生物分析样品制备中的磁分离技术综述_精品文档.pptx
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生物分析样品制备中的磁分离技术目录目录7345621磁分离技术磁分离技术展望展望发展历程发展历程磁分离技术的应用磁分离技术的应用磁分离技术优点磁分离技术优点磁分离技术的模式磁分离技术的模式磁分离技术的一般程序磁分离技术的一般程序磁磁分分离离技技术术是是基基于于功功能能化化磁磁性性材材料料的的批批量量技技术术。
磁磁性性材材料料是是特特别别适适合合于于生生物物大大分分子子的的吸吸附附剂剂,因因为为其其表表面面积积大大,生生物物相相容容性性好好,功功能能化化方方便便,操操作作方方便便。
在在典典型型的的磁磁分分离离过过程程中中,对对分分离离结结构构表表现现出出亲亲和和力力的的磁磁性性材材料料与与含含有有目目标标化化合合物物的的样样品品混混合合。
在在孵孵育育期期间间,靶靶化化合合物物与与磁磁性性颗颗粒粒结结合合。
随随后后使使用用额额外外的的磁磁场场将将整整个个磁磁性性复复合合物物与与样样品品分分离离。
清清除除污污染染物物后后,分分离离的的目目标标化化合合物物可可以以洗洗脱并用于进一步的工作。
脱并用于进一步的工作。
磁分离技术磁分离技术磁性分离通常对生物分析物如蛋白质或肽类来说是温和的捕获到磁性材料的目标分析物可以从样品中容易地去除磁性分离可以通过几个简单的步骤直接用于生物样品磁分离程序是强大而有效的,特别是对于大规模的操作磁分离技术优点发展历程发展历程公元前六世纪确定磁性材料的性质1792年,当WilliamFullarton提出铁矿物与磁铁分离专利磁性材料被应用于分离1970年起应用磁性材料分离和分析各种生物活性化合物和细胞,磁选分离已成为样品制备的常用方法。
图图11显示显示20032003年至年至20132013年间发表的关于蛋白质年间发表的关于蛋白质/肽,核肽,核酸,细胞,生物活性化合物和酶的分离的文献的统计。
酸,细胞,生物活性化合物和酶的分离的文献的统计。
直接模式直接模式:
具有适当的亲和配体并对靶化合物表现出亲和力的磁性亲和粒子直接施加到样品上。
孵育后,目标化合物或细胞与磁性亲和粒子结合,形成稳定的磁性复合物。
间接模式:
间接模式:
首先将游离亲和配体如适当的抗体加入到溶液或悬浮液中以使得能够与靶化合物相互作用。
在从溶液中除去过量的未结合的亲和配体后,通过合适的亲和磁性颗粒捕获所得到的标记复合物。
磁分离技术磁分离技术的模式的模式磁分离技术的一般磁分离技术的一般程序程序磷酸蛋白磷酸蛋白/磷酸肽的富集磷酸肽的富集糖蛋白糖蛋白/糖肽的富集糖肽的富集固定在固定在MNPMNP上的特异性上的特异性寡核苷酸结合到粗细胞寡核苷酸结合到粗细胞裂解物中的靶核酸的特裂解物中的靶核酸的特异位点,然后磁分离。
异位点,然后磁分离。
固定在固定在MNPMNP上的抗原可用上的抗原可用于通过免疫应答分离抗体于通过免疫应答分离抗体表达或抗原特异性细胞。
表达或抗原特异性细胞。
短时间内进行受控的酶降解,短时间内进行受控的酶降解,一旦反应完成,酶固定的一旦反应完成,酶固定的MNPMNP可以通过外加磁体与产物分离。
可以通过外加磁体与产物分离。
在蛋白质组中生物大分子的富集分离核酸细胞分离酶固定磁分离技术磁分离技术的应用的应用由于操作简单,效率高,生物相容性高,磁选技术已成为由于操作简单,效率高,生物相容性高,磁选技术已成为生物分析中的重要趋势。
生物分析中的重要趋势。
磁分离技术的应用大大简化了样品预磁分离技术的应用大大简化了样品预处理过程。
处理过程。
分析物结合的磁性复合物可以通过施加外部磁场容分析物结合的磁性复合物可以通过施加外部磁场容易地进行。
易地进行。
此外,由于磁性材料的完美的磁特性,可以使磁性此外,由于磁性材料的完美的磁特性,可以使磁性材料的再利用性得到改善。
材料的再利用性得到改善。
有望开发用于从大量粗培养基有望开发用于从大量粗培养基中直接选择性提取生物活性化合物中直接选择性提取生物活性化合物的工业磁选分离系统,基于自动操的工业磁选分离系统,基于自动操作作MNPMNP的高效富集生物活性化合物的的高效富集生物活性化合物的机器人平台仍然是一个特别具有挑机器人平台仍然是一个特别具有挑战性的案例。
战性的案例。
1234将来,预期磁分离技术将在生物化学分析中开发,例如将来,预期磁分离技术将在生物化学分析中开发,例如应用免疫磁性颗粒从混合物中分离靶蛋白以及酶联免疫吸附应用免疫磁性颗粒从混合物中分离靶蛋白以及酶联免疫吸附测定(测定(ELISAELISA)检测)检测磁性材料与新兴技术如芯片和微流体分磁性材料与新兴技术如芯片和微流体分析的集成将允许在微量器件中同时磁性分离和检测极微量的析的集成将允许在微量器件中同时磁性分离和检测极微量的生物活性化合物。
生物活性化合物。
展望展望磁分离技术相对较新,仍在开发中。
磁分离技术相对较新,仍在开发中。
由于生物样品复杂的基质,需提高由于生物样品复杂的基质,需提高MNPMNP的稳定性、长寿命和良好选择性等物的稳定性、长寿命和良好选择性等物化性质。
小规模的磁选技术占有优势,化性质。
小规模的磁选技术占有优势,但这些技术的潜力尚未得到充分开发。
但这些技术的潜力尚未得到充分开发。
THANKS