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生化复习资料
生化复习资料
——农学专业
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1、提取DNA时,用什么方法衡量它的纯度?
DNA纯品:
OD260/OD280=1.8
RNA纯品:
OD260/OD280=2.0
2、构成蛋白质的20种氨基酸的分类
酸性氨基酸
芳香族氨基酸
杂环氨基酸
3、变形蛋白质的特点
理化性质改变和生物活性的丧失
4、球蛋白的特点
外形接近球形或椭圆形,溶解性较好,能形成结晶,大多数蛋白质属于这一类,微溶于水,易溶于稀酸中
5、蛋白质的四级结构和生物学的关系
蛋白质分子中各亚基的空间排布及亚基接触部位的布局和相互作用,称为蛋白质的四级结构。
6、血红蛋白和双曲线肌红蛋白的氧解离曲线
7、处于等电点时蛋白质的特点
易沉淀析出
8、等电点的含义
处于电中性时溶液的PH
9、氨基酸与茚三酮特征性反应颜色
氨基酸与水合茚三酮共热,发生氧化脱氨反应,生成NH3与酮酸。
水合茚三酮变为还原型茚三酮。
加热过程中酮酸裂解,放出CO2,自身变为少一个碳的醛。
水合茚三酮变为还原型茚三酮。
NH3与水合茚三酮及还原型茚三酮脱水缩合,生成蓝紫色化合物。
10、杂交的种类
⏹Southern杂交(Southernbloting)用于检测DNA
⏹Northern杂交(Northernbloting)用于检测RNA
⏹Western杂交(Westernbloting)用于检测蛋白质
11、DNA测序的方法
纯蛋白质——二硫键拆开——末端氨基酸测定——专一性裂解——将肽段分离并测出顺序——将肽段顺序进行叠联以确定完整的顺序
12、酶的可逆性抑制作用的三种类型,动力学特征,图形
竞争性抑制,动力学:
Vmax不变;Km值增加,酶与底物的亲和力降低。
非竞争性抑制,动力学:
Vmax减小,Km不变,酶与底物亲和力不变。
反竞争性抑制,动力学:
km减少,酶对底物亲和力增加,最大反应速度减少,也无法通过改变底物浓度而改变反应抑制剂的影响。
13、全酶的组成和作用
全酶(holoenzyme)=酶蛋白+辅助因子
14、Km值的含义
米氏常数
15、酶促反应动力学曲线的三层含义
I.单底物、单产物反应
II.酶促反应速度一般在规定的反应条件下,用单位时间内底物的消耗量和产物的生成量来表示
III.反应速度取其初速度,即底物的消耗量很小(一般在5﹪以内)时的反应速度
IV.底物浓度远远大于酶浓度
16、各种辅酶的符号
NADHNADPH、FMN、FAD,辅酶a,四氢叶酸,生物素
17、米氏方程建立的基础
快速平衡理论
18、两大代谢过程的整体过程
糖降解,
三羧酸循环,也叫柠檬酸循环,也称Krebs循环。
这个循环以乙酰CoA与草酰乙酸缩合成含有三个羧基的柠檬酸开始,故名三羧酸循环,简称为TCA;又因循环的第一个产物是柠檬酸,故名柠檬酸循环;由著名生化学家H.Krebs发现,故称Krebs循环。
19、呼吸链上两个活动分子
NADH呼吸链和FADH2呼吸链
20、电子抑制剂的切割位点(幻灯C5,90)
22、酶的氧化特点
23、核苷酸合成两个途径
补救途径从头合成
23、糖元合成的直接供体
脂肪酸
24、脱氨有几种方式,主要是
25、DNA聚合酶的功能1、2、3
26、DNA修复的种类和主要方式
SOS修复
27、原核真核的特点
真核生物每个染色体有多个复制原点,是多复制子的复制。
原核rRNA加工:
rRNA含非转录的间隔区,其产物中含tRNA
真核rRNA加工:
5S自成体系加工少无修饰和剪接。
45S加工中含剪切和甲基化修饰,需核酸酶。
RNA聚合酶不相同
启动子不同
转录后RNA加工修饰不同
28、tRNA特点特征
●三叶草型二级结构
29、蛋白质合成,激素的种类
释放因子:
也称终止因子,在肽键延伸过程中,当终止密码子出现在核糖体的A位时,蛋白多肽链合成即终止。
释放因子使核糖体与mRNA分离,大肠杆菌有三种释放因子,真核生物中有一个释放因子eLF。
延长因子:
蛋白质合成过程中肽链延伸所需的特异蛋白质因子TU、TS和G。
起始因子有12种,但只有2种延长因子和1种终止因子
简答
1别构酶的特点
(1)常为多个亚基构成的寡聚体
(2)具有别构效应
(3)动力学曲线不符合米曼方程曲线
(4)酶分子上含两个中心或部位:
活性中心(活性部位)和别构中心(别构部位)
2简述血糖的来源和去路
来源
(1)食物中糖的消化和吸收
(2)肝糖元的分解
(3)甘油乳酸等小分子物质的异生
去路
(1)氧化为二氧化碳和水,提供能量
(2)合成糖元,储存起来
(3)转化为脂肪,氨基酸等
3简答蛋白质主链构象的主要单元有哪些和维系其结构稳定的主要力
α——螺旋,β——转角,β——折叠
4写出下列符号的中文名称
TPPFH4PiNADHCoQTCAmRNAEMPHSCoAHMSRDDPATPACP
5简答酶按其催化的反应类型可分为几类,各是什么?
1.氧化还原酶类,2.转移酶类,3.水解酶类,4.裂解酶类,5.异构酶类,6.合成酶类
6试述糖异生作用和糖酵解途径的关系,指明如何克服可能存在的障碍
非糖物质转化成糖代谢的中间产物后,在相应的酶催化下,绕过糖酵解途径的三个不可逆反应,利用糖酵解途径其它酶生成葡萄糖的途径称为糖异生作用。
7简述生物细胞DNA复制的基本特点
►复制是半保留的;
►复制起始于细菌或病毒的特点位置,真核生物有多个原点;
►复制可以朝一个方向,也可以朝两个方向进行,后者较常见;
►复制时DNA两条链都从5’端向3’端延伸;
►复制是半不连续的,前导链连续合成,滞后链形成冈崎片断(不连续合成),再连接起来;
►冈崎片断合成起始于小段RNA引物后被酶切除,缺口由脱氧核苷酸补满后,再与新生DNA链连在一起;
►复制有多种机制。
8、以丙酮酸为底物的三个酶促反应
9、简述EMP途径的调节部位是哪几个,最关键的控制步骤是哪个
10、简述G蛋白的主要结构特征
与GTP结合的异三聚体蛋白由α、β、γ三个亚基组成,其中α上有GTP、GDP和受体的结合位点,同时具有GTP活性,β和γ较保守,不易分开。
11、试述真核生物体内糖代谢和脂代谢之间的主要转化关系
1糖酵解过程中产生的磷酸二羟丙酮可转变为磷酸甘油,可作为脂肪合成过程中甘油的原料;
2糖有氧氧化产生的乙酰COA是脂肪酸和酮体的合成原料;
3脂肪酸分解产生的乙酰COA最终进入TCA;
4酮体氧化产生的乙酰COA和丙酮酸可进入TCA或糖异生;
5甘油经磷酸甘油激酶作用后转变为磷酸二羟丙酮或进入糖酵解或糖异生。
6糖有氧代谢产生的NADPH可供脂肪酸合成需要。
12、比较竞争性抑制、非竞争性抑制、反竞争性抑制对酶促反应动力学的影响
竞争性抑制,动力学:
Vmax不变;Km值增加,酶与底物的亲和力降低。
非竞争性抑制,动力学:
Vmax减小,Km不变,酶与底物亲和力不变。
反竞争性抑制,动力学:
km减少,酶对底物亲和力增加,最大反应速度减少,也无法通过改变底物浓度而改变反应抑制剂的影响。
名词解释
冈崎片段:
因为复制的方向与解链方向相反,不能顺着解链方向连续延长,这股不连续复制中的不连续片段
多酶体系:
在完整细胞的某一代谢中,由几个酶组成的反应链体系称为多酶体系
解偶联作用:
不抑制呼吸链的递氢或递电子过程,而是抑制由ADP+Pi生成ATP的磷酸化作用,使氧化产生的能量不能用于ADP磷酸化。
即使氧化与磷酸化偶联过程脱离。
同促效应:
配体相同,当一个效应物与酶结合后,影响另一相同的效应物与酶的结合
内含子:
DNA上插入而不编码的序列
增色效应:
DNA变成单链的变性过程会导致紫外线的吸收增加