届二轮 微生物的培养与应用 专题卷适用全国.docx

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届二轮微生物的培养与应用专题卷适用全国

微生物的培养与应用

一、单选题

1．实验测定链霉素对3种细菌的抗生素效应，用3种细菌在事先准备好的琼脂块平板上画3条等长的平行线（3条线均与下图中的链霉素带接触），将平板置于37℃条件下恒温培养3天，结果如图所示。

从实验结果分析以下叙述，不正确的是（）

A.链霉素能阻止结核菌的生长

B.链霉素对结核菌比对霍乱菌更有效

C.链霉素对结核菌比对伤寒菌更有效

D.链霉素可以用于治疗伤寒病人

【答案】D

【解析】图中结核菌最短，说明链霉素能够阻止结核菌的生长，且比对伤寒菌、霍乱菌更有效，ABC正确；图中接种伤寒菌的琼脂块没有变短，说明链霉素对伤寒菌没有作用，所以链霉素不能用于治疗伤寒病人，D错误。

【考点定位】实验探究抗生素对不同细菌的作用

【名师点睛】据图分析，已知3条平行菌线均与链霉素菌带接触，链霉素对细菌抗生效应大小，可从图中横向的三条菌带长度加以判别，菌带越长，说明此菌生长良好，链霉素对该菌的杀灭作用越弱；菌带越短，说明此菌生长不好，链霉素对该细菌杀灭作用越强。

2．尿素是尿素分解菌的氮源，因此在配制培养基时

A．葡萄糖在培养基中含量越多越好

B．尿素在培养基中含量越少越好

C．尿素分解菌有固氮能力，故培养基中尿素为无机氮

D．尿素分解菌无固氮能力，故培养基中尿素为有机氮

【答案】D

【解析】

试题分析：

在配制培养基时，葡萄糖和尿素的含量都要适中，A、B都错误；尿素分解菌无固氮能力，但能利用尿素中的氮元素发生同化作用，尿素本身就是有机物，所以尿素中的氮是有机氮。

故C错误，D正确。

考点：

尿素分解菌的相关知识

【名师点睛】鉴定分解尿素的细菌

（1）原理：

CO（NH2）2＋H2O

CO2＋2NH3；由于NH3的产生，培养基碱性增强，pH升高，因此可通过检测pH的变化来判断该化学反应是否发生。

（2）方法：

以尿素为唯一氮源的培养基中加入酚红指示剂，培养某种细菌，若指示剂变红，则pH升高，说明该种细菌能分解尿素。

3．为了研究病毒，需将其大量培养，你认为下列何种培养方式最适宜（）

A.无菌的牛肉汤B.含有多种无机盐的培养液

C.固体培养基D.适宜温度和湿度下的活鸡胚

【答案】D

【解析】病毒无细胞结构，不能进行独立的代谢活动．病毒只能寄生在某种特定的活细胞内才能生活。

并利用宿主细胞内的环境及原料快速复制增值。

无菌的牛肉汤是只含有营养物质的培养基上，是不能繁殖病毒的。

故A错误；病毒无细胞结构，需寄生在活细胞中生活，而含多种无机盐的培养液只是含有营养物质的培养基，无细胞。

则不能培养病毒。

故B错误；固体培养基在液体培养基中加入适量的凝固剂即成固体培养基。

常用作凝固剂的物质有琼脂、明胶、硅胶等，以琼脂最为常用。

固体培养基在实际中用得十分广泛。

在实验室中，它被用作微生物的分离、鉴定、检验杂菌、计数、保藏、生物测定等。

没有活细胞，不能培养病毒。

故C错误；病毒无细胞结构，需寄生在活细胞中生活，所以培养病毒可以用活的鸡胚作为培养基。

温度和湿度都会影响动物细胞的培养，所以病毒的培养需要适宜温度和湿度下的活鸡胚。

故D正确。

【考点定位】烟草花叶病毒

4．在涂布有大肠杆菌的培养基上进行抑菌实验，在a、b、c处分别贴浸有不同抗生素（浓度相同）的无菌滤纸片，d处滤纸片浸有无菌水。

培养后的结果如下图。

以下判断错误的是

A.a处抑菌效果小于b处

B.b处的滤纸片没有沥干

C.c处抗生素无效

D.d为对照

【答案】A

【解析】透明圈大的抑菌效果好，透明圈小的抑菌效果弱。

d为空白对照，与d处的比较可说明a处抑菌效果大于b处；A错误。

B处透明圈不规则，可说明b处的滤纸片没有沥干；B正确。

C处的与d处相同，说明c处抗生素无效；C正确。

【考点定位】本题考查微生物的培养的相关知识。

5．关于青霉素生产的叙述，正确的是

A．用紫外线、激光、化学诱变剂处理青霉菌再经筛选的方法可选育高产菌种

B．青霉素是青霉菌生长代谢中重要的初级代谢产物

C．发酵罐接种后必须进行灭菌处理

D．在青霉菌生长的稳定期，活菌数不再增加，青霉菌产量下降

【答案】A

【解析】

试题分析：

可以用物理、化学等诱导因素诱导青霉菌产生基因突变，再经筛选的方法可选育高产菌种，A正确；青霉素是次级代谢产物，B错误；发酵罐接种后不能灭菌，灭菌会把菌种杀死，C错误；稳定期，细胞内大量积累代谢产物，特别是次级代谢产物，D错误。

考点：

本题考查了微生物的代谢和培养的相关知识，意在考查考生能识记并理解所学知识的要点，把握知识间的内在联系的能力。

6．在腐乳制作过程中，加盐和加酒所发挥的作用相同的是（）

A．析出豆腐中的水分，使豆腐块变硬

B．抑制微生物的生长，避免豆腐块腐败变质

C．使腐乳具有独特的香味

D．促进蛋白质水解成多肽和氨基酸

【答案】B

【解析】腐乳制作过程中，加盐的目的是析出豆腐中的水分，使豆腐块变硬，同时抑制微生物的生长，避免豆腐块腐败变质；加酒的目的是抑制微生物的生长，同时使腐乳具有独特的香味；加香料的目的是调制腐乳的风味，也具有防腐杀菌的作用。

7．在酿酒生产上，常向发酵罐中加少量尿素，其目的是（　　）

A.作为碳源，为酵母菌提供能源物质B.作为碳源，用于酵母菌合成代谢产物

C.作为氮源，用于酵母菌合成蛋白质和核酸D.作为氮源，用于酵母菌合成代谢产物

【答案】C

【解析】略

8．下列有关生物技术实践的叙述中，正确的是

A．培养基中加入酚红指示剂，若指示剂变红则培养基中肯定有能够分解尿素的细菌

B．在菊花组织培养中，MS培养基中可以不加入生长素或生长素类似物

C．在果酒的制作中，榨出的葡萄汁需经过高压蒸汽灭菌后才能密闭发酵

D．煮沸杀菌是生活中常用到的灭菌方法，常用于培养皿、牛奶等的灭菌

【答案】B

【解析】

试题分析：

培养基中加入酚红指示剂，若指示剂变红则培养基中肯定有能产生碱性物质的东西，但不一定就是分解尿素的细菌，故A错误。

因为菊花容易进行组织培养，在菊花组织培养中，MS培养基中可以不加入植物激素即生长素或生长素类似物，故B正确。

在果酒的制作中，榨出的葡萄汁不能经过高压蒸汽灭菌，因为会将附着在葡萄皮上的野生型酵母菌灭活，故C错误。

煮沸杀菌常用于牛奶灭菌但培养皿通常用干热灭菌，故D错误。

考点：

本题考查生物技术实践相关知识，意在考察考生对知识点的识记理解掌握程度。

9．下表所列培养基配方中，能作为选择培养基、鉴别培养基的依次是（）

A．①③B．③①

C．②④D．①②

【答案】B

【解析】

试题分析：

③加了青霉素，有选择作用，故③能作为选择培养基，①加了伊红，属于鉴别培养基，故选B。

考点：

本题主要考查微生物培养基的类型，意在加强学生对相关知识点的识记与理解。

10．在制作馒头时，可采用小苏打或者通过酵母菌发酵的方法使馒头松软，请问这两种方法中，馒头中的营养和所含有的能量情况相比较最可能的是（　　）

A.后者所含营养丰富，能量少

B.后者所含营养单一，能量少

C.前者所含营养丰富，能量少

D.两者所含营养和能量相同

【答案】A

【解析】试题分析：

采用小苏打的原理是小苏打在高温下分解产生二氧化碳，使馒头松软，并不会改变面粉中的营养物质和能量；能量的多少取决于有机物总量，利用酵母菌发酵会消耗面粉中的有机物，且酵母菌正是从其中获取能量而生存的，所以能量较少。

在利用有机物发酵时，酵母菌会把一些有机物合成或分解成其他种类的有机物，所以有机物种类多，即营养丰富。

故A项正确，B、C、D项错误。

考点：

本题考查运用发酵加工食品的基本方法的相关知识，意在考查考生理论联系实际，综合运用所学知识解决自然界和社会生活中的一些生物学问题的能力。

11．某研究小组从有机废水中分离微生物用于废水处理。

下列叙述正确的是

A.培养基分装到培养皿后进行高压蒸汽灭菌

B.转换划线角度后需灼烧接种环再进行划线

C.接种后的培养皿须放在光照培养箱中培养

D.培养过程中每隔一周观察三次菌落生长

【答案】B

【解析】在配制培养基的过程中要先灭菌后倒平板，A错误；灼烧接种环可以防止残留菌种对实验的干扰，因此转换划线角度后要对接种环进行灼烧灭菌再进行划线，B正确；接种后放置在恒温培养箱中进行培养，C错误；微生物的繁殖速度快，培养过程中一般要隔天观察一次，D错误。

12．用于观察微生物的运动的培养基是：

A、固体培养基B、半固体培养基

C、天然培养基D、选择培养基

【答案】B

【解析】

13．发酵工程的第一个重要工作是选择优良的单一纯种。

消灭杂菌获得纯种的方法不包括（）

A．根据微生物对碳源需要的差别，使用含不同碳源的培养基

B．根据微生物缺乏生长因子的种类，在培养基中增减不同的生长因子

C．根据微生物遗传组成的差异，在培养基中加入不同比例的核酸

D．根据微生物对抗菌素敏感性的差异，在培养基中加入不同的抗菌素

【答案】C

【解析】

试题分析：

选择优良的单一菌种，可以采用选择培养基法。

即在培养基中加入某种物质，以抑制不需要的微生物、促进所需微生物的生长。

如青霉素可分离酵母菌和霉菌，抑制细菌和放线菌；加高浓度的食盐可得金黄色葡萄球菌；缺氮培养基可分离固氮微生物；A项自养微生物用无机培养基；异养微生物用有机培养基；B项生长因子是微生物不能合成的小分子有机物，如维生素、氨基酸和碱基等，但天然培养中不会缺乏。

乳酸菌需加入多种维生素、氨基酸等多种生长因子，加入四环素可分离大肠杆菌。

故选C

考点：

本题考查微生物的利用。

点评：

不同的微生物所需要的碳源、氮源、生长因子和无机盐不同，配制不同的选择培养基，获得生产所需要的单一纯种，然后扩大培养用于发酵工程。

14．下列关于细菌的叙述，错误的是

A.根瘤菌能够固氮，因此是自养型微生物

B.硝化细菌可以利用化学能将CO2转化为有机物

C.在培养基中可以不加碳源进行硝化细菌的培养

D.含伊红美蓝试剂的培养基可以鉴别牛奶中的大肠杆菌

【答案】A

【解析】根瘤菌只有入侵到豆科植物根内才能固氮，利用豆科植物的有机物，属于异养型微生物，A错误；硝化细菌可以利用氨气氧化释放出的化学能，将二氧化碳和水等无机物转化为有机物，属于生物圈中的生产者，B正确；硝化细菌属于自养型微生物，故培养硝化细菌可以不加碳源，C正确；伊红美蓝是专一鉴定大肠杆菌的指示剂，可以用来鉴别和计数大肠杆菌，D正确。

15．在筛选纤维素分解菌的过程中，通常用刚果红染色法，这种方法能够通过颜色反应直接对纤维素分解菌进行筛选。

某同学在实验时得到了如图所示的结果，则纤维素分解菌位于（）

A.①②B.③

C.②③D.①②③

【答案】B

【解析】在筛选纤维素分解菌的过程中，通常用刚果红染色法。

刚果红与纤维素形成的红色复合物，在纤维素被分解后将不再存在，因此在培养基上会出现以纤维素分解菌为中心的透明圈，据此可判断图示中的纤维素分解菌位于③。

16．用稀释涂抹平板法来统计样品中活菌的数目，其结果与实际值相比（）

A.比实际值高

B.比实际值低

C.和实际值一致

D.可能比实际值高，也可能比实际值低

【答案】B

【解析】试题分析：

用稀释涂布平板法对样品中活菌数目进行统计，只是一种估测，根据此方法的实验过程可知，在某一稀释度下涂布的平板菌体数具有一定的偶然性，并不是绝对均匀的，所以取若干个平板菌落数量的平均值比较接近样品中菌体数的真实值．用稀释涂布平板法来统计样品中活菌的数目有可能几个细菌同时在一起，当两个或多个细胞连在一起时，平板上观察到的只是一个菌落，而样品稀释度无论多高都很难使其中的细菌都单个分布于培养基上，故计数结果比实际值低．

故选：

B．

17．下列叙述错误的是

A.因为土壤中各类微生物的数量不同，所以获得不同类型的微生物要按不同的稀释倍数进行分离

B.测定土壤中细菌的总量和测定土壤中能分解尿素的细菌的数量，选用的稀释范围不同

C.只有得到了3个或3个以上菌落数目在30～300的平板，才说明稀释操作比较成功，并能够进行菌落的计数

D.牛肉膏蛋白胨培养基的菌落数明显大于选择培养基的数目，说明选择培养基已筛选出一些细菌菌落

【答案】C

【解析】试题分析：

样品的稀释度直接影响平板上生长的菌落数目，土壤中各类微生物数量不同，含量最多的是细菌,其次是放线菌，最少的是真菌，所以为获得不同类型的微生物，要按不同稀释倍数进行分离，以保证获得菌落在30～300之间、适于计数的平板，A项正确；由以上分析可知，测定土壤中细菌的总量和测定土壤中能分解尿素的细菌的数量，选用的稀释范围不同，B项正确；如果涂布三个平板能够得到2个菌落数目在30～300之间的平板，就说明稀释操作比较成功并能够进行菌落的计数，计数的方法是舍弃相差很大的一个，然后取平均值，故C项错误；验证选择培养基是否具有选择作用，需设立牛肉膏蛋白胨培养基作为对照，若后者上的菌落数明显大于前者,说明前者具有筛选作用，D项正确。

考点：

微生物的分离和培养

18．下列生物学实验操作，能够顺利达到实验目的的是（）

A.在固体培养基上涂布稀释的大肠杆菌培养液获得单菌落

B.在接种酵母菌的新鲜葡萄汁中通入无菌空气制作果酒

C.土壤浸出液接种于牛肉膏蛋白胨培养基上筛选分解尿素的细菌

D.在分离土壤中的尿素分解菌实验中，采集的土样经高温灭菌后，可以用于制取土壤稀释液

【答案】A

【解析】试题分析：

在固体培养基上涂布稀释后的菌液能够得到单个菌落，A项正确；在接种酵母菌的新鲜葡萄汁中通入无菌空气，有利于酵母菌进行有氧呼吸大量繁殖，不利于制作果酒，B项错误；牛肉膏蛋白胨培养基是普通的培养基没有选择功能，应以尿素为唯一氮源的培养基上筛选尿素分解菌，C项错误；在分离土壤中的尿素分解菌实验中，采集的土样经高温灭菌后，土样中的微生物全部被杀死，不能用于制取土壤稀释液，D项错误。

考点：

本题考查微生物的培养与应用的相关知识，意在考查学生能理解所学知识的要点，把握知识间的内在联系，形成知识网络结构的能力。

19．室温放置一周的牛奶，包装袋充气膨胀，如下图所示。

以下分析错误的是

A.巴氏杀菌（60～90℃）不能杀死所有微生物

B.将牛奶放入冰箱能一定程度上抑制该过程

C.打开包装袋若闻到酒味，袋内应含有二氧化碳气体

D.该牛奶可正常饮用，因为无氧条件下牛奶已变成酸奶

【答案】D

【解析】巴氏杀菌（60～90℃）不能杀死所有微生物，A正确；冰箱中温度太低，不能满足巴氏杀菌的温度要求，所以将牛奶放入冰箱能一定程度上抑制该过程，B正确；打开包装袋若闻到酒味，说明微生物进行了酒精发酵，产生了酒精和二氧化碳，C正确；室温放置一周的牛奶，包装袋充气膨胀，说明产生了酒精和二氧化碳，对人体有害，不能正常饮用，D错误。

20．金黄色葡萄球菌有很强的致病力，可能引起食物中毒。

下列实验结束后的做法错误的是（　　）

A.对接种环进行灼烧处理

B.带菌培养基须经加热后才能倒掉

C.带菌培养基须经高压蒸汽灭菌锅灭菌后才能倒掉

D.接种后双手须经肥皂洗净，再用75%的酒精棉球擦拭

【答案】B

【解析】实验结束后应将金黄色葡萄球菌杀死，以免使人致病，接种环应用灼烧灭菌，A正确；带菌培养基经加热不一定完全能杀灭金黄色葡萄球菌的孢子和芽孢，所以需要灭菌，不能加热后倒掉，B错误；带菌的培养基要高压蒸汽灭菌后才能倒掉，以免污染环境，C正确；接种后双手须用肥皂洗净，再用70%的酒精棉球擦试，D正确。

二、非选择题

21．植物秸秆中的纤维素可被某些微生物分解。

回答下列相关问题：

（1）分解秸秆中纤维素的微生物能分泌纤维素酶，该酶是由3种组分形成的复合酶，其中的葡萄糖苷酶可将分解成。

（2）在含纤维素的培养基中加入刚果红（CR）染料时，CR可与纤维素形成色复合物。

用含有CR的该种培养基培养纤维素分解菌时，培养基上会出现以该菌的菌落为中心的。

（3）为从富含纤维素的土壤中分离获得纤维素分解菌的单菌落并加以鉴定，某同学设计了甲、乙两种培养基：

酵母膏

无机盐

淀粉

纤维素粉

琼脂

CR溶液

水

培养基甲

+

+

+

+

-

+

+

培养基乙

+

+

+

-

+

+

+

（注：

“+”表示“有”，“-”表示“无”）

据表判断，培养基甲（填“能”或“不能”）用于分离纤维素分解菌，原因是培养基乙（填“能”或“不能”）用于鉴定纤维素分解菌，原因是。

【答案】

（1）纤维二糖葡萄糖

（2）红透明圈

（3）不能液体培养基不能分离单菌落不能培养基中没有纤维素（不能形

成CR-纤维素红色复合物）

【解析】

试题分析：

（1）纤维素是一种由葡萄糖首尾相连而成的高分子化合物，是含量最丰富的多糖类物质。

纤维素能被土壤中某些微生物分解利用，如下图:

（2）刚果红与纤维素形成红色复合物，当纤维素被纤维素酶分解后，红色复合物无法形成，出现以纤维素分解菌为中心的透明圈，我们可以通过是否产生透明圈来筛选纤维素分解菌。

（3）生物适应一定环境，环境对生物具有选择作用，只有在纤维素含量丰富的环境中纤维素分解菌才会发挥作用。

纤维素分解菌选择培养基属于液体培养基。

纤维素分解菌鉴别培养基属于固体培养基，要分离和鉴别纤维素分解菌，需要以纤维素为主要碳源的培养基，培养基乙不具有选择的作用。

考点：

微生物的培养与分离

22．【生物——选修1：

生物技术实践】

新鲜的泡菜滤液中含有乳酸菌，可作为实验材料分离纯化乳酸菌。

请回答下列问题：

（1）分离纯化乳酸菌时，首先需要用无菌水对泡菜滤液进行______，这样做的理由_________。

（2）分离纯化所用的固体培养基中因含有碳酸钙而不透明，乳酸菌产生的乳酸能溶解培养基中的碳酸钙，从而使培养基在分离纯化过程中形成_________。

（3）若要长期保存乳酸菌，菌液中常需要加入一定量的_____（填“蒸馏水”“甘油”或“碳酸钙”），且要放置在_________（填“-5”“-20”或“-100”）℃的冷冻箱中。

若要短期保存乳酸菌，可将菌种接种到试管的_________（填“溶液中”“固体培养基表面上”或“固体斜面培养基上”），菌落长成后，将试管放置在______（填“-4”“0”或“4”）℃的冰箱中保藏。

【答案】梯度稀释在稀释度足够高的菌液里，聚集在一起的乳酸菌将被分散成单个细胞，从而能在培养基表面形成单个的菌落透明圈甘油-20固体斜面培养基上4

【解析】试题分析：

制作泡菜时要用到乳酸菌，乳酸菌是一种厌氧菌，在无氧气的情况下，乳酸菌发酵产生乳酸，使得泡菜呈现出特殊的风味，因此制作泡菜时要在密封的环境中进行，要防止空气的进入。

（1）分离纯化乳酸菌时，首先需要用无菌水对泡菜滤液进行梯度稀释；进行梯度稀释的理由是在稀释度足够高的菌液里，聚集在一起的乳酸菌将被分散成单个细胞，从而能在培养基表面形成单个的菌落。

（2）固体培养基中因含有碳酸钙而不透明，而乳酸菌产生的乳酸能溶碳酸钙，形成透明圈。

（3）乳酸菌在-20℃长期保存时，菌液中常需要加入一定量的甘油。

若要短期保存乳酸菌，可将菌种接种到试管的固体斜面培养基上，菌落长成后，将试管放置在4℃的冰箱中保藏。

【点睛】本题主要考查了泡菜制作的相关知识,意在考查考生能理解所学知识的要点，把握知识间的内在联系，形成知识的网络结构的能力。

23．运用所学知识回答下列与生物技术实践相关的问题。

（1）自古酒就与人类生活息息相关。

在图甲所示两发酵瓶中装入等量的葡萄汁进行果酒制作实验，若在A装置的通气口补充无菌空气，那么一段时间后，能获得葡萄酒的是________（1分）装置，发酵是否成功可用________对发酵产物进行检验确认。

（2）图乙是胡萝卜素提取粗品鉴定结果示意图。

点加提取样品的是________点，点加标准样品的是________点，该鉴定实验的方法叫做________。

（3）微生物培养时，如果想让培养基内只生长真菌，则可用含的培养基；后期进行菌落统计时，一般选择菌落数在间的平板进行计数。

（4）与微生物培养相比，植物组织培养的培养基常需添加的植物激素是。

【答案】

（1）B重铬酸钾

（2）B、CA、D纸层析法

（3）抗生素（或青霉素）30—300（4）生长素和细胞分裂素

【解析】

试题分析：

（1）酵母菌进行无氧呼吸可使葡萄糖分解为酒精，A装置通入空气抑制酵母菌进行无氧呼吸，所以一段时间后，能获得葡萄酒的是B装置；可用重铬酸钾检测发酵产物中是否有酒精产生，来确认发酵是否成功。

（2）胡萝卜素提取粗品通过纸层析法进行鉴定，鉴定时，点加提取样品要点加在中间，标准样品点加在两侧。

（3）青霉素可以抑制细菌细胞壁的形成，在微生物培养时，如果想让培养基内只生长真菌，则可用含抗生素（或青霉素）的培养基；后期进行菌落统计时，为了保证结果准确，一般选择菌落数在30—300间的平板进行计数。

（4）植物组织培养的培养基常需添加的植物激素是生长素和细胞分裂素。

考点：

本题综合考查生物技术实践的相关知识，意在考查考生意在考查考生理解所学知识的要点，把握知识间的内在联系，形成知识的网络结构的能力。

24．氯苯化合物是重要的有机化工原料，因其不易降解，会污染环境。

某研究小组依照下图所示实验方案筛选出能高效降解氯苯的微生物SP1菌。

培养基配方如表1。

（1）从用途上来说，Ⅱ号培养基属于____________培养基，在Ⅱ号培养基中，为SP1菌提供氮源的成分是_________________。

配制Ⅱ号固体培养基时，除添加Ⅱ号液体培养基成分外，还应添加1％的____________。

在Ⅱ号培养基的倒平板操作时，平板冷凝后，应将平板倒过来放置，这样做的目的是_________________________________。

（2）培养基配制时，灭菌与调pH的先后顺序是_________________________________。

实验室中，培养基灭菌常用的方法是__________________________。

（3）将Ⅰ号培养基中的微生物接种Ⅱ号培养基中，采用的最佳接种方法是，

到将SP1菌接种在含不同浓度氯苯的Ⅲ号培养液中培养，得到生长曲线如下图所示，此过程

采用______________________________（方法）统计菌体数。

从图中可知，SP1菌在

__________________培养条件下最早停止生长，其原因是_____________________________

____________________________。

【答案】

（1）选择（2分）硝酸铵琼脂防止皿盖上的水珠落入培养基（2分）

（2）先调pH，后灭菌（2分）高压蒸汽灭菌

（3）稀释涂布平板法（2分）抽样检测法（血球计数板计数法）

20mg/L氯苯碳源最早耗尽（2分）

【解析】

试题分析：

（1）由表中内容可知培养基II中没有碳源，所以可以选择自养型的生物，故是选择培养基。

II号培养基中的硝酸铵可以提供氮源。

固体培养基需要加入琼脂，倒平板时应倒置是为了防止皿盖上的水珠落入到培养基上。

（2）应先调pH再灭菌，这样可以防止灭菌后调PH时污染。

培养基一般采用高压蒸汽灭菌法进行灭菌。

（3）纯化菌种可以用稀释涂布平板法和平板划线法，由图可知得到的菌落是均匀的所以用的是稀释涂布平板法。

对细菌的计数可以采用抽样检测法。

由图可知SP1菌在20mg/L氯苯最先停止生长，原因应是提供碳源的氯苯少，碳源最先耗尽。

考点：

本题考查细菌的分离和培养相关知识，意在考察考生对知识点的理解掌握程度和应