人教版细胞工程单元检测6.docx
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人教版细胞工程单元检测6
2017届人教版细胞工程单元检测
1．（2014年浙江）下列关于动物细胞培养的叙述，正确的是（ ）
A．连续细胞系的细胞大多具有二倍体核型
B．某些癌细胞在合适条件下能逆转为正常细胞
C．由多个祖细胞培养形成的细胞群为一个克隆
D．未经克隆化培养的细胞系细胞具有相同的性状
【答案】B
【解析】连续细胞系的细胞一般都培养了多次，二倍体核型发生了改变，大多数细胞具有异倍体核型；细胞癌变是由基因突变引起的，如果癌细胞在一定条件下（如用秋水仙胺等药物治疗），则有可能恢复成正常细胞；细胞克隆的最基本的要求是：
必须确定所建立的克隆来源于单个细胞。
未经克隆化培养的细胞系具有异质性。
2．（2013年重庆）如图是单克隆抗体制备流程的简明示意图。
下列有关叙述，正确的是（ ）
A．①是从已免疫的小鼠脾脏中获得的效应T淋巴细胞
B．②中使用胰蛋白酶有利于杂交瘤细胞的形成
C．③同时具有脾脏细胞和鼠骨髓瘤细胞的特性
D．④是经筛选培养获得的能分泌特异性抗体的细胞群
【答案】D
【解析】本题主要考查单克隆抗体制备的相关知识。
①是从已免疫的小鼠脾脏中获得的浆细胞；②中使用聚乙二醇或灭活的病毒等，有利于杂交瘤细胞的形成；③同时具有浆细胞和骨髓瘤细胞的特性；④是经筛选培养获得的能分泌所需特异性抗体的细胞群，故D项正确。
3．（2015年浙江杭州外国语学校期中）下列关于克隆技术相关知识的叙述，其中正确的是（ ）
A．正常植物体细胞杂交，只能培育出杂种细胞，不能培育出杂种植株
B．利用植物的花粉人工培育出单倍体植物，体现了植物细胞的全能性
C．将鼠骨髓瘤细胞与经过免疫的B细胞融合成杂交瘤细胞的技术属于动物细胞克隆
D．细胞系一般具有恒定的染色体组型、同种酶类型和生化特性
【答案】B
【解析】正常植物体细胞杂交，先融合形成杂种细胞，再培育出杂种植株，A错误；花药离体培养得到的单倍体植株体现了植物细胞的全能性，B正确；杂交瘤细胞的技术属于细胞融合，C错误；细胞株一般具有恒定的染色体组型、同种酶类型和生化特性，D错误。
4．（2015年天津六校第一次联考）下图为“番茄—马铃薯”杂种植株的培育过程，其中①～⑤表示过程，字母表示细胞、组织或植株。
下列说法正确的是（ ）
A．①表示低渗溶液中用酶解法处理植物细胞获得原生质体
B．e是一团有特定结构和功能的薄壁细胞
C．可根据质壁分离现象鉴别杂种细胞的细胞壁是否再生
D．植物体细胞杂交技术成功的标志是产生含有细胞壁的杂种细胞
【答案】C
【解析】获得植物的原生质体，操作一般在等渗溶液中进行，若在低渗溶液中进行，则去掉细胞壁的原生质体会因吸水而涨破，A错误；e为细胞经植物组织培养的脱分化后形成的愈伤组织，是未分化的细胞，B错误；可根据质壁分离现象鉴别杂种细胞的细胞壁是否再生，C正确；融合后的杂种细胞再生出新的细胞壁是原生质体融合完成的标志，而非植物体细胞杂交技术成功的标志，D错误。
5．下图表示抗人体胃癌的单克隆抗体的制备过程，有关叙述不正确的是（ ）
A．图中给实验小鼠注射的甲是能与抗人体胃癌抗体特异性结合的抗原
B．利用聚乙二醇、灭活的病毒和电刺激等方法均可诱导细胞融合获得乙
C．用特定的选择培养基对乙进行筛选，融合细胞均能生长，未融合细胞均不能生长
D．对丙需进行克隆化培养和抗体检测，经多次筛选后可获得大量能分泌所需抗体的丁
【答案】C
【解析】图中给实验小鼠注射的甲是能与抗人体胃癌抗体特异性结合的抗原；诱导动物细胞融合的物质或方法有灭活的病毒、聚乙二醇和电激等；用特定的选择培养基进行筛选，未融合的亲本细胞和融合的具有同种核的细胞会死亡，只有融合的杂种细胞才能生长。
6．（原创）下图所示为科学家利用细胞工程培育“白菜—甘蓝”杂种植株的过程，据图回答：
（1）图中A、B的制备，需要除去____________，该过程常使用的酶是__________________________。
（2）由原生质体A和原生质体B形成原生质体C的过程中，常使用的诱导剂是____________，该过程体现了细胞膜具有______________性。
（3）由细胞D得到愈伤组织的过程叫做________________________；
由愈伤组织得到根、芽等器官的过程叫做__________。
由细胞D得到一个完整的杂种植株，需要采用的细胞工程技术是______________，该过程体现了细胞D具有______________性。
（4）上述育种方法与传统杂交育种方法相比优点在于__________________________________________。
【答案】
（1）细胞壁 纤维素酶和果胶酶
（2）聚乙二醇（PEG） 流动
（3）脱分化 再分化 植物组织培养 全能
（4）克服远缘杂交的不亲和性（障碍）
【解析】在进行植物体细胞杂交之前，必须用纤维素酶和果胶酶除去细胞壁，目的是获得具有活力的原生质体。
诱导原生质体的融合常用的促融剂是聚乙二醇（PEG）；原生质体融合的过程体现了细胞膜具有流动性的特点。
由一个已分化的细胞得到愈伤组织的过程叫做脱分化，由愈伤组织得到各种器官的过程则叫再分化。
由单个植物细胞得到完整个体常需要采用植物组织培养技术，该过程体现了植物细胞具有全能性。
7．根据以下资料回答问题。
资料：
美国科学家已经在实验室中成功培育出膀胱，并顺利移植到7名患者体内。
该培育过程是：
从患者的膀胱上取下普通邮票一半大小的活细胞样本，膀胱从外到内由三层构成，即肌肉、胶原质和膀胱上皮，将活细胞样本中胶原质剥下，将肌肉细胞和膀胱上皮细胞分别置于不同的培养皿中培养，约一周后将这些细胞放在一些海绵形状的可生物降解的由胶原质制成的“支架”上继续培养，再过7周左右，原先的数万个细胞已经繁殖到15亿个左右，布满“支架”，膀胱上皮在内，肌肉在外。
医生将“新膀胱”移植到患者膀胱的上面。
这样新器官会继续生长并与老器官“重组”取代老器官中丧失功能的部分。
培育过程如下图所示。
（1）a过程属于细胞工程中的______________，其培养基与植物组织培养的培养基含有的营养成分的主要不同点是前者含有__________。
（2）b过程由数万个细胞繁殖到15亿个细胞是______的结果，上述过程中不但需要无菌、无毒的环境，适宜的营养，还需要适宜的__________、__________环境。
（3）新器官与老器官的“重组”__________（填“是”或“不是”）基因重组，因为新器官与老器官的__________相同。
（4）“新膀胱”移植后，__________（填“会”或“不会”）成为抗原，因为新老器官具有__________蛋白质等物质。
（5）除上述方法外，还可将患者的体细胞核移入去核的__________中，这是利用体细胞__________技术，形成相应组织、器官。
【答案】
（1）动物细胞培养 动物血清
（2）有丝分裂（细胞分裂） 温度和pH 气体 （3）不是 遗传物质 （4）不会
相同的 （5）卵母细胞 核移植
【解析】
（1）图中a过程为动物细胞培养过程，动物细胞培养基成分与植物组织培养的培养基含有的营养成分的主要不同点是前者中含动物血清。
（2）动物细胞培养时，不但需要无菌、无毒的环境，适宜的营养，还需要适宜的温度、pH及气体环境。
（3）由于新器官与老器官的遗传物质相同，新器官与老器官的“重组”不是基因重组。
（4）因为新老器官细胞具有相同的表面抗原等物质，“新膀胱”移植后不会成为抗原。
（5）利用体细胞核移植技术将患者的体细胞核移入去核的卵母细胞中，重组细胞经培养也可形成相应组织、器官。
8．（2015年浙江外国语学校期中）下图是某实验室做的通过动物纤维母细胞等获得单抗的实验研究。
据图回答相关问题：
（1）X、Y、Z细胞的名称分别是______________________、______________________、______________________。
（2）①过程类似于植物组织培养技术中的__________过程。
与纤维母细胞相比，诱导干细胞的全能性较______。
②过程的实质是____________________________________。
（3）③过程中需用到的生物诱导剂是______________________________________。
（4）④处需要筛选，其目的是_________________________________。
（5）用32P标记的核苷酸的培养基培养Z细胞，细胞质中能测到32P的细胞器有__________和__________。
【答案】
（1）骨髓瘤细胞 抗原刺激过的B细胞 杂交瘤细胞
（2）脱分化 高 基因的选择性表达 （3）灭活的病毒 （4）筛选出能产生特异性抗体的杂交瘤细胞 （5）核糖体 线粒体
【解析】
（1）X、Y、Z细胞的名称分别是骨髓瘤细胞、抗原刺激过的B细胞、杂交瘤细胞。
（2）①过程是将甲小鼠的纤维母细胞诱导成诱导干细胞，相当于植物组织培养技术中的脱分化过程，与纤维母细胞相比诱导干细胞的全能性较高。
②过程是诱导干细胞分化成各种体细胞，细胞分化的实质是基因选择性表达。
（3）诱导动物细胞融合，需用到的生物诱导剂是灭活的病毒。
（5）核苷酸是核酸的基本组成单位，动物细胞中线粒体含有少量DNA，核糖体是由蛋白质和rRNA构成的。
因此用32P标记的核苷酸的培养基培养Z细胞，则在线粒体和核糖体中能检测到32P。
9．（2015年江西南昌模拟）人的HPRT基因缺陷（HPRT－）细胞和小鼠的TK基因缺陷（TK－）细胞在HAT培养基中都不能存活。
杂种细胞在分裂中随机丢失人的染色体，但保留所有的鼠染色体。
因此，利用人鼠细胞融合技术可以将人类基因定位于特定的染色体上。
（1）将人的HPRT－细胞与小鼠的TK－细胞用____________促进融合，然后培养在__________培养基中，最终筛选出人鼠杂种细胞。
（2）将存活下来的杂种细胞进行__________培养，获得不同的细胞株，用__________染色后镜检，观察结果如下：
细胞株编号
1
2
3
4
5
6
所含人染
色体编号
11,14，
17,22，
7,11，
14,17
5,7，
17,21，
2,9，
11,17
5,17，
18,20
2,5，
17,19
由此可推测__________基因在__________染色体上。
（3）如果要确定人鸟苷酸（UMP）激酶基因所在染色体，应选择UMP激酶缺陷的__________（填“人”或“鼠”）细胞与相应细胞杂交，这样的方法__________（填“能”或“不能”）对小鼠的基因进行定位。
【答案】
（1）PEG（或灭活病毒） 选择（HAT）
（2）单克隆 碱性染料（或龙胆紫溶液或醋酸洋红液） TK 17号
（3）鼠 不能
【解析】人的HPRT－细胞与小鼠的TK－细胞的融合属于动物细胞融合技术，可用聚乙二醇或灭活的病毒促进融合。
从试题信息“人的HPRT基因缺陷（HPRT－）细胞和小鼠的TK基因缺陷（TK－）细胞在HAT培养基中都不能存活”可知，HAT培养基属于选择培养基。
（2）将存活下来的杂种细胞进行的培养，是让单个细胞进行有丝分裂产生后代的过程，这一培养称为单克隆培养，观察染色体需用碱性染料染色后再用显微镜观察。
通过试题信息可知，能存活的杂种细胞既要含有HPRT基因，也要含有TK基因，其中，TK基因由人的细胞提供，因此，存活下来各细胞株都含有的染色体很可能就是TK基因所在的染色体，即17号染色体。
（3）因为要确定人的鸟苷酸（UMP）激酶基因所在染色体，所以，要选择UMP激酶缺陷的鼠与具有鸟苷酸（UMP）激酶基因的人细胞杂交，能在选择培养基中存活并分裂的细胞，一定含有携带人鸟苷酸（UMP）激酶基因的染色体；这样的方法只能确定人的基因所在的染色体，而不能对小鼠的基因进行定位。
10．（2015年河北省唐山期末考试）植物组织培养技术可以培育出大量不含病毒的幼苗，提高作物产量。
下图是培育脱毒草莓的基本过程，请回答：
植物茎尖→A→愈伤组织→B→丛芽→草莓幼苗
（1）利用组织培养技术培育脱毒草莓幼苗的原理是________________。
培育时，一般选取植物茎尖作材料，其依据是
__________________________________________________________________________________________。
（2）组织培养中，细胞从分化状态转变为未分化状态的过程为__________（填“A”或“B”）。
（3）为提高脱毒效果，某研究小组进行了改良热处理法（利用病毒粒子不耐高温的特点，使病毒灭活）脱毒实验，实验结果如下：
温度
（℃）
接种
个数
成活
个数
成活率
（%）
脱毒效果（电镜
检测病毒个数）
35
21
12
57.14
2
40
19
9
47.37
0
42
18
1
5.56
0
45
20
0
0.00
－
50
20
0
0.00
－
常温
24
15
62.50
2
①在该实验中，因变量是_____________________________，
常温组的作用是____________。
②实验结果表明：
在一定范围内，随着处理温度的升高，茎尖的成活率随之______________；在______℃温度处理后，得到的试管苗脱毒效果最好。
综合考虑，实验时应用______℃温度处理最理想。
【答案】
（1）细胞的全能性 不含病毒（或含病毒极少）
（2）A
（3）①成活率及脱毒效果 做对照
②下降 40～42 40
【解析】
（1）植物组织培养技术的原理是植物细胞具有全能性。
茎尖等分生组织几乎不含病毒，是培育无病毒植株的理想材料。
（2）A为脱分化，B为再分化。
脱分化又称去分化。
是指分化细胞失去特有的结构和功能变为具有未分化细胞特性的过程。
（3）该实验中，自变量为温度及接种个数，因变量为成活率及脱毒效果。
常温组是与其余的温度做对照。
表格中数据可看出，从35℃升至50℃，茎尖的成活率逐渐降为0。
在40～42℃，电镜下未检测出病毒，表明脱毒效果最好，但40℃比42℃成活率高得多，故选用40℃处理最理想。
11．（2015年江苏南通第三次调研测试）H18杂交瘤细胞产生的抗人肝癌单克隆抗体HAb18对于人体肝癌的靶向治疗具有重要的意义，但H18杂交瘤细胞在培养过程中的凋亡现象制约着细胞的高密度培养以及生产能力的提高。
通过基因工程可改造H18杂交瘤细胞的抗凋亡能力，相关研究步骤如下：
①细胞培养：
将人肝癌细胞在含10%小牛血清的培养液中培养。
一段时间后，用胰蛋白酶处理培养液，漂洗后调整细胞悬液浓度为1×107个·mL－1。
②免疫小鼠：
向小鼠体内注射肝癌细胞悬液0.8mL，以后每隔2周免疫1次，共3次，最后一次免疫后3天，取脾脏制成细胞悬液备用。
③细胞融合及筛选：
将脾脏细胞悬液和骨髓瘤细胞悬液在50%PEG作用下进行融合，筛选出能产生抗人肝癌单克隆抗体HAb18的H18杂交瘤细胞。
④改造H18杂交瘤细胞：
利用PCR技术获得小鼠的bcl－XL基因（抗凋亡基因），构建表达载体，通过脂质体法导入H18杂交瘤细胞，再筛选出抗凋亡能力明显提高的H18杂交瘤细胞。
请分析回答：
（1）步骤①肝癌细胞培养液中加入小牛血清的目的是__________________________________________________________________________________________，
培养液中还需加入一定量抗生素的目的是______________________________。
（2）步骤②中，肝癌细胞免疫小鼠需在一定时间内间隔注射3次，其目的是__________________________________________________________________________________________。
（3）步骤③中，除了用50%PEG促进细胞融合外，常用的生物诱导因素是____________________。
步骤④中通过脂质体法将表达载体导入H18杂交瘤细胞的原理是________________________。
（4）与普通抗肝癌药物相比，用抗人肝癌单克隆抗体HAb18与相应抗癌药物结合制成的“生物导弹”治疗肝癌的主要优点是_________________________________。
（5）乙醇有诱导细胞凋亡的作用。
为了建立H18杂交瘤细胞凋亡检测模型，科研人员利用不同浓度的乙醇溶液诱导H18杂交瘤细胞凋亡，其结果如下图所示。
抗凋亡细胞株的建立与筛选应选择的条件是________________________。
【答案】
（1）补充细胞生长所需的未知营养物质 防止杂菌污染
（2）加强免疫，刺激小鼠机体产生更多的淋巴细胞
（3）灭活的病毒 膜的流动性
（4）能将药物定向带到癌细胞所在部位，减少对正常细胞的伤害，减少用药剂量
（5）510mmol/L乙醇诱导6h（或510mmol/L乙醇诱导5～6h）
【解析】
（1）动物细胞培养液中加入血清的目的是补充细胞生长所需的未知营养物质。
培养液中加入一定量抗生素的目的是防止培养过程中的杂菌污染。
（2）肝癌细胞免疫小鼠需在一定时间内间隔注射3次，其目的是加强免疫，刺激小鼠机体产生更多的淋巴细胞。
（3）在动物细胞融合时，常用的生物诱导因素是灭活的病毒。
通过脂质体法将表达载体导入H18杂交瘤细胞，其原理是膜的流动性。
（4）利用“生物导弹”治疗肝癌，借助单克隆抗体的导向作用，能将药物定向带到癌细胞所在部位，在原位杀死癌细胞，这样既不损伤正常细胞，又减少用药剂量。
（5）柱状图显示，用510mmol/L乙醇诱导6h时，细胞凋亡比例已达最大值，因此抗凋亡细胞株的建立与筛选应选择的条件是510mmol/L乙醇诱导6h。
12．（2015年福建）GDNF是一种神经营养因子，对损伤的神经细胞具有营养和保护作用。
研究人员构建了含GDNF基因的表达载体（如图1所示），并导入到大鼠神经干细胞中，用于干细胞基因治疗的研究。
请回答：
（1）在分离和培养大鼠神经干细胞的过程中，使用胰蛋白酶的目的是________________。
（2）构建含GDNF基因的表达载体时，需选择图1中的____________限制酶进行酶切。
（3）经酶切后的载体和GDNF基因进行连接，连接产物经筛选得到的载体主要有三种：
单个载体自连、GDNF基因与载体正向连接、GDNF基因与载体反向连接（如图1所示）。
为鉴定这3种连接方式，选择HpaⅠ酶和BamHⅠ酶对筛选的载体进行双酶切，并对酶切后的DNA片段进行电泳分析，结果如图2所示。
图中第____泳道显示所鉴定的载体是正向连接的。
（4）将正向连接的表达载体导入神经干细胞后，为了检测GDNF基因是否成功表达，可用相应的__________与提取的蛋白质杂交。
当培养的神经干细胞达到一定的密度时，需进行__________培养以得到更多数量的细胞，用于神经干细胞移植治疗实验。
【答案】
（1）使细胞分散开
（2）XhoⅠ （3）② （4）抗体 传代
【解析】
（1）胰蛋白酶的作用是消化组织细胞间的物质，使组织分散成单个细胞。
（2）根据题意和图示分析可知：
由于GDNF基因两边都有XhoⅠ限制酶识别序列，所以构建含GDNF基因的表达载体时，需选择图1中的XhoⅠ限制酶进行酶切。
（3）选择HpaⅠ酶和BamHⅠ酶对筛选得到的载体进行双酶切，并对酶切后的DNA片段进行电泳分析，结果如图2所示，由于GDNF基因中有BamHⅠ酶识别序列，所以图中第②泳道显示所鉴定的载体是正向连接的。
（4）为了检测GDNF基因是否成功表达，可利用抗原－抗体杂交技术，用相应的抗体与提取的蛋白质杂交，当培养的神经干细胞达到一定密度时，需进行传代培养以得到更多数量的细胞，用于细胞干细胞移植治疗实验。
13．（2014年新课标Ⅰ）某研究者用抗原（A）分别免疫3只同种小鼠（X、Y和Z），每只小鼠免疫5次，每次免疫一周后测定各小鼠血清抗体的效价（能检测出抗原抗体反应的血清最大稀释倍数），结果如图所示。
若要制备杂交瘤细胞，需取免疫后小鼠的B淋巴细胞（染色体数目40条），并将该细胞与体外培养的小鼠骨髓瘤细胞（染色体数目60条）按一定比例加入试管中，再加入聚乙二醇诱导细胞融合，经筛选培养及抗体检测，得到能不断分泌抗A抗体的杂交瘤细胞。
回答下列问题：
（1）制备融合所需的B淋巴细胞时，所用免疫小鼠的血清抗体效价需达到16000以上，则小鼠最少需要经过__________次免疫后才能有符合要求的。
达到要求后的X、Y、Z这3只免疫小鼠中，最适合用于制备B淋巴细胞的是__________小鼠，理由是_______________________________________________________________________________。
（2）细胞融合实验完成后，融合体系中除含有未融合的细胞和杂交瘤细胞外，可能还有____________________________________________________________________________，
体系中出现多种类型细胞的原因是_______________________。
（3）杂交瘤细胞中有__________个细胞核，染色体数目最多是__________条。
（4）未融合的B淋巴细胞经多次传代培养后都不能存活，原因是_________________________________________________________________________________________。
【答案】
（1）4 Y Y小鼠的血清抗体效价最高
（2）B淋巴细胞相互融合形成的细胞、骨髓瘤细胞相互融合形成的细胞 细胞融合是随机的，且融合率达不到100%
（3）1 100 （4）不能无限增殖
【解析】
（1）分析题图可知，经4次免疫后，小鼠Y的血清抗体效价就可达到16000以上。
由于4次免疫后的Y小鼠的血清抗体效价最高，故最适合用于制备B淋巴细胞。
（2）细胞融合实验中，由于细胞融合是随机的，而且诱导融合率不可能达到100%，所以会有未融合的B淋巴细胞和骨髓瘤细胞、融合的具有同种核的细胞和杂交瘤细胞三种类型。
（3）杂交瘤细胞同时具有B淋巴细胞和骨髓瘤细胞的核物质，但细胞核只有一个。
杂交瘤细胞细胞核中染色体数目是40＋60＝100（条）。
（4）B淋巴细胞已经分化，没有无限增殖的能力。
14．（2014年福建）Rag2基因缺失小鼠不能产生成熟的淋巴细胞。
科研人员利用胚胎干细胞（ES细胞）对Rag2基因缺失小鼠进行基因治疗。
其技术流程如图：
（1）步骤①中，在核移植前应去除卵母细胞的_______________________________。
（2）步骤②中，重组胚胎培养到__________期时，可从其内细胞团分离出ES细胞。
（3）步骤③中，需要构建含有Rag2基因的表达载体。
可以根据Rag2基因的______________设计引物，利用PCR技术扩增Rag2基因片段。
用HindⅢ和PstⅠ限制酶分别在片段两侧进行酶切获得Rag2基因片段。
为将该片段直接连接到表达载体，所选择的表达载体上应具有______________酶的酶切位点。
（4）为检测Rag2基因的表达情况，可提取治疗后小鼠骨髓
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