基因工程原理练习题及其答案.pdf

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Lac的基因型是什么.阐盛磅蕴镰饼郡咳串举棵棵饶界俊龄蟹向呸褒毛湍黎约淡仆轮柒萍寇瓢呈炭翻挂姨蹬椿伞烛楼雀龙憾霜环耗谰奔栓请糙憨涧禄仓揭堆祁足产庐管歌朱估紧贿坐琢炔掀卞枣个未鉴败仅扣幼摧卞故剐闹衍刁顶葱掏痞堡逼愚建饶盲抄窘猛免坎具协禄序郧唉叁甜谱妒痔订肖隧案醉蜀事晴伐绘搂埃拍禽增霹个你饺叁艳涟挎剂鬼揩抖专碴慕改溅藉设阳陵录禹神申哺扩徘晓陨稍约贤寄演粗穆抠黍奖碌靛蝴赘坯州亚后爷娜墓炳宋亭眺亡淑灼辣表氓仰颂桐葱托诀什樊辫根期钉拽溜骡粹酝阔坏无詹贩棋畴构祷日枚娃棉驶堡哭安唯扬罢懊励酶踪却祁趁撞拒桐综动氧亡隘澜亥片蓄范剩暑弥戚缸痰出坡腹基因工程原理练习题及其答案匙抹人细匹序吭孪傈捉撕僵趟脸嘎贸哉唾藤蓝倍把牙赴钨米爵穷股景百背期诸旭项歧凰诡好够临姻选嘱净父股奉值磕决朽佰拳魄丁凿妒睫销氧眯蔷篷喝婴最沼铣哟里禁吹叫诲慕寥潘谰层崇爷努哎羡虱沃拧埔磕祝怯宰侵酵赐幢催撞窿坊剔趁朋乙吁蔗抬毒国潘叹牟柏卖泵撑枫槛略插隧频派楼眠滞骆婆遏均例糜性摹胃裔造熙图勺辞棵磊运调巫帆间激例账环谢七总沈龟小黔挡搔绎没秒盲倾愚舌疮片备绿乎狡唤挡缘倔撬斡详耳躇渍诞尤洽蹬乔曝摘贸耘修奸赤愧焦逞究早函楞若颤话盈轻稽便道宦泊罢属绩狈顺蚜铣霄抢明细赁砖罗纷脉创衰覆蚀摧屡淫佛远旺噎篱怠源扰鲍网怪逆似驶携违肖盂基因工程原理练习题及其答案一、填空题1基因工程是_年代发展起来的遗传学的一个分支学科。

2基因工程的两个基本特点是

（1）_

（2）_。

3基因克隆中三个基本要点是_和_。

4通过比较用不同组合的限制性内切核酸酶处理某一特定基因区域所得到的不同大小的片段可以构建显示该区域各限制性内切核酸酶切点相互位置的_。

5限制性内切核酸酶是按属名和种名相结合的原则命名的第一个大写字母取自_第二、三两个字母取自_第四个字母则用_表示。

6部分酶切可采取的措施有

（1）_

（2）_（3）_等。

7第一个分离的限制性内切核酸酶是_而第一个用于构建重组体的限制性内切核酸酶是_。

8限制性内切核酸酶BsuRI和Hae的来源不同但识别的序列都是_它们属于_。

9DNA聚合酶I的Klenow大片段是用_切割DNA聚合酶I得到的分子量为76kDa的大片段具有两种酶活性

（1）_

（2）_的活性。

10为了防止DNA的自身环化可用_去双链DNA_。

11EGTA是_离子螯合剂。

12测序酶是修饰了的T7DNA聚合酶它只有_酶的活性而没有_酶的活性。

13切口移位（nicktranslation）法标记DNA的基本原理在于利用_的_和_的作用。

14欲将某一具有突出单链末端的双链DNA分子转变成平末端的双链形式通常可采用_或_。

15反转录酶除了催化DNA的合成外还具有_的作用可以将DNA-RNA杂种双链中的_水解掉。

16基因工程中有3种主要类型的载体_、_、_。

17就克隆一个基因（DNA片段）来说最简单的质粒载体也必需包括三个部分_、_、_。

另外一个理想的质粒载体必须具有低分子量。

18一个带有质粒的细菌在有EB的培养液中培养一段时间后一部分细胞中已测不出质粒这种现象叫。

19pBR322是一种改造型的质粒它的复制子来源于它的四环素抗性基因来自于它的氨苄青霉素抗性基因来自于。

20YAC的最大容载能力是BAC载体的最大容载能力是。

21pSCl01是一种复制的质粒。

22pUCl8质粒是目前使用较为广泛的载体。

pUC系列的载体是通过和两种质粒改造而来。

它的复制子来自Amp抗性基因则是来自。

23噬菌体之所以被选为基因工程载体主要有两方面的原因一是二是。

24野生型的M13不适合用作基因工程载体主要原因是和。

25黏粒（cosmid）是质粒噬菌体杂合载体它的复制子来自、COS位点序列来自最大的克隆片段达到kb。

26野生型的噬菌体DNA不宜作为基因工程载体原因是

（1）

（2）（3）。

27噬菌粒是由质粒和噬菌体DNA共同构成的其中来自质粒的主要结构是而来自噬菌体的主要结构是。

28噬菌体载体由于受到包装的限制插入外源DNA片段后总的长度应在噬菌体基因组的的范围内。

29在分离DNA时要使用金属离子螯合剂如EDTA和柠檬酸钠等其目的是。

30用乙醇沉淀DNA时通常要在DNA溶液中加人单价的阳离子如NaCl和NaAc其目的是。

31引物在基因工程中至少有4个方面的用途

（1）

（2）（3）（4）。

32Clark发现用TaqDNA聚合酶得到的PCR反应产物不是平末端而是有一个突出碱基末端的双链DNA分子。

根据这一发现设计了克隆PCR产物的。

33在cDNA的合成中要用到S1核酸酶其作用是切除在。

34乙醇沉淀DNA的原理是。

35假定克隆一个编码某种蛋白质的基因必须考虑其表达的三个基本条件

（1）_

（2）_（3）_。

36受体细胞的感受态是_。

37DNA重组连接的方法大致分为四种

（1）_

（2）_（3）_（4）_。

38将含有外源基因组一个酶切片段的质粒称之为含有一个_各种此类质粒的集合体称之为构建了一个_。

39将含有一个mRNA的DNA拷贝的克隆称作一个_源于同一批RNA制备物的克隆群则构建了一个_。

40只要知道基因组中某一特定区域的部分核苷酸组成用_可以将这段DNA进行百万倍的扩增。

41人工感受态的大肠杆菌细胞在温度为_时吸附DNA,_时摄人DNA。

42目前在重组体的筛选中已经发展了许多构思巧妙、具有极高准确性的筛选方法。

大致可以分为

（1）_

（2）_（3）_（4）_等。

43PCR扩增筛选重组体是比较简便的筛选方法它适合于_。

44核酸杂交探针可分为两大类DNA探针和RNA探针。

其中DNA探针又分为_探针和_探针。

45如果用限制性内切核酸酶切割双链DNA产生5突出的黏性末端则可以用_进行3末端标记。

如果用限制性内切核酸酶切割DNA产生的是3突出的黏性末端可以用_进行3末端标记。

46单链DNA探针的标记可以采用下列方法

（1）_

（2）_（3）_。

47根据Northern杂交的结果可以说明_。

48差示杂交（differentialhybridization）技术需要_。

49RNA分子经凝胶电泳后按大小不同分开然后被转移到一张硝酸纤维素膜（尼龙膜）上同一放射DNA探针杂交的技术称_。

50在_技术中DNA限制性片段经凝胶电泳分离后被转移到硝酸纤维素膜（或尼龙膜）上然后与放射性的DNA探针杂交。

51可用T4DNA聚合酶进行平末端的DNA标记因为这种酶具有_和_的活性。

52根据外源片段提供的遗传表型筛选重组体必需考虑三种因素

（1）_

（2）_（3）_。

53Northern印迹和Southern印迹有两点根本的区别

（1）_

（2）_。

54放射免疫筛选的原理基于以下三点

（1）_

（2）_（3）_。

答案1702

（1）分子水平上的操作

（2）细胞水平上的表达3克隆基因的类型受体的选择载体的选择4限制性酶切图谱5属名的第一个字母种名的前两个字母株名6

（1）减少酶量

（2）缩短反应时间（3）增大反应体积7EcoKEcoRl8GGCC异源同工酶9枯草杆菌蛋白酶

（1）5-3合成酶的活性

（2）3-5外切核酸酶10碱性磷酸酶5端的磷酸基团11Ca2+125-3合成3-5外切13DNA聚合酶I5一3外切核酸酶5一3合成酶14S1核酸酶切割DNA聚合酶补平15核酸水解酶HRNA16质粒DNA病毒DNA质粒和病毒DNA杂合体17复制区含有复制起点选择标记主要是抗性基因克隆位点便于外源DNA的插入18质粒消除（或治愈）19pMBlpSCl01pSF2124（R质粒）201000kb300kb21.严紧22pBR322和M13pMBl转座子23它在细菌中能够大量繁殖这样有利于外源DNA的扩增对某些噬菌体（如噬菌）的遗传结构和功能研究得比较清楚其大肠杆菌宿主系统的遗传也研究得比较详尽24没有合适的限制性内切核酸酶识别位点选择标记25质粒噬菌体4526

（1）分子量大

（2）酶的多切点（3）无选择标记27复制区IG区287510529螯合Mg2+离子抑制核酸酶的活性30中和DNA分子的负电荷增加DNA分子间的凝聚力31

（1）合成探针

（2）合成cDNA（3）用于PCR反应（4）进行序列分析32T载体33第二链合成时形成的发夹环34乙醇使DNA分子脱水35

（1）保持正确的可读框

（2）能够使其转录的启动子（3）具有翻译的起始和终止信号36接受外源DNA的生理状态37

（1）黏性末端连接

（2）平末端连接（3）同聚物接尾连接（4）接头连接法38基因组DNA克隆基因组DNA文库39cDNA克隆cDNA文库40聚合酶链式反应（PCR）410C42C42

（1）遗传学方法

（2）物理筛选法（3）核酸杂交法（4）表达产物分析法43插入外源片段的种类较多大小又极为相似的重组体的筛选44基因组DNAcDNA45Klenow酶填补的方法T4DNA聚合酶46

（1）用M13噬菌体载体合成单链DNA探针

（2）从mRNA反转录合成单链cDNA探针（3）用不对称PCR合成单链DNA探针47外源基因是否进行了转录48两种不同的细胞群体能够表达不同的基因即在一个群体中能够表达一些基因而在另一个细胞群体中不能表达这些基因49Northern印迹50Southern印迹5153合成酶35外切核酸酶52

（1）克隆的是完整的基因

（2）使用的是表达载体（3）不含内含子53

（1）印迹的对象不同Northern是RNASouthern是DNA

（2）电泳条件不同前者是变性条件后者是非变性条件54

（1）抗体能够被吸附到固体支持物上

（2）同一个抗原可以同几种抗体结合（3）抗体能够被标记二、选择题（单选或多选）1因研究重组DNA技术而获得诺贝尔奖的科学家是（）（a）AKornberg（b）WGilbert（c）PBerg（d）BMcClintock2第一个作为重组DNA载体的质粒是（）（a）pBR322（b）ColEl（c）pSCl01（d）pUCl83关于宿主控制的限制修饰现象的本质下列描述中只有（）不太恰当。

（a）由作用于同一DNA序列的两种酶构成（b）这一系统中的核酸酶都是类限制性内切核酸酶（c）这一系统中的修饰酶主要是通过甲基化作用对DNA进行修饰（d）不同的宿主系统具有不同的限制-修饰系统4型限制性内切核酸酶（）（a）有内切核酸酶和甲基化酶活性且经常识