实验三、植物病原细菌、病毒、线虫和寄生性种子植物形态观察最新.ppt

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实验三、植物病原细菌、病毒、线虫和寄生性种子植物形态观察一、实验目的通过实验，认识主要作物病原细菌、病毒、线虫和寄生性种子植物形态、所致病害的症状及病原物观察。

二、实验材料植物病害的盒装标本，各类症状的挂图、多媒体课件等。

三、实验内容1、植物病原细菌及其所致病害观察2、植物病原病毒及其所致病害观察3、植物病原线虫及其所致病害观察4、寄生性种子植物及其所致病害观察四、作业：

见四、作业：

见PPT最后一页。

最后一页。

实验三、植物病原细菌、病毒、实验三、植物病原细菌、病毒、线虫和寄生性种子植物形态观察线虫和寄生性种子植物形态观察指导教师：

段海明指导教师：

段海明一、植物病原细菌一、植物病原细菌l

（一）细菌的一般形态结构

（一）细菌的一般形态结构l细菌属原核生物细菌属原核生物,它的典型特点是遗传物它的典型特点是遗传物质分散在细胞质中，没有核膜包围，没有质分散在细胞质中，没有核膜包围，没有明显的细胞核。

细菌是单细胞的生物。

明显的细胞核。

细菌是单细胞的生物。

l1.1.细菌的形态细菌的形态l细菌有球形、杆状、螺旋状三种基本形状。

细菌有球形、杆状、螺旋状三种基本形状。

l植物病原细菌大多是杆状，大小为（植物病原细菌大多是杆状，大小为（0.5-0.5-0.80.8）（1-51-5）mm，少数是球状，少数是球状;l细菌一般要经过染色后在光学显微镜下观细菌一般要经过染色后在光学显微镜下观察。

察。

l2.2.细菌的细胞结构细菌的细胞结构l（11）细胞壁）细胞壁维持菌体形态维持菌体形态,并保护并保护l菌体菌体;l（22）细胞膜）细胞膜一种半渗透性的生一种半渗透性的生l物膜物膜;l（33）细胞质）细胞质含有蛋白质含有蛋白质,无机盐无机盐,脂类脂类.水等水等;l（4）（4）核质核质相当于真核生物的细胞相当于真核生物的细胞l核核.无核膜。

无核膜。

l（55）粘质层）粘质层由细胞分泌的多糖物质组成由细胞分泌的多糖物质组成;l（66）荚膜）荚膜厚而固定的粘质层厚而固定的粘质层;l植物病原细菌细胞外一般有厚薄不均的粘植物病原细菌细胞外一般有厚薄不均的粘质层，但很少有荚膜。

质层，但很少有荚膜。

l（77）芽孢）芽孢在菌体一端或中间产生在菌体一端或中间产生,l无色透明无色透明,具有抵抗不良环境的具有抵抗不良环境的l作用作用;植物病原细菌通常不产生芽孢。

植物病原细菌通常不产生芽孢。

芽孢抗逆性较强。

芽孢抗逆性较强。

l（88）鞭毛）鞭毛细菌的运动器官细菌的运动器官,不同的不同的l细菌鞭毛着生不一样细菌鞭毛着生不一样,有极生鞭毛有极生鞭毛,周生鞭周生鞭毛。

大多数植物病原细菌都具有鞭毛。

毛。

大多数植物病原细菌都具有鞭毛。

l革兰氏染色反应是细菌分类和鉴定的重革兰氏染色反应是细菌分类和鉴定的重要性状。

它是要性状。

它是1884年由丹麦医师年由丹麦医师Gram创立的。

创立的。

细菌先经碱性染料结晶（草酸铵结晶紫）染细菌先经碱性染料结晶（草酸铵结晶紫）染色及碘液处理后，用酒精脱色，在一定条件色及碘液处理后，用酒精脱色，在一定条件下有的细菌此色不被脱去，有的可被脱去，下有的细菌此色不被脱去，有的可被脱去，因此可把细菌分为两大类，前者叫做革兰氏因此可把细菌分为两大类，前者叫做革兰氏阳性菌（阳性菌（G+），后者为革兰氏阴性菌（），后者为革兰氏阴性菌（G-）。

）。

为观察方便，脱色后再用一种红色染料如碱为观察方便，脱色后再用一种红色染料如碱性蕃红等进行复染。

阳性菌仍是紫色，阴性性蕃红等进行复染。

阳性菌仍是紫色，阴性菌则被染上红色。

菌则被染上红色。

l革兰氏阳性菌和阴性菌的细胞壁的组革兰氏阳性菌和阴性菌的细胞壁的组成上有显著的不同，阳性的细胞壁厚、成上有显著的不同，阳性的细胞壁厚、坚硬而牢固，而阴性菌的壁薄而柔软。

坚硬而牢固，而阴性菌的壁薄而柔软。

再就是二者细胞壁的组成成份也不同。

再就是二者细胞壁的组成成份也不同。

（二）植物病原细菌所致病害症状观察

（二）植物病原细菌所致病害症状观察1、薄壁菌门：

有壁较薄。

革兰氏染色反应阴性，包括大多数植物病原细菌。

主要有以下十一个属：

土壤杆菌属、欧文氏菌属、泛菌属、果胶杆菌属、假单胞菌属、布克氏菌属、劳尔氏菌属、噬酸菌薯、黄单胞菌属、木质部小菌属和韧皮部杆菌属。

2、厚壁菌门：

有壁较厚。

革兰氏染色反应阳性，包括棒形杆菌属、芽孢杆菌属和链丝菌属（放线菌）、节杆菌属、短小杆菌属、红球菌属。

l（一一）欧文氏菌属欧文氏菌属l主要引起植物软腐（少数萎蔫和主要引起植物软腐（少数萎蔫和枝枯）。

枝枯）。

大白菜软腐病基腐型基腐型l症状Symptoms：

心腐型心腐型外腐型外腐型梨火疫病叶缘变黑叶缘变黑梨火疫病营养枝受害呈营养枝受害呈“手仗状手仗状”弯曲弯曲梨火疫病发病后期发病后期“火烧状火烧状”l

（二）假单胞菌属l主要引起叶斑和叶枯。

主要引起叶斑和叶枯。

黄瓜细菌性角斑病水渍状多角形斑点水渍状多角形斑点西瓜细菌性角斑病果实发病后期灰白果实发病后期灰白色病斑。

色病斑。

叶片发病淡褐色多叶片发病淡褐色多角形黄褐色斑点。

角形黄褐色斑点。

l姜瘟病地上部变褐腐烂地上部变褐腐烂地下根部腐烂，黄地下根部腐烂，黄褐色。

褐色。

l（三）黄单胞菌属（三）黄单胞菌属l主要引起叶斑和叶枯。

主要引起叶斑和叶枯。

柑橘溃疡病近圆性、米黄色隆起病斑。

近圆性、米黄色隆起病斑。

黄色、半透明病斑油疱状黄色、半透明病斑油疱状突起。

突起。

桃细菌性穿孔病桃细菌性穿孔病l症状Symptoms：

紫褐色至深褐色圆性或不紫褐色至深褐色圆性或不规则性病斑，最后病斑干规则性病斑，最后病斑干枯脱落，形成枯脱落，形成“穿孔状穿孔状”。

l（四）土壤杆菌属l主要引起植物的根、茎部瘤肿。

桃根癌病桃根癌病根部发病形成根瘤，大而硬，根部发病形成根瘤，大而硬，木质化。

木质化。

葡萄根癌病葡萄根癌病贴近地表，枝蔓基贴近地表，枝蔓基部形成瘤肿部形成瘤肿。

l（五）棒形杆菌属（五）棒形杆菌属l主要引起萎蔫。

主要引起萎蔫。

番茄溃疡病番茄溃疡病发病后期茎中空，开裂，可发病后期茎中空，开裂，可见褐色条斑。

见褐色条斑。

果实受害，果实受害，“鸟眼鸟眼”斑。

斑。

马铃薯环腐病马铃薯环腐病维管束呈乳白色或黄褐色环状，维管束呈乳白色或黄褐色环状，重者病部变黑褐色。

重者病部变黑褐色。

l（六六）劳尔氏菌属劳尔氏菌属l主要引起植株青枯。

主要引起植株青枯。

马铃薯青枯病l马铃薯青枯病地上部萎蔫死亡，地上部萎蔫死亡，叶片仍保持青绿色。

叶片仍保持青绿色。

番茄青枯病番茄青枯病全株青枯萎蔫，维管全株青枯萎蔫，维管束变褐。

束变褐。

植物病害的诊断的一般程序l诊断的程序和要求诊断的程序和要求l

（1）对病植物全株的症状观察与检查，症状的）对病植物全株的症状观察与检查，症状的识别与描述（有无病征、发生面积和时间，区识别与描述（有无病征、发生面积和时间，区分两类病害）；分两类病害）；l

（2）调查询问有关病史与有关档案，对病植物）调查询问有关病史与有关档案，对病植物的生长环境和已有的管理措施的询问调查；的生长环境和已有的管理措施的询问调查；l（3）采样检查（镜检、剖检，网络化远程诊断）采样检查（镜检、剖检，网络化远程诊断系统的应用）；系统的应用）；l（4）专项检测；）专项检测；l（5）综合分析比较，得出适当结论，下结论要）综合分析比较，得出适当结论，下结论要留有余地。

留有余地。

l不同层次的植保人员的知识和经验不同，不同层次的植保人员的知识和经验不同，因此，到最后确诊所需要的时间也是不一因此，到最后确诊所需要的时间也是不一样的。

样的。

l田间症状（确诊），镜检（确诊），分离、田间症状（确诊），镜检（确诊），分离、培养、接种（验证病原与症状的吻合，区培养、接种（验证病原与症状的吻合，区别寄生菌与腐生菌）确诊。

别寄生菌与腐生菌）确诊。

l对于一个新手或经验不多的植保人员来说，对于一个新手或经验不多的植保人员来说，正确的诊断需作详细和系统的检查，而不正确的诊断需作详细和系统的检查，而不仅根据外表症状。

仅根据外表症状。

植物病原细菌病害的诊断要点植物病原细菌病害的诊断要点11、首先要田间观察，区别侵染性病害和非侵染性病害。

、首先要田间观察，区别侵染性病害和非侵染性病害。

22、细菌病害的症状观察、细菌病害的症状观察细菌性病害，病植物表现的症状主要有坏死、萎蔫、细菌性病害，病植物表现的症状主要有坏死、萎蔫、腐烂和畸形等腐烂和畸形等44类，褪色或变色的较少，多数细菌病害类，褪色或变色的较少，多数细菌病害都有菌脓（都有菌脓（OozeOoze）溢出。

或者保温、保湿培养后会有菌）溢出。

或者保温、保湿培养后会有菌脓溢出。

脓溢出。

33、显微镜检查、显微镜检查由细菌侵染引起的病害，无论是维管束系统受害的，还是由细菌侵染引起的病害，无论是维管束系统受害的，还是薄壁组织受害的，都可以在徒手切片中看到有很多细菌薄壁组织受害的，都可以在徒手切片中看到有很多细菌从病部喷出，这种现象称为喷菌现象（从病部喷出，这种现象称为喷菌现象（BacteriaBacteriaexudation,BEexudation,BE）。

喷菌现象为细菌病害所特有，是区分）。

喷菌现象为细菌病害所特有，是区分细菌病害或真菌、病毒病害最简单的手段。

细菌病害或真菌、病毒病害最简单的手段。

44、分离培养与侵染性试验、分离培养与侵染性试验按柯赫氏法则，从病部组织中分离病原细菌的按柯赫氏法则，从病部组织中分离病原细菌的纯培养，无论是在普通培养基上，还是选择性纯培养，无论是在普通培养基上，还是选择性培养基上，挑选典型的单菌落，再接种到敏感培养基上，挑选典型的单菌落，再接种到敏感植物或指示植物上，使表现出典型的或特有症植物或指示植物上，使表现出典型的或特有症状反应是必不可少的。

状反应是必不可少的。

以上三个方面也只能区分是否是侵染性的细菌以上三个方面也只能区分是否是侵染性的细菌性病害，并未回答是何种病菌引起的病害。

因性病害，并未回答是何种病菌引起的病害。

因此，也只是初步诊断。

此，也只是初步诊断。

l二、植物病毒二、植物病毒一、病毒的形态和结构一、病毒的形态和结构l11、病病毒毒形形态态：

病病毒毒是是由由粒粒体体（particleparticle）组组成成的的，多多数数粒粒体体为为球球状状、杆杆状状、线线状状，少少数为弹状、杆状、双联体状：

数为弹状、杆状、双联体状：

l线状线状：

11-13nm750nm11-13nm750nm，细长可弯曲；细长可弯曲；l杆杆状状、弹弹状状：

刚刚直直不不易易弯弯曲曲，两两端端为为截截面面，称杆状；双端钝园，称弹状；称杆状；双端钝园，称弹状；l球球状状和和双双联联体体状状：

球球状状病病毒毒也也称称多多面面体体病病毒毒，直直径径多多为为20-35nm20-35nm，少少数数可可达达70-80nm70-80nm；若若病病毒毒由由两两个个球球状状病病毒毒粒粒体体联联合合一一起起，称称双双联病毒；联病毒；l2、病毒结构l绝大多数病毒粒体是由核酸和蛋白质衣壳组成；l植物弹状病毒粒体外有囊膜包被；l杆状或线状病毒粒体中间是螺旋体核酸链，外面是由许多蛋白质亚基组成的衣壳；l球状病毒结构复杂，表面由二十个正三角形组成，称20面体，还有60面体等；

（二）植物病毒所致病害症状观察

（二）植物病毒所致病害症状观察11、烟草花叶病毒属及、烟草花叶病毒属及TMVTMV22、黄瓜花叶病毒属及、黄瓜花叶病毒属及CMVCMV33、马铃薯、马铃薯YY病毒属及病毒属及PVYPVY番茄花叶病毒病花叶花叶植株矮化植株矮化烟草花叶病毒烟草花叶病毒（TMV）番茄曲顶病毒病叶柄下弯叶柄下弯主要由主要由番茄曲番茄曲顶病毒顶病毒引起。

引起。

番茄蕨叶病毒病番茄蕨叶病毒病苗期矮化，叶片细苗期矮化，叶片细长，不扩展。

长，不扩展。

黄瓜花叶病毒（黄瓜花叶病毒（CMVCMV）。

）。

花椰菜病毒病花椰菜病毒病叶片畸形，皱缩，叶片畸形，皱缩，叶脉坏死。

叶脉坏死。

黄瓜花叶病毒（黄瓜花叶病毒（CMV）、芜菁花）、芜菁花叶病毒（叶病毒（TuMV）等引起。

）等引起。

莴苣病毒病莴苣花叶病毒（莴苣花叶病毒（LMVLMV）和黄瓜花叶）和黄瓜花叶病毒（病毒（CMVCMV）等引起。

）