Microcytic）（MCV降低）、巨红细胞（Macrocytic）（MCV升高）性贫血还是正常红细胞贫血。

贫血可进一步分类为低色素性贫血（MCHC降低）和血色正常性贫血，MCHC可因溶血或脂血（Lipemia）造成人为地升高，但决不能归为高色素性贫血，其解释可见下一页的顶部方框的内容。

鲸类动物的红细胞参数值（CetaceanRBCParameters）

有关大型鲸类动物的血液学资料极少，杀人鲸（Killerwhale）是人工饲养条件下为数最多的大型鲸类动物。

然而有关文献记载的杀人鲸的血液参数值也非常少。

在鲸类动物中，大多数血样是动脉血和静脉血的混合血样，其结果会造成RBC和CO2的降低。

在鲸类动物中，太平洋斑纹海豚（Pacificwhite-sideddolphin）红细胞计数（RBC）最高，而白鲸（Belugawhale）的红细胞计数（RBC）最低，然而，白鲸是深潜动物（400-600m深），因而具有较高的PCV和血红蛋白值，从而增加携带氧的能力。

红细胞各参数值的临床意义

  MCV（小红细胞性）=慢性失血（Chronicbloodloss）

               =食物中铁含量偏低（lowdietaryiron）

               =铁利用缺陷（Defectinironutilization）       

               =维生素B6缺乏   

   MCV（巨红细胞性）=红细胞大量丧失后的恢复期

                =在人类提示VB12和叶酸缺乏，已知磺胺甲基异恶唑有抗叶酸   

作用，而且由于该药被广泛用于海洋哺乳动物医学中，因此在检查RBC实验室结果时必须记住这一点。

MCV，MCHC（巨红细胞，低色素性）=预后良好，提示再生性贫血

MCV，MCHC（小红细胞性，低色素性）=提示缺陷

鳍脚类动物RBC参数值（见第34章表2）

新生象海豹（elephantseals）和点斑海豹（harborseals）的红细胞参数值与动物的年龄明显地呈直接比例变化。

5-8周开始与MCV升高有关联的RBC计数下降与动物进入水中和潜水成平行关系，人工饲养的和野生的象海豹由于携带氧能力的要求增加，而诱导红细胞生成（Erythropoiesis），血容量增大，红细胞增大（MVC增加）。

相同的变化还见于点斑海豹（harborseal），然而人工饲养的和自由生活的点斑海豹的RBC值存在明显差异。

在人工饲养条件下的动物（缺乏深潜），比自由生活的动物（进行深潜）的RBC、PCV和血红蛋白含量都低。

海牛的RBC参数值（ManateeRBCParameters）

在救护有外伤或（和）具有感染疾病的海牛时，开始可见到PCV、血红蛋白、钠（Sodium）和氯增加，这可能是由于脱水引起的，在这个初期常常伴随着一段时间的饥饿或采食量降低，如果这些海牛幸免于难，红细胞值会在动物开始吃食以后或进行导管饲喂补充水溶液和蔬菜浆（Vegetablematterslurry）以后恢复到正常范围之内。

海牛（Manatee）发生贫血时，会表现出RBC指数降低，其中也包括红细胞计数减少，贫血可能是某种潜在疾病的继发反应，在慢性炎症过程中如化脓性肺炎（Suppurativepneumonia）既可在再生性贫血又可在非再生性贫血中见到正常红细胞性、正常血色素性贫血。

巨红细胞性、低色素性再生性贫血已在因外伤引起大量失血的海牛中见到，这种特殊的贫血后来会伴有外周血液中红细胞增生的症状，其中包括红细胞大小不均（anisocytosis），出现异型红细胞（Poikilocytosis）和多染红细胞（Polychromasia）。

海獭红细胞的参数值（SeaotterRBCParameters）

海獭的RBC、血红蛋白和PCV值类似于鳍脚类和鲸类动物的RBC、血红蛋白和PCV值，并反应出它们对海洋环境的适应。

海獭的血红蛋白值和PCV值比较高，而RBC则比非海生的鼬科动物（Mustelids）如水獭（Riverotter）的红细胞数低。

北极熊红细胞参数值（PolarBearRBCParameters）（请见第37章，表7）。

野生状态下的北极熊比人工饲养条件下北极熊的血红蛋白和PCV值要低。

然而，红细胞计数在所检查的野生北极熊和人工饲养的北极熊似乎没有什么差异，而且北极熊的红细胞值和黑熊或棕色熊（Blackorbrownbears）的红细胞值也没有显著的差异。

白细胞血像（Leukograms）

白细胞增多（Leukocytosis）即白细胞（WBC）总数增加，可能是一种生理反应（如害怕、兴奋、“应激”）或是一种病理反应即反映一种疾病状态（即：

全身性的或局部感染，快速生长的肿瘤、中毒、白血病）；或者是生理性反应和病理性反应都有。

海洋哺乳动物很容易产生应激（“stressed”）（请见第22和第21章）其中一些动物的应激比另外一些动物的应激更为强烈。

因此，在白细胞血像中显示出具有嗜中性的细胞增多（neutrophilia），淋巴细胞减少（Lymphopenia）、嗜酸性白细胞减少（Eosinopenia），单核细胞增多（monocytosis），并缺乏临床症状，则表明是在应激状态下释放皮质类固醇的结果。

这一点在建立动物个体的血像基线值时必须予以考虑。

在家禽中，下列药物和毒物（toxicsubstances）能使白细胞减少（leukopenia）即白细胞降低（decreasedcounts），氯霉素（chloramphenicol），青霉素（penicillin）、灰黄霉素（griseofulvin）、保泰松（phenyllutazone）、阿斯匹林（aspirin）、去氧苯巴比妥（primidone）、苯妥英钠（dilantin）、硫氧嘧啶   （thiouracil）、丙基硫氧嘧啶（propylthiouracil）、环磷酰胺（cytoxan）、DDT、氯丙嗪（chlorpromazine）、铅（lead）、铊  （thallium）、汞（mercury）、砷化物（arsenic）。

因此海洋哺乳动物的临床医生必须清楚的认识到某种用药的改变WBC的计数值。

假如对所使用的临床实验室比较熟悉并长期报道海洋哺乳动物的白细胞值，那么白细胞的分类计数（WBCdifferentialcounts）会给出一定的信息，嗜中性白细胞（Neutrophil）增多（即嗜中性白细胞增加，neutrophilia）见于炎症（inflammation）、应激（stress）（肾上腺素和皮质类固醇的释放或使用）以及运动或兴奋引起的生理变化，杆状核细胞的存在（未成年的嗜中性白细胞），同时嗜中性白细胞数绝对增加，则表明是再生性“核左移”（“leftshift”）型炎症反映，通常是预后良好的信号。

假如细菌感染非常严重并遍布全身，就发生与深度“核左移”相关联的嗜中性白细胞降低（neutropenia），这种情况属变性核左移，并且难以进行药物治疗，预后应谨慎甚至会呈现严重预后不良，单纯性的嗜中性白细胞减少而没有杆状核细胞的存在，则提示是病毒感染，全身性的细菌感染或毒血症（toxemia）。

假如白细胞计数正常或稍有升高，同时有单核细胞数量的增加存在，则应考虑有明显组织碎块引起的慢性炎症存在，单核细胞是监测慢性疾病发展的最好指标，单核细胞数增加则提示预后会不断改善。

海洋哺乳动物易于发生内寄生虫感染（parasitism）（请见第四章），假如白细胞血像（leukogram）显示嗜酸性白细胞增多（eosinophilia）则应肯定最近是否作过粪便、鼻孔或喷气孔的寄生虫学检查，鲸类动物具有较高比例的循环嗜酸性细胞，并且常常没有寄生虫感染的临床症状，关于这一点的意义目前还不清楚，但可能与某些由抗原刺激引起的过敏反映（hypersensitivityreactions）有关。

鲸类动物的白细胞参数值（Cetaceanleukocyticparameters）。

在一些研究中，白细胞计数与年龄有关，这种趋势表现出年龄越大的动物，其RBC越高。

Cornell等人提出，大西洋宽吻海豚（Atlanticbottlenosedolphins）其幼龄动物的RBC值要比成年动物的高。

具有下颌骨骨折的大西洋宽吻海豚手术后单核细胞极度增加，这种状况被认为是由于骨折本身引起的，同时是由于在手术期要除去大量组织碎片引起的。

Cornell等人报道，杀人鲸血液的白细胞分类计数（WBCdifferentialcounts）和其他动物存在明显不同，即在临床上健康的杀人鲸中不能检出杆状核细胞。

另外，Bossart和Eimstadt注意到鲸类动物的某些丹毒杆菌（Erysipelothrix）的感染不出现血细胞计数升高或循环中的杆状核细胞增加，其中的原因目前还不知道。

鳍脚类动物的白细胞参数值（PinnipedleukocyticParameters）（见第34章，表2）

点斑海豹（Harborseal）新生儿出生时WBC较低，但在生活10天后，WBC计数在正常范围内（>7000个细胞/mm3）。

白细胞参数值的临床意义（LeukocyteParametersignificance）

WBC计数                     

细菌感染                         

某些真菌感染                      

妊娠（Pregnancy）                 

过度的活动（Strenuousexercise）  

非传染性炎症            

RBC计数                     

 全身性细菌感染                          

 病毒感染                      

 癌症的化疗期                   

 某些药物中毒                  

 肝硬化（Livercirrhosis）      

单核细胞（Monocyte）

 慢性疾病过程

 疾病的恢复期

 有许多组织坏死的疾病

 骨折（Bonefractures）

嗜酸性白细胞（Eosinophil）

寄生虫感染

过敏反应（allergies）

白血病（leukemia）

某些毒性物（苯、磷酸盐）

肾上腺皮质功能减退（hypoadrenocorticism）

嗜酸性白细胞（Eosinophil）

 应激（Stress）

 肾上腺皮质功能亢进（hyperadrenocorticism）

 皮质类固  （Corticosteroids）

嗜中性白细胞（Neutrophils）                                

 全身性应激的非炎症变化           

 急性炎症（AcuteInflammation）