基因工程第一节复习.docx

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基因工程第一节复习

基因工程（第一节）复习

一、单选题

1．将外源基因导入受体细胞时，常用的载体不包括（）

A．质粒B．噬菌体C．动植物病毒D．农杆菌

2．质粒是细菌中的有机分子，下列描述中正确的是

A．质粒能够自主复制B．质粒是基因工程的工具酶

C．质粒中含有两个游离的磷酸基团D．质粒完全水解后最多可产生4种化合物

3．若要使目的基因在受体细胞种表达，需要通过质粒等载体导入受体细胞而不能直接将目的基因导入受体细胞，其原因不包括（）

A.目的基因无法插入受体细胞DNAB.目的基因无法完成复制

C.目的基因无转录所需的启动部位D.目的基因与受体细胞遗传信息传递方式不同

4．下列所示的黏性末端是由几种限制性核酸内切酶作用产生的（　　）

A．1种B．2种C．3种D．4种

5．关于下列黏性末端的描述，正确的是

A．①与③的黏性末端相同，必定是由相同的限制性核酸内切酶切出

B．①和④是不同种限制性核酸内切酶处理后得到的两个DNA片段

C．DNA连接酶与DNA聚合酶均能作用于上述黏性末端

D．形成④需要脱去2个水分子

6．下列有关限制性核酸内切酶识别的叙述，不正确的是（　　）

A．从反应类型来看，限制性核酸内切酶催化的是一种水解反应

B．限制性核酸内切酶的活性受温度、pH的影响

C．限制性核酸内切酶能识别双链DNA中某种特定的脱氧核苷酸序列

D．限制性核酸内切酶识别序列越短，则该序列在DNA中出现的几率就越小

7．下列关于DNA连接酶的作用叙述正确的是（）

A．DNA连接酶的基本组成单位是脱氧核苷酸

B．将单个脱氧核苷酸加到DNA片段的骨架上连接起来，重新形成磷酸二酯键

C．连接DNA链上碱基之间的氢键

D．将断开的两个DNA片段的骨架连接起来，重新形成磷酸二酯键

8．据图所示，有关工具酶功能的叙述不正确的是（）

A．限制性内切酶可以切断a处B．DNA聚合酶可以连接a处

C．解旋酶可以使b处解开D．DNA连接酶可以连接c处

9．下图是三种限制酶的脱氧核苷酸识别序列和切割位点示意图（表示切点）。

下列相关分析正确的是（）

A．这三种限制酶切割出的DNA片段的黏性末端长度相同

B．不同限制酶切割DNA所得的黏性末端可能相同

C．能被限制酶Ⅰ切割的DNA也能被限制酶3切割

D．同一个DNA经限制酶Ⅰ和限制酶3分别切割后所得片段数一定相等

10．2020年诺贝尔化学奖授予两位女科学家以表彰她们“开发出一种基因组编辑方法”。

CRISPR/Cas9基因组编辑系统工作原理如图所示，关于此技术的解释错误的是（）

A．Cas9为一种能使磷酸二酯键断裂的酶

B．DNA-RNA杂交区域不存在T-A碱基对

C．在单链向导RNA中也存在碱基互补配对

D．人为改变向导RNA的序列可实现对特定基因的切割

11．下列关于DNA重组技术基本工具的说法，正确的是（　　）

A．DNA连接酶只能连接双链DNA片段互补的黏性末端

B．细菌细胞内含有的限制酶不能对自身的DNA进行剪切

C．限制酶切割DNA后一定能产生黏性末端

D．质粒是基因工程中唯一的载体

12．图甲表示某环型DNA分子经限制性核酸内切酶（EcoRⅠ）完全酶切后的片段电泳结果，若改变条件使其酶切不充分就有可能获得如图乙所示的电泳结果（Kb即千个碱基对）。

下列叙述错误的是

A．该DNA分子全长至少为7Kb

B．该DNA分子中至少含有4个EcoRⅠ酶切位点

C．反应时间越长，得到图甲结果的可能性越大

D．适当增加EcoRⅠ浓度，可得到图乙的结果

13．基因工程是在DNA分子水平上进行设计操作的，在基因操作的基本步骤中，不进行碱基互补配对的是（）

A．目的基因与载体的结合B．将目的基因导入受体细胞

C．目的基因的表达D．目的基因的人工合成

14．下图是基因文库的构建和获取目的基因的示意图。

下列叙述正确的是（）

A．通过该途径获得的目的基因，通常是序列已知的

B．①过程通常只用一种DNA酶切割全部DNA

C．③过程需用CaC12处理，使大肠杆菌细胞壁的通透性增加

D．④过程可用相应抗体，利用核酸分子杂交技术钓取目的基因

15．蚯蚓富含金属硫蛋白（MT）等重金属结合蛋白，能选择性吸收土壤中的镉。

利用基因工程技术将蚯蚓MT基因转入烟草，流程如图所示。

下列叙述错误的是（）

A．过程①需使用逆转录酶

B．过程③把重组质粒导入大肠杆菌的主要目的是对MT基因进行扩增

C．过程④中携带有目的基因的Ti质粒进入烟草愈伤组织细胞，并整合到植物细胞的染色体上

D．通过设计相关引物，可借助PCR技术鉴定目的基因是否已导入受体细胞

16．天然的玫瑰没有蓝色花，这是由于缺少控制蓝色色素合成的基因B，而开蓝色花的矮牵牛中存在序列已知的基因B。

现用基因工程技术培育蓝玫瑰，下列操作正确的是（）

A．提取矮牵牛蓝色花的mRNA，从而获得互补DNA，再扩增基因B

B．利用DNA连接酶从开蓝色花矮牵牛的基因文库中可以获取基因B

C．利用DNA聚合酶将基因B与质粒连接后导入玫瑰细胞

D．将基因B直接导入大肠杆菌，然后感染并转入玫瑰细胞

17．下列有关基因工程技术的正确叙述是（）

A．重组DNA技术所用的工具酶是限制酶、DNA连接酶和运载体

B．一种限制酶只能识别一种特定来源的DNA

C．选用细菌作为重组质粒的受体细胞是因为细菌繁殖快

D．通过标记基因监测到重组DNA进入了受体细胞，标志着成功实现表达

18．植物基因工程可以改造农作物性状，使农作物变得更加高产。

如图是培育良种水稻的有关原理和步骤，有关叙述错误的是（）

A．图中表达载体中的T-DNA插入外源基因后将失去作用

B．图中②过程需要在无菌环境下用Ca2+处理土壤农杆菌

C．需要用除草剂检测转基因植株是否具有抗除草剂性状

D．该过程需要用到固体和液体培养基

19．下列关于生物学实验及其研究方法的叙述，错误的是（　　）

A．探究DNA的复制方式——密度梯度超速离心

B．探究酵母菌细胞的呼吸方式——相互对照

C．检测目的基因是否翻译成蛋白质——DNA分子杂交技术

D．研究种群数量变化规律——构建数学模型

20．下图示一项重要生物技术的关键步骤，字母X可能代表

A．不能合成胰岛素的细菌细胞B．能合成抗体的人类细胞

C．能合成人胰岛素原的细菌细胞D．不能合成抗生素的人类细胞

21．质粒是基因工程中最常用的载体，它存在于许多细菌体内。

某质粒上的标记基因如图所示，通过标记基因可以推知外源基因（目的基因）是否转移成功。

外源基因插入的位置不同，细菌在培养基上的生长情况也不同，下表是外源基因插入位置（插入点有a、b、c），请根据表中提供细菌的生长情况，推测①②③三种重组后细菌的外源基因插入点，正确的一组是（　　）

细菌在含青霉素培养基上生长情况

细菌在含四环素培养基上生长情况

①

能生长

能生长

②

能生长

不能生长

③

不能生长

能生长

A．①是c；②是b；③是aB．①是a和b；②是a；③是b

C．①是a和b；②是b；③是aD．②是c；②是a；③是b

22．农杆菌能感染双子叶植物而通常不感染单子叶植物，是因为受伤的双子叶植物能分泌某些酚类物质诱导Ti质粒中的Vir基因区段表达，该表达产物能诱导Ti质粒产生一条新的T-DNA单链分子。

此单链分子可进入植物细胞并整合到染色体。

下列相关叙述错误的是（　　）

A．可以通过在伤口施加相关酚类物质而使单子叶植物也成为农杆菌易感植物

B．农杆菌感染宿主细胞的原理与肺炎双球菌转化实验的原理类似

C．使用农杆菌转化法时，目的基因应插入Ti质粒的T-DNA中

D．合成新的T-DNA单链需要的DNA连接酶与限制酶，均在宿主细胞内合成

23．在检测抗虫棉培育是否成功的方法中，不属于分子水平检测的是（）

A．观察害虫吃棉叶后是否死亡

B．检测目的基因片段与DNA探针能否形成杂交带

C．检测目的基因转录形成的mRNA与DNA探针能否形成杂交带

D．检测目的基因表达产物能否与特定抗体形成杂交带

24．据研究，新冠病毒表面的S蛋白是其主要的病毒抗原，在康复病人的血清中有抗S蛋白的特异性抗体。

如图为某机构研制新冠病毒疫苗的部分过程。

下列叙述中错误的是

A．对发热病人进行核酸检测可使用带标记的S基因做探针

B．使用PCR选择性扩增的前提条件是掌握S基因的核苷酸序列

C．过程②通常是将S基因和质粒连接以构建重组表达载体

D．S基因与培养的动物细胞核DNA整合是其稳定遗传的关键

25．我国科学家利用农杆菌转化法将Bt毒蛋白基因转入普通棉花，培育出转基因抗虫棉，下列说法正确的是（　　）

A．可通过检测该转基因抗虫棉对抗生素的抗性来确定其是否具有抗虫性状

B．只要将Bt毒蛋白基因整合到染色体上，所得植株即为稳定遗传的转基因抗虫棉

C．理论上讲，棉花体内几乎每一个生活细胞都可以作为重组DNA分子的受体细胞

D．在培育过程中，需使用CaCl2处理棉花细胞，增大细胞壁的通透性以吸收重组质粒

26．下面是四种不同质粒的示意图，其中ori为复制必需的序列，amp为氨苄青霉素抗性基因，tet为四环素抗性基因，箭头表示同一种限制性内切酶的酶切位点。

下列有关叙述正确的是（）

A．基因amp和tet是一对等位基因，常作为基因工程中的标记基因

B．质粒指细菌细胞中能自我复制的小型环状的DNA和动植物病毒的DNA

C．限制性核酸内切酶的作用部位是DNA分子中特定的两个核苷酸之间的氢键

D．用质粒4将目的基因导入大肠杆菌，该菌不能在含四环素的培养基上生长

二、简答题

器官移植来源可来自异种动物器官，例如转hCD46基因（能够干扰受体免疫细胞的抗原识别，发挥抑制免疫排斥反应的作用）的猪，请利用以下关键词，可自行补充，简单画出构建转hCD46基因小猪的流程图。

参考答案

1．D

【分析】

基因工程的工具包括限制酶、DNA连接酶和运载体。

【详解】

将外源基因导入受体细胞，常常需要将目的基因与运载体结合构建基因基因表达载体，常用的载体有质粒、噬菌体和动植物病毒，农杆菌可以作为受体细胞，不能作为载体。

综上所述，ABC不符合题意，D符合题意。

故选D。

【点睛】

2．A

【分析】

本题考查基因工程中的运载体—质粒。

质粒存在于许多细菌以及酵母菌等生物的细胞中，是拟核或细胞核外能够自主复制的很小的环状DNA分子。

【详解】

A、质粒是小型环状DNA，可以自主复制，A正确；

B、质粒是基因工程中的运载体，B错误；

C、质粒是小型环状DNA，没有游离的磷酸基团，C错误；

D、质粒是小型环状DNA，完全水解后可以得到磷酸、脱氧核糖、4种含氮碱基等共6种化合物，D错误。

故选A。

3.D

4．C

【分析】

限制酶主要从原核生物中分离纯化出来，并且具有特异性：

能够识别双链DNA分子的某种特定核苷酸序列，并且使每一条链中特定部位的两个核苷酸之间的磷酸二酯键断裂，形成黏性末端和平末端两种。

【详解】

同种限制性内切核酸酶切出相同的黏性末端，具有相同的切割位点。

根据图中所示的粘性末端可推知相应的限制酶的识别序列及切割位点依次是GAATTC（在G和A之间切开）、CAATTG（在C和A之间切开）、GTTAAC（在G和T之间切开），显然图中所示的黏性末端应该分别是由3种限制性内切核酸酶作用产生的，即C正确。

故选C。

【点睛】

5．B

【解析】

试题分析：

不同限制酶切割生成的粘性末端也会相同，A错；同一种限制酶切割的粘性末端一定相同，B对；DNA聚合酶无法作用于粘性末端，它是在DNA复制时连接游离的脱氧核苷酸，C错；形成④需要脱去4个水分子，因为一条链上有5个脱氧核苷酸，D错。

考点：

本题考查基因工程的工具酶相关知识，意在考查考生能理解所学知识的要点，把握知识间的内在联系的能力和识图能力。

6．D

【分析】

基因的“剪刀”--限制性核酸内切酶（简称限制酶）

①分布：

主要存在于原核生物中。

②特性：

一种限制酶只能识别一种特定的核苷酸序列，并在特定的切点上切割DNA分子。

③切割结果：

产生两个带有黏牲末端或平末端的DNA片段。

④作用：

基因工程中重要的切割工具，通常能将外来的DNA切断，对自己的DNA无损害。

⑤实例：

EcoRl限制酶能专一识别CAATTC序列，并在G和A之间将这段序列切开。

【详解】

A、限制酶能够识别双链DNA分子的某种特定核苷酸序列，并且使每一条链中特定部位的两个核苷酸之间的磷酸二酯键断裂，即催化的是一种水解反应，A正确；

B、限制性内切酶的活性受温度、pH的影响，在最适宜的温度和pH条件下，酶的活性最高；温度和pH偏高或偏低，酶的活性都会明显降低；在过酸、过碱或温度过高条件下酶会变性失活，而在低温条件下酶的活性降低，但不会失活，B正确；

C、限制性内切酶能识别双链DNA中某种特定的脱氧核苷酸序列，并在特定的位点切割磷酸二酯键，说明酶专一性，C正确；

D、限制性内切酶识别序列越短，则该序列在DNA中出现的几率就越大，D错误。

故选D。

【点睛】

7．D

【分析】

DNA连接酶和DNA聚合酶的区别：

①DNA连接酶是在两个DNA片段之间形成磷酸二酯键，而DNA聚合酶只能将单个脱氧核苷酸加到已有的核苷酸片段上，形成磷酸二酯键；

②DNA连接酶是同时连接双链的切口，而DNA聚合酶只是在单链上将一个个脱氧核苷酸连接起来；

③DNA连接酶不需要模板，而DNA聚合酶需要模板。

【详解】

A、DNA连接酶的基本组成单位是氨基酸，A错误；

B、DNA聚合酶能将单个的脱氧核苷酸连接到主链上，B错误；

C、DNA连接酶连接的是黏性末端两条链主链上的磷酸和脱氧核糖，C错误；

D、DNA连接酶能将断开的两个DNA片段的骨架连接起来，重新形成磷酸二酯键，D正确。

故选D。

【点睛】

本题考查基因工程的相关知识，要求考生识记基因工程的操作工具，尤其是DNA连接酶的种类及作用，能结合所学的知识作出准确的判断。

8．D

【分析】

分析题图：

图示为某DNA分子一个片段，其中a为磷酸二酯键，b为氢键，c为脱氧核苷酸内部的磷酸键。

【详解】

A、限制酶可以切断脱氧核苷酸之间的磷酸二酯键，即a处，A正确；

B、DNA聚合酶可以连接脱氧核苷酸形成磷酸二酯键，即a处，B正确；

C、解旋酶可以使氢键断裂，即b处，C正确；

D、DNA连接酶可以连接DNA片段形成磷酸二酯键，即a处，D错误。

故选D。

9．B

【分析】

由图可知，三种限制酶的识别序列均不同，但限制酶1和3切割后产生的黏性末端相同。

【详解】

AB、据图可知，这三种限制酶切割出的DNA片段的黏性末端长度不同，DNA经限制酶1和限制酶3分别切割，所得的DNA片段黏性末端相同，A错误，B正确；

CD、能被限制酶3切割的DNA也能被限制酶1切割，但能被限制酶1切割的DNA不一定能被限制酶3切割，故同一个DNA经限制酶Ⅰ和限制酶3分别切割后所得片段数不一定相等，C、D错误。

故选B。

10．B

【分析】

根据题意分析可知：

CRISPR/Cas9系统基因编辑技术是利用该基因表达系统中的向导RNA能识别并结合特定的DNA序列，从而引导Cas9蛋白结合到相应位置并剪切DNA，最终实现对靶基因序列的编辑。

由于其他DNA序列也含有与向导RNA互补配对的序列，所以会造成向导RNA错误结合而出现脱靶现象。

【详解】

A、Cas9能在特定位置切割DNA，为一种能使磷酸二酯键断裂的酶，A正确；

B、DNA上含有A、T、G、C四种碱基，RNA中存在A、U、G、C四种碱基，DNA中的T可与RNA中的A互补配对，所以DNA-RNA杂交区域存在T-A碱基对，B错误；

C、在单链向导RNA中也存在部分碱基互补配对，C正确；

D、根据图示可知“向导RNA能识别并结合特定的DNA序列，从而引导Cas9蛋白结合到相应位置并剪切DNA”，所以人为改变向导RNA的序列可实现对特定基因的切割，D正确。

故选B。

11．B

【分析】

基因工程的工具：

（1）限制酶：

能够识别双链DNA分子的某种特定核苷酸序列，并且使每一条链中特定部位的两个核苷酸之间的磷酸二酯键断裂．形成黏性末端和平末端两种。

（2）DNA连接酶：

据酶的来源不同分为两类：

E．coliDNA连接酶、T4DNA连接酶．这二者都能连接黏性末端，此外T4DNA连接酶还可以连接平末端，但连接平末端时的效率比较低。

（3）运载体：

常用的运载体：

质粒、噬菌体的衍生物、动植物病毒。

【详解】

A、DNA连接酶能连接双链DNA片段的黏性末端或平末端，A错误；

B、细菌细胞内含有的限制酶不会对自身DNA进行剪切，B正确；

C、限制酶切割DNA后能产生黏性末端或平末端，C错误；

D、基因工程中常用的载体包括质粒、动植物病毒、噬菌体的衍生物等，D错误。

故选B。

【点睛】

12．D

【解析】

试题分析：

题干信息，DNA分子是环型的，经限制性核酸内切酶（EcoRⅠ）完全酶切后得到图甲的4个片段，至少含有4个EcoRⅠ酶切位点，长度至少是7Kb。

图乙是改变条件使酶切不充分获得的，可能是改变了酶促反应的温度或者Ph，也可能是反应时间，但是不会使酶浓度，因为酶具有高效性，D错误。

考点：

本题考查基因工程的相关知识，意在考查考生能运用所学知识与观点，通过比较、分析与综合等方法对某些生物学问题进行解释、推理，做出合理的判断或得出正确的结论的能力。

13．B

【分析】

基本操作步骤主要包括四步：

①目的基因的获取，②基因表达载体的构建，③将目的基因导入受体细胞，④目的基因的检测与鉴定。

【详解】

A、目的基因与运载体结合时，进行碱基互补配对，与题意不符，A错误；

B、将目的基因导入受体细胞时，不进行碱基互补配对，B正确；

C、目的基因的表达包括转录和翻译过程，该过程中需要进行碱基互补配对，与题意不符，C错误；

D、人工合成目的基因的方法需要进行碱基互补配对，如逆转录法，与题意不符，D错误。

故选B。

14．C

【分析】

基因文库指将含有某种生物不同基因的许多DNA片段，导入受体菌的群体中储存，各个受体菌分别含有这种生物的不同的基因。

【详解】

A、题中的目的基因序列未知，是从基因文库中分离出来的，A错误；

B、①过程使用限制性核酸内切酶，其识别并切割DNA分子上特定的核苷酸序列，B错误；

C、转化前用CaCl2处理大肠杆菌，可使其细胞壁的通透性增大，C正确；

D、④过程可用特定的基因探针，利用核酸分子杂交技术钓取目的基因，D错误。

故选C。

【点睛】

常用钙离子处理法将目的基因导入微生物细胞，用显微注射法将目的基因导入动物细胞。

15．C

【分析】

基因工程的四个步骤是：

获取目的基因，构建基因表达载体，将目的基因导入受体细胞，目的基因的检测与鉴定。

根据题意和图示分析可知：

图中过程①表示通过反转录法合成相应的DNA；过程②表示利用PCR技术对目的基因进行扩增；过程③表示将目的基因导入大肠杆菌；过程④表示用农杆菌转化法将目的基因导入植物愈伤组织细胞。

【详解】

A、过程①以mRNA为模板合成DNA，需使用逆转录酶，A正确；

B、过程③把重组质粒导入大肠杆菌的主要目的是对MT基因进行扩增，B正确；

C、过程④表示用农杆菌转化法将目的基因导入植物愈伤组织细胞，C错误；

D、通过设计相关引物，可借助PCR技术鉴定目的基因是否已导入受体细胞，D正确。

故选C。

【点睛】

16．A

【分析】

基因工程技术的基本步骤：

（1）目的基因的获取：

方法有从基因文库中获取、利用PCR技术扩增和人工合成；

（2）基因表达载体的构建：

是基因工程的核心步骤，基因表达载体包括目的基因、启动子、终止子和标记基因等；（3）将目的基因导入受体细胞：

根据受体细胞不同，导入的方法也不一样．将目的基因导入植物细胞的方法有农杆菌转化法、基因枪法和花粉管通道法；将目的基因导入动物细胞最有效的方法是显微注射法；将目的基因导入微生物细胞的方法是感受态细胞法；（4）目的基因的检测与鉴定：

分子水平上的检测：

①检测转基因生物染色体的DNA是否插入目的基因--DNA分子杂交技术；②检测目的基因是否转录出了mRNA--分子杂交技术；③检测目的基因是否翻译成蛋白质--抗原-抗体杂交技术。

个体水平上的鉴定：

抗虫鉴定、抗病鉴定、活性鉴定等。

【详解】

A、提取矮牵牛蓝色花的mRNA，逆转录得到cDNA，然后扩增，可获得大量的基因B，A正确；

B、基因文库中保存的是各基因片段，从基因文库中获取基因B时，不需要使用DNA连接酶，B错误；

C、目的基因与质粒连接用的是DNA连接酶，而DNA聚合酶是在DNA复制中用到的酶，C错误；

D、将目的基因导入植物细胞时，常采用农杆菌转化法，即将基因B先导入农杆菌，然后感染并转入玫瑰细胞，D错误。

故选A。

【点睛】

17．C

【分析】

DNA重组技术至少需要三种工具：

限制性核酸内切酶（限制酶）、DNA连接酶、运载体。

常用的运载体有质粒、噬菌体的衍生物、动植物病毒。

限制酶能够识别双链DNA分子的某种特定核苷酸序列，并且使每一条链中特定部位的两个核苷酸之间的磷酸二酯键断裂，形成黏性末端和平末端两种。

【详解】

A、基因工程中常用的工具酶有DNA连接酶、限制性核酸内切酶，运载体不属于工具酶，A错误；

B、一种限制酶只能识别一种特定的核苷酸序列，具有特异性，B错误；

C、选用细菌作为重组质粒的受体细胞是因为细菌繁殖快、易培养、遗传物质少，C正确；

D、目的基因进入受体细胞内能否表达还需要检测和鉴定，因为成功导入的目的基因不一定能成功实现表达，D错误。

故选C。

18．A

【分析】

1、基因表达载体包括目的基因、标记基因、启动子和终止子。

标记基因的作用是为了鉴别受体细胞中是否含有目的基因，从而将含有目的基因的细胞筛选出来。

2、将目的基因导入微生物体内，常采用的方法是用一定浓度CaCl2溶液处理微生物，提高细胞摄取外源治理DNA的能力，该方法为感受态细胞法。

3、图中①代表构建基因表达载体，②代表将含有目的基因的Ti质粒转入农杆菌，③代表用农杆菌侵染植物愈伤组织细胞，④代表再分化，⑤代表植物生长发育为植株的过程。

【详解】

A、T-DNA可将T-DNA之间的DNA序列转移并整合至受体细胞的染色体DNA上，使目的基因能够稳定遗传，故T-DNA插入外源基因后不会失去作用，A错误；

B、用Ca2+处理农杆菌，使农杆菌处于感受态，利于农杆菌吸收目的基因完成转化过程，故图中②将载体导入农杆菌过程需要在无菌环境下用Ca2+处理土壤农杆菌，B正确；

C、为从个体水平上检测图中植株是否具有抗除草剂性状，可采用的方法是用相应除草剂喷洒待测植株，C正确；

D、筛选含重组质粒的农杆菌时用的是固体培养基，扩大培养时应该用液体培养基，故该过程需要用到固体和液体培养基，D正确。

故选A。

【点睛】

19．C

【分析】

基因工程技术的操作程序：

1、目的基因的获取：

方法有从基因文库中获取、利用PCR技术扩增和人工合成。

2、基因表达载体构建：

是基因工程的核心步骤，基因表达载体包括目的基因、启动子、终止子和标记基因等。

3、将目的基因导入受体细胞：

根据受体细胞不同，导入的方法也不一样：

将目的基因导入植物细胞的方法有农杆菌转化法、基因枪法和花粉管通道法；将目的基因导入动物细胞最有效的方法是显微注射法；将目的基因导入微生物细胞的方法是感受态细胞法。

4、目的基因的检测与鉴定：

（1）分子水平上的检测：

①检测转基因生物染色体的DNA是