补体C3d增强伪狂犬病毒gC基因免疫原性的研究_精品文档.ppt

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补体C3d增强伪狂犬病毒gC基因免疫原性的研究,汇报提纲,文献综述研究的目的、意义研究内容结果与分析结论,补体C3d的分子生物学特性,补体C3d晶体格结构,补体受体CR2晶体格结构,补体受体CR2与C3d结合的晶体格结构,抗原和补体C3d复合物与B细胞表面受体结合示意图,补体C3d的作用机理,伪狂犬病毒gC基因的结构与功能,PrV11种糖蛋白在免疫中的作用,研究内容：

1.猪、鼠、羊补体C3d分子cDNA的克隆与序列分析2.补体C3d或受体结合功能区M28对gC基因核酸疫苗的免疫增强作用3.猪源补体C3d的分子免疫增强作用及小鼠动物模型的建立,试验技术路线图,RT-PCR扩增,补体C3d分子,重组质粒的构建,动物免疫试验,体液免疫,细胞免疫,结果与分析,猪、鼠、羊补体C3d分子的克隆,ULIRUsTR,小鼠肝细胞总RNA的电泳结果,C3dcDNA的RT-PCR扩增,不同物种间C3d氨基酸同源性的比较,鼠/羊补体C3d同源性81%，鼠/猪补体C3d同源性82%,两种不同形式的系统发育进化树,鼠、猪、羊补体C3d蛋白信号肽分析,鼠、猪、羊补体C3d均无信号肽,鼠、猪、羊的受体结合功能区,重组表达质粒的结构示意图,重组质粒的间接免疫荧光试验,A:

pcDNA3.1+;B:

sgC;C:

sgC-C3d3;D:

sgC-M284,A,B,D,C,Westernblotting分析融合蛋白表达,Westernblot检测pcDNA3.1+、sgC、sgC-C3d3、sgC-sC3d3和sgC-M284在PK-15细胞中的表达,不同免疫组诱导的抗gCELISA抗体检测,鼠源C3d作用,猪源C3d作用,免疫组不同阶段诱导的中和抗体滴度,鼠源补体C3d,猪源补体C3d,各免疫组诱导的淋巴细胞刺激指数,鼠源补体c3d作用,猪源补体c3d作用,免疫组脾细胞IL-4、IFN-水平检测,鼠源补体c3d免疫增强作用,鼠源补体c3d免疫增强作用,攻毒后小鼠的存活情况,鼠源补体C3d,猪源补体C3d,攻毒后各免疫组小鼠的体重变化情况,鼠源补体c3d作用,猪源补体c3d作用,结论,.克隆了猪、鼠、羊的补体C3d分子，其中羊补体C3d分子的克隆为首次报道。

2.证明gC基因与C3d融合能够显著增强gC基因常规DNA疫苗所诱发的体液免疫水平，调节Th1/Th2免疫反应平衡，提供更强的免疫保护作用。

3.补体C3d的受体结合功能区M28可以增强gC基因常规DNA疫苗所诱发的ELISA与中和抗体水平，但是较全长C3d的免疫增强作用略差。

4.猪源补体C3d同样可以显著增强gC基因常规DNA疫苗抗体水平，提供更强的免疫保护作用。

5.建立了小鼠模型，研究猪源补体C3d分子免疫佐剂作用。

TiezhuTong,HuiyingFan,YadiTan,ShaoboXiao,JieyuLing,HuanchunChen,AizhenGuoC3denhancedDNAvaccinationinducedhumoralimmuneresponsetoglycoproteingCofpseudorabiesvirusBiochemicalandBiophysicalResearchCommunications（2004IF:

2.904）2.TiezhuTong,HuiyingFan,YadiTan,ShaoboXiao,HuanchunChen,AizhenGuoImmunogenicityofaPseudorabiesvirusgCC3dfusionproteincontainingaporcinehomologofC3dVaccine（submitted）3.TiezhuTong,HuiyingFan,YadiTan,HuanchunChen,AizhenGuoC3denhancementofgCglycoproteinimmuneresponseagainstpseudorabiesvirus19thInternationalPigVeterinaryCongress,硕士期间发表文章：

硕士期间发表文章：

4.HuiyingFan,Chunmei,Ju,TiezhuTong,HongliangHuang,JiangqiangLv,HuanchunChenImmunogenicityofEmptyCapsidsofPorcineCircovirusType2ProducedinInsectCells。

Veterinaryresearchcommunications5.佟铁铸、樊惠英、谭亚娣、陈焕春、郭爱珍鼠、猪、羊补体C3d基因克隆和序列分析预防兽医学报（submitted）6.樊惠英、佟铁铸;琚春梅;吕建强;黄红亮、陈焕春;猪圆环病毒2型ORF2基因在昆虫细胞中的表达及其特性生物工程学报200521（6）975-978,