园艺植物育种学实验指导书3word资料18页.docx

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园艺植物育种学实验指导书3word资料18页

园艺植物育种学总论

单靠“死”记还不行,还得“活”用,姑且称之为“先死后活”吧。

让学生把一周看到或听到的新鲜事记下来,摒弃那些假话套话空话,写出自己的真情实感,篇幅可长可短,并要求运用积累的成语、名言警句等,定期检查点评,选择优秀篇目在班里朗读或展出。

这样,即巩固了所学的材料,又锻炼了学生的写作能力,同时还培养了学生的观察能力、思维能力等等,达到“一石多鸟”的效果。

实验指导书

观察内容的选择，我本着先静后动，由近及远的原则，有目的、有计划的先安排与幼儿生活接近的，能理解的观察内容。

随机观察也是不可少的，是相当有趣的，如蜻蜓、蚯蚓、毛毛虫等，孩子一边观察，一边提问，兴趣很浓。

我提供的观察对象，注意形象逼真，色彩鲜明，大小适中，引导幼儿多角度多层面地进行观察，保证每个幼儿看得到，看得清。

看得清才能说得正确。

在观察过程中指导。

我注意帮助幼儿学习正确的观察方法，即按顺序观察和抓住事物的不同特征重点观察，观察与说话相结合，在观察中积累词汇，理解词汇，如一次我抓住时机，引导幼儿观察雷雨，雷雨前天空急剧变化，乌云密布，我问幼儿乌云是什么样子的，有的孩子说：

乌云像大海的波浪。

有的孩子说“乌云跑得飞快。

”我加以肯定说“这是乌云滚滚。

”当幼儿看到闪电时，我告诉他“这叫电光闪闪。

”接着幼儿听到雷声惊叫起来，我抓住时机说：

“这就是雷声隆隆。

”一会儿下起了大雨，我问：

“雨下得怎样?

”幼儿说大极了，我就舀一盆水往下一倒，作比较观察，让幼儿掌握“倾盆大雨”这个词。

雨后，我又带幼儿观察晴朗的天空，朗诵自编的一首儿歌：

“蓝天高，白云飘，鸟儿飞，树儿摇，太阳公公咪咪笑。

”这样抓住特征见景生情，幼儿不仅印象深刻，对雷雨前后气象变化的词语学得快，记得牢，而且会应用。

我还在观察的基础上，引导幼儿联想，让他们与以往学的词语、生活经验联系起来，在发展想象力中发展语言。

如啄木鸟的嘴是长长的，尖尖的，硬硬的，像医生用的手术刀―样，给大树开刀治病。

通过联想，幼儿能够生动形象地描述观察对象。

黄桂香编著

教师范读的是阅读教学中不可缺少的部分，我常采用范读，让幼儿学习、模仿。

如领读，我读一句，让幼儿读一句，边读边记；第二通读，我大声读，我大声读，幼儿小声读，边学边仿；第三赏读，我借用录好配朗读磁带，一边放录音，一边幼儿反复倾听，在反复倾听中体验、品味。

广西大学农学院园艺系

2019年3月

实验一园艺植物花粉生活力测定（3h）…………………………………3

（一）果树花粉生活力测定………………………………………………3

（二）蔬菜花粉生活力测定………………………………………………6

实验二、三园艺植物开花习性观察及有性杂交育种（6h）……………7

（一）果树开花习性观察及有性杂交育种………………………………7

（二）蔬菜开花习性观察及有性杂交育种………………………………8

实验四、园艺植物品种描述及鉴别（3h）…………………………………10

（一）番茄品种描述及鉴别………………………………………………10

（二）荔枝品种描述及鉴别………………………………………………13

实验五、种胚分离培养技术（3h）…………………………………………16

实验六、园艺植物选择育种（3h）…………………………………………17

实验七、园艺植物品种调查及育种方案的制订（6h）……………………20

实验八、园艺植物花粉单核期观察（3h）…………………………………20

实验一、园艺植物花粉发芽试验及生活力测定

内容一：

果树花粉发芽试验及花粉生活力测定

一、目的要求

练习并掌握果树花粉发芽试验及花粉生活力测定技术

二、材料用具

供试花粉、氯化钙、硼酸、琼脂、蔗糖、凹玻片、棉花、染色瓶、蒸馏水、显微镜、计数器、天平、载玻片、盖玻片、烧杯、镊子、水浴锅、玻璃杯、玻棒、冰箱、温箱、干燥器等。

联苯胺、α—萘酚、碳酸钠、酒精、过氧化氢、氯化三苯基四氮吡、磷酸氢二钠、磷酸二氢钾、量筒、量瓶、滴瓶等。

安全提示：

因联苯胺、α—萘酚、氯化三苯基四氮唑为易制毒化学品，操作时要按规范要求，避免人体直接接触，注意安全。

三、说明

在有性杂交工作中，常因杂交亲本组合的花期不遇，或亲本植株异地而必须预先收集父本花粉，花粉应贮藏在低温（0—4℃），干燥（相对湿度0—4%）不受阳光直射（或黑暗）的环境下，可以较长时间地保持花粉的生活力，经贮藏或外地采来的花粉，在授粉之前，必须检验花粉的生活力，以确定花粉发芽的可靠程度，这对检验杂交后的效果，具有重要意义。

花粉人工发芽的效果与培养基的配制是否适合有很大关系，培养基常用不同浓度的蔗糖和琼脂1%及蒸馏水配制而成，不同果树的花粉对蔗糖浓度要求不同。

一般柑桔花粉要求蔗糖浓度以10—15%为宜；苹果及梨以10—15%为宜，桃以10%为宜。

通过控制蔗糖浓度的高低可调节培养基的渗透压，防止播种的花粉在培养基上发生破裂现象。

培养基一般以微酸性为宜，pH值相应调整在6—5.2之间，发芽温度控制在20—25℃，并需要空气和较高的湿度。

如在培养基中加入少量的硼酸和维生素B1，更可促进花粉发芽。

测定花粉生活力，同样是检查花粉的质量，因为做花粉发芽试验时，操作较复杂，设备要求较高，需时也较长。

为了简易而迅速地测定花粉的生活力，也有用化学染色的方法测定花粉生活力，但此种方法有一个很大的缺点，就是不能真实地反映出有发芽力的花粉究竟有多少，因为即使染上色的花粉也不一定都具有生活力。

所以一般常用而且较为可靠的方法仍然是采用花粉发芽试验，而染色法作为一种粗略的快速测定，还是比较简便的。

四、方法和步骤

（一）花粉发芽试验

（1）培养基的配制：

在100毫升蒸馏水中，加入琼脂1克，蔗糖（按果树花粉种类不同的比例加入）和0.01g的硼酸共同置于烧杯中加热煮沸，使琼脂和蔗糖等充分溶解于水中，在加热过程中，由于水分蒸发，必须加入失去的水分，才能保持准确的浓度，然后将烧杯置于水浴锅中（或盛热水的烧杯中）备用，以防培养基冷却凝固

（2）发芽床的装置：

用玻棒将冷却前（约50℃）的培养基滴入凹玻片的凹孔中（1—2滴），要求培养基表面必须园正，待其凝固后用作播种花粉之发芽床。

（3）播种花粉用接种丝或头发沾上花粉（花粉事先收集使之干燥，贮藏于干燥器中置于冰箱内）少许，均匀地播种于培育基表面，播种时要防止花粉成团堆集于培育基上；也要防止花粉埋入培养基过深，影响花粉发芽。

播种后要在显微镜下检查，花粉分布是否均匀。

花粉堆积过多难以计数，而过少则影响发芽。

以每一视野中（10×10）分布有100—200粒左右花粉为宜。

播种完毕后，将凹玻片插入染色瓶中（染色瓶底事先放入少量的脱脂棉，并加入适量的无菌水），盖上瓶盖。

再在染色瓶上贴上标签，注明花粉种类，蔗糖浓度，采集时间，播种时间，工作者姓名等。

然后置于温箱中（温度调至25—28℃左右）。

（4）播种后的检查：

播种根据树种不同，隔不同时间在显微镜下，检查花粉发芽情况、苹果、梨、桃在3—4小时后检查第一次，以后每隔2—4小时检查一次（北方可适当缩短2次之间的时间），柑桔在24小时检查一次。

每次检查三个视野（最好能固定视野检查。

如不能固定视野检查，则每次检查的视野不能重复）。

同时用计数器统计出花粉总粒数及发芽粒数，直至花粉粒数不再增加为止，花粉发芽标准，以花粉管伸长超过花粉直径为准。

表一花粉发芽记载表

供试品种

收集时间

播种时间

蔗糖浓度

第一次

第二次

第三次

总发芽率%

时

间

总

数

发芽率

时

间

总

数

发芽率

时

间

总

数

发芽率

（二）花粉生活力测定

1、B、C夏尔达考夫染色法：

具有生活力的花粉粒中，含有过氧化物酶，它能促使过氧化物放出活性氧，这种氧是在花粉萌发时，进行的许多综合反应时所必需的。

因此，通过对过氧化物酶的测定，可间接地判断花粉是否具有生活力。

（1）预先配制下列溶液

①0.20克联苯胺溶于100毫升50%酒精溶液中。

②0.15α-萘酚溶于100毫升之50%酒精溶液中。

③0.25克碳酸钠溶于100毫升之蒸馏水中。

以上三溶液分别装入棕色瓶中贮藏备用（或用量瓶放在暗色避光处），使用时将上述三种溶液等量混合，配成混合液，装于棕色滴瓶中备用。

④在使用前配好0.3%过氧化氢溶液，装于棕色滴瓶中备用。

（2）操作步骤：

在载玻片上加入少量待测花粉，然后在花粉上滴一小滴混合液和一小滴过氧化氢溶液，用玻棒把花粉和溶液充分混合，再盖上盖玻片（盖上后常出现很多气泡，不要把气泡认为花粉），经过3—4分钟后，在显微镜下检查被染色和未染色的花粉粒数，因联苯胺被氧化后呈兰色，α—苯酚被氧分后呈红色，同时被氧化则呈紫红色，因此联苯胺，α—苯酚和过氧化氢的混合液同时参与作用下，凡具生活力的花粉因含有过氧化物酶使过氧化氢释放出氧，从而使花粉染成红色。

生活力愈强的花粉染色愈深，不具生活力的花粉则呈黄色和无色。

（3）观察和测定结果：

表二花粉染色记载表

供

试

品

种

花粉

收集

日期

测

定

日

期

第一视野

第二视野

第三视野

具有生活

力的花粉

（%）

备

注

花粉总数

染色总数

花粉总数

染色总数

花粉总数

染色总数

每片观察三个视野，总数不少于500粒左右，统计出具有生活力的花粉粒的%。

2、氯化三苯基四氮唑（简称T、T、C）染色法：

具有生活力花粉的脱氢酶，在催化去氢的过程中，把氢转移到它的物质上去，使用T、T、C与催化过程中产生的氢结合，使具有生活力的花粉粒变成红色。

（1）预先配制下列溶液：

①磷酸盐缓冲液：

在100毫升的蒸馏水中，溶解0.8323克的磷酸氢二钠（Na2HPO42H2O）和0.273克的磷酸二氢钾（KH2PO4），调整PH值为7.17。

②T、T、C溶液：

称取0.02—0.05克的T、T、C溶解在10毫升的磷酸盐缓冲溶液中，溶液配好后，装入棕色滴瓶内，置于暗处。

（2）操作步骤：

①取少量花粉放在载玻片上，并在花粉上滴1—2滴配制液，用玻棒混合后，盖上盖玻片。

②将此盖玻片置于恒温箱中（35—40℃）约15—20分钟。

③在显微镜（10×10）下观察，凡具有生活力的花粉粒呈红色，部分失去生活力的呈淡红色，无色的是死的和不育的花粉粒。

（3）观察和测定结果：

表三花粉染色记载表

供

试

品

种

花粉

收集

日期

测

定

日

期

第一视野

第二视野

第三视野

具有生活

力的花粉

（%）

备

注

花粉总数

染色总数

花粉总数

染色总数

花粉总数

染色总数

内容二蔬菜花粉生活力测定及发芽试验

一、实验目的

练习各种蔬菜花粉生活力测定的基本方法；了解不同蔬菜作物的花粉贮存条件对其生活力的影响。

二、原理

1、生活力测定

将花粉用某种化学药品直接染色，根据花粉形态和染色情况判断花粉生活力有无或强弱的方法。

常用的方法有I2—KI溶液染色法，氯化三苯四氮唑法（TTC），过氧化物酶测定法等，本试验采用I2—KI溶液染色法。

2、发芽试验法

是将花粉播到培养基上，使其吸收水和少量营养物质，观察发芽情况，判断花粉生活力。

此法是最直观可靠的。

三、实验材料和用具

1、试材：

白菜、黄瓜、茄子等蔬菜作物的新鲜花粉或贮藏花粉。

2、用具及药品：

载玻片、盖玻片、显微镜、光照培养箱、镊子、培养皿、凹玻片、染色缸、培养基、I2—KI溶液等。

四、实验步骤

（一）生活力的测定

1、采样：

采集成熟的新鲜花粉或贮存过的花粉。

2、染色液配制：

先溶解2gKI，后加入1gI2,全部溶解后定容成100毫升，即制成含I为2%的母液，用前按需要稀释即可。

3、染色：

因正常花粉一般可积累比较多的淀粉，而败育花粉则不积累淀粉，利用I2—KI对淀粉的特异染色反应可区分开来，正常的花粉呈蓝黑色，败育的花粉呈黄褐色。

（注：

很小粒花粉视为败育）。

4、统计及计算。

表1花粉生活力测定记载表

供试品种

花粉

镜检情况

具生活力花粉

（%）

采集时间

测定时间

测定方法

视野1

视野2

视野3

花粉总数

染色数

花粉总数

染色数

花粉总数

染色数

（二）发芽力测定

1、采样：

采集成熟的新鲜花粉或贮存过的花粉。

2、培养基制备：

①成分：

蔗糖10%~12%+硼酸0.01%+琼脂0.5%。

②煮溶

③滴定

④冷却。

3、播种：

用解剖针等尖细物将花粉均匀地播在培养基表面（勿弄破表面）。

4、培养：

在25~28℃下，培养48小时。

5、镜检：

在10×10倍下镜检。

统计结果填表2。

表2花粉发芽测定记载表

供试品种

花粉

镜检情况

总发

芽力

（%）

采集时间

播粉

时间

蔗糖浓度

视野1

视野2

视野3

花粉总数

发芽数

花粉总数

发芽数

花粉总数

发芽数

实验二、园艺植物开花习性观察及有性杂交育种

内容一果树的开花习性观察及有性杂交育种

一、实验目的

本实验通过教师讲解、现场观察、实际操作，使学生了解供试园艺植物的花器构造、开花习性并掌握有性杂交技术。

二、实验方法及步骤

（1）观察供试园艺植物的花器构造、开花习性。

（2）确定杂交组合：

根据当地的育种目标，在掌握亲本性状的遗传倾向，品种开花早晚等前提来确定杂交组合。

杂交亲本的选配，原则上要符合育种目标的要求，在经济性状上做到取长补短，在组合的选配中母本更为重要，最好具备下列条件：

优点较多，缺点较少的生产品种，单胚性类型或平均胚数较少的品种，父本应具有花粉生活力强，某些相对性状（如翼叶、胚的颜色）具有显性，但雄蕊退化的品种不能作父本，对于高度自花授粉的无性胚占优势的柑桔类，杂交组合宜适当增多，每杂交组合的花朵数应不少于200朵。

（3）花粉采集与贮藏：

父本花粉应在母本去雄前采集备用。

采集花粉宜在晴天露水干后进行，一般应采含苞待放的花蕾为好，用镊子将花药取下，置于培养皿内摊开，除去花丝、标名花粉名称，放置干燥条件下直至花药开裂，散出大量花粉，然后将花粉收集在指形管内，用棉花塞好，置于干燥器内，放在低温避光的环境下保存备用。

（4）母本树、花枝及花朵的选择：

母本树：

宜选具有该品种的典型性、丰产优质、树势中庸、抗性强的植株。

花枝：

一般结果母枝以春梢和早秋梢发育而成的为佳，并注意选择树冠中部外围，发育健壮的较斜生正常结果枝，但选枝还须根据品种结果习性具体而定。

花朵：

有叶单顶花或有叶总状花序顶部的花着果率高，无叶花序则在每一果枝上留2—5朵即将开放的正常花作为杂交用，其余花朵全部摘除。

（5）去雄和套袋

母本花朵在杂交授粉前必须去雄，掌握花苞待放，花药未开裂前去雄，用镊子将花瓣剥开。

然后将花药全部完整的除去，注意勿伤花柱及子房，更不能使花药破裂而引起自花授粉，去雄后为防止异花授粉，必须立即套袋隔离。

当一个组合去雄完毕，所用镊子用70%酒精消毒，以便进行另一组合时再用。

（6）授粉

有些果树（如柑桔类）花朵的雌蕊具有早熟性，故去雄后的当天或第二天即可授粉，一般去雄后1—3天内均可授粉，最好去雄后马上授粉，可简化手续，结实率也较高，授粉最好在晴天无风的上午（9—11时）进行，授粉时用毛笔或授粉匙在指形管内沾取花粉。

轻轻涂在去雄花朵的柱头上，授毕立即套袋，挂上标签，标签上应注明组合名称，去雄杂交日期，杂交花朵数及杂交者姓名等。

（6）杂交后的管理

授粉后9—10天，柱头已变褐，枯萎，即可除去纸袋，然后按记载表内容统计杂交效果。

在果实最后一次生理落果后，还需统计一次杂交结实率，采前落果严重的地区，对杂交果实还需套上沙布袋，以免杂交果实掉落；果实完全成熟后，按组合采回杂交果实。

三、结果及记录

（1）杂交记录表

杂交组合

编

号

花粉采集日期

母本树位置

授粉日期

杂交花枝

杂交花数

第一次

检查

第二次检查

果实采收

种子总数

备

注

日期

幼果数

日期

幼果数

日期

采数

结实率

饱满

小粒

总数

内容二番茄的开花习性观察及有性杂交技术

一、实验目的

本实验的目的是了解番茄花器构造及掌握番茄有性杂交方法。

番茄是自花授粉作物，但在自然情况下，也常常会出现异花授粉现象。

异花授粉率的大小决定于栽培条件及品种间的花器构造。

在人工交配时，番茄的各个品种之间很易杂交，杂交一朵花所结种子数很多，去雄及授粉也较为简便，所以人工有性杂交是目前番茄杂种生产的主要方法。

番茄为两性花，花瓣5-7片，雄蕊5-7条，合生成为筒状，雌蕊在筒的中央，呈线状，种子很多。

开花最适宜的温度为25℃，花开放时首先从黄绿色花蕾中露出花冠（露冠），逐渐张开花冠，然后花冠反卷，最后花冠凋谢。

自露冠至盛开约2-3天，自露冠至凋谢需5-6天，花在初开及盛开时花粉均已成熟，杂交用将开而未开花朵的柱头授粉最为适宜，但柱头在蕾期即露冠前1-2天已有授粉能力，并在开花后保持4天左右，花粉的生活力在低温干燥及黑暗的条件下一般可保持8-10天。

二、材料及用具

番茄植株，小镊子，刀片，酒精，培养皿，小放大镜，纸袋，标签，曲别针，软性铅笔，棉花等。

三、方法与步骤

1、取盛开的花，纵切解剖，观察花器的结构，特别注意雌蕊的所在位置。

2、母本花朵的选择：

选取花萼全裂，花冠裂片半开，花瓣展开呈30°角的花蕾，此时花药尚未开裂，其色由绿开始转黄。

花蕾太小，不利于操作，座果率和结籽数受影响；花蕾过大，有可能已经自交。

3、去雄：

用小镊子的一边，小心插入雄蕊筒的中心将之夹紧，轻轻向上提，这样就可以将雄蕊取出去。

切勿弄破花粉囊及刺伤雌蕊。

去雄后，用小放大镜检查雌蕊柱头，看有没有花粉粘在柱头上，如若没有，这花就可以作杂交之用。

4、父本花朵选择：

在用作父本品种的植株中，选取花全开，花冠完全展开，且向外反卷，呈浅黄色，花药呈现橙黄色，花药有裂缝的花。

一般在晴天上午10时以后，或阴天中午花粉量最多，生活力也强。

5、采粉：

将花萼及花冠全部除掉后，用小镊子插入雄蕊筒内的基部，将之夹紧，轻轻向上提，将雄蕊取出，并将之展开，用左手大拇指及食指将花药基部夹紧（花药裂口面向大拇指的指甲），然后用右手轻轻敲花药之背，使花粉全部落在左手大拇指指甲上，这些花粉可作杂交之用。

6、授粉：

是将花粉放在柱头上，其方法是将已去雄而作为母本的花，用右手执之，将左手大拇指指甲的花粉涂在柱头上。

授粉后再用小放大镜观察柱头表面花粉数量是否足够，花药是否均匀铺开。

在授粉工作全部完毕后，在杂交花柄处挂牌，用铅笔写上母本及父本名称、杂交日期及时间、杂交人姓名。

授粉一周后，子房开始很快膨大。

授粉时母本的花龄对子房受精能力有一定影响。

据报道，当天开放的花授粉后，其座果率、单果种子产量和种子千粒重最高；其次是开花前1天和后1天的；花后3天的最低。

一天内授粉时间与田间气温有关，气温在22.8—28.5℃时，结果率45.1—61.1%，气温30.5℃时，结果率17.1%（赵邦勤，1983）。

7、检查：

杂交工作结束后要经常检查母本植株，摘除所有未去雄的花和它们所结的果实。

对无限生长类型的品种，要打顶，使养分集中，促进果实中种子发育，待结成果实时进行观察，计算授粉后结果率和平均单果种子数。

番茄有性杂交记录表

授粉时期

杂交组合

花数

（朵）

结果数

（个）

结实率

（%）

单果种子数

（粒）

实验四园艺植物品种描述及鉴别

内容一、番茄品种描述及鉴别

一、目的要求

1、学习品种（资源）形态特征的描述方法；

2、根据品种的主要形态特征，练习鉴别品种的方法。

3、识别一些主要品种。

二、材料与用具

材料：

若干番茄品种。

用具：

钢卷尺、卡尺、扩大镜、果刀、粗天秤、手持测糖仪、铅笔、记录本等。

三、说明

品种形态特征研究的对象是植株，枝与芽，叶与花，果实包括种子等器官的综合表现即品种特征。

品种特征的鉴别主要通过观察、记载和描述。

每一个品种都具有它一定的品种特征，即品种典型性。

因此，品种的形态特征是鉴别品种的主要依据之一。

由于果实是番茄栽培的目的产品，是育种选择的主要对象。

所以品种特征在很大程度上是以果实作为鉴别依据。

当品种在植株形态上不易区别时，可在果实上明显地辨别出来。

育种工作者无论在进行引种，选种或育种工作，都必须对种质资源和选种材料进行研究，但为了研究原始材料，首先就要能识别各种原始材料。

育种是以栽培品种或有关野生类型作为原始材料的，所以现有的主要品种是育种的最主要的原始材料。

因此，识别品种、鉴别品种是育种工作者必须具备的基础知识。

在育种工作过程中，熟悉品种特征不仅能判断品种优劣，掌握选择标准，还可以通过各性状的研究，了解品种间的亲缘关系，作为提供选配杂交亲本的依据。

在良种繁殖中，为了确定品种的真实性和纯度，也需要熟悉各品种的形态特征。

四、番茄品种的分类

番茄品种很多，按开花结果习性可分有限生长型和无限生长型两类；按成熟期分为早熟种、中熟种和晚熟种等。

普通番茄的园艺学分类，大体上可以从植株的生长习性、叶型、果实大小、颜色等不同的角度进行分类。

如：

 1.按照植株的生长习性分类

按照植株的生长习性分类，可以分为无限生长型、有限生长型及半有限生长型三类。

（1）无限生长型：

植株无限生长，一般采用单秆整枝法。

在条件适宜的情况下，主枝高度可达2米以上，能结果十多穗，宜作露地栽培或温室长周期栽培。

（2）有限生长型：

在主干3～5层时花序封顶，生长点变成花序，不再向上生长，依靠叶腋或花序下部抽生侧枝生长，侧枝生长1～2个花序后顶端又变成花序而封顶，如此反复，再从叶腋形成侧芽生长。

因此，该类型品种的番茄植株较矮，大多也较早熟，一般株高1米左右，可行2～3秆整枝，立较矮的或简易的支架，或不立支架。

该类型品种宜作小棚栽培或大棚双层覆盖栽培、露地简易支架密植栽培或无支架栽培。

（3）半有限生长型：

半有限生长型是指具有无限生长趋势的有限生长类型的品种。

 2.按照果实大小分类

按照果实大小分类，可分为大番茄、串番茄和樱桃形番茄。

大