新课标高中生物选修三《基因工程的基本操作程序》导学案.docx
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新课标高中生物选修三《基因工程的基本操作程序》导学案
1.2基因工程的基本操作程序
[教学目标]
1、简述基因工程原理及基本操作程序。
2、尝试设计某一转基因生物的研制过程。
[教学重点和难点]
1、教学重点
基因工程基本操作程序的四个步骤。
2、教学难点
(1)从基因文库中获取目的基因。
(2)利用PCR技术扩增目的基因。
[教学过程]
一、目的基因的获取:
1.目的基因:
符合人们需要的,编码蛋白质的。
2.获取目的基因的方法
(1)从基因文库中获取目的基因
①基因文库:
将含有某种生物不同基因的许多,导人受体菌的群体中,各个受体菌分别含有这种生物的不同基因,称为基因文库。
基因组文库:
含有一种生物的基因
②种类
cDNA文库:
含有一种生物
的基因
③目的基因的获取
根据基因的有关信息:
基因的序列、基因在上的位置、基因的产物mRNA、基因的产物蛋白质等特性获取目的基因。
(2)利用PCR技术扩增目的基因。
①PCR:
是一项在生物体外特定DNA片段的核酸合成技术。
②条件:
已知目的基因的序列。
③过程:
目的基因DNA受热形成,与结合,然后在______的作用下进行延伸形成DNA。
④方式:
指数扩增=2n(n为扩增循环的次数)
(3)人工合成法:
基因较小,核苷酸序列已知,可以人工合成。
例1下列获取目的基因的方法中需要模板链的是()
①从基因文库中获取目的基因②利用PCR技术扩增目的基因③反转录法④通过DNA合成仪利用化学方法人工合成
A.①②③④B.①②③C.②③④D.②③
二、基因表达载体的构建
1.表达载体的组成:
目的基因+++标记基因等。
2.启动子:
位于基因的,它是结合
的部位,驱动基因转录产生mRNA。
3.终止子:
位于基因的,终止。
4.表达载体的功能:
使目的基因在受体细胞中稳定存在,并且给下一代;使目的基因____和发挥作用。
5.标记基因:
受体细胞是否含有目的基因。
6.不同的受体细胞及目的基因导入受体细胞的方法不同,基因表达载体的构建上也会有所差别。
例2科学家在培育抗虫棉时,经过了许多复杂的过程和不懈的努力,才获得成功。
起初把苏云金芽孢杆菌的抗虫基因插入载体质粒中,然后导入棉花的受精卵中,结果抗虫基因在棉花体内没有表达。
然后在插入抗虫基因的质粒中插入启动子(抗虫基因首端),导人棉花受精卵,长成的棉花植株还是没有抗虫能力。
科学家又在有启动子、抗虫基因的质粒中插入终止子(抗虫基因末端),导入棉花受精卵,结果成长的植株,有了抗虫能力。
由以上过程推知,作为目的基因的运载体应具备的结构是()
A.目的基因、启动子B.目的基因、终止子
C.目的基因、启动子、终止子D.目的基因、启动子、终止子、标记基因
三、将目的基因导入受体细胞
(一)转化:
目的基因进人受体细胞内,并在受体细
胞内维持稳定和的过程。
(二)方法
1.将目的基因导入植物细胞
(1)农杆菌转化法
①农杆菌特点:
易感染植物和裸子植物,对___________植物没有感染力;Ti质粒的可转移至受体细胞,并整合到受体细胞的染色体上。
②转化:
目的基因插人
农杆菌→导入植物细胞→目的基因整合到植物细胞染
色体上→目的基因的遗传特性得以稳定维持和表达。
(2)基因枪法
基因枪法:
是单子叶植物中常用的一种基因转化方法,但是成本较高。
(3)花粉管通道法
花粉管通道法:
这是我国科学家独创的一种方法,是一种十分简便经济的方法。
(我国的转基因抗虫棉就是用此种方法获得的)
2.将目的基因导入动物细胞
(1)方法:
注射技术。
(2)操作程序:
目的基因表达载体→取卵(受精卵)→显微注射→注射了目的基因的受精卵移植到____性动物的_________________________内发育→新性状动物。
3.将目的基因导人微生物细胞
(1)原核生物特点:
繁殖快、多为单细胞、遗传物质相对较少等。
(2)转化:
处理细胞→细胞→表达载体与感受态细胞混合→
_________细胞吸收DNA分子。
例3采用
基因工程的方法培育抗虫棉,下列导入目的基因的做法正确的是()
①将毒素蛋白注射到棉受精卵中②将编码毒素蛋白的DNA序列,注射到棉受精卵中③将编码毒素蛋白的DNA序列,与质粒重组,导人细菌,用该细菌感染棉的体细胞,再进行组织培养④将编码毒素蛋白的DNA序列,与细菌质粒重组,注射到棉的子房并进入受精卵
A、①②B、②③C、③④D、①④
四、目的基因的检测与鉴定
1.检测
(1)方法:
标记了的、抗原抗体杂交。
(2)内容
①检测转基因生物染色体的DNA是否插入。
②检测目的基因是否转录。
③检测目的基因是否翻译成。
2.鉴定:
鉴定、抗病鉴定等。
例4下图是将人的生长激素基因导人细菌B细胞内制造“工程菌”的示意图,所用载体为质粒A。
已知细菌B细胞内不含质粒A,也不含质粒A上的基因,质粒A导人细菌B后,其上的基因能得到表达。
请回答下列问题:
(1)目前把重组质粒导入细菌细胞时,效率还不高,导入完成后得到的细菌,实际上有的根本没有导入质粒,有的导入的是普通质粒A,只有少数导入的是重组质粒。
以下步骤可鉴别得到的细菌是否导人了质粒A或重组质粒:
将得到的细菌涂布在一个含有氨苄青霉素的培养基上,能够生长的就导人了质粒A或重组质粒,反之则没有。
使用这种方法鉴别的原因是。
(2)若把通过鉴定证明导人了普通质粒A或
重组质粒的细菌放在含有四环素的培养基上培养,会发生的现象是。
原因是:
_______________________________________________
_____________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________。
(3)导人细菌B细胞中的目的基因成功表达的标志是什么?
_________________________________________________________________________________________________________________________________________。
课堂巩固:
一、选择题:
1、下列属于获取目的基因的方法的是()
①利用mRNA反转录形成②从基因组文库中提取
③从受体细胞中提取④利用PCR技术
⑤利用DNA转录⑥人工合成
A.①②③⑤B.①②⑤⑥C.①②③④D.①②④⑥
2、不属于目的基因与运载体结合过程的是()
A.用一定的限制酶切割质粒,露出黏性末端
B.用同种限制酶切割目的基因,露出黏性末端
C.将切下的目的基因插
入到质粒的切口
处
D.将重组DNA引入到受体细胞中进行扩增
3、分辨基因工程是否成功是通过()
A.提取目的基因B.基因表达载体的构建
C.目的基因导人受体细胞D.目的基因的检测与鉴定
4.下列不属于获取目的基因的方法的是()
A.利用DNA连接酶复制目的基因B.利用DNA聚合酶复制目的基因
C.从基因文库中获取目的基因D.利用PCR技术扩增目的基因
5.哪项不是基因表达载体的组成部分()
A.启动子B.终止密码C.标记基因D.目的基因
6.在胰岛素的基因与质粒形成重组DNA分子的过程中,下列哪组是所需要的()
①同一种限制酶切割两者;②不需同一种限制酶切割两者;③加
入适量的DNA连接酶;④不需加DNA连接酶
A.①③B.①④C.②④D.②③
7.下列说法中正确的是()
A.基因表达载体的构建方法是一致的
B.标记基因也叫做抗生素基因
C.显微注射技术是最为有效的一种将目的基因导入植物细胞的方法
D.大肠杆菌是常用的微生物受体
8、下列哪项不是将目的基因导入植物细胞的方法()
A.基因枪法B.显微注射法C.农杆菌转化法D.花粉管通道法
9.基因工程中常用的受体细胞不包括()
A.人体细胞B.动物细胞C.植物细胞D.微生物细胞
10.基因工程中科学家常采用细菌、酵母菌等微生物作为受体细胞。
下列不属于这样做的原因的是()
A.结构简单,多为单细胞B.繁殖速度快
C.遗传物质含量少D.性状稳定,变异少
11.要检测目的基因是否成功的插入了受体DNA中,需要用基因探针,基因探针是指()
A.用于检测疾病的医疗器械
B.用放射性同位素或荧光分子等标记的DN
A分子
C.合成
一球蛋白的DNA
D.合成苯丙羟化酶的DNA片段
12.基因工程的正确操作步骤是()
①构建基因表达载体②将目的基因导入受体细胞
③检测目的基因的表达是否符合特定性状要求④取目的基因
A.③②④①B.②④①③C.④①②③D.③④①②
13.下列有关基因工程技术的叙述,正确的是()
A.重组DNA技术所用的工具酶是限制酶、DNA连接酶和基因进入受体细胞的载体
B.所有的限制酶都只能识别同一种特定的核苷酸序列
C.选用细菌作为重组质粒的受体细胞主要是因为细菌繁殖快、遗传物质少
D.只要目的基因进入受体细胞就能成功实现表达
14.基因工程中不会出现()
A.DNA连接酶将黏性末端的碱基连接起来
B.限制性内切酶可用于目的基因的获取
C.目的基因必须有载体导入受体细胞
D.人工合成目的基因不用限制性核酸内切酶
15、下列哪项不是基因工程技术()
A.基
因转移B.基因扩增C.基因检测D.基因表达
(二)填空题:
16.根据下列所给材料回答问题:
材料一把人的胰岛素基因拼接到大肠杆菌的质粒上,然后导入大肠杆菌内,产生出人的胰岛素。
材料二把萤火虫的荧光基因转入烟草体内,培育荧光的烟草。
材料三有人把蜘蛛产生丝腺蛋白的基因转入羊的细胞屯,在羊分泌的乳汁中加入某种物质后,可抽出细丝,这种细丝可望用作手术的缝合线。
(1)上述生物新品种的产生运用了技术。
(2)一种生物的基因在另一种生物体内能够表达,而不影响其他基因的表达,这说明基因是有___________效应的片段,具有一定的性;同时可以说明各种生物共用一套。
(3)上述技术所用的工具酶有。
(4)材料三中所用缝合线与普通缝合线相比有何优点?
。
(5)可遗传的变异分为三种:
、、,而基因工程改变一个物种的基因属于。
(6)从上述所给的材料,不能得出哪一结论()
A.动植物之间可以相互转基因
B.真核生物与原核生物之间可以相互转基因
C.基因工程可以定向地改变生物的基因
D.转基因生物的出现对生物的进化是有利的
17.人体受病毒刺激后,可以产生干扰素,干扰素分为
、
、
三类,1980年,生物学家成功破译了
干扰素的全部遗传信息,并运用插入质粒的方法,用大肠杆菌生产得到干扰素可以用于治疗肝炎和肿瘤,回答下列问题:
(1)上述材料中涉及的现代生物技术有。
(2)在利用大肠杆菌生产干扰过程中,目的基因是,所用载体是。
表达载体的结构组成包括、、、。
(3)目的基因在大肠杆菌中表达时,必须经过和过程。