电泳相关溶液配制.docx

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电泳相关溶液配制

电泳相关溶液配制

溶液配制Solutiontorecord

文件编号:

版本:

A/0No:

生产日期(ProducingDate):

中间产品品名

Name:

批号

Lot.No.:

计划产量

PlanYields:

指令

Directive

1、生产许可证(Productioncertificate)有(yes)□无(no)□

2、设备状态(Equipmentstatus)

完好(ready)□未完好(notready)□清洁(cleared)□未清洁(notcleared)□

3、已清场(Clearedornot)是(yes)□否(no)□

4、清场合格证(clearancecertificate)有(yes)□无(no)□

5、生产指令单编号(ProductiondirectiveNo.):

_____________

2%琼脂糖

品名(Name)

单位

(Unit)

配方量

(Prescription)

实际称量(Actualusage)

备注

(Remark)

琼脂糖

g

2

1*电泳液

ml

100

1.将琼脂糖加入250ml的锥形瓶中,倒入100ml的1*电泳液,摇匀,放入微波炉中反复加热2-3次,直至琼脂糖完全溶解为止。

2.观察溶液上层有无漂浮物,有□、无□:

下层有无沉淀,有□、无□;

(Istherefloatingsubstance?

onthesurfaceofthesolution,yes□no□;

onthebottom,yes□no□)

备注(Remark):

30%丙烯酰胺

品名(Name)

单位

(Unit)

配方量

(Prescription)

实际称量(Actualusage)

备注

(Remark)

丙烯酰胺

g

300

N-N亚甲基双丙烯酰胺

g

8

纯水

ml

定容至1000

1.将丙烯酰胺和N-N亚甲基双丙烯酰胺置于1L烧杯中。

2.向烧杯中加入约600ml的去离子水,于40℃左右水浴加热,并用玻璃棒搅拌至完全溶解。

3.加水将溶液定容至1L,用0.45μm滤膜滤去杂质。

4.观察溶液上层有无漂浮物,有□、无□:

下层有无沉淀,有□、无□;

(Istherefloatingsubstance?

onthesurfaceofthesolution,yes□no□;

onthebottom,yes□no□)

5.于棕色瓶中4℃保存。

备注(Remark):

丙烯酰胺具有很强的神经毒性,并可通过皮肤吸收,其作用具有积累性,配制时应戴手套等。

聚丙烯酰胺无毒,但也应谨慎操作,因为有可能含有少量的未聚合成份。

10%十二烷基硫酸钠(SDS)

品名(Name)

单位

(Unit)

配方量

(Prescription)

实际称量(Actualusage)

备注

(Remark)

十二烷基硫酸钠(SDS)

g

20

纯水

ml

定容至200

1.将SDS置于烧杯中,加入一定量的水,用磁力搅拌器搅拌至完全溶解,用水定容至200ml。

2.观察溶液上层有无漂浮物,有□、无□:

下层有无沉淀,有□、无□;

(Istherefloatingsubstance?

onthesurfaceofthesolution,yes□no□;

onthebottom,yes□no□)

备注(Remark):

10%过硫酸铵(APS)

品名(Name)

单位

(Unit)

配方量

(Prescription)

实际称量(Actualusage)

备注

(Remark)

过硫酸铵(APS)

g

0.1

纯水

ml

定容至1

1.将过硫酸铵倒入2ml的离心管中,加1mL去离子水,用漩涡振荡器震荡溶解,贮存于4℃。

备注(Remark):

10%过硫酸铵溶液在4℃保存可使用2周左右,超过期限会失去催化作用。

4%分离胶

品名(Name)

单位

(Unit)

配方量

(Prescription)

实际称量(Actualusage)

备注

(Remark)

纯水

ml

11.9

30%丙烯酰胺

ml

5.4

1.5MTris-HCl(pH8.8)

ml

10

10%SDS

μl

200

10%过硫酸铵

μl

200

TEMED

μl

12

1.按照配方依次将纯水、30%丙烯酰胺、1.5MTris-HCl(pH8.8)、10%SDS、10%过硫酸铵、TEMED加入100ml的烧杯中,加入搅拌子,用磁力搅拌器搅拌均匀。

备注(Remark):

TEMED为交联剂,应最后加入,以防胶凝固。

20%分离胶

品名(Name)

单位

(Unit)

配方量

(Prescription)

实际称量(Actualusage)

备注

(Remark)

纯水

ml

1.3

30%丙烯酰胺

ml

13.3

1.5MTris-HCl(pH8.8)

ml

5

10%SDS

μl

200

10%过硫酸铵

μl

200

TEMED

μl

8

1.按照上述配方依次将纯水、30%丙烯酰胺、1.5MTris-HCl(pH8.8)、10%SDS、10%过硫酸铵、TEMED加入100ml的烧杯中,加入搅拌子,用磁力搅拌器搅拌均匀。

备注(Remark):

TEMED为交联剂,应最后加入,以防胶凝固。

5%积层胶

品名(Name)

单位

(Unit)

配方量

(Prescription)

实际称量(Actualusage)

备注

(Remark)

纯水

ml

10.2

30%丙烯酰胺

ml

2.55

1.5MTris-HCl(pH8.8)

ml

1.875

10%SDS

μl

150

10%过硫酸铵

μl

150

TEMED

μl

15

1.按照上述配方依次将纯水、30%丙烯酰胺、1.5MTris-HCl(pH8.8)、10%SDS、10%过硫酸铵、TEMED加入100ml的烧杯中,加入搅拌子,用磁力搅拌器搅拌均匀。

备注(Remark)TEMED为交联剂,应最后加入,以防胶凝固。

 

10*电泳液

品名(Name)

单位

(Unit)

配方量

(Prescription)

实际称量(Actualusage)

备注

(Remark)

Trisbase

g

30

甘氨酸

g

144

SDS

g

10

纯水

ml

定容至1000

1.在烧杯中加入一定量的去离子水,依次加入Trisbase、甘氨酸、SDS,加完后用磁力搅拌器搅拌至完全溶解,补加纯水定容至1000ml。

2.观察溶液上层有无漂浮物,有□、无□:

下层有无沉淀,有□、无□;

(Istherefloatingsubstance?

onthesurfaceofthesolution,yes□no□;

onthebottom,yes□no□)

备注(Remark):

用时用纯水稀释成1*的电泳液。

10*电转液

品名(Name)

单位

(Unit)

配方量

(Prescription)

实际称量(Actualusage)

备注

(Remark)

Trisbase

g

5.8

甘氨酸

g

29

SDS

g

0.37

甲醇

ml

200

纯水

ml

定容至1000

1.在烧杯中加入一定量的去离子水,依次加入Trisbase、甘氨酸、SDS,加完后用磁力搅拌器搅拌至完全溶解。

2.加入200ml的甲醇,补加纯水定容至1000ml。

3.观察溶液上层有无漂浮物,有□、无□:

下层有无沉淀,有□、无□;

(Istherefloatingsubstance?

onthesurfaceofthesolution,yes□no□;

onthebottom,yes□no□)

备注(Remark):

用时用纯水稀释成1*的电转液

封闭液

品名(Name)

单位

(Unit)

配方量

(Prescription)

实际称量(Actualusage)

备注

(Remark)

脱脂奶粉

g

5

纯水

ml

定容至100

1.将脱脂奶粉加入烧杯中,加入100ml的1*PBS,用磁力搅拌器搅拌至完全溶解。

备注(Remark):

10*TBST

品名(Name)

单位

(Unit)

配方量

(Prescription)

实际称量(Actualusage)

备注

(Remark)

1MTris-HCl(pH7.4)

ml

40

NaCl

g

17.532

Tween20

ml

1

纯水

ml

定容至200

1.将Tris-HCl、NaCl加入烧杯中,加入一定量水,置于磁力搅拌器上搅拌,再用移液枪(剪枪头)加入Tween20,继续搅拌至完全溶解,用纯水定容至200ml。

备注(Remark):

1.5MTris-HCl(pH8.8)

品名(Name)

单位

(Unit)

配方量

(Prescription)

实际称量(Actualusage)

备注

(Remark)

Trisbase

g

36.33

纯水

ml

定容至200

1.将Trisbase加入烧杯中,加入约150ml的水,用磁力搅拌器搅拌至完全溶解。

2.用盐酸调节pH至8.8,定容至200ml。

备注(Remark):

1MTris-HCl(pH6.8)

品名(Name)

单位

(Unit)

配方量

(Prescription)

实际称量(Actualusage)

备注

(Remark)

Trisbase

g

24.22

纯水

ml

定容至200

1.将Trisbase加入烧杯中,加入约150ml的水,用磁力搅拌器搅拌至完全溶解。

2.用盐酸调节pH至6.8,定容至200ml。

备注(Remark):

1MTris-HCl(pH7.5)

品名(Name)

单位

(Unit)

配方量

(Prescription)

实际称量(Actualusage)

备注

(Remark)

Trisbase

g

24.22

纯水

ml

定容至200

1.将Trisbase加入烧杯中,加入约150ml的水,用磁力搅拌器搅拌至完全溶解。

2.用盐酸调节pH至7.4,定容至200ml。

备注(Remark):

5*上样缓冲液

品名(Name)

单位

(Unit)

配方量

(Prescription)

实际称量(Actualusage)

备注

(Remark)

1MTris-HCl(pH6.8)

ml

0.6

甘油

ml

5

10%SDS

ml

2

巯基乙醇

ml

0.5

溴酚蓝

g

1

纯水

ml

4.4

1.先用少量的水将溴酚蓝溶解后,将1MTris-HCl(pH6.8)、甘油、10%SDS、巯基乙醇、溴酚蓝、纯水依次加入烧杯中,用磁力搅拌器搅拌混匀。

置于-20℃保存。

备注(Remark):

PBS

品名(Name)

单位

(Unit)

配方量

(Prescription)

实际称量(Actualusage)

备注

(Remark)

KH2PO4

g

0.27

Na2HPO4

g

1.42

NaCl

g

8

KCl

g

0.2

纯水

ml

800

1.按配方将KH2PO4、Na2HPO4、NaCl、KCl依次加入烧杯中,用磁力搅拌器搅拌混匀。

用纯水定容至800ml。

备注(Remark):

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