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高考生物选修三知识点总结精选范文
高考生物选修三知识点总结
高考生物选修三知识点
(一)
基因工程概念:
按照人们的愿望,进行严格的设计,通过体外DNA重组和转基因技术,赋予生物新的遗传特性,创造出更符合人们需要的新的生物类型和生物产品。
基因工程基本原理:
让目的基因在受体细胞内稳定且高效的表达。
基因工程理论基础:
DNA是生物遗传物质的发现,DNA双螺旋结构,遗传信息传递方式
基因工程核心:
构建重组DNA分子
植物体细胞:
农杆菌转化法(插入Ti质粒上的T-DNA),基因枪法、花粉管通道法——导入叶绿体DNA中,由于细胞质/器DNA的遗传与性别相关联,故可避免因花粉传播而造成基因污染(目的基因传播到非转基因生物中)
动物受精卵:
显微注射技术
用(如显微注射)技术/方法将目的基因导入cf转基因/基因工程技术
原核细胞:
CaCl2/Ca2+处理法(先用Ca2+处理增加细胞壁通透性,使之成为感受态细胞,再将重组质粒与感受态细胞混合,在一定温度下感受态细胞吸收DNA分子)——原核生物作为受体细胞的原因:
①繁殖快②体积小新陈代谢旺盛(目的产物合成效率高)③遗传物质少(便于操作)、④单细胞(容易培养)
高考生物选修三知识点
(二)
1.限制性核酸内切酶
(1)来源:
主要是从原核生物中分离纯化出来的(不切割自身DNA的原因:
原核生物中无该限制酶的识别序列或其已被修饰)
(2)功能:
识别和切割DNA分子内一小段特殊的脱氧核苷酸序列(偶数碱基对回文序列)
特异性表现:
识别特定片段、切割该片段中的特定位点、形成一种末端Cf—G↓GATCC—&—↓GATC—
(3)结果:
DNA片段末端形成末端碱基互补的黏性末端或平末端
2.DNA连接酶
(1)功能:
连接具有末端碱基互补的2个DNA片段,形成重组DNA分子
CfDNA聚合酶:
只能将单个脱氧核苷酸逐个添加到已有的脱氧核苷酸链之后,需模板DNA,连接磷酸二酯键
3.载体
(1)条件:
①能在受体细胞中稳定保存并大量复制,基本不影响受体细胞正常生命活动②一至多个限制酶酶切位点(必须在所需标记基因外),供外源DNA片段插入③标记基因,便于筛选含有重组DNA分子的受体细胞——往往需要根据需求改造天然载体。
(2)功能:
①作为运载工具将目的基因转移到受体细胞内——载体选质粒的原因:
具有环状结构,能够携带目的基因②利用它在受体细胞内对目的基因进行大量复制和转录/表达
(3)质粒(最常用的载体)一种能够自主复制,在细菌(或酵母菌)中独立于染色体之外存在的双链环状DNA分子
(4)其它载体:
噬菌体、动植物病毒
高考生物选修三知识点(三)
获取目的基因
1.目的基因:
人们所需要的编码蛋白质的结构基因
2.方法:
(1)序列已知、
(2)序列未知:
(1)序列已知:
①化学合成法——较长DNA单链合成过程中容易出现碱基缺失如反转录法(e.g获取mRNA逆转录成cDNA再用DNA聚合酶生成双链)
②聚合酶链式反应(PCR)扩增
(1)原料:
水、缓冲液、4种游离脱氧核苷酸、TaqDNA聚合酶、模板DNA(……基因)、对…基因特异的2段DNA引物(防止相互或自身折叠)
(2)过程:
第一步:
加热至90~95℃,DNA在高温下变性解链
第二步:
冷却到55~60℃,引物结合到互补DNA链(退火)
第三步:
加热至70~75℃,热稳定DNA聚合酶从引物起始互补链的合成能量来源于dNTP
(2)序列未知:
建立基因文库:
建立一个包括目的基因在内的基因文库(保存在受体菌中),再从基因文库中获取。
3.目的基因大量扩增/分子水平的克隆
①利用受体细胞(如E.coli)无性繁殖,利用基因探针钓取,再导入最终受体细胞e.g目的基因→大肠杆菌→农杆菌→植物细胞→植物(主要在细菌分裂时几何级扩增,尽管质粒独立于拟核,可在分裂时发生自我复制,
但由于多数细菌对胞内质粒数量有限制,故该种复制对扩增效果不大)
②PCR技术
形成重组DNA分子
(基因表达载体:
启动子+目的基因+终止子+标记基因)
1.目的:
转运目的基因,并使在受体内稳定存在、复制、表达/转录并稳定遗传(基因型X0)
2.过程:
(1)单酶切:
用同种限制酶分别切割目的基因和载体从而形成相同的粘性末端,然后用DNA连接酶将目的基因和载体连接起来——有时用不同限制酶也可以形成相同的粘性末端
(2)双酶切:
用两种限制酶切割使目的基因和载体两端各形成两种粘性末端,防止载体和目的基因自身环化。
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