尿液标本的细菌学检验操作规程SOP微-003_精品文档.doc

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单位及实验室名称项目

汉源县人民医院检验科尿液标本的细菌学检验操作

编号：

LAB/SOP/HY/微-003

日期：

2010年5月3日

版本：

第一版，第0次修订

第1页，共3页

一、【标本采集】

1.采用无菌导尿法，取尿液5-10ml，盛于无菌试管中送检。

2.尿路感染一般采集中断尿：

其方法为：

（1）女患者先用肥皂水及1：

1000高锰酸钾水溶液冲洗外阴部及尿道口，留取中段尿；

（2）男患者应先翻转包皮冲洗，用2%红汞或1：

1000苯扎溴铵消毒尿道口，留取中段尿；（3）儿童、婴儿先消毒其阴部，将无菌小瓶直接对准尿道，待排尿后立即送检。

3.若取左右两侧肾盂尿，应由泌尿科医师采取，左右侧的标签应标记明确，以免出现错误。

4.做结核杆菌检查时，可收集24h尿液，将沉淀部分盛于洁净瓶内送检。

伤寒杆菌等其它细菌的培养检查，可取清晨第一次尿液送检。

5.膀胱穿刺：

此法主要用于厌氧菌培养。

二、【检验方法】

1.直接涂片检查

（1）一般细菌涂片：

以无菌方法吸取尿液10—15ml置于无菌试管内，经3000r/min，离心沉淀15-20分钟，倒去上清液，取沉渣涂成薄膜镜检，自然晾干，革兰染色镜检，可以得出初步报告“找到革兰ⅹ菌，形似ⅹⅹ细菌”。

（2）结核分枝杆菌：

尿液经高压消毒后，将尿液离心取沉淀物涂片，抗酸染色镜检，根据镜检可报告：

“找到或未找到抗酸杆菌”。

（3）假丝酵母菌涂片：

取尿液离心沉淀物置于洁净玻片上，加以盖玻片，轻轻加压，用高倍镜检查。

如沉渣太多可滴加100g/L的KOH溶液使其溶解后再镜检。

若发现有发亮的芽丝胞子和假菌丝，经革兰染色镜检时有酵母样细胞时，可报告“找到酵母样细胞，形似假丝酵母菌”。

否则可报告“未找到假丝酵母菌”。

2.细菌培养

（1）一般细菌培养：

将接种环灭菌后挑取离心沉淀物，分别接种在血平板及中国兰平板上，35℃培养18-24h，观察有无细菌生长，根据菌落特征和涂片、染色结果，选择相应的方法做进一步鉴定，如培养2天无细菌生长，则报告“经48h培养无细菌生长”。

（2）厌氧菌培养：

必须用膀胱穿刺尿进行培养，接种厌氧琼脂平板，置厌氧环境。

三、【检验程序】

尿液

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离心沉淀涂片染色镜检定量培养分离培养结核杆菌检查

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细菌计数厌氧环境培养普通及CO2环境培养罗氏培养基涂片镜检

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菌落观察

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生化反应试验→血清学检查←自动化鉴定

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药敏试验

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报告结果

四、【结果判定】

清洁中段尿标本中革兰阴性杆菌菌落计数>105cfu/ml，革兰阳性球菌菌落计数>104cfu/ml有诊断意义，如培养48h无细菌生长，则报告“培养48h无细菌生长”。

作者：

肖德慧

时间：

2010-5-3

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