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微生物考点1

第一章微生物绪论常见考点

第一章 绪论

一、微生物的分类及命名

1、微生物的分类等级为界、门、纲、目、科、属、种，种是最基本的分类单位。

目前国际上普遍采用的分类系统是伯杰分类系统。

2、根据微生物的大小、结构和组成不同，分为三大类型：

（1）非细胞型微生物：

此类微生物无细胞结构，由一种核酸和蛋白衣壳组成，必须寄生在活细胞内才能生长繁殖。

如病毒、类病毒和朊病毒（又称朊粒）。

（2）原核细胞型微生物：

此类微生物由单细胞组成，细胞核分化程度低，无核膜、核仁，染色体为裸露的DNA分子，缺乏完整的细胞器。

如细菌、支原体、衣原体、立克次体和螺旋体。

（3）真核细胞型微生物：

此类微生物细胞核分化程度高，有核膜、核仁、完整的细胞器。

如真菌、单细胞藻类。

3、每种细菌DNA中的G（鸟嘌呤）+C（胞嘧啶）含量摩尔百分比有一定范围，变化不大，DNA（G+C）mol%可以作为细菌分类的一个重要依据。

4、微生物命名由属名和种名组成，中文命名种名在前，属名在后。

拉丁文则相反。

  如：

Mycobacteriumtuberculosis

　　中文名:

种名+属名

　　例:

结核分枝杆菌

二、微生物的发展

1、荷兰人列文虎克发明了显微镜，人类第一次观察到微生物。

2、法国科学家巴斯德被称为“微生物学之父”。

3、1929年，弗莱明发现了青霉素。

1940年Florey和Chain将青霉素分离提纯，应用于临床。

5、德国医生郭霍证明了微生物是传染病的致病因子。

第二章细菌的基本性状常见考点

一、细菌的形态与结构

（一）细菌的大小和形态

1、细菌个体微小，通常以微米作为测量单位。

2、细菌的基本形态有三类：

球菌、杆菌、螺形菌。

（二）细菌的基本结构

1、细菌的基本结构由外向内依次是细胞壁、细胞膜、细胞质和核质。

2、根据细胞壁的化学组成与结构不同，用革兰染色将细菌分为G＋和G－两大类。

3、磷壁酸是革兰阳性菌细胞壁特有的结构，壁磷壁酸为革兰阳性菌的重要表面抗原，膜磷壁酸为黏附因子。

4、外膜层是革兰阴性菌特细胞壁的特殊成分，从外向内依次是脂多糖、脂质双层、脂蛋白。

其中脂多糖是革兰阴性菌内毒素，脂质A是内毒素的主要毒性部分。

5、由于革兰阴性菌和革兰阳性菌细胞壁组成成分的不同，两者对药物的敏感性也不一样。

革兰阳性菌细胞壁有五肽交联桥，是青霉素作用的部位。

6、中介体：

又称中间体，是细胞膜内陷折叠而成的管状囊状结构。

其功能类似真核细胞的线粒体，故有人称之为类线粒体。

7、质粒：

是细菌染色体（核质）以外的遗传物质，为双链闭环DNA分子，携带遗传信息，控制细菌某些特定的遗传性状。

F质粒控制性菌毛的产生、R质粒与细菌的耐药性有关。

（二）细菌的特殊结构

1、鞭毛：

细菌的运动器官，是由细胞质伸出的蛋白性丝状物。

2、菌毛：

主要出现在革兰阴性菌中。

分为性菌毛和普通菌毛。

    仅少数革兰阴性细菌具有性菌毛，较普通菌毛少，只有1～4根，比普通菌毛长且粗，呈中空管状，是两菌之间传递遗传物质的通道。

带有性菌毛的细菌称为F+菌或雄性菌，无菌毛的细菌称为F-菌或雌性菌。

细菌的耐药性及某些毒力因子均可通过这种方式转移。

3、荚膜：

通常在机体内和营养物质丰富的环境中形成，在细胞壁外包绕的一层界限分明，且不易被洗脱的黏稠性物质。

4、芽胞：

主要为革兰阳性杆菌在一定条件下细胞质、核质浓缩脱水而形成的一个遮光性很强、具有多层膜状结构、通透性很低的圆形或卵圆形小体。

    ▲细菌L型即为细菌细胞壁缺陷型。

在人工诱导（少量青霉素、头孢菌素存在）或自然情况下，细菌L型在体内或体外均可产生。

细菌L型在含血清的高渗低琼脂培养基中能缓慢生长，可形成“油煎蛋”样菌落（典型L型细菌）：

菌落较小，中心致密并深陷人琼脂中；四周较薄，由透明的颗粒组成，在低倍镜下观察菌落呈“油煎蛋”状。

细菌L型保留了亲代的遗传特性，可返祖，可致病。

二、细菌的生理

1、细菌的基本化学组成：

水、无机盐、蛋白质、糖类、脂类、核酸（细菌含有RNA和DNA两种核酸）。

2、细菌有带电现象，革兰阳性菌的等电点约为pH2～3，革兰阴性菌的等电点约为pH4～5。

（一）细菌的生长繁殖、控制、遗传及变异

1、细菌根据营养类型的不同，分为自养菌（以无机物作为原料）和异养菌，异氧菌又根据所需营养物质的不同分为腐生菌（以无生命的有机物作为原料）和寄生菌（以宿主体内的有机物作为原料）。

2、细菌生长繁殖的主要条件有：

（1）充足的营养物质：

水、碳源、氮源、无机盐、生长因子。

（2）合适的pH：

大多数细菌的最适pH为7.2～7.6，有个别例外，结核分支杆菌在pH6.4～6.8、霍乱弧菌在pH8.4～9.2的环境中生长最好。

（3）合适的温度：

35～37℃

（4）必要的气体

根据细菌对氧气 需求不一，分为：

①需氧菌：

必须在有氧（空气）的情况下才能生长。

②微需氧菌：

在5%～6%的低氧环境中才能生长。

③厌氧菌：

必须在无氧的环境中才能生长。

④兼性厌氧菌：

在有氧和无氧环境中均能生长。

3、细菌生长繁殖的规律

（1）细菌一般一无性二分裂的方式繁殖。

（2）大多数细菌20～30分钟繁殖一代，结核需要18～20小时才繁殖一代。

（3）细菌的生长曲线分为四个时期：

①迟缓期：

适应阶段，此阶段细菌几乎不繁殖。

一般约1～4小时。

②对数期：

细菌的形态、染色性、生理活性都较典型，可以用来观察细菌的大小、形态、染色性、对抗菌药物的敏感性等。

一般约8～18小时。

③稳定期：

细菌繁殖数与死亡数大致平衡。

④衰亡期：

细菌死亡逐渐增多，死菌数超过活菌数。

4、细菌合成代谢的产物主要有：

热原质、毒素（革兰阳性菌合成外毒素、革兰阴性菌合成内毒素）、侵袭性酶类、色素、抗生素、细菌素、维生素。

▲我国规定生活饮用水的标准是：

1ml水中的细菌总数不超过100cfu；100ml水中不得检出大肠埃希菌。

5、细菌的控制：

（1）消毒：

杀死物体上的病原微生物但不一定杀死细菌芽胞的方法。

（2）灭菌：

杀灭物体上所有的微生物，包括细菌芽孢。

（3）防腐：

防止或抑制微生物生长繁殖的方法。

（4）无菌和无菌操作：

无菌是指没有活的微生物存在。

防止微生物进入机体或者其他操作对象的方法称为无菌操作。

（5）高压蒸汽灭菌法的压力为103.4kPa，温度为121.3℃，维持15-30分钟。

检测高压蒸汽灭菌效果的细菌是嗜热枯草芽孢杆菌。

（6）用于牛奶等物品的消毒方法是巴氏消毒法。

（7）紫外线杀菌的主要机制是干扰DNA的复制。

6、正常情况下，人体与外界相同的器官都有细菌，机体的胃、骨骼、肌肉、血液、脑等无菌。

滥用抗生素会导致菌群失调而发生一系列的病理反应。

7、细菌常见的变异现象：

（1）形态与结构变异：

如细菌L型。

①荚膜变异，从有到无；②鞭毛变异（H-O变异），从有到无；③芽胞变异，从有到无。

（2）菌落变异：

S-R变异，细菌菌落光滑型与粗造型之间的变异。

（3）毒力变异：

包括毒力加强和毒力减弱。

（4）抗原变异

（5）耐药性变异：

细菌对某种药物从敏感变为不敏感。

（6）酶活性变异   

（7）生化特性的变异

8、细菌的R质粒是耐药质粒，可通过细菌间的接合或通过噬菌体进行传递。

9、细菌基因转移与重组的方式有转化、接合、转导、溶原性转换、原生质融合等。

（1）转化：

是受体菌直接摄取供体菌提供的游离DNA片段整合重组，使受体菌的性状发生变异的过程。

（2）转导：

是以噬菌体为媒介，将供体菌的基因转移到受体菌内，导致受体菌基因改变的过程。

（3）接合：

受体菌和供体菌直接接触，供体菌通过性菌毛将所带有的F质粒或类似遗传物质转移至受体菌的过程。

（4）溶原性转换：

是噬菌体的DNA与细菌染色体重组，使宿主菌遗传结构发生改变而引起的遗传型变异。

（5）原生质体融合：

两种经过处理失去细胞壁的原生质体混和可发生融合，融合后的双倍体细胞可发生细菌染色体间的重组。

10、细菌的主要遗传物质是染色体，为一条环状闭合的双螺旋DNA。

质粒也是细菌的遗传物质。

但不是主要遗传物质。

第三章微生物致病性与感染常见考点

1、病原微生物能否致病与病原体的毒力、数量、侵入么户、机体的免疫力、环境因素等密切相关。

2、细菌分泌的侵袭性酶类主要有：

（1）透明质酸酶：

分解结缔组织的透明质酸，易于细菌扩散。

（2）胶原酶：

分解细胞外基质的胶原蛋白。

（3）神经氨酸酶：

分解肠黏膜上皮细胞的细胞间质。

（4）磷脂酶：

可水解细胞膜的磷脂，破坏组织细胞。

（5）卵磷脂酶：

分解细胞膜的卵磷脂。

（6）激酶：

将血纤维蛋白酶原激活为纤维蛋白酶，以分解纤维蛋白，防止形成血凝块。

（7）凝固酶：

使血浆发生凝固，保护细菌不被吞噬细胞吞噬和杀灭。

（8）IgA蛋白酶：

与细菌的黏附有关。

3、细菌毒素根据来源、性质和作用特点不同分为外毒素和内毒素。

（1）外毒素的特性：

①主要是革兰阳性菌产生；②具有菌种特异性；③毒性作用强；④毒性作用有组织选择性；⑤具有良好的免疫原性：

外毒素经过0.4%的甲醛处理可失去毒性但仍保持免疫原性变为类毒素，可刺激几天产生抗毒素；⑥不耐热；⑦都是蛋白质，易被酸及蛋白水解酶灭活。

（2）内毒素的特性：

①主要是革兰阴性菌产生；②化学性质是脂多糖；③抵抗力强，耐热、耐酸、耐碱、耐强氧化剂；④细菌死亡溶解后释放；⑤毒性及免疫原性均较外毒素弱，不能用甲醛处理成类毒素。

4、内毒素的主要生物学活性有致热作用、白细胞增多、感染性休克、DIC等。

5、细菌全身感染在临床上常见以下几种情况：

（1）毒血症：

致病菌不进入血液循环，但其产生的外毒素入血。

（2）菌血症：

致病菌侵入血流，但不在其生长繁殖。

（3）败血症：

致病菌侵入血流，在其中大量繁殖并产生毒性物质。

（4）脓毒血症：

化脓性细菌侵入血流，并在其大量繁殖。

（5）内毒素血症：

革兰阴性细菌侵入血流，并在其大量繁殖，崩解后释放大量内毒素。

第四章细菌检验技术常见考点

一、细菌染色标本镜检

▲染色标本检查的基本程序是涂片、干燥、固定、染色、镜检。

（一）革兰染色

1、革兰染色为两种染料先后进行染色，为复染色法。

2、染液：

结晶紫、卢戈碘液、95%乙醇、稀释苯酚复红液或沙黄。

3、染色步骤：

初染1min（结晶紫）→流水冲洗→媒染1min（卢戈碘液）→流水冲洗→脱色20-30s（95%乙醇）→流水冲洗→复染0.5-1min（稀释苯酚复红液或沙黄）→流水冲洗→干燥→镜检

4、意义：

鉴别细菌、指导用药、指导临床治疗。

5、结果判定：

染紫色为革兰阳性，染红色为革兰阴性。

（二）抗酸染色

1、抗酸染色也是两种染料先后染色，也是复染色法。

2、染液：

苯酚复红、3%盐酸酒精、吕氏碱性亚甲蓝

3、染色步骤：

初染5～8min（苯酚复红加热）→流水冲洗→脱色（3%盐酸酒精）→流水冲洗→复染1min（吕氏亚甲蓝）→流水冲洗→干燥→镜检

4、注意事项：

①苯酚加热冒气即可，切勿煮沸或煮干；②脱色要脱到无红色染液脱下为止。

③痰标本需要经过酸或碱处理后，使痰液化后接种。

5、临床意义：

一般用于分枝杆菌属的检查，如结核分枝杆菌、麻风杆菌等。

6、结果判定：

染成红色为抗酸菌，染成蓝色为非抗酸菌。

二、细菌不染色标本镜检

▲压滴法、悬滴法、暗视野聚光法均用于观察细菌动力。

暗视野聚光法使用暗视野显微镜可观察螺旋体及其动力。

三、细菌接种与培养技术

1、液体培养基是在肉浸液中加入1%蛋白胨和0.5%NaCl，调pH至7.4，蛋白胨的作用为提供细菌生长繁殖所需的氮源。

2、半固体培养基是在液体培养基中加入0.2%～0.5的琼脂。

3、固体培养基是在液体培养基中加入2%～3%的琼脂。

4、细菌L型的培养基必须采用高渗（3%～5%NaCl、10%～20%蔗糖等）低琼脂培养基。

5、制备好的培养基放于4℃活冷暗处一般可以保存一周，最多不超过2周。

6、平板划线接种法一般用于含有多种细菌的标本，利用此接种法可以得到单个菌落，分为分区划线法和连续划线法。

7、分区划线法下一区应与上一区接触3～4次，此方法多用于含菌量多的标本，如粪便、浓汁、痰液等标本。

连续划线法多用于含菌量少的标本。

8、斜面接种法主要用于纯种增菌及保留菌种或生化反应。

9、穿刺接种法可用于观察细菌动力，有鞭毛的细菌可沿穿刺线扩散生长。

10、液体接种法多用于普通肉汤、蛋白胨水等液体培养基接种。

11、细菌在液体培养基上的生长现象有三种，分别是：

①混浊（大多数细菌）；②沉淀（链状生长的细菌，如链球菌、炭疽芽孢杆菌等）；③菌膜（专性需氧菌，如铜绿假单胞菌等）。

12、血琼脂上的溶血现象：

　　α溶血：

又叫草绿色溶血，菌落周围血培养基变为绿色环状。

　　β溶血：

又称完全溶血，菌落周围形成一个完全清晰透明的环。

　　γ溶血：

即不溶血，菌落周围的培养基没有变化；红细胞没有溶解或无缺损。

　　双环：

上层溶血环，内层为θ溶血，外层为α溶血。

如产气荚膜梭菌。

13、倾注平板法用于水、牛乳、饮料及尿液等液体标本的细菌计数。

14、常用的厌氧培养法有：

①疱肉培养基法；②焦性没食子酸法；③厌氧罐法；④气袋法；⑤厌氧手套箱法，⑥气体喷射法。

15、最常用的营养培养基：

血平板和巧克力平板。

16、鉴别培养基：

如糖发酵管、三糖铁培养基、枸橼酸盐培养基、克氏双糖铁琼脂（KIA）、伊红-美蓝琼脂和动力-吲哚-尿素（MIU）等培养基。

17、选择培养基：

在培养基中加入某种化学成分或抗生素以抑制某些细菌的生长，而有助于需要的细菌生长，此培养基称为选择培养基。

如SS琼脂，其中的胆盐能抑制革兰阳性菌，因而使沙门菌、志贺菌容易得到分离。

18、增菌培养基：

如乙型溶血性链球菌、肺炎链球菌的生长需含血液或血清的培养基；霍乱弧菌的增菌常用碱性蛋白胨水。

19、特殊培养基：

包括厌氧培养基和细菌L型培养基。

巯基乙醇酸钠是特殊培养基。

厌氧培养基如疱肉培养基；细菌L型培养基是针对细胞壁缺陷的细菌L型，由于胞内渗透压较高，培养基必须采用高渗低琼脂培养基。

20、细菌血液培养使用的抗凝剂为聚苯乙烯磺酸钠（SPS）。

四、细菌生化鉴定技术

（一）碳水化合物代谢试验

1、碳水化合物代谢试验包括：

糖（醇、苷）类发酵试验、葡萄糖氧化/发酵试验、甲基红试验（MR）、V-P试验、β-半乳糖苷酶试验（ONPG）、七叶苷水解试验。

2、甲基红试验的原理是细菌发酵葡萄糖产酸，使培养基pH下降至4.5以下，加入甲基指示剂变红为试验阳性。

3、V-P试验出现红色为阳性，ONPG出现黄色为阳性，七叶苷水解试验出现黑色为阳性。

V-P试验常与甲基红试验一起使用，因为前者阳性的细菌，后者通常为阴性。

4、七叶苷水解试验主要用于D族链球菌与其他链球菌的鉴别，前者为阳性（黑色）。

（二）蛋白质和氨基酸代谢试验

1、蛋白质和氨基酸代谢试验包括：

靛基质（吲哚）试验、硫化氢试验、尿素酶试验、苯丙氨酸脱氨酶试验、氨基酸脱羧酶试验。

2、吲哚试验是由于细菌有色氨酸酶，可以分解色氨酸而产生吲哚，与对二甲基苯甲醛反应生成红色化合物，本试验呈现红色为阳性。

3、硫化氢试验是细菌能分解含硫氨基酸，产生的H2S与Fe2+反应呈黑色为阳性。

主要用于肠杆菌科中属及种的鉴别。

如沙门菌属、爱德华菌属、亚利桑那菌属、枸橼酸杆菌属、变形杆菌属细菌，绝大多数硫化氢阳性，其他菌属阴性。

沙门菌属中也有硫化氢阴性菌种。

4、尿素酶试验是细菌分解尿素生成氨，使培养基呈碱性，指示剂变红为阳性。

5、苯丙氨酸脱氨酶的阳性结果为绿色，氨基酸脱羧酶的阳性结果为培养基从黄色变为紫色。

（三）碳源利用试验

1、碳源利用试验包括枸橼酸盐利用试验和丙二酸盐利用试验。

2、枸橼酸盐利用试验的阳性结果为深蓝色，阴性为绿色。

3、丙二酸盐利用试验的阳性结果为深蓝色。

4、枸橼酸盐利用试验在肠杆菌科中埃希菌属、志贺菌属、爱德华菌属和耶尔森菌属均为阴性，沙门菌属、克雷伯菌属通常为阳性。

（四）酶类试验

1、触酶试验：

细菌能催化过氧化氢生成水和氧气，出现气泡为阳性。

2、氧化酶试验：

某些细菌具有细胞色素氧化酶，能将二甲基对苯二胺或四甲基对苯二胺氧化成红色的化合物，出现红色为阳性。

3、凝固酶试验：

主要用于金黄色葡萄球菌的鉴定。

4、DNA酶试验：

细菌产生DNA酶分解DNA，是菌落周围出现透明环。

葡萄球菌、沙雷菌、变形杆菌均为阳性。

5、硝酸盐还原试验：

出现红色为阳性。

若加入试剂后无颜色反应，可能是：

①硝酸盐没有被还原，试验阴性；②硝酸盐被还原为氨和氮等其他产物而导致假阴性结果，这时应在试管内加入少许锌粉（还原剂），如出现红色则表明试验确实为阴性。

若仍不产生红色，表示试验为假阴性。

（五）其他及药敏鉴定试验

1、CAMP试验：

B群链球菌能产生CAMP因子，可促进葡萄球菌的β-溶血素溶解红细胞的活性，因此在两菌（B群链球菌和葡萄球菌）的交界处溶血力增加，出现箭头状或矢形（半月形）的溶血区。

在链球菌中，只有B群链球菌CAMP试验阳性，故可作为特异性鉴定。

2、胆汁溶菌试验：

胆汁或胆盐可溶解肺炎链球菌，可能是由于胆汁降低细胞膜表面的张力，使细胞膜破损或使菌体裂解；或者是由于胆汁加速了肺炎链球菌本身自溶过程，促使细菌发生自溶。

3、O/129抑菌试验：

O/129抑菌试验为药敏试验，0／129（二氨基喋啶）对弧菌属细菌有抑制作用，而对气单胞菌属细菌无抑制作用。

4、杆菌肽试验：

A群链球菌对杆菌肽几乎全部敏感，而其他群链球菌绝大多数对其耐药。

5、奥普托欣（Optochin）试验：

几乎所有肺炎链球菌对奥普托欣试验敏感，而奥普托欣试验对其他链球菌则无抑制作用。

五、细菌毒力鉴定

▲内毒素

常采用鲎试验——内毒素激活鲎试剂中凝固酶原转变为凝固酶，凝固蛋白原生成凝固蛋白。

▲外毒素

常用体内及体外毒力试验检测，也用ELISA法测定。

第五章细菌对抗菌药物的敏感试验

一、临床常用抗菌药物

（一）β-内酰胺类

1、常见药物主要是青霉素类、头孢菌素类和单环β-内酰胺类（氨曲南和卡芦莫南）。

2、作用机制：

β-内酰胺类抗生素的作用机制相似，均是与青霉素结合蛋白（PBP）结合，抑制细菌细胞壁合成，致使细菌死亡。

（二）氨基糖苷类

1、作用机制：

①依靠离子的附作用，吸附在菌体表面，造成膜的损伤；②和细菌核糖体30S小亚基发生不可逆结合，抑制mRNA的转录和蛋白质的合成，造成遗传密码的错读，产生无意义的蛋白质。

2、种类：

①链霉菌属：

如链霉素、卡那霉素、妥布霉素、核糖霉素、巴龙霉素、新霉素；

　　②小单胞菌属：

如庆大霉素、福提霉素；

　　③半合成氨基苷类：

阿米卡星、奈替米星、地贝卡星等，氨基苷类抗菌药物对需氧G-杆菌有较强的抗菌活性，对G+球菌有一定的活性。

（三）喹诺酮类

1、作用机制：

①通过外膜孔蛋白和磷脂渗透进入细菌细胞；②作用于DNA旋转酶，干扰细菌DNA复制、修复和重组。

2、种类：

①第一代：

为窄谱抗菌药物，对G+球菌无作用；主要作用于大肠埃希菌，且迅速出现耐药，较少应用于临床。

②第二代：

对G-和G+细菌均有作用；比较这类药的抗菌活性强度依次为环丙沙星、氧氟沙星、罗美沙星、氟罗沙星、培氟沙星、诺氟沙星；

③第三代：

对G+菌作用高于第二代的4～8倍，对厌氧菌亦有作用；司帕沙星、妥舒沙星、左氧氟沙星、加替沙星、格帕沙星、莫西沙星等。

（四）大环内酯类

1、作用机制：

可逆结合细菌核糖体50S大亚基的23S单位，抑制细菌蛋白质合成和肽链延伸；

2、种类：

国内常用有红霉素、吉他霉素、麦迪霉素、乙酰螺旋霉素。

新一代大环内酯类有克拉霉素、罗红霉素、地红霉素、氟红霉素、阿奇霉素和乙酰麦迪霉素。

（五）其他抗菌药物

▲磺胺类：

竞争性第与二氢叶酸合成酶结合，阻止核酸形成。

▲四环素类：

阻止酰胺基转移酶RNA与mRNA核糖体的受体位点结合。

分为短效（土霉素、四环素）、中效（地美环素、美他环素）和长效（多西环素、米诺环素）。

▲氯霉素类、林克霉素类：

能与细菌核蛋白体50S亚基结合，使蛋白质合成呈可逆性抑制。

▲糖肽类：

属于杀菌剂，能与一个或多个肽聚糖合成中间产物形成复合物，阻断肽聚糖合成，阻止细胞壁合成。

包括万古霉素、去甲万古霉素、替考拉宁、多粘菌素、杆菌肽等。

◆大环内酯类的抗生素是抑菌剂。

二、抗菌药物敏感试验方法

▲细菌多抗菌药物的敏感分为三种现象：

敏感（S）、耐药（R）、中介（I）。

（一）扩散法（K-B法）

1、目前常用的方法，是一种半定量的方法。

采用的接种方法是平板涂布法。

2、抑菌圈的大小可以反映待检菌对测定药物的敏感程度，与该药对待检菌的最低抑菌浓度（MIC）呈负相关，即抑菌圈愈大，MIC愈小。

3、含药纸片贴于含菌琼脂表面时应注意：

①各纸片中心距离不小于24mm，纸片距平板内缘应大于15mm；②一旦碰触培养基就不可再动；③平板最好单独平放，不超过两个叠放。

4、采用标准菌株是进行质控的主要措施。

◆金黄色葡萄球菌ATCC25923，大肠埃希菌ATCC25922，铜绿假单胞菌ATCC27853，粪肠球菌ATCC29212或ATCC33186。

5、纸片扩散法的培养基要求其pH值为7.2～7.4，过高或过低的pH值会影响药物效能。

碱性可扩大氨基糖苷类药物的抑菌圈，酸性可扩大四环素类药物的抑菌圈。

★其他高频考点

1、MBC为最低杀菌浓度。

2、体外联合药物敏感试验的FIC （部分抑菌浓度指数）：

FIC指数＜0.5协同作用；FIC指数0.5～1相加作用；FIC指数1～2无关作用；FIC指数＞2拮抗作用。

3、抗结核分枝杆菌的首选一线药物是异烟肼、利福平。

4、产ESBL菌株临床上用β-内酰胺类抗生素（青霉素类、头孢菌素类及氨曲南）治疗无效。

5、耐甲氧西林金葡菌（MRSA）用β-内酰胺类抗生素治疗无效。

6、产AmpC酶菌株对β-内酰胺类抗生素（青霉素类、头孢菌素类及氨曲南）及含酶抑制剂复合制剂耐药。

治疗有效的药物主要有碳青霉烯类（亚胺培南）和第四代头（头孢吡肟、头孢匹罗）以及某些喹酮类和氨基糖苷类抗生素。

7、药敏试验时，采用的菌液浓度为0.5麦氏比浊度，相当于1.5×10^8/ml含菌量。

第六章各菌属特征汇总

●葡萄球菌属

1、葡萄球均属是一类触酶试验阳性的革兰阳性（G＋）球菌，无鞭毛和芽胞，某些菌株能形成荚膜。

包括金黄色、表皮、腐生、溶血葡萄球菌。

2、葡萄球菌触和链球菌鉴别用触酶试验，葡萄球菌触酶阳性，链球菌是阴性。

3、葡萄球菌的致病性用凝固酶试验，致病性葡萄糖球菌为阳性，还可以分解甘露醇产酸，耐热DNA酶阳性。

主要见于金黄色葡萄球菌。

4、葡萄球菌的细胞壁上有葡萄球菌A蛋白（SPA），可以与人类IgG的Fc段结合，可进行协同凝集试验。

5、葡萄球菌抵抗力强，耐热、耐干燥、耐高盐，是抵抗力最强的无芽胞细菌。

6、耐甲氧西林的金葡菌（MRSA），耐甲氧西林的表葡菌（MRSE），耐万古霉素的金黄色葡萄球菌（VRSA），耐万古霉素的表皮葡萄球菌（VRSE），MRSA的首选抗生素为万古霉素。

7、表皮葡萄球菌为医院感染的重要病原菌，它是导致血培养污染的常见细菌之一。

8、腐生葡萄球菌是导致尿路感染的常见病原菌之一。

★看到凝固酶、耐热DNA酶阳性，就选金黄色葡萄糖球菌。

●链球菌属

1、链球菌属是一大群触酶试验阴性、在液体培养基上呈链状排列的革兰阳性（G＋）球菌，但在陈旧培养基或被吞噬细胞吞噬后常呈革兰阴性（G－）。

无鞭毛、无芽胞。

2、肺炎链球菌矛头状排列，由于其能产生自溶酶，菌落呈脐窝状，鉴别试验：

奥普托欣试验（Optochin），阳性、胆汁溶菌试验阳性、荚膜肿胀试验阳性、草绿色溶血圈。

本菌是社区获得性肺炎的最常见病原菌。

3、A群链球菌用杆菌肽试验鉴别，为阳性。

可产生溶血素和红疹毒素，前者在血平板上形成β