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中国农业大学806生物化学考点分析总结图文

806生物化学考点分析(2016年)

填空题:

共五题30空(30分)

选择题:

共60题(60分)包括英文选择20题

简答题:

共6题(60分)

 

 

中国农业大学806生物化学考点分析总结

考点一:

20种必需氨基酸

 

例1:

(1)把WYTSPNE用中文名表示,指出哪些是酸性氨基酸,哪些是碱性氨基酸。

(2007)

 

(2)蛋白质中氨基酸的共性;比较Val和Glu的电荷差异;由镰刀形红细胞贫血病说明蛋白质中的保守氨基酸的重要性。

 

(3)碱性氨基酸有_____________________。

(用单字母或三字母表示)

考点二:

蛋白质等电点

例2:

氨基酸的酸碱性,其原因是什么?

设计实验证明。

并讨论-氨基,-羧基,氨基酸的pK1(羧基)pK2(氨基)和PI的含义,三者的关系。

 

考点三:

氨基酸的反应

反应类型

Sanger反应

Edman反应

茚三酮反应

反应试剂

DNFB

PITC

水合茚三酮

反应基团

氨基

氨基

氨基,羧基

反应条件

弱碱性

弱碱性

弱酸性

反应本质

烃基化

烃基化

脱羧脱氨

例3:

(1)氨基酸降解的反应主要有三种方式_____________________

(2)蛋白质中二硫键的断裂有氧化法或还原法,氧化法试剂(),还原法试剂(),蛋白质二硫键还原后易回聚为防止发生用()。

(3)实验室常用的蛋白变性试剂()、()、()。

(4)Sanger反应所使用的重要试剂是();Edman降解所用重要试剂是()

考点四:

氨基酸的分离分析(p21)

分配柱层析纸层析离子交换层析薄层层析

例4:

(1997)1、在PH=3左右,氨基酸混合液(酸性、碱性、中性三类),经强酸型阳离子交换树脂被洗脱分离,指出这三类氨基酸被洗脱的先后顺序,并说明为什么。

 

2、用阳离子交换层析洗脱Asp、Ala、Lys、Ser最先洗脱下来的

考点五:

蛋白质的一级结构、二级结构及肽链测定

例5:

(1999)1、简述蛋白质一级结构与生物功能的关系。

 

2、蛋白质二级结构的类型有________________、________________和___________________。

3、测定多肽链N-末端的常用方法有__________________、__________________和__________________等。

4、x-射线衍射鉴定蛋白质___________,质谱鉴定蛋白质___________

5、最先被阐明一级结构的蛋白质___________

6、维持二级结构的作用力____________________________________________

7、胰蛋白酶专门水解_________________________,胰凝乳蛋白酶水解______________________________,CNBr专一水解_________

8、用胰蛋白酶处理Gly-Lys-Ala-Phe-Arg-Leu-Ile后,得到几个肽段

9、X射线衍射技术测定二级结构的要求_________;NMR的要求不同之处_________

10、α-螺旋:

螺旋每转一圈上升3.6个氨基酸残基,螺距约0.54nm;相邻的螺圈之间形成链内氢键,氢键的取向几乎与中心轴平行。

典型α-螺旋一对氢键O与N之间共有13个原子(3.613),前后间隔3个残基。

螺旋的走向绝大部分是右手螺旋,残基侧链伸向外侧。

R基团的大小、荷电状态及形状均对α-螺旋的形成及稳定有影响。

11、蛋白的变性与复性

12、肌、血红蛋白共同点及各自功能

 

13、结合肌红蛋白的功能,分子结构特点和氧合曲线特征,讨论肌红蛋白可逆结合氧的分子基础。

2010

 

14、简述H+、CO2和BPG对血红蛋白结合氧的影响

 

考点六:

蛋白质的分离与鉴定

A、蛋白质的分离

1、根据溶解度差异分离蛋白

1)等点沉淀

 

2)盐溶盐析

 

3)有机溶剂沉淀

 

4)蛋白变性沉淀

 

2、根据分子大小差异分离蛋白质

1)透析和超滤

 

2)密度梯度离心

 

3)凝胶过滤层析

 

3、根据所带电荷不同分离蛋白质

(一)电泳

聚丙烯酰胺凝胶电泳、等点聚焦电泳、双向电泳

SDS-PAGE凝胶电泳(2014简答)

 

 

(二)离子交换层析

 

4、根据蛋白质吸附性

1)羟基磷灰石层析

 

2)疏水作用层析

B、蛋白质鉴定

1、蛋白质分子量鉴定

1)SDS-PAGE电泳

2)凝胶过滤

3)沉降速度法

2、Western-Blotting(2014简答)

 

C、蛋白定量测定

1)双缩脲反应

2)Folin-酚反应

3)考马斯亮兰结法

例6

(1)变性电泳和非变性电泳都可用于蛋白质研究,但基本原理和应用目的不同,讨论其主要区别。

(8分)2000

 

(2)、一个蛋白质样品,经SDS-PAGE证明有两条链,从这个实验结果能不能说:

这个蛋白质样品是不纯的?

为什么?

(8分)1998

 

(3)有一个低浓度、大体积的含盐蛋白质样品,要求得到高浓度、不含盐的蛋白质样品,试设计一实验方案,并讨论其可行性。

 

(4)在产品中提取一种蛋白质,它有强的酶的活性。

请问用下列那种方法好。

为什么?

1)

先盐析,再用SDS-PAGE法提纯。

2)先盐析,再用凝胶过滤法提纯。

2005

 

(5)蛋白免疫印记法的的基本原理和重要操作

 

(6)某蛋白质样品经过PAGE,SDS-PAGE和凝胶过滤得到一个纯的样品,在进行PAGE在100KD处聚集,进行SDS-PAGE在50KD处聚集,经过桑格法分析,经层析后得到两种不同氨基酸,试分析试验结果,并推测蛋白质的天然结构。

2007

 

(7)有一个多亚基球状蛋白质,其肽链间有二硫键。

试问由一下那种方法,可以测得该蛋白质的分子量?

请说明理由。

(1)SDS-PAGE

(2)等密度沉降(3)凝胶过滤法2008

 

(8)举例3种测定蛋白质浓度的方法,说明其原理和作用特点。

9分2009

 

(9)从样品中提取天然蛋白质,为什么要加缓冲液且要有一定离子浓度?

为什么要在低温条件下进行而不是室温?

2010

 

稀盐和缓冲系统的水溶液对蛋白质稳定性好、溶解度大、是提取蛋白质最常用的溶剂,通常用量是原材料体积的1-5倍,提取时需要均匀的搅拌,以利于蛋白质的溶解。

提取的温度要视有效成份性质而定。

一方面,多数蛋白质的溶解度随着温度的升高而增大,因此,温度高利于溶解,缩短提取时间。

但另一方面,温度升高会使蛋白质变性失活,因此,基于这一点考虑提取蛋白质和酶时一般采用低温(5度以下)操作。

为了避免蛋白质提以过程中的降解,可加入蛋白水解酶抑制剂(如二异丙基氟磷酸,碘乙酸等)。

下面着重讨论提取液的pH值和盐浓度的选择。

1、pH值

  蛋白质,酶是具有等电点的两性电解质,提取液的pH值应选择在偏离等电点两侧的pH范围内。

用稀酸或稀碱提取时,应防止过酸或过碱而引起蛋白质可解离基团发生变化,从而导致蛋白质构象的不可逆变化,一般来说,碱性蛋白质用偏酸性的提取液提取,而酸性蛋白质用偏碱性的提取液。

2、盐浓度

稀浓度可促进蛋白质的溶,称为盐溶作用。

同时稀盐溶液因盐离子与蛋白质部分结合,具有保护蛋白质不易变性的优点,因此在提取液中加入少量NaCl等中性盐,一般以0.15摩尔。

升浓度为宜。

缓冲液常采用0.02-0.05M磷酸盐和碳酸盐等渗盐溶液。

(10)常用于蛋白质沉淀的方法有_____、_____、_____。

第一章蛋白质化学-练习题

一、单项选择题

1.测得某一蛋白质样品的氮含量为0.40g,此样品约含蛋白质多少?

A.2.00g  B.2.50g  C.6.40g  D.3.00g  E.6.25g

2.下列含有两个羧基的氨基酸是:

A.精氨酸 B.赖氨酸 C.甘氨酸 D.色氨酸 E.谷氨酸

3.维持蛋白质二级结构的主要化学键是:

A.盐键 B.疏水键 C.肽键   D.氢键   E.二硫键

4.关于蛋白质分子三级结构的描述,其中错误的是:

A.天然蛋白质分子均有的这种结构

B.具有三级结构的多肽链都具有生物学活性

C.三级结构的稳定性主要是次级键维系

D.亲水基团聚集在三级结构的表面biooo

E.决定盘曲折叠的因素是氨基酸残基

5.具有四级结构的蛋白质特征是:

A.分子中必定含有辅基

B.在两条或两条以上具有三级结构多肽链的基础上,肽链进一步折叠,盘曲形成

C.每条多肽链都具有独立的生物学活性

D.依赖肽键维系四级结构的稳定性

E.由两条或两条以上具在三级结构的多肽链组成

6.蛋白质所形成的胶体颗粒,在下列哪种条件下不稳定:

A.溶液pH值大于pIB.溶液pH值小于pIC.溶液pH值等于pID.溶液pH值等于7.4E.在水溶液中

7.蛋白质变性是由于:

biooo

A.氨基酸排列顺序的改变 B.氨基酸组成的改变 C.肽键的断裂 D.蛋白质空间构象的破坏E.蛋白质的水解

8.变性蛋白质的主要特点是:

A.粘度下降    B.溶解度增加    C.不易被蛋白酶水解

D.生物学活性丧失   E.容易被盐析出现沉淀

9.若用重金属沉淀pI为8的蛋白质时,该溶液的pH值应为:

A.8   B.>8   C.<8  D.≤8    E.≥8

10.蛋白质分子组成中不含有下列哪种氨基酸?

A.半胱氨酸 B.蛋氨酸 C.胱氨酸 D.丝氨酸 E.瓜氨酸

二、多项选择题

(在备选答案中有二个或二个以上是正确的,错选或未选全的均不给分)

1.含硫氨基酸包括:

A.蛋氨酸   B.苏氨酸  C.组氨酸   D.半胖氨酸

2.下列哪些是碱性氨基酸:

A.组氨酸  B.蛋氨酸  C.精氨酸  D.赖氨酸

3.芳香族氨基酸是:

A.苯丙氨酸 B.酪氨酸 C.色氨酸 D.脯氨酸

4.关于α-螺旋正确的是:

A.螺旋中每3.6个氨基酸残基为一周

B.为右手螺旋结构

C.两螺旋之间借二硫键维持其稳定

D.氨基酸侧链R基团分布在螺旋外侧

5.蛋白质的二级结构包括:

A.α-螺旋 B.β-片层  C.β-转角 D.无规卷曲

6.下列关于β-片层结构的论述哪些是正确的:

A.是一种伸展的肽链结构

B.肽键平面折叠成锯齿状

C.也可由两条以上多肽链顺向或逆向平行排列而成

D.两链间形成离子键以使结构稳定

7.维持蛋白质三级结构的主要键是:

A.肽键 B.疏水键 C.离子键 D.范德华引力

8.下列哪种蛋白质在pH5的溶液中带正电荷?

A.pI为4.5的蛋白质   B.pI为7.4的蛋白质C.pI为7的蛋白质   D.pI为6.5的蛋白质

9.使蛋白质沉淀但不变性的方法有:

A.中性盐沉淀蛋白    B.鞣酸沉淀蛋白C.低温乙醇沉淀蛋白    D.重金属盐沉淀蛋白

10.变性蛋白质的特性有:

A.溶解度显著下降   B.生物学活性丧失C.易被蛋白酶水解   D.凝固或沉淀

三、填空题

1.组成蛋白质的主要元素有_________,________,_________,_________。

2.不同蛋白质的含________量颇为相近,平均含量为________%。

3.蛋白质具有两性电离性质,大多数在酸性溶液中带________电荷,在碱性溶液中带_______电荷。

当蛋白质处在某一pH值溶液中时,它所带的正负电荷数相待,此时的蛋白质成为_________,该溶液的pH值称为蛋白质的__________。

4.蛋白质的一级结构是指_________在蛋白质多肽链中的_________。

5.在蛋白质分子中,一个氨基酸的α碳原子上的________与另一个氨基酸α碳原子上的________脱去一分子水形成的键叫________,它是蛋白质分子中的基本结构键。

6.蛋白质颗粒表面的_________和_________是蛋白质亲水胶体稳定的两个因素。

7.蛋白质变性主要是因为破坏了维持和稳定其空间构象的各种_________键,使天然蛋白质原有的________与________性质改变。

8.按照分子形状分类,蛋白质分子形状的长短轴之比小于10的称为_______,蛋白质分子形状的长短轴之比大于10的称为_________。

按照组成分分类,分子组成中仅含氨基酸的称_______,分子组成中除了蛋白质部分还分非蛋白质部分的称_________,其中非蛋白质部分称_________。

参考答案

一、单项选择题

1.B2.E3.D4.B5.E6.C7.D8.D9.B10.E

二、多项选择题

1.AD2.ACD3.ABD4.ABD5.ABCD

6.ABC7.BCD8.BCD9.AC10.ABC

三、填空题

1.碳氢氧氮;2.氮16;3.正负两性离子(兼性离子)等电点;4.氨基酸排列顺序;5.氨基羧基肽键;6.电荷层水化膜;7.次级键物理化学生物学;8.球状蛋白质纤维状蛋白质单纯蛋白质结合蛋白质辅基

考点七:

酶的分类

例7.

类别

作用

裂合酶

异构酶

连接酶

 

考点八:

酶活力测定(2014简答)

例8.1酶活力时应遵循哪些基本原则?

为什么?

2001

 

2、测定酶活力时,通过增加反应时间能否提高酶活力?

为什么?

(8分)1999

 

3、用生物化学方法提取酶要进行酶活力跟踪,说说你对这个研究方法的看法(2013)

 

4.取1mg酶在1分钟内催化生成1000μmol产物,那么,酶活力就相当于_____。

 

考点九:

酶促动力学(2014简答)

例9..1、明底物浓度,温度和PH对酶促反应的作用规律;

(2)新开发出一种新型酶,设计一实验说明ABC三种物质与酶亲和力大小。

16分2009

 

2、从酶的角度分析酒精过敏者的过敏症状原因

 

3、简述Km值得意义以及作用

 

4、关于温度对酶促反应速度的影响,下列叙述错误的是

A.升高温度可加快酶促反应速度,但也可使酶逐步变性

B.在最适温度时,酶反应速度最快

C.最适温度时没的特征常数

D.最适温度与酶的作用时间有关

5、当[S]<

A.与[S]成正比B.与[S]无关

C.与Km成正比D.与[E]成正比

6、有机汞,有机砷毒性的抑制酶的();有机磷毒性的抑制酶的();烷化剂毒性的抑制酶的();

7、米氏方程的表达式为__________________________,它表达了__________________关系,其中的________是酶的特征常数

8、以酶的1/V为纵坐标,以1/[s]为横坐标,所得直线在纵坐标上的截距为_____。

9、溶菌酶活性中心两个重要氨基酸残基是_________________和_________________可用单字母或三字母表示。

10、NAD+和NADP+分子结构的区别是后者有一个____________________基团。

11、维生素B2构成的辅基是____________,参加________反应。

 

12、画图简述酶的反应初速度,并结合图说明为何不能通过延长反应时间来加快酶的最大催化速度2006

 

13、

 

14、酶的抑制剂有哪些类型?

简述各类型的作用特点。

(8分)1998

 

考点十:

酶的催化机理

例10.1、什么是酶的活性中心?

有一个酶,含有一个半胱氨酸残基,设计一个实验,验证该氨基酸与酶的催化作用或专一性。

2010

 

2.酶活性中心的特点,测定酶活性中心的两种方法2011

 

3.什么是酶的专一性?

指出两种酶作用专一性的假说,并说明其中一种的重要观点。

 

4.酶的专一性是指

A.酶与辅酶的特异结合

B.酶对其所催化的底物或反应有选择性

C.酶在细胞中的定位是特异性的

D.酶催化反应的机制各不相同

考点十一:

酶的活性调节

例11.画出普通酶和别构酶初始速度和底物浓度间的动力学曲线,并分别加以说明。

2007

 

酶测试题

一、单项选择题(在备选答案中只有一个是正确的)

1.关于酶的叙述哪项是正确的?

A.所有的酶都含有辅基或辅酶B.只能在体内起催化作用C.大多数酶的化学本质是蛋白质

D.能改变化学反应的平衡点加速反应的进行E.都具有立体异构专一性(特异性)

2.酶原所以没有活性是因为:

A.酶蛋白肽链合成不完全B.活性中心未形成或未暴露C.酶原是普通的蛋白质

D.缺乏辅酶或辅基E.是已经变性的蛋白质

3.磺胺类药物的类似物是:

A.四氢叶酸B.二氢叶酸C.对氨基苯甲酸D.叶酸E.嘧啶

4.关于酶活性中心的叙述,哪项不正确?

A.酶与底物接触只限于酶分子上与酶活性密切有关的较小区域

B.必需基团可位于活性中心之内,也可位于活性中心之外

C.一般来说,总是多肽链的一级结构上相邻的几个氨基酸的残基相对集中,形成酶的活性中心

D.酶原激活实际上就是完整的活性中心形成的过程

E.当底物分子与酶分子相接触时,可引起酶活性中心的构象改变

5.辅酶NADP+分子中含有哪种B族维生素?

A.磷酸吡哆醛B.核黄素C.叶酸D.尼克酰胺E.硫胺素

6.下列关于酶蛋白和辅助因子的叙述,哪一点不正确?

A.酶蛋白或辅助因子单独存在时均无催化作用B.一种酶蛋白只与一种辅助因子结合成一种全酶

C.一种辅助因子只能与一种酶蛋白结合成一种全酶D.酶蛋白决定结合酶蛋白反应的专一性

E.辅助因子直接参加反应

7.如果有一酶促反应其〔8〕=1/2Km,则v值应等于多少Vmax?

A.0.25B.0.33C.0.50D.0.67E.0.75

8.有机磷杀虫剂对胆碱酯酶的抑制作用属于:

A.可逆性抑制作用B.竞争性抑制作用C.非竞争性抑制作用D.反竞争性抑制作用E.不可逆性抑制作用

9.关于pH对酶活性的影响,以下哪项不对?

A.影响必需基团解离状态B.也能影响底物的解离状态C.酶在一定的pH范围内发挥最高活性

D.破坏酶蛋白的一级结构E.pH改变能影响酶的Km值

10.丙二酸对于琥珀酸脱氢酶的影响属于:

A.反馈抑制B.底物抑制C.竞争性抑制D.非竞争性抑制E.变构调节

11.Km值的概念是:

A.与酶对底物的亲和力无关B.是达到Vm所必须的底物浓度C.同一种酶的各种同工酶的Km值相同

D.是达到1/2Vm的底物浓度E.与底物的性质无关

二、多项选择题

(在备选答案中有二个或二个以上是正确的,错选或未选全的均不给分)

1.关于酶的竞争性抑制作用的说法哪些是正确的?

A.抑制剂结构一般与底物结构相似B.Vm不变C.增加底物浓度可减弱抑制剂的影响D.使Km值增大

2.关于酶的非竞争性抑制作用的说法哪些是正确的?

A.增加底物浓度能减少抑制剂的影响B.Vm降低C.抑制剂结构与底物无相似之处D.Km值不变

3.酶与一般催化剂的不同点,在于酶具有:

A.酶可改变反应平衡常数B.极高催化效率C.对反应环境的高度不稳定D.高度专一性

4.FAD分子组成是:

A.含有维生素B2B.是一种二核苷酸C.含有GMP组分D.含有ADP组分

5.关于同工酶,哪些说明是正确的?

A.是由不同的亚基组成的多聚复合物B.对同一底物具有不同的Km值

C.在电泳分离时它们的迁移率相同D.免疫学性质相同

6.常见的酶活性中心的必需基团有:

A.半胱氨酸和胱氨酸的巯基B.组氨酸的咪唑基C.谷氨酸,天冬氨酸的侧链羧基D.丝氨酸的羟基

7.酶的专一性可分为:

A.作用物基团专一性B.相对专一性C.立体异构专一性D.绝对专一性

8.有关变构酶的叙述是:

A.大多数变构酶是多聚复合物B.是体内快速调节酶含量的重要方式

C.可有调节亚基和催化亚基D.酶从一种构象转变为另一种构象时,酶活性发生改变

9.影响酶促反应的因素有:

A.温度,pH值B.作用物浓度C.激动剂D.酶本身的浓度

10.酶的活性中心是指:

A.是由必需基团组成的具有一定空间构象的区域B.是指结合底物,并将其转变成产物的区域

C.是变构剂直接作用的区域D.是重金属盐沉淀酶的结合区域

三、填空题

1.结合蛋白酶类必需由__________和___________相结合后才具有活性,前者的作用是_________,后者的作用是__________。

2.酶促反应速度(v)达到最大速度(Vm)的80%时,底物浓度[S]是Km的___________倍;而v达到Vm90%时,[S]则是Km的__________倍。

3.不同酶的Km________,同一种酶有不同底物时,Km值________,其中Km值最小的底物是__________。

4.__________抑制剂不改变酶反应的Vm。

5.__________抑制剂不改变酶反应的Km值。

6.乳酸脱氢酶(LDH)是_______聚体,它由________和_________亚基组成,有________种同工酶,其中LDH1含量最丰富的是__________组织。

7.L-精氨酸只能催化L-精氨酸的水解反应,对D-精氨酸则无作用,这是因为该酶具有_________专一性。

8.酶所催化的反应称________,酶所具有的催化能力称_________。

参考答案

一、单项选择题

1.C2.B3.C4.C5.D6.C7.B8.E9.D10.C

二、多项选择题

1.ABCD2.BCD3.BCD4.ABD5.AB

6.BCD7.BCD8.ACD9.ABCD10.AB

三、填空题

1.酶蛋白辅酶(辅基)决定酶的促反应的专一性(特异性)传递电子、原子或基团即具体参加反应2.4倍9倍3.不同也不同酶的最适底物4.竞争性5.非竞争性6.四HM5种心肌7.立体异构8.酶的反应酶的活性

 

考点十二:

脂的分类

例12.根据功能对脂类进行分类(2013)

 

1.甘油磷脂的种类:

____________________________________

考点十三:

生物膜结构及功能

例13.简述生物膜的流动性及影响因素,设计实验证明蛋白的流动性

 

2.简述LDL的受体介导的内吞作用

 

3.简述Na+,K+-ATP酶的构象变化以及作用变化

 

4.简述胞外信号的跨膜转导

 

5.简述G-蛋白的激活与抑制

6、简述腺苷酸环化酶信号途径(级联反应)

 

7.简述有机氟磷酸盐以及有机磷农药的作用机理

 

8.物质跨生物膜的主动运输和被动运输有什么主要区别?

 

9.生物膜脂构成__________结构,生物膜的基本特征是__________和___________。

10.体液中的主要阳离子是_________________,细胞内的主要阳离子是_________________。

考点十四:

ATP是生物系统中自由能的“通用货币”

例14.什么是ATP?

简述其生物功能。

2005

 

考点十五:

线粒体电子传递链(2014简答)

例15.1、讨论呼吸链的组成及电子传递顺序。

2、属于高能磷酸化合物的是

A、ADP,磷酸肌醇,磷酸精氨酸?

烯醇式…B、烯醇式…,焦磷酸

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