第十三章化学性食物中毒的快速检验.ppt

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复习内容n浸泡试验n溶剂选择n综合项目第十四章第十四章化学性食物中毒的快速检验化学性食物中毒的快速检验n14.1概述n14.2水溶性毒物的快速检验n14.3挥发性毒物的快速检验n14.4不挥发性有机毒物的快速检验n14.5有毒元素的快速检验n14.6农药的快速检验n14.7兽药快速检验n14.8灭鼠药的快速检验n14.9生物毒素快速检验食物中毒是什么食物中毒是什么凡是吃了凡是吃了“不干净不干净”的食物引起的急性中的食物引起的急性中毒性疾病。

毒性疾病。

一一般般以以腹腹痛、痛、恶恶心、心、呕呕吐、腹泻、发吐、腹泻、发热热等等症症状状为为主。

主。

n2013年5月20日晚，7名青岛理工大学琴岛学院的学生相继出现腹痛、腹泻、抽搐等症状，经城阳人民医院急诊内科检查，7名学生均为食物中毒n2011年5月德国暴发肠出血性大肠杆菌（EHEC）疫情，已在德国各州造成1400多例确诊或疑似病例，至少14人因此丧生。

瑞典、丹麦、英国、法国、荷兰、瑞士和奥地利等国也发现类似病例。

据了解，这些国家的患者大部分曾到过德国。

德国流行病预防研究的权威机构罗伯特科赫研究所表示，目前还无法确定大肠杆菌的来源，但呼吁民众尤其是德国北部地区的居民避免生吃黄瓜、番茄和生菜。

n肠出血性大肠杆菌是大肠杆菌的一种，因其能产生志贺样毒素而具有较强的致病性。

感染到发病的潜伏期为3至8天，平均为3至4天。

临床表现主要有：

腹部绞痛和腹泻，一些病例为血便样腹泻。

多数病人10天内康复，少数病人特别是幼儿和老年人，可出现严重并发症，如以急性肾功能衰竭、溶血性贫血和血小板减少为特点的溶血尿毒综合症。

n目前正值夏秋季肠道传染病高发季节，更要注意饮食卫生，尽量不要到卫生条件差的街头摊点就餐；易变质的食物（如吃剩的熟食）应冷藏存放；处理熟食时应洗净手或戴上一次性手套；食物煮熟后应尽快食用，剩菜剩饭食用前应彻底加热；不要食用变质的食物。

广广州州、佛佛山山、中中山山、江江门门、惠惠州州等等地地学学校校、工工厂厂食食堂堂和和酒酒楼楼相相继继发发生生10起起重重大大食食物物中中毒毒事事故故，中中毒毒人人数数达达到到709人，死亡人，死亡2人。

人。

（9月月26日日10:

40:

10新快报新快报）广东广东:

2008年年9月月8日日9月月22日日共共14天天709人食物中毒人食物中毒1.88日日，广广州州番番禺禺区区沙沙圹圹村村66人人自自行行加加工工进进食食河河豚豚鱼鱼引引起的食物中毒起的食物中毒，22人死亡。

人死亡。

2.99日日中中山山市市嘉嘉华华电电子子有有限限公公司司8686名名员员工工食食堂堂进进食食含含冷藏鱼类，造成集体高组胺食物中毒事故冷藏鱼类，造成集体高组胺食物中毒事故。

3.1515日日中中山山大大学学北北校校区区第第一一学学生生食食堂堂常常温温存存放放熟熟食食，造成细菌污染造成细菌污染，致，致199199名学生食物中毒。

名学生食物中毒。

4.1818日日惠惠州州艺艺园园学学校校9797名名学学生生因因进进食食农农药药污污染染的的蔬蔬菜菜发生食物中毒事故。

发生食物中毒事故。

5.2020日日河河源源市市和和平平县县大大坝坝镇镇龙龙狮狮村村106106人人进进食食老老鼠鼠药药污染的牛肉污染的牛肉造成食物中毒。

造成食物中毒。

6.2222日日东东莞莞市市黄黄江江镇镇裕裕元元花花园园酒酒店店6363人人进进食食受受污污染染的的蛋糕发生细菌性食物中毒蛋糕发生细菌性食物中毒。

v重大食物中毒事件重大食物中毒事件3131起起v中毒人数近中毒人数近12001200人人v死亡死亡1616人人造成这些事故的主要原因造成这些事故的主要原因：

v集体食堂供餐条件达不到要求集体食堂供餐条件达不到要求v不法分子投毒作案不法分子投毒作案v误食有毒动植物及食物原料残留有毒物质误食有毒动植物及食物原料残留有毒物质2008年年1月月1日日9月月22日日1.化化学学性性污污染染：

农农药药、有有害害金金属属、多多环环芳芳族族化化合合物物、杂杂环环胺胺、N-亚亚硝硝基基化化合合物物、食食品品添添加加剂剂、食食品品容容器器、包包装装材材料料中中的的单单体、助剂、二恶英。

体、助剂、二恶英。

2.生生物物性性污污染染：

黄黄曲曲霉霉毒毒素素、单单端端孢孢霉霉烯烯族族化化合合物物、伏伏马马菌菌素素、椰椰毒毒假假单单孢孢菌菌酵酵米米面面亚亚种种食食物物中中毒毒、大大肠肠埃埃烯烯氏氏菌菌属属食食物物中中毒、单核细胞增多性李斯特菌；毒、单核细胞增多性李斯特菌；食源性寄生虫病：

食源性寄生虫病：

隐孢子虫、园孢子虫隐孢子虫、园孢子虫食源性病毒：

食源性病毒：

甲型肝炎甲型肝炎疯牛病疯牛病3.特殊食品卫生问题特殊食品卫生问题转转基基因因食食品品的的安安全全性性、肉肉乳乳蛋蛋中中兽兽药药的的残残留留问问题题、功功能能性性食品的安全性。

食品的安全性。

污染因素污染因素中毒原因中毒原因报告起数报告起数中毒人数中毒人数死亡人数死亡人数细菌性食物中毒细菌性食物中毒49761320化学性食物中毒化学性食物中毒90612181有毒动植物食物中毒有毒动植物食物中毒33112735其他食物中毒其他食物中毒1385410合合计计18515715146中毒原因分类中毒原因分类健健康康安安全全控制细菌繁殖控制细菌繁殖（杀灭细菌杀灭细菌食物中毒预防食物中毒预防三管齐下！

三管齐下！

防防止止污污染染食食品品n食物中毒的含义n食物中毒的分类n中毒食物14.1概概述述n化学性食物中毒：

是指摄入了含有化学性有毒有害物质的食品或者把有毒有害物质误作食品摄入后，出现的以急性或亚急性中毒症状为主的疾病。

n化学性食物中毒的特点：

n季节不明显n不同有毒化学物质表现不同，临床多样化n可以由误食引起n一般有特效解毒药n病死率较高，愈后较差n化学性食物中毒的分类n化学性食物中毒快速检验的程序n化学性食物中毒检验的特点通常采用快速定性分析和实验室确证分析。

快速定性分析适合于可疑目标毒物的快速筛查，通常采用试纸、液体或固体试剂、试剂盒等，通过沉淀反应、颜色反应、免疫学反应、酶抑制率等与标准物质比较定性或半定量。

常用的有比色（比浊）法、免疫法以及生物芯片、生物传感器、金（荧光素）标记法等一些现场快速筛选法。

目前实验室常用的确证分析方法也可以用于快速检测，如气相色谱法、液相色谱法、气相色谱-质谱法、液相色谱-质谱法等仪器方法，尤其是与相应的质谱数据库配合使用，可以对可疑毒物的进行快速筛查和确证。

化学性食物中毒的快速检验方法14.2水溶性毒物的快速检验水溶性毒物的快速检验n亚硝酸盐的来源n大量摄入硝酸盐和亚硝酸盐可诱导高铁血红蛋白血症，临床表现为口唇、指甲发绀，皮肤出现紫斑等缺氧症状，可致死亡。

主要是由于人体内大量的亚硝酸盐能将血液中的低铁血红蛋白氧化成高铁血红蛋白。

美蓝n硝酸盐的摄入也能减少人体的碘的消化吸收，从而导致甲状腺肿。

中毒机理及症状:

检验方法检验方法（格氏法格氏法）n原理:

n分光光度法测定食品中环己基氨基磺酸钠;n分光光度法测定磺胺类兽药;n分光光度法测定亚硝胺总量;n粮食中氯化苦的测定;n水产品中组胺的测定;操作方法n格氏试剂配制:

n提取:

510g样品捣碎,加20ml水+1ml乙酸.n检测:

检验方法检验方法（联苯胺联苯胺-冰乙酸法冰乙酸法）n原理：

亚硝酸盐在酸性溶液中将联苯胺重氮化，然后水解并氧化成红色的联苯醌，可在白色滴板上进行颜色反应，观察有无紫红色产生，以检验亚硝酸盐存在。

检验方法检验方法（联苯胺联苯胺-冰乙酸法冰乙酸法）再与亚硝酸作用生成重氮盐：

重氮盐水解生成联苯二酚：

最后脱氢，氧化成紫红色醌式化合物:

14.3挥发性毒物的快速检验挥发性毒物的快速检验n生氰糖苷的毒性甚强，对人的致死量为18mg/kg体重。

生氰糖苷的毒性主要是氢氰酸和醛类化合物的毒性。

氢氰酸被吸收后，随血液循环进入组织细胞、并透过细胞膜进入线粒体，氰化物通过与线粒体中细胞色素氧化酶的铁离子结合，导致细胞的呼吸链中断。

n生氰糖苷的急性中毒症状包括心智紊乱、肌肉麻痹和呼吸窘迫。

氢氰酸的最小致死口服剂量为0.53.5mg/kg体重。

氰化钠为0.1g，氰化钾为0.12g。

n处理急性氰化物类物质中毒时，首先应立刻让病人口服亚硝酸盐或亚硝酸酯（如亚硝酸异戊酯），使病人体中的血红蛋白（Fe2）转变为高铁血红蛋白Fe3），高铁血红蛋白的加速循环可将氰化物从细胞色素氧化酶中脱离出来，使细胞继续呼吸。

其后应让病人口服硫代硫酸盐等解毒剂，使氰化物容易形成硫氰化物而随尿排出。

检验方法检验方法（普鲁士蓝法普鲁士蓝法）n原理：

氰化物在酸性条件下生成HCN气体，可与NaOH-FeSO4生成Na4Fe（CN）6，用盐酸酸化后与部分亚铁离子氧化生成的高价铁离子作用，生成亚铁氰化高铁，即普鲁士蓝。

HCNNaOHNaCN+H2OFeSO46NaCNNa4Fe（CN）6+Na2SO44FeCl33Na4Fe（CN）6Fe4Fe（CN）63+12NaCl操作方法nNaOH-FeSO4试纸:

100g/L。

n步骤:

取510g样品粉碎,放入100ml锥形瓶，加20ml水+10ml100g/L酒石酸，立即在瓶口盖上NaOH-FeSO4试纸，缓慢加热，待瓶内溶液沸腾后停止加热，取下试纸浸入10盐酸。

n苦味酸试纸法n硫化物、亚硫酸盐或硫代硫酸盐红色n对硝基苯甲醛法n缩合反应红色n气-质联用（GC-MS）法n样品在酸性条件下蒸馏出无机氰化物，将氰根离子衍生化，用气相毛细管色谱柱分离，以离子阱质谱检测器检测，为快速检验氰化物是否存在的确证方法，14.3挥发性酚性酚类快速快速检验n1溴化法苯酚与溴水反应，能生成三溴苯酚的白色沉淀或浑浊，借以检出苯酚的存在。

n2三氯化铁法三氯化铁能与酚类物质形成蓝紫色化合物，借以检出酚类物质的存在。

水杨酸n3气相色谱法食物中毒样品经蒸馏提取挥发性酚类物质后，通过固相萃取柱净化、浓缩后进行气相色谱分离，常用的色谱柱为含硝基对苯二酸改性聚乙二醇的不锈钢色谱柱，或经溴化或酯化后注入毛细管色谱柱（5%苯基甲基硅氧烷），用火焰离子化检测器（溴化时采用ECD检测器）检测，14.4不挥发性有机毒物的快速检验不挥发性有机毒物的快速检验n不挥发性有机毒物：

相对分子量较大、结构复杂、不易挥发。

n酸性有机毒物n碱性有机毒物n两性有机毒物n中性有机毒物斯斯-奥氏法（乙醇奥氏法（乙醇-乙醚提取法）乙醚提取法）巴比妥类安眠药的快速检验巴比妥类安眠药的快速检验n理化性质：

巴比妥酸的衍生物。

白色结晶粉末，呈弱酸性。

难溶于水，易溶于乙醇、乙醚、三氯甲烷等有机溶剂。

加碱成盐后易溶于水。

巴比妥类安眠药的快速检验巴比妥类安眠药的快速检验n硝酸钴法原理：

巴比妥类药物分子结构中的环酰脲，在碱性条件下与钴盐作用生成紫堇色络合物。

与米龙试剂中汞盐生成沉淀，沉淀溶于过量米龙试剂中。

n米龙试剂配制：

取汞1ml，加硝酸9ml溶解，再以等量水稀释。

操作步骤操作步骤n1.样品提取n简易提取法：

取样品50g捣碎，加入浓盐酸5ml研磨，再加硫酸铵30g，研磨后加入乙醇50ml和三氯甲烷50ml，过滤，滤渣用三氯甲烷淋洗。

分离有机相并水浴挥干，残渣用热水溶解过滤，取滤液备用。

n2.硝酸钴反应:

取样品提取液少许，于蒸发皿上挥干，加数滴10g/L硝酸钴无水乙醇溶液，在浓氨水瓶口熏片刻，阳性显紫堇色,阴性显污绿色。

n3.米龙试剂反应:

取残渣少许溶于少量水中，呈饱和溶液，滴加米龙试剂12滴，则产生灰白色沉淀，继续滴加米龙试剂，沉淀溶解，表示有巴比妥类药物存在。

生物碱类的快速检验生物碱类的快速检验n生物碱：

一类含氮杂环结构的碱性有机化合物。

n1.沉淀反应n2.颜色反应n3.TLC14.5有毒元素的快速检验有毒元素的快速检验n雷因许氏预试验原理：

金属铜在酸性条件下，能使砷、汞、银、锑、铋等金属还原成元素状态或生成铜的合金而沉积于铜的表面，显示出不同的颜色及光泽。

操作方法操作方法n1.铜片处理：

将铜片或铜丝置于试管中，加入2mol/L硝酸处理，除去酸液水洗，再用乙醇洗涤，后用乙醚洗涤。

n2.取20ml样品于5