测定蛋黄中铁含量综合实验.docx
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测定蛋黄中铁含量综合实验
齐鲁工业大学
化学与制药工程学院
基础化学综合实验小论文
蛋黄中铁的测定
院系名称：
化学与制药工程学院
专业班级：
应用化学2012级3班
姓名：
组号：
指导教师：
摘要：
本实验是根据Lambert-beer定律A=εbc,用工作曲线的方法测定鸡蛋黄中铁的含量；样品中的三价铁被还原为二价铁可与显色剂形成有色配合物，可用分光光度计测定吸光度；
本试验样品鸡蛋黄是用干灰化法预处理成实验试剂的。
关键词：
Lambert-beer定律、工作曲线、条件实验、样品预处理、分光光度计。
前言：
此论文是对我们之前进行的为期三天的测定鸡蛋黄的实验的结果讨论和总结，本实验主要原理就是Lambert-beer定律，这个定律应用到试验中就是利用分光光度计测定吸光度从而通过吸光度与浓度的关系确定一条标准曲线，接着只要测定样品溶液中的铁的吸光度就可以从曲线上找到对应的铁的浓度了。
此论文中包括我们做的实验的内容，所用的仪器，试剂的配制，条件试验的设计，样品的预处理，工作曲线的绘制等。
条件实验是通过单一变量的方法来确定最终的实验条件是保证实验精确不可获取的一部分，也是几部分实验内容之中时间最长的一部分，所以本实验大部分重点就在条件实验，也是本论文的重要部分。
一实验部分
（一）主要仪器试剂
仪器：
722型分光光度计、电加热炉、坩埚、马弗炉、50ml容量瓶16个、500ml容量瓶1个、500ml烧杯1个、200ml烧杯1个、10ml移液管2个、5ml移液管3个、吸耳球2个、胶头滴管1个、试剂瓶2个、25ml移液管1个。
试剂：
200µg/ml的铁标溶液（准确称取3.456g分析纯NH4Fe（So4）2·12H2O,置于一烧杯中以120ml2mol/L的HCl溶解后移入1000ml的容量瓶中），10%的盐酸羟胺（8瓶盐酸羟胺试剂用水溶解移入1000ml的容量瓶中），2mol/L的HCl（取83ml的浓盐酸溶于417ml的水中），1:
1HCl（250mlHCl溶于250ml水），8mol/LNaOH（68g固体溶于200ml水中），8µg/ml的铁标溶液（移取20ml的200µg/ml的铁标与500ml的容量瓶中），0.1%的邻二氮杂菲（取0.5g邻二氮杂菲溶于500ml水中），1mol/LNaAc（41gNaAc溶于500ml水）。
（二）实验步骤与结果
1样品预处理
取一鸡蛋黄，放入坩埚中称取质量为18.3g，用玻璃棒捣碎，放到电加热上边加热边搅拌加热到不产生烟为止，然后放入到马弗炉中加热一天一夜。
取出冷却后的坩埚，用10ml1:
1的盐酸溶解样品（注意经过马弗炉加热后的样品用肉眼观察不到，用盐酸沿着坩埚壁慢慢的冲下去），然后移到50ml容量瓶中用蒸馏水定容，这就是样品溶液。
2条件实验
1最大吸收波长的确定
准确移取5ml8µg/ml的铁标溶液于50ml的容量瓶中，加入10%盐酸羟胺1.0ml，摇匀2min后，加入5.0ml的1mol/LNaAc和3.0ml0.1%的邻二氮杂菲，定容。
做与上相同的另一份溶液，以水为参比液在光度计上测不同波长下的吸光度。
λ/nm
450.
470.
490.
500.
510.
520.
530.
550.
560.0
A1
0.110
0.132
0.142
0.147
0.153
0.147
0.122
0.048
0.013
A2
0.095
0.110
0.125
0.130
0.138
0.129
0.106
0.034
0.002
平均值
0.103
0.121
0.134
0.139
0.146
0.138
0.114
0.041
0.008
根据表格与图像可知在λ=510nm时溶液吸光度最大为0.146，所以最大吸收波长为510nm。
2显色时间的确定
配置与①相同的溶液，在λ=510nm情况下测定不同时间下的溶液吸光度。
时间/min
0.000
1.000
5.000
20.000
30.000
60.000
90.000
120.00
A
0.147
0.147
0.147
0.147
0.146
0.145
0.153
0.149
由图可知在90min时吸光度最大，所以最佳吸收时间为120min
3显色剂用量
取两组容量瓶每组各8个，编号1、2、3、4、5、6、7、8，每个容量瓶中各装入5ml的铁标溶液，再加入1.0ml的盐酸羟胺溶液，摇匀，2min后，每个容量瓶中加入5.0ml的NaAc溶液，然后把邻二氮杂菲分成8个梯度的体积量分别加入到8个容量瓶中，加入量见下表。
定容，在510nm的波长下测定吸光度。
1
2
3
4
5
6
7
8
邻二氮杂菲加入量/ml
1.5
2.0
2.5
2.8
3.0
3.2
3.5
4.0
A1
0.159
0.157
0.161
0.159
0.166
0.164
0.158
0.162
A2
0.154
0.156
0.159
0.146
0.160
0.155
0.156
0.162
平均
0.157
0.157
0.160
0.153
0.163
0.160
0.157
0.162
通过数据和图表可以看出当显色剂取3.0ml时吸光度最大，所以邻二氮杂菲应取3.0ml。
4还原剂的用量
把容量瓶按③分组，加入铁标溶液后，按一定的体积梯度加入盐酸羟胺溶液，反应2min，加入5.0ml的NaAc溶液，再加入3.0ml的邻二氮杂菲溶液，在510nm的波长下测定吸光度，记录数据。
1
2
3
4
5
6
7
8
盐酸羟胺用量/ml
0.1
0.3
0.5
0.8
1.0
1.5
2.0
2.5
A1
0.149
0.148
0.148
0.149
0.152
0.149
0.150
0.149
A2
0.147
0.148
0.149
0.151
0.152
0.153
0.151
0.152
平均
0.148
0.148
0.149
0.150
0.152
0.151
0.151
0.151
通过数据表和图可以观察到当盐酸羟胺取1.0ml时吸光度最大，所以盐酸羟胺应取1.0ml。
5缓冲液NaAc的用量
还是上面的分组方式，铁标液为5ml、10%盐酸羟胺为1.0ml，NaAc分为合适的梯度加入，邻二氮杂菲3.0ml，最大吸收波长下测吸光度，记录数据。
1
2
3
4
5
6
7
8
NaAc的用量/ml
0.5
1.0
2.0
3.0
4.0
4.5
5.0
5.5
A1
0.153
0.163
0.160
0.161
0.163
0.156
0.158
0.156
A2
0.151
0.161
0.161
0.163
0.161
0.159
0.161
0.157
平均
0.152
0.162
0.161
0.162
0.162
0.158
0.160
0.157
根据图和表，醋酸钠从0.5ml到1.0ml这一段突然上升达最大但1.0ml到2.0ml又突然降低，在3.0ml到4.0ml这一段吸光度达最大并且保持平衡，所以错酸钠用量应取3.0ml。
3标准曲线的绘制
①取13个容量瓶，根据下表配置试剂
容量瓶编号
1
（1）
2
（2）
3（3）
4（4）
5（5）
6（6）
7
8µg/ml的铁标溶液/ml
0.0
2.0
4.0
6.0
8.0
10.0
未知液5.0
10%的盐酸羟胺溶液/ml
1.0
1.0
1.0
1.0
1.0
1.0
1.0
摇匀，2min后加1mol/l的NaAc溶液/ml
3.0
3.0
3.0
3.0
3.0
3.0
3.0
0.1%邻二氮杂菲溶液/ml
3.0
3.0
3.0
3.0
3.0
3.0
3.0
②吸光度的测定，用1cm的比色皿，510nm的最大吸收波长下测定吸光度。
③标准曲线如图:
编号
1
2
3
4
5
6
标铁质量µg/50ml
0
16
32
48
64
80
A1
0.000
0.070
0.128
0.192
0.251
0.315
A2
0.000
0.068
0.127
0.191
0.250
0.312
平均值
0.000
0.069
0.128
0.192
0.251
0.314
4样品中铁含量的测定
取未知液5ml时，其吸光度A>0.3为0.446，所以最终未知液取2ml，如下表。
未知液
10%的盐酸羟胺溶液/ml
摇匀，2min后加1mol/l的NaAc溶液/ml
0.1%邻二氮杂菲溶液/ml
2.0
1.0
3.0
3.0
未知液的吸光度为0.210其所对应的浓度为Cx=53µg/50ml。
样品中的铁含量x==54；
η=x/m=1350/18300000=0.0737‰
5回收实验
按4（样品中铁含量的测定）配置溶液，在放入未知液之后再加入2ml的铁标溶液其余的与4中的一样。
测量其吸光度。
测的吸光度A=0.314，所对应的浓度y=80µg/50ml。
则回收率ω=（y-Cx）/M=（80-54）/16=100%。
二结论
本实验是测鸡蛋黄之中的铁的含量，主要原理是Lambert-Beer定律及吸光度与有色溶液之间的关系与工作曲线的方法。
最终测得样品中的铁含量η=0.0737‰，本实验的回收率ω=100%。
百分之百的回收率，本应该说实验做得很精确，但每个实验不可能百分百的精确，更何况在我们学校的条件下做得实验，不应该出现100%的回收率，我想我们做的实验有两个缺点：
1.我们一开始配铁标溶液用错了移液管导致它的浓度是8µg/ml而不是10µg/ml，浓度小误差大，导致M偏小，所以ω太大。
2.我们实验的最适显色时间
三参考文献
«基础化学实验简明教程»化学工业出版社2007
«分析化学实验»化学工业出版社2009
四讨论心得
辛苦伴随着快乐与收获，虽然这三天站着做了三天的实验，但是我也学到了很多了解到了Lambert-Beer定律的应用，也可以熟练地操作722型分光光度计，同时也锻炼了很多基础实验能力和应用办公软件的能力。
总体上来说我们做这个实验做得非常顺利，由于帮助老师配置溶液我从中又温习了一遍对电子天平的应用，注意到了更多的细节。
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