高中生物选修3(人教版)动物细胞工程课件.ppt

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动物细胞培养动物细胞培养动物细胞融合动物细胞融合单克隆抗体技术单克隆抗体技术核移植核移植动物动物细胞细胞工程工程常用常用技术技术胚胎移植技术胚胎移植技术11、概念：

、概念：

zxxkzxxkzxxkzxxk是从动物机体中取出相关是从动物机体中取出相关组织组织，将它分散成将它分散成单个细胞单个细胞,放在适宜的放在适宜的培养培养基基中，让这些细胞中，让这些细胞生长和增殖生长和增殖一、动物细胞培养一、动物细胞培养胚胎组织或幼龄动物组织胚胎组织或幼龄动物组织贴壁生长接触抑制5%CO2维持培养液的pHP46讨论讨论动物组织细胞间隙中含动物组织细胞间隙中含有一定量的蛋白质，将有一定量的蛋白质，将细胞网络起来形成具有细胞网络起来形成具有一定弹性和韧性的组织一定弹性和韧性的组织和器官。

和器官。

传代培养传代培养动物胚胎或幼龄动动物胚胎或幼龄动物的组织、器官物的组织、器官细胞悬浮液细胞悬浮液胰蛋白酶胰蛋白酶（分解弹性纤维）（分解弹性纤维）10代细胞代细胞原代培养原代培养50代细胞代细胞细胞株细胞株无限传代无限传代细胞系细胞系遗传物质遗传物质未改变未改变遗传物质遗传物质改变改变讨论讨论:

细胞株与细胞系的特点细胞株与细胞系的特点有何不同有何不同?

有关概念有关概念原代培养：

从机体取出后立即培养的细胞为原代培养：

从机体取出后立即培养的细胞为原代细胞。

培养的第原代细胞。

培养的第1代细胞与传代细胞与传10代以内代以内的细胞称为原代细胞培养。

的细胞称为原代细胞培养。

传代培养：

将原代细胞从培养瓶中取出，配传代培养：

将原代细胞从培养瓶中取出，配制成细胞悬浮液，分装到两个或两个以上的制成细胞悬浮液，分装到两个或两个以上的培养瓶中继续培养，称为传代培养培养瓶中继续培养，称为传代培养。

有关概念有关概念细胞株：

细胞株：

原代细胞一般传至原代细胞一般传至10代左右细胞代左右细胞生长停滞，大部分细胞衰老死亡，少数细胞存生长停滞，大部分细胞衰老死亡，少数细胞存活到活到4050代，这种传代细胞为细胞株。

代，这种传代细胞为细胞株。

细胞系：

细胞系：

细胞株传代至细胞株传代至50代后又出现细胞代后又出现细胞生长停滞状态，只有部分细胞由于遗传物质的生长停滞状态，只有部分细胞由于遗传物质的改变，使其在培养条件下可以无限制传代，这改变，使其在培养条件下可以无限制传代，这种传代细胞为细胞系。

种传代细胞为细胞系。

细胞株和细胞系的区别：

细胞株和细胞系的区别：

细胞系的遗传物细胞系的遗传物质改变，具有癌细胞的特点，失去接触抑制，质改变，具有癌细胞的特点，失去接触抑制，容易传代培养。

容易传代培养。

1、动物细胞的培养过程、动物细胞的培养过程幼龄动物幼龄动物取动物器官取动物器官和组织和组织剪碎组织剪碎组织胰蛋白酶处理胰蛋白酶处理细胞培细胞培养养单个细胞单个细胞动物细胞培养技术动物细胞培养技术是其他动物细胞工程技术的基础是其他动物细胞工程技术的基础

（1）请据图简述动物细胞的培养过程

（2）思考:

动物细胞培养有哪些方面的应用?

2、动物细胞培养、动物细胞培养的条件的条件

（1）无菌无毒的环境无菌无毒的环境

（2）营养营养（3）温度和温度和pH（4）气体环境气体环境比较：

植物的组织培养的条件比较：

植物的组织培养的条件植物组织培养和动物细胞培养的比较植物组织培养和动物细胞培养的比较比较项目比较项目植物组织培养植物组织培养动物细胞培养动物细胞培养原理原理细胞的全能性细胞的全能性细胞增殖细胞增殖培养基性质培养基性质固体培养基固体培养基液体培养基液体培养基培养基特有成分培养基特有成分蔗糖蔗糖植物激素植物激素葡萄糖葡萄糖动物血清动物血清培养结果培养结果植物体植物体细胞株、细胞系细胞株、细胞系培养目的培养目的快速繁殖、培育快速繁殖、培育无病毒植株无病毒植株获得细胞或细胞获得细胞或细胞分泌蛋白分泌蛋白思考：

思考：

2、为什么选用动物胚胎或幼龄个体的器官或组织做动物细胞、为什么选用动物胚胎或幼龄个体的器官或组织做动物细胞培养材料？

培养材料？

1、动物细胞培养液的主要成分是什么？

较植物组培培养基有、动物细胞培养液的主要成分是什么？

较植物组培培养基有何独特之处？

何独特之处？

3、为什么培养前要将组织细胞分散成单个细胞？

、为什么培养前要将组织细胞分散成单个细胞？

4、动物细胞培养能否像绿色植物组织培养那样最终培养成新个、动物细胞培养能否像绿色植物组织培养那样最终培养成新个体？

体？

主要成分：

葡萄糖、氨基酸、无机盐、维生素和动物血清等。

主要成分：

葡萄糖、氨基酸、无机盐、维生素和动物血清等。

独特之处有：

独特之处有：

1、液体培养基、液体培养基2、成分中有动物血清等、成分中有动物血清等因为这些组织或器官上的细胞生命力旺盛，分裂能力强因为这些组织或器官上的细胞生命力旺盛，分裂能力强成块组织不利培养，分散了做成细胞悬浮液利于培养成块组织不利培养，分散了做成细胞悬浮液利于培养不能，动物细胞培养只能使细胞数目增多，不能发育成新的不能，动物细胞培养只能使细胞数目增多，不能发育成新的动物个体动物个体3.动物细胞培养的应用动物细胞培养的应用（）大规模生产有重要价值的蛋白质生物制品。

大规模生产有重要价值的蛋白质生物制品。

（）解决为大面积烧伤病人移植皮肤问题。

解决为大面积烧伤病人移植皮肤问题。

（利用贴壁生长和接触抑制原理）（利用贴壁生长和接触抑制原理）（）检测有关物质毒性。

检测有关物质毒性。

（）培养正常或病变细胞，用于科研。

培养正常或病变细胞，用于科研。

如病毒疫苗、干扰素、单克隆抗体如病毒疫苗、干扰素、单克隆抗体克隆羊多利克隆羊多利二、细胞核移植技术和克隆动物二、细胞核移植技术和克隆动物绵羊绵羊绵羊绵羊乳腺细胞乳腺细胞卵细胞卵细胞重组胚胎重组胚胎CC母绵羊子宫母绵羊子宫多莉羊多莉羊克隆羊多利的培育过程细胞核移植细胞核移植胚胎移植胚胎移植（减减中期中期卵母细胞卵母细胞）11、概念、概念将一个动物的将一个动物的细胞核细胞核，移入一个已经去掉，移入一个已经去掉细胞核的细胞核的卵母细胞卵母细胞中，使其重组发育成中，使其重组发育成新的胚新的胚胎胎，这个新的胚胎最终发育为，这个新的胚胎最终发育为动物个体动物个体。

22、结果：

、结果：

33、原理：

、原理：

克隆动物克隆动物动物细胞核动物细胞核的全能性的全能性二、细胞核移植技术和克隆动物二、细胞核移植技术和克隆动物44、种类、种类体细胞核移植体细胞核移植胚胎细胞核移植胚胎细胞核移植（难度较高）（难度较高）55、体细胞核移植的过程（克隆高产奶牛）、体细胞核移植的过程（克隆高产奶牛）高产奶牛高产奶牛（供体）（供体）供体细胞培养供体细胞培养（去核去核）重组胚胎重组胚胎胚胎移植胚胎移植M期期卵母细胞卵母细胞重组细胞重组细胞P4966、应用、应用器官移植器官移植加快家畜遗传改良进程，促进优良畜群繁育加快家畜遗传改良进程，促进优良畜群繁育转基因转基因克隆动物克隆动物作为生物反应器，生产医用作为生物反应器，生产医用蛋白蛋白保护频危物种保护频危物种体细胞核移植技术用体细胞核移植技术用于人类疾病治疗于人类疾病治疗77、存在问题、存在问题成功率非常低成功率非常低对克隆动物食品的安全性问题也存有争议对克隆动物食品的安全性问题也存有争议存在健康问题存在健康问题P50思考与探究思考与探究细胞细胞A细胞细胞B杂种细胞杂种细胞灭活的病毒灭活的病毒物理法物理法化学法化学法仙台病毒仙台病毒疱疹病毒疱疹病毒新城鸡瘟病新城鸡瘟病毒毒一、动物细胞融合一、动物细胞融合2、过程：

、过程：

1、概念：

、概念：

“2个或多个动物细胞个或多个动物细胞”“1”、“杂交单核细胞杂交单核细胞”用灭活的病毒诱导动物细胞融合过程用灭活的病毒诱导动物细胞融合过程细胞核细胞核病毒颗粒病毒颗粒细胞核细胞核思考讨论：

思考讨论：

思考讨论：

思考讨论：

为什么细胞融合过程为什么细胞融合过程为什么细胞融合过程为什么细胞融合过程中使用的病毒需要中使用的病毒需要中使用的病毒需要中使用的病毒需要灭活？

灭活？

灭活？

灭活？

二、单克隆抗体二、单克隆抗体什么是抗体？

其本质是什么？

什么是抗体？

其本质是什么？

抗体是机体受抗原刺激后产生的、抗体是机体受抗原刺激后产生的、并能与该抗原发生特异性结合的并能与该抗原发生特异性结合的具有免疫功能的球蛋白。

具有免疫功能的球蛋白。

效应效应B淋巴细胞与抗体淋巴细胞与抗体效应效应B淋巴细胞受抗原刺激后，淋巴细胞受抗原刺激后，可以产生抗体。

可以产生抗体。

动物体内的效应动物体内的效应B淋巴细胞可以淋巴细胞可以产生百万种以上的抗体，每种抗体对特定产生百万种以上的抗体，每种抗体对特定的抗原具有特异性免疫作用。

的抗原具有特异性免疫作用。

每一个淋巴细胞只能产生一种抗每一个淋巴细胞只能产生一种抗体。

体。

单克隆抗体单克隆抗体由单个效应由单个效应B淋巴细胞经过无性繁淋巴细胞经过无性繁殖（克隆），形成基因型相同的细胞群，殖（克隆），形成基因型相同的细胞群，这一细胞群所产生的化学性质单一、特这一细胞群所产生的化学性质单一、特异性强的抗体称为单克隆抗体。

异性强的抗体称为单克隆抗体。

特点：

特点：

特异性强、灵敏度高特异性强、灵敏度高如何大量生产单克隆抗体？

如何大量生产单克隆抗体？

利用淋巴细胞产生抗体的功能利用淋巴细胞产生抗体的功能利用肿瘤细胞无限增殖的特性利用肿瘤细胞无限增殖的特性利用细胞融合的技术将两种细胞融利用细胞融合的技术将两种细胞融合获得具有淋巴细胞和肿瘤细胞特合获得具有淋巴细胞和肿瘤细胞特性的杂交瘤细胞性的杂交瘤细胞利用动物细胞培养技术大量培养杂利用动物细胞培养技术大量培养杂交瘤细胞交瘤细胞单克隆抗体的制备问题思考问题思考Q1Q2细胞两两融合后，胞两两融合后，有哪些有哪些类型？

型？

B-B;B-瘤瘤;瘤瘤-瘤瘤哪种是需要的哪种是需要的类型，要型，要筛选吗？

细胞合成细胞合成DNADNA有有DD和和SS两条途径，其中两条途径，其中DD途径能被氨途径能被氨基嘌呤阻断。

基嘌呤阻断。

人淋巴细胞中有这两种人淋巴细胞中有这两种DNADNA的合成途径，但一般的合成途径，但一般不分裂增殖。

不分裂增殖。

鼠骨髓瘤细胞中只有鼠骨髓瘤细胞中只有DD途径，没有途径，没有SS途径，可是能途径，可是能不断分裂增殖。

不断分裂增殖。

你想到筛选杂交瘤细胞的方案了么？

你想到筛选杂交瘤细胞的方案了么？

小资料：

小资料：

单克隆抗体的制备问题思考问题思考Question经过选择培养基培养基筛选的的杂交瘤交瘤细胞群胞群进行克隆是行克隆是否就得到否就得到产生生纯度高度高的抗体？

的抗体？

还需怎么需怎么办？

单克隆抗体杂交杂交杂交杂交细胞细胞细胞细胞灭活的病毒灭活的病毒灭活的病毒灭活的病毒等手段等手段等手段等手段小鼠骨髓瘤细胞小鼠骨髓瘤细胞小鼠骨髓瘤细胞小鼠骨髓瘤细胞BB淋巴细胞淋巴细胞淋巴细胞淋巴细胞经经经经免疫免疫免疫免疫的小鼠的小鼠的小鼠的小鼠提取提取杂交瘤细胞杂交瘤细胞第第一一次筛选次筛选用特定的用特定的选择培养基选择培养基第第二二次筛选次筛选能产生专一抗体的杂交瘤细胞能产生专一抗体的杂交瘤细胞体外体外体外体外培养培养培养培养注射到小鼠注射到小鼠注射到小鼠注射到小鼠腹腔腹腔腹腔腹腔提取单克隆抗体提取单克隆抗体提取单克隆抗体提取单克隆抗体4.单抗制备过程中应用了那些技术？

动物细胞融合、动物细胞培养1.此过程中至少进行了几次筛选？

目的相同吗？

3.单克隆抗体的优点？

特异性强，灵敏度高，可大量制备。

2.最终从哪儿提取单克隆抗体？

（11）为为什什么么选选用用小小鼠鼠骨骨髓髓瘤瘤细细胞胞与与BB淋淋巴巴细细胞融合胞融合?

（小鼠骨髓瘤细胞可以在体外培养条件下大量（小鼠骨髓瘤细胞可以在体外培养条件下大量增殖，增殖，BB淋巴细胞能够产生抗体，细胞的同源性淋巴细胞能够产生抗体，细胞的同源性越近，融合形成的杂种细胞越易成活。

）越近，融合形成的杂种细胞越易成活。

）（22）骨髓瘤细胞是癌细胞吗）骨髓瘤细胞是癌细胞吗?

（有无限增殖能力（失去凋亡机制，失去接触（有无限增殖能力（失去凋亡机制，失去接触抑制等）的细胞是肿瘤细胞，而具有转移能力抑制等）的细胞是肿瘤细胞，而具有转移能力的肿瘤细胞，称为癌细胞，所以说，瘤细胞不的肿瘤细胞，称为