食品中氯酸盐和高氯酸盐的测定.docx
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食品中氯酸盐和高氯酸盐的测定
食品中氯酸盐和高氯酸盐的测定
BJS201706
1 范围
本方法规定了食品中氯酸盐和高氯酸盐含量的液相色谱-串联质谱测定方法。
本方法适用于包装饮用水、液体乳、大米、胡萝卜、哈密瓜、猪肉、鱼肉、茶叶、婴幼儿配方乳粉（不包括特殊医学用途的婴幼儿配方乳粉）中氯酸盐和高氯酸盐的测定。
2 原理
试样经提取、离心后，上清液经固相萃取柱净化，用液相色谱-串联质谱测定，内标法定量。
3 试剂和材料
3.1 试剂
3.1.1 乙腈（CH3CN）：
色谱纯。
3.1.2 甲醇（CH3OH）：
色谱纯。
3.1.3 甲酸（HCOOH）：
色谱纯。
3.1.4 甲酸铵（HCOONH4）：
液质联用级。
3.1.5 超纯水（H2O）：
电阻率为18.2MΩ·cm。
注：
以上试剂在使用前均应做本底测试。
3.2 试剂配制
3.2.1 含0.1%甲酸的水溶液：
量取1.0mL甲酸（3.1.3）至1000mL容量瓶，用超纯水（3.1.5）稀释至刻度，混匀。
3.2.2 20mmol/L甲酸铵溶液：
称取0.63g甲酸铵（3.1.4），用超纯水（3.1.5）溶解并稀释至500mL，混匀。
3.2.3 甲酸铵甲醇溶液：
取100mL甲酸铵溶液（3.2.2），加入200mL甲醇（3.1.2），混匀。
3.3 标准品
氯酸钠标准品：
采用具有证书的标准品或高纯试剂，纯度＞99%。
中文名称、英文名称、CAS登录号、分子式、相对分子量详见表1。
高氯钠盐标准品：
采用具有证书的标准品或高纯试剂，纯度＞99%。
中文名称、英文名称、CAS登录号、分子式、相对分子量详见表1。
表1氯酸盐和高氯酸盐的中文名称、英文名称、CAS登录号、分子式、相对分子量
中文名称
英文名称
CAS登录号
分子式
相对分子量
氯酸钠
Sodiumchlorate
7775-09-9
NaClO3
106.44
高氯酸钠
Sodiumperchlorate
7601-89-0
NaClO4
122.45
3.4 同位素内标
氯酸盐同位素内标：
氯酸盐-18O3（200μg/mL，以氯酸根-18O3离子计，北京振祥提供，EURL-SRMLotNo:
024），4℃保存。
高氯酸盐同位素内标：
高氯酸盐-18O4（100μg/mL，以高氯酸根-18O4离子计，美国剑桥提供，CILOLM-7310-1.2），4℃保存。
3.5 标准溶液的配制
氯酸盐标准储备液（1mg/mL，以氯酸根计）：
精密称取氯酸钠0.128g（精确至0.0001g），置于100mL容量瓶中，用超纯水（3.1.5）溶解并稀释至刻度，摇匀，制成浓度为1mg/mL标准储备液，4℃保存。
高氯酸盐标准储备液（1mg/mL，以高氯酸根计）：
精密称取高氯酸钠0.123g（精确至0.0001g），置于100mL容量瓶中，用超纯水（3.1.5）溶解并稀释至刻度，摇匀，制成浓度为1mg/mL标准储备液，4℃保存。
混合标准中间液：
分别准确量取0.2mL氯酸盐标准储备液（3.5.1）、0.1mL高氯酸盐标准储备液（3.5.2），置于同一100mL容量瓶中，用超纯水（3.1.5）稀释至刻度，摇匀，制成氯酸盐、高氯酸盐浓度分别为2.0µg/mL、1.0µg/mL的混合标准中间液，4℃保存。
混合同位素内标液：
分别准确量取75µL氯酸盐同位素内标（3.4.1）、20µL高氯酸盐同位素内标（3.4.2）置于同一10.0mL容量瓶中，用超纯水（3.1.5）稀释至刻度，摇匀，制成氯酸盐-18O3、高氯酸盐-18O4浓度分别为1500ng/mL、200ng/mL的混合同位素内标液，4℃保存。
混合标准工作溶液：
分别准确量取混合标准中间液（3.5.3）0μL、10μL、25μL、50μL、75μL、100μL、250μL、500μL、750μL、1000μL，及混合同位素内标液（3.5.4）100μL，用甲酸铵甲醇溶液（3.2.3）稀释并定容至10mL，作为混合标准工作溶液S0、S1—S9。
氯酸盐浓度依次为：
0.00ng/mL、2.00ng/mL、5.00ng/mL、10.0ng/mL、15.0ng/mL、20.0ng/mL、50.0ng/mL、100ng/mL、150ng/mL、200ng/mL，高氯酸盐浓度依次为：
0.00ng/mL、1.00ng/mL、2.50ng/mL、5.00ng/mL、7.50ng/mL、10.0ng/mL、25.0ng/mL、50.0ng/mL、75.0ng/mL、100ng/mL，混合标准工作液中氯酸盐-18O3、高氯酸盐-18O4浓度分别为15.0ng/mL、2.0ng/mL，或依需要配制适当浓度的混合标准工作液。
临用新制。
4 仪器和设备
4.1 液相色谱-串联质谱仪，配有电喷雾离子源（ESI源）。
4.2 涡旋振荡器。
4.3 组织捣碎机。
4.4 均质器。
4.5 离心机：
转速≥10000r/min。
4.6 电子天平：
感量分别为0.0001g和0.001g。
4.7 超声波恒温水浴振荡器。
4.8 具塞离心管：
50mL。
4.9 PRiMEHLB固相萃取柱：
3cc，150mm，或性能相当者。
注：
4.8、4.9的耗材在使用前均应做本底测试。
5 试样制备与保存
5.1 包装饮用水
充分混匀，直接取用。
5.2 液体乳：
充分摇匀，取适量有代表性的试样，均分成两份，作为试样和留样，分别装入洁净容器中，密封并标记，于4℃避光保存。
5.3 猪肉、鱼肉：
取适量有代表性的可食部分试样，切成小块，组织捣碎机捣碎，均分成两份，作为试样和留样，分别装入洁净容器中，密封并标记，于-18℃避光保存。
5.4 胡萝卜、哈密瓜：
取适量有代表性的试样，去皮去籽，切成小块，组织捣碎机捣碎，均分成两份，作为试样和留样，分别装入洁净容器中，密封并标记，于-18℃避光保存。
5.5 婴儿配方乳粉：
充分混匀，取适量有代表性的试样，均分成两份，作为试样和留样，分别装入洁净容器中，密封并标记，于常温避光保存。
5.6 大米、茶叶：
取适量有代表性的试样，粉碎机粉碎后过40目筛，均分成两份，作为试样和留样，分别装入洁净容器中，密封并标记，于常温避光保存。
6 测定步骤
6.1 提取
包装饮用水：
准确移取1.0mL试样，加入10.0µL混合同位素内标液（3.5.4），涡旋震荡10s，经0.22µm再生纤维素滤膜过滤后，取续滤液供液相色谱-串联质谱仪测定。
胡萝卜、哈密瓜、茶叶：
准确称取1g（精确至0.001g）试样置于50mL具塞离心管（4.8）中，加入200μL混合同位素内标液（3.5.4），准确加入7.0mL超纯水（3.1.5），涡旋振荡5min，再准确加入13.0mL甲醇（3.1.2），混匀，振荡超声提取30min，10000r/min常温离心10min，取上清液待净化。
大米：
准确称取2g（精确至0.001g）试样置于50mL具塞离心管（4.8）中，加入200μL混合同位素内标液（3.5.4），准确加入7.0mL超纯水（3.1.5），涡旋振荡5min，再准确加入13.0mL甲醇（3.1.2），混匀，振荡超声提取30min，10000r/min常温离心10min，取上清液待净化。
婴儿配方乳粉：
准确称取2g（精确至0.001g）试样置于50mL具塞离心管（4.8）中，加入150μL混合同位素内标液（3.5.4），准确加入5.0mL0.1%甲酸水溶液（3.2.1），迅速混匀，置于45℃水浴超声20min，涡旋振荡5min，再准确加入10.0mL甲醇（3.1.2），混匀，10000r/min常温离心10min，取上清液待净化。
液体乳：
准确称取5g（精确至0.001g）试样置于50mL具塞离心管（4.8）中，加入150μL混合同位素内标液（3.5.4），加入1.0mL0.1%甲酸水溶液（3.2.1），9.0mL甲醇（3.1.2），涡旋振荡5min，10000r/min常温离心10min，取上清液待净化。
猪肉、鱼肉：
准确称取2g（精确至0.001g）试样置于50mL具塞离心管（4.8）中，加入200μL混合同位素内标液（3.5.4），准确加入7.0mL超纯水（3.1.5），13.0mL甲醇（3.1.2），10000r/min均质30s，10000r/min常温离心10min，取上清液待净化。
6.2 净化
吸取约3.0mL上述上清液（6.1.2~6.1.6），按附录A中的图A.1方式过固相萃取柱（4.9）及0.22µm再生纤维素滤膜，弃去约1mL流出液，收集续滤液，供液相色谱-串联质谱仪测定。
6.3 色谱测定
6.3.1 液相色谱-串联质谱检测
6.3.1.1 参考液相色谱条件
a）色谱柱：
AcclaimTRINITYP1复合离子交换柱（50mm×2.1mm，3μm；100mm×2.1mm，3μm），或性能相当者。
b）流动相：
A为乙腈，B为20mmol/L甲酸铵溶液。
梯度洗脱程序见表2。
c）样品系列运行完后，按表3的色谱柱清洗梯度程序对色谱柱进行清洗。
d）流速：
0.5mL/min。
e）柱温：
35℃。
f）进样量：
3μL。
表2梯度洗脱程序
50mm×2.1mm，3μm规格色谱柱
100mm×2.1mm，3μm规格色谱柱
时间（min）
流动相A（%）
流动相B（%）
时间（min）
流动相A（%）
流动相B（%）
Initial
35
65
Initial
70
30
0.5
35
65
0.2
70
30
4.0
65
35
3.0
90
10
5.0
90
10
7.0
90
10
7.0
90
10
8.0
70
30
8.0
35
65
10.0
70
30
表3色谱柱清洗梯度程序
50mm×2.1mm，3μm规格色谱柱
100mm×2.1mm，3μm规格色谱柱
时间（min）
流速（mL/min）
流动相A（%）
流动相B（%）
时间（min）
流速（mL/min）
流动相A（%）
流动相B（%）
Initial
0.5
35
65
Initial
0.5
70
30
10.0
0.15
90
10
15.0
0.15
90
10
100.0
0.15
90
10
150.0
0.15
90
10
注：
色谱柱按该程序清洗后保存，有助于延长色谱柱寿命。
6.3.1.2 参考质谱条件
a）离子源：
电喷雾离子源（ESI源）。
b）检测方式：
多反应监测（MRM）。
c）扫描方式：
负离子模式扫描。
d）毛细管电压：
200V。
e）锥孔电压：
60V。
f）脱溶剂温度：
500℃。
g）脱溶剂气流量：
1000L/h。
h）锥孔气流量：
150L/h。
i）采用多反应监测（MRM）模式采集数据，质谱参数见表4。
表4氯酸盐和高氯酸盐定性、定量离子对和质谱分析参数
化合物
母离子（m/z）
子离子（m/z）
锥孔电压（V）
碰撞能量（eV）
氯酸根
83.0
67.0*
60
15
85.0
69.0
60
15
高氯酸根
99.0
83.0*
60
18
101.0
85.0
60
18
氯酸根内标
89.0
71.0*
60
16
高氯酸根内标
107.0
89.0*
60
18
*定量离子对。
注：
6.3.1.2的质谱条件仅供参考，当采用不同质谱仪器时，仪器参数可能存在差异，测定前应将质谱参数优化到最佳。
标准工作曲线制作
将混合标准工作溶液（3.5.5）按仪器参考条件（6.3.1）进行测定。
以混合标准工作溶液的浓度为横坐标，以内标校正后的响应值为纵坐标绘制标准工作曲线。
定性测定
在相同试验条件下测定试样和混合标准工作溶液，记录试样和混合标准工作液中氯酸盐、高氯酸盐的色谱保留时间，以相对于最强离子丰度的百分比作为定性离子的相对离子丰度。
若试样中检出与混合标准工作液（3.5.5）中氯酸盐、高氯酸盐保留时间一致的色谱峰，且其定性离子与浓度相当的标准溶液中相应的定性离子的相对丰度相比，偏差不超过表5规定的范围，则可以确定试样中检出相应的氯酸盐、高氯酸盐。
表5定性确证时相对离子丰度的最大允许偏差
相对离子丰度（%）
>50
>20~50
>10~20
≤10
允许的相对偏差（%）
±20
±25
±30
±50
定量测定
若试样检出与混合标准工作液（3.5.5）一致的氯酸盐、高氯酸盐，根据标准工作曲线按内标法以内标校正后的响应值计算得到其含量。
空白样品加标试样参考色谱图见附录B中的图B.1、B.2。
6.4 空白试验
除不加试样外，均按试样同法操作。
7 结果计算
结果按式
（1）计算：
………………………………………….
（1）
式中：
X—试样中各待测组分的含量，包装饮用水单位为微克每升（µg/L），其他样品单位为微克每千克（µg/kg）；
c—从标准工作曲线中读出的供试品溶液中各待测组分的浓度，单位为纳克每毫升（ng/mL）；
V—试样溶液最终定容体积，单位为毫升（mL）；
f—试样制备过程中的稀释倍数；
m—称样量，包装饮用水单位为毫升（mL），其他样品单位为克（g）。
计算结果以重复性条件下获得的两次独立测定结果的算术平均值表示，结果保留三位有效数字。
8 检测方法的灵敏度、准确度、精密度
8.1 灵敏度
当试样量为1.0mL时，包装饮用水中氯酸盐的检出限为0.6μg/L、定量限为2.0μg/L；高氯酸盐的检出限为0.4μg/L、定量限为1.0μg/L。
当试样量为1g（精确至0.001g）、定容体积为20.0mL时，胡萝卜、哈密瓜、茶叶中氯酸盐的检出限为12.0μg/kg、定量限为40.0μg/kg；高氯酸盐的检出限为8.0μg/kg、定量限为20.0μg/kg。
当试样量为2g（精确至0.001g）、定容体积为20.0mL时，猪肉、鱼肉、大米中氯酸盐的检出限为6.0μg/kg、定量限为20.0μg/kg；高氯酸盐的检出限为4.0μg/kg、定量限为10.0μg/kg。
当试样量为5g（精确至0.001g）、定容体积为15.0mL时，液体乳中氯酸盐的检出限为1.8μg/kg、定量限为6.0μg/kg；高氯酸盐的检出限为1.2μg/kg、定量限为3.0μg/kg。
当试样量为2g（精确至0.001g）、定容体积为15.0mL时，婴儿配方乳粉中氯酸盐的检出限为4.5μg/kg、定量限为15.0μg/kg；高氯酸盐的检出限为3.0μg/kg、定量限为7.5μg/kg。
8.2 准确度
本方法在5~800µg/kg添加浓度范围内，回收率为80%~110%。
8.3 精密度
在重复性条件下获得的两次独立测定结果的绝对差值不得超过算术平均值的20%。
A
附录A
净化方式示意图
图A.1 9种基质样液净化方式示意图
A
附录B
氯酸盐、高氯酸盐特征离子色谱图
图A.2 氯酸盐、高氯酸盐特征离子色谱图（50mm×2.1mm，3μm规格色谱柱）
注：
氯酸盐-18O3内标、氯酸盐特征离子色谱图中，3.05min处为高氯酸盐-18O4内标、高氯酸盐的碎片离子峰。
图A.3 氯酸盐、高氯酸盐特征离子色谱图（100mm×2.1mm，3μm规格色谱柱）
注：
氯酸盐-18O3内标、氯酸盐特征离子色谱图中，2.65、2.64min处为高氯酸盐-18O4内标、高氯酸盐的碎片食品质量管理人员职责权限
1。
质量管理者员责任、权力和义务
1.1责任
①贯彻国家有关质量政策、法律、法规、规章和有关规定；
②协助相关职能部门对本厂食品安全进行监督检查，并如实提供有关情况；
③定期协助组织本厂从业人员进行食品安全法律法规和食品安全知识培训；
④制定本厂食品安全管理制度及岗位责任制度，并对执行情况进行督促检查；
⑤检查食品生产经营过程的食品安全状况并记录，对检查中发现的不符合要求的行为及时制止并提出处理意见，必要时及时报告企业食品安全领导小组办公室。
⑥建立健全食品安全管理档案，保存各种检查记录；
1.2权力
①对本厂从业人员进行健康管理，实施健康检查，督促患有有碍食品安全疾病和病症的人员调离相关岗位；
②发生食品安全事故时，协助本厂及时报告卫生及质量监督管理部门，采取措施防止事态扩大，配合监管部门调查处理；
③负责对质量检验、检测过程及结果的管理，负责对质量考核的管理，负责对不合格项的跟踪验证工作；
④产品检验合格，签署合格产品出厂通知的权利。
1.3义务
①对公司产品质量检测分析数据结论负责；
②负责食品安全生产，对公司产品质量负责；
③对公司出厂产品质量安全负责；
④对不符合情况的的监督、管理和评价，对质量事故负责处理和协调。
⑤具有食品质量技术相关资格，负责对产品质量安全管理培训；
⑥保守公司工艺技术和商业秘密。
2生产管理者责任、权力和义务
2.1责任
①带领并督促员工遵守公司的各项规章制度，组织员工学习公司各项规章制度，提高业务技能。
②负责公司产品的生产加工任务的安排、协调和调度，对公司生产任务负责。
③负责公司食品质量安全生产加工技术，对食品质量安全负直接领导责任。
④全面掌握公司的生产加工工艺流程技术，科学的进行生产加工岗位人员调配和生产协调。
⑤检查、监督、考核生产加工系统的任务完成情况，及时处理生产过程中发生的问题。
⑥负责公司的安全生产管理工作及环保工作，对公司生产加工安全负总责。
⑦负责制定公司生产加工管理和制度流程，确保制度和流程与食品质量安全管理文件统一性和可操作性。
2.2权力
对不予执行正确指挥、不执行工艺操作学校应根据学校开展安全工作的情况，总结成功经验，查找存在问题，不断改进和加强安全工作，完善相关材料，把安全工作真正落到实处。
规范、故意违反公司规定及非法添加等行为的有建议总经理开出，甚至移交司法机关处理的权力。
2.3义务
①具有食品加工和食品工程相关专业知识，负责组织、指导产品安全生产、安全操作的义务；
②负责搞好安全生产培训工作，有责任向各部门传递安全方面的最新消息。
③负责车间安全检查，对设备设施、工作环境安全隐患及员工违章行为拿出改善方案义务；
④负责事故调查、责任处理义务；
⑤负责每月安全生产评比事宜，每月协助安委会负责人召开一次安全工作会议。
⑥工作直接向总经理负责，确保安全工作持续改进的义务。
3技术人员责任、权力和义务
3.1质量检验员
3.1。
1责任
①结合公司质量管理实际的产品质量标准，制定原材料、外协件、工序产品、成品检验规范，明确检验方式、检验程序；
②负责对原辅材料进行检验，确保购进原辅料符合技术要求，定期向相关负责人提供外购物品质量工作报告；
③负责对产品包装材料进行检验，确保购进包装材料符合技术要求，定期向相关负责人提供外购物品质量工作报告；
④负责对半成品进行检验，定期向相关负责人提供产品质量工作报告；
⑤负责对成品的检验，按产品或岗位、项目填写检验记录，检验原始记录上应有授权检验人员签名。
⑥各项质检、化验工作必须做相应完整的原始记录，以备随时查用，原始记录不得随意改动。
⑦定期对检验工作的实施情况进行总结、落实；对产品质量进行综合评价，发现和分析生产过程中潜在或已出现的质量问题，找出解决问题的方法和途径。
3.1。
2权力
①检验员应按生产批号做好产品化验工作，及时按规定出具化验报告，并做好检验记录，报送总经理和质量负责人，对检验不合格产品，应及时采取隔离措施，予以监督销毁，决不允许出厂对不合格品要负责标识、记录、评价和隔离，并按规定进行处置；
②检查监督操作工人执行工艺，对违章作业的要立即劝阻，并作好记录；
③检验工作不受生产进度、行政领导学生必须接受学校安全教育，提高安全意识和防范能力，严格遵守学校各项安全管理制度。
学生进出校门应佩戴校牌；不得将贵重物品放在教室过夜，要随身携带严防失窃。
的影响，检验员有权反映质量问题，具有质量否决权。
④对不合格的原辅料、不合格产品有签署不合格品的权利；
⑤被强令更改或出具造假报告时有拒绝的权利。
3.1。
3义务
①具有产品质量检验资格，按照标准进行检验、分析，对产品检验结果负责的义务；
②负责公司计量器具、检验设备的定期检验、校验工作的义务；
③把握品质控制重点，制定关键、特殊工序操作标准，并协助相关部门人员执行。
④遵照公司指令，妥善处理顾客投诉，力求公正、客观；
⑤牵头组织有关部门对质量事故的调查分析，提出处置建议，防范类似事故的再度发生；
⑥确保公司的产品质量、品质能够满足客户的需求。
3.2生产技术员
3.2。
1职责
①执行公司在食品质量安全管理、技术方面的管理制度，服从生产部（车间）门的管理；
②负责生产现场的技术管理和监督工艺文件的执行，对不合格的产品及时作出处理；
③负责生产前的技术准备工作，负责技术的实施和及时解决生产中出现的技术、质量安全管理问题；参加公司组织的产品质量安全管理分析会，提供食品质量安全管理信息；
④对使用的设备、工具，按要求进行维护、保养。
⑤负责工艺改进，协助生产班组对不合格项采取纠正措施及参加食品质量安全管理攻关、质量安全管理改进。
3.2。
2权力
①严格执行工艺，进行生产加工工艺安全生产；
②对不合格生产有阻止、监督、举报的权力。
3.2。
3义务
①掌握公司加工生产工艺技术和流程知识，树立安全操作意识和质量安全责任意识；
②严格按照工艺流程操作，定期检查工艺设备和流程，保障设备的政策运行；
③按照设备操作流程，定期对设备的保养、清洗、消毒，保障质量安全；
④在作业过程中，应当严格遵守本公司的安全生产规章制度和操作规程，安全生产和管理；
⑤严格遵守个人卫生制度，在作业过程中，应当正确佩带和使用劳动防护用品；
⑥保守公司生产技术秘密和商业机密；
3.3采购员责任、权力和义务
3.3。
1责任
①熟悉本企业所有原辅料、包装物资、成品的技术标准、性能；
②协助作好合格供方的选择工作，认真填写采购文件；
③确保采购物资的质量，严格按照采购制度，防止不合格的物资的采购；
④组织好职权范围内的采购合同的签定和评审工作；
⑤做好采购服务工作，认真、及时和顾客沟通；
3.3。
2权力和义务
①工作认真负责，服从安排；
②有权对采购单位和个人进行评价、订制采购活动的权利；
③熟悉各类物资设备的市场价格、供货渠道和本企业供应流程；
④履行职权范围内的采购合同的签定、评审工作；
⑤对采购原料、包装物资类型、数量、质量负学校安全教育以学生为主，同时对教师开展教育。
责。
3.4仓库保管员责任、权力和义务
3.4。
1职责
①负责采购产品、半成品、成品的入库、保管、发放，并对每个环节进行有效的控制，满足产品质量安全管理的要求；
②对入库物资建帐立卡，做到帐、卡、物一致；
③合理安排使用库房，物资分类、分区域存放，腐蚀性物资应进行有效隔离，物资堆放应按具体情况规定堆置高度，不准超高、超重，保持道路畅通。
④物资凭领料单出库，记入分类台帐，坚持先入库先发放原则，发放物资规格、品种、数量准确，要求库存物资安置有序，标识清楚明确，避免错用和误用不同类型的产品；
⑤要及时隔离任何可能对产品造成物理提高食品卫生意识，不买撊迶（无生产厂家、无生产日期、无保质期）食品和路边摊贩不洁食品。
不准到无卫生许可证经营的饮食摊点饮食。
或化学污染的杂物；
⑥做好产品标识，
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