植物的组织培养技术之月季.docx
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植物的组织培养技术之月季
《新教材导学练》（选修1）编写体例
专题三植物的组织培养技术
【学习导航】
利用植物的一块组织，甚至一个细胞，就能培养出完整的植株，靠的就是植物组织培养技术。
运用这种技术，可以实现优良品种的快速繁殖，保持遗传性状的一致；可以培育出大量不含病毒的幼苗，提高作物产量；可以实现花卉的连续生产，不受开花季节的限制……
在学习本专题的过程中应引导学生联系与微生物培养基的对比来认识植物组织培养的MS培养基的特点；学会正确配制MS培养基的方法；与有关植物激素的作用、原理等相联系，来正确理解植物组织培养技术的原理、培养基的配制等具体操作过程。
同时还可与单倍体育种常用方法——花药离体培养相联系，使植物组织培养技术应用到生产实践中去。
植物的花药培养在育种上有特殊的意义。
育种工作者可以采用花药培养的方法，使花粉粒发育为单倍体植株，再经过人工诱导使染色体数目加倍，重新恢复到正常植株的染色体数目。
这样的植株不仅能够正常生殖，而且每对染色体上的成对的基因都是纯合的，自交产生的后代不会产生性状分离。
单倍体育种不仅缩短了育种周期，也为新品种的培育开辟了新途径。
课题2月季的花药培养
【导学诱思】
1．被子植物的花粉发育
被子植物花粉的发育要经历、和等阶段。
花粉是由花粉母细胞经过而形成的，因此花粉是。
2．产生花粉植物的两种途径
通过花药培养产生花粉植株的两种途径：
①
②
思考：
（1）花药培养产生花粉植株的两种途径的差别主要取决于什么？
（2）什么是体细胞胚？
（3）单倍体性细胞产生的花粉胚，也可发育成为单倍体植株，这和植物的体细胞克隆有区别吗？
3．影响花药培养的因素
诱导花粉植株能否成功及诱导成功率的高低，受多种因素影响，其中与
是主要的影响因素；也是提高诱导成功率的重要因素；另外亲本植株的生长条件、以及等对诱导成功率都有一定影响。
思考：
（1）为什么选择合适的花粉发育期是诱导花药培养成功率的重要因素？
（2）为什么花药的培养要选择完全未开放的花蕾？
4．实验操作
（1）材料的选取
选择花药时，一般要通过来确定其中的花粉是否处于适宜的发育期。
确定花粉发育时期的方法有和。
（2）材料的消毒
材料消毒过程中用的0.1%的氯化汞溶液,实验完毕应如何处理?
（3）接种和培养
剥离花药时，应注意哪些问题？
花药培养过程中应注意哪些问题？
【疑难点拨】
1．为什么花瓣松动会给材料的消毒带来困难？
花瓣松动后，微生物就可能侵入到花药，给材料的消毒带来困难。
2．植物组织培养技术与花药培养技术有何区别？
相同之处：
培养基的配制方法、无菌技术及接种操作等基本相同。
不同之处：
花药培养的选材非常重要，需事先摸索时期适宜的花蕾；花药裂开后释放出的愈伤组织或胚状体也要及时更换培养基；花北培养对培养基配方的要求更为严格。
这些都使花药的培养难度加大。
【典例解析】
例1．某名贵花卉用种子繁殖会发生性状分离。
为了防止性状分离并快速繁殖，可以利用该植物的一部分器官或组织进行离体培养，发育出完整植株。
进行离体培养时不应采用该植株的（）
A．茎尖B．子房壁C．叶片D．花粉粒
解析：
本题主要考查无性生殖特点。
涉及知识点有：
组织培养、体细胞、生殖细胞等。
抓住无性生殖能够保持原物种特性这一特点。
组织培养就是无性生殖的一种方式，它是由体细胞培养而来的，含有原物种的全部基因，而花粉粒是生殖细胞。
该题易陷入思维定势，联想到花粉粒的离体培养。
可见，植物组织培养若取自体细胞则为无性生殖；若取自生殖细胞则为有性生殖。
答案：
D
例2．一个初级精母细胞在减数分裂的第一次分裂时，有一对同源染色体不发生分离，所形成的次级精母细胞减数分裂的第二次分裂正常；另一个初级精母细胞减数分裂的第一次分裂正常，减数第二次分裂时，在两个次级精母细胞中，有一个次级精母细胞的1条染色体姐妹染色单体没有分开。
以上两个初级精母细胞可产生染色体数目不正常的配子（以下简称不正常的配子）。
上述两个初级精母细胞减数分裂的最终结果应当是
A．两者产生的配子全部都不正常
B．前者产生一半不正常的配子，后者产生的配子不正常
C．两者都产生一半不正常的配子
D．前者产生全部不正常的配子，后者只产生一半不正常的配子
解析：
初级精母细胞的减数第一次分裂过程，是同源染色体分开，进入两个次级精母细胞。
若此过程中同源染色体不发生分离，形成的两个次级精母细胞中，一个多了一条染色体，另一个少了一条染色体。
次级精母细胞进行的减数分裂的第二次分裂，是姐妹染色单体分开，平均分配到两个精子细胞中。
若此过程中姐妹染色单体不分开，形成的两个精子细胞中的染色体数目均不正常。
答案：
D
例3．下图是被子植物的受精过程
（1）写出图中数字所代表的结构的名称：
①②③④⑤⑥
（2）草履虫进行生殖；蘑菇进行生殖，酵母菌和水螅常常进行生殖。
（3）下列图解表示水稻（2n=24）胚珠中胚囊的发育过程，试根据图回答：
薄壁细胞直接发育减数分裂
珠心孢原细胞（2n）
三次有丝分裂
①水稻种子的种皮遗传物质应为n，其中遗传物质应与相同。
②水稻胚珠中的胚囊应共有染色体条，其中卵细胞中含染色体条；若水稻授粉受精后发育成胚和胚乳，则胚细胞中含有染色体条，胚乳细胞中含染色体条。
③7细胞或8核中的7细胞其中就包括了一个卵细胞和两个极核，若水稻的基因型为AaBb，则胚囊母细胞基因型为。
④如果水稻卵细胞基因型应为Ab，则极核的基因型为，其原因是
。
解析：
图中给出一个被子植物子房结构示意图，首先要求学生能够正确识图，弄清各数字代表的结构名称。
胚囊中7个细胞，从图解中我们可以看出是由一个胚囊母细胞发育而来的，所以这几个细胞的基因型完全相同（卵细胞和极核的基因型完全相同）。
花粉粒落到雌蕊柱头上萌发生出花粉管，花粉管通过珠孔进入胚囊，释放出两个精子，一个精子与卵细胞结合，形成受精卵，受精卵发育成植物的胚；另一个精子与极核结合，形成受精极核，将来发育成胚乳（双子叶植物胚乳发育过程中，胚乳被子叶吸收）。
答案：
（1）花粉管子房壁珠被受精极核受精卵珠孔
（2）分裂孢子
出芽（3）2母方122436AaBbAb卵细胞和极核是由单核胚囊经三次有丝分裂而来
【课堂演练】
一、选择题
1．在月季花药培养成单倍体植株的过程中，应选择哪个时期最易成活（）
A．单核期前的花药B．单核期后的花药C．单核期花药D．双核期
2．影响花药培养的主要因素是
A．材料的选择与培养基的组成B．亲本植株的生理状况
C．选择合适的花粉发育时期D．材料的低温处理与接种密度
3．粗糙脉孢菌的单倍体细胞中具有7条染色体。
两个不同类型的粗糙脉孢菌A和a融合后成为二倍体，随即发生典型的减数分裂，紧接着又进行一次有丝分裂。
此过程最终形成的子细胞数及每个子细胞中的染色体数分别为（）
A．8个、7条B．8个、14条C．4个、7条D．4个、14条
4．某高等植物体细胞内假设有6条染色体，它们是AaBbDd，那么，一个花粉管中的两个精子中的染色体是（）
A．ABD和abdB．AbD和abdC．AaB和BbdD．Abd和Abd
5．用兰花茎尖细胞可快速培养兰花苗，这种生殖方式不能叫（）
A．无性生殖B．组织培养C．植物克隆D．有性生殖
6．有同源染色体存在，但在光镜下一定看不到同源染色体之间两两配对联会的是（）
A．初级精母细胞B．次级精母细胞C．精细胞D．根尖分生区细胞
7．玉米的体细胞含有20条染色体。
在正常情况下，它的卵细胞、一个极核、胚细胞、胚乳细胞、珠被细胞和子房壁细胞所含染色体数目依次应为（）
A．10、10、20、20、20、20B．10、10、30、30、20、20
C．10、10、20、30、20、20D．10、20、20、30、20、20
8．如果某种植物的基因型为AABb，这两对基因分别位于两对同源染色体上，去雄后授以aabb植株的花粉，其胚乳可能的基因型是（）
A．AAaBBb、AAabbb、AAaBbbB．AABB、AABb
C．AaaBBb、AaabbbD．AaaBbb、Aaabbb
9．番茄的染色体数目是24，一个番茄细胞发生减数分裂，形成的细胞中有三个退化消失。
剩下一个细胞迅速发生了三次有丝分裂，你会找到多少个细胞核？
这些核含有多少个染色体（）
A．4个核，各有12个染色体B．4个核，各有24个染色体
C．8个核，各有24个染色体D．8个核，各有12个染色体
10．一个豆荚中种子的数目，从理论上讲取决于（）
A．花中雌蕊的数目B．雌蕊中柱头的数目
C．子房中受精胚珠的数目D．胚囊中胚的数目
二、非选择题﹙2--4个﹚
11．基因型为AaBb的水稻（24条染色体）的花药通过无菌操作，接入试管后，在一定条件下培养形成试管苗。
（1）愈伤组织是花粉细胞不断分裂后形成的不规则的细胞团，愈伤组织形成中，必须从培养基中获得和小分子有机物等营养物质。
（2）要促进花粉细胞分裂生长，培养基中应有和两种激素。
（3）愈伤组织分化是指愈伤组织形成芽和根，再由芽发育成叶和茎。
这一过程必须给予光照，其原因是①② 。
（4）试管苗的细胞核中含有条脱氧核苷酸链。
（5）培育成的试管苗可能出现的基因型有。
12.现有甲、乙两个烟草品种（2N=48），其基因型分别为aaBB和Aabb，这两对基因位于非同源染色体上，且在光照强度大于800勒克斯时，都不能生长，这是由于它们中的一对隐性纯合基因（aa或bb）作用的结果。
取甲乙两品种的花粉分别培养成植株，将它们的叶肉细胞制成原生质体，并将二者相混，使之融合，诱导产生细胞团。
然后，放到大于800勒克斯光照下培养，结果有的细胞团不能分化，有的能分化发育成植株。
请回答下列问题：
（1）甲、乙两烟草品种的花粉的基因型分别为和。
（2）将叶肉细胞制成原生质体时，使用破除细胞壁。
（3）在细胞融合技术中，常用的促融剂是。
（4）细胞融合后诱导产生的细胞团叫。
（5）在大于800勒克斯光照下培养，有种细胞团不能分化；能分化的细胞团是由的原生质体融合来的（只考虑2个原生质体的相互融合）。
由该细胞团分化发育成的植株，其染色体数是，基因型是。
该植株自交后代中，在
大于800勒克斯光照下，出现不能生长的植株的概率是。
答案:
1.C2.A3.A4.D5.D6.D7.C8.C9.D10.C
!
!
.
（1）水、无机盐
（2）细胞分裂素生长素（3）叶绿素的形成需要光试管苗的生长发育所需营养来自叶绿体利用光能制造的有机物
（4）24（5）AB、Ab、Ab、ab
12.答案：
（1）aBAb
（2）纤维素酶（3）聚乙二醇（4）愈伤组织
（5）2甲、乙两烟草品种的花粉48AaBb7/16
专题知识归纳
专题知识检测
一、选择题﹙50分﹚
1．在下列选项中，没有采用植物组织培养技术的一项是（）
A．利用秋水仙素处理萌发的种子或幼苗，得到多倍体植株
B．利用花药离体培养得到单倍体植株
C．利用基因工程培育抗棉铃虫的棉花植株
D．利用细胞工程培育“番茄-马铃薯”杂种植株
2．下列描述中，属于改变物种遗传性状的最根本的途径是（）
A．胚胎移植B．基因导入C．克隆D．组织培养
3．在植物组织培养中，切取胡萝卜的外植体时一般选择（）
A．具有木质部的部分B．具有韧皮部的部分
C．具有形成层的部分D．具有髓的部分
4．植物细胞表现出全能性的必要条件（）
A．给予适宜的营养和外界条件B．导入其他植物的基因
C．脱离母体的，给予适宜的营养和外界条件
D.将成熟的筛管的细胞移到去核的卵细胞
5.花药培养技术与植物组织培养技术的不同之处在于（）
A．培养基配制方法B．无菌技术C．接种操作D．选材
6．MS培养基与微生物的培养基相比，需要提供大量的（）
A．无机营养B．蔗糖C．甘氨酸和微生素D．激素
7．植物的花药培养形成的植株在下列育种过程中最有意义的是（）
A．杂交育种B．人工诱变育种C．单倍体育种D．基因工程育种
8．制培养基时下列各项可不必考虑的是（）
A．大量元素要充足B．微量元素不可少C．不能被杂菌污染D．要有一定光照
9．菊花的组织培养一般选择（）
A．开过花的老枝B．正在开花的枝条
C．未开花植株的茎上部新萌生的侧枝D．任何枝条均可
10．植物激素中生长素和细胞分裂素是启动细胞分、脱分化和再分化的关键性因素。
在植物组织培养过程中，如何使用这两种激素更有利于胚状体的形成（）
A．先使用生长素，后使用细胞分裂素B．先使用细胞分裂素，后使用生长素C．同时使用D．都不使用
11．植物激素中生长素和细胞分裂素是启动细胞分、脱分化和再分化的关键性因素。
在植物组织培养过程中，如何使用这两种激素更有利于愈伤组织的形成（）
A．长素的用量比细胞分裂素用量的比值高时B．生长素的用量比细胞分裂素用量的比值低时C．生长素的用量比细胞分裂素用量的比值适中时D．生长素的用量比细胞分裂素用量的比值相等时
12．用植物组织培养技术不能培育或生产出（）
A．杂交水稻B．无病毒植物C．人工种子D．食品添加剂
13．要将胡萝卜韧皮部细胞培养成完整植株，哪一项不是必须的（）
A．具有完整细胞核的细胞B．使培养对象处于离体状态
C．导入外源性目的基因D．一定的营养和激素
14.．下图是某二倍体植株一个正在分裂的细胞，下列叙述正确的是（）
①该植株的基因型必为AaBB②若该植株是由花粉粒发育而来的，则其亲本是四倍体③该类型植株不能产生Ab型配子④该细胞发生过基因突变
A．①②B．③④C．①③D．②④
15．在离体的植物器官、组织或细胞脱分化形成愈伤组织的过程中，下列哪一项是不需要的（）
A．消毒灭菌B．适宜的温度C．充足的光照D．适宜的养料和激素
16．动物细胞培养与植物组织培养的重要区别是（）
A．培养基不同B．动物细胞不需要在无菌条件下进行
C．动物细胞可以传代培养，而植物细胞不能
D．动物细胞能够大量培养，而植物细胞只能培养成植株
17．在生物体所有细胞中，全能性最高的是（）
A.卵细胞B.植物花粉C.体细胞D.受精卵
18．对细胞全能性的表述正确的是（）
A.花粉可培育成单倍体，是细胞全能性的体现
B.动物细胞融合标志着动物细胞全能性的实现
C.单克隆抗体的制备原理依据的是细胞的全能性
D.非离体植物细胞能够表现出全能性
19．用以下四种细胞工程技术培育出的新个体中，遗传物质全部来自一个亲本的方法是（）
A.细胞核移植B.细胞融合C.动物胚胎移植D.细胞组织培养
20．动物细胞培养与植物组织培养的重要区别是（）
A．动物细胞培养可以传代培养而植物不能
B．动物细胞培养是单个细胞培养而植物不是
C．物细胞培养的培养基的成分与植物不同
D.动物细胞培养中可发生遗传物质的改变而植物不能
21．关于愈伤组织形成过程的正确叙述是（）
A.愈伤组织的形成是离体的植物细胞分化的结果
B.愈伤组织的形成是离体的植物细胞分裂的结果
C.愈伤组织的形成是离体的动物细胞分化的结果
D.愈伤组织的形成是离体的动物细胞分裂的结果
22．植物组织培养过程中的脱分化是指（）
A.植物体的分生组织通过细胞分裂产生新细胞
B.未成熟的种子经过处理培育出幼苗的过程
C.植物的器官、组织或细胞通过离体培养产生愈伤组织的过程
D.取植物的枝芽培育成一株新植物的过程
23．运用下列细胞工程技术培育新品种，培养过程中能形成愈伤组织的是（）
1细胞和组织培养②植物体细胞杂交③动物细胞融合④动物细胞核移植
A.①②B.③④C.①③D.②④
24．细胞具有全能性的原因是（）
A.生物体细胞具有使后代细胞形成完整个体的潜能
B.生物体的每一个细胞都具有全能性
C.生物体的每一个细胞都含有个体发育的全部基因
D.生物体的每一个细胞都是由受精卵发育来的
25．1958年，美国科学家斯图尔德用胡萝卜韧皮部细胞培养出完整的胡萝卜植株。
该过程不需要（）
A.在无菌条件下切取具细胞核的细胞B.用酶解法去掉细胞壁
C.适合的光照和温度D.在培养基中加入一定量的营养物质和激素
二、非选择题﹙50分﹚
26．一同学做植物水培实验，全素标准培养液完全按植物生长发育所需要的矿质元素的种类和数量配制的，在培养过程中又及时添加该种培养液。
第一周长势正常，第二周起出现缺素症状且越来越严重。
第三周全株萎蔫，继而死亡，实验失败。
请分析回答：
（1）既然配制的是全素标准培养液，为什么还会出现缺素症状？
。
应采取怎样的补救措施？
。
（2）培养液中并不缺水，但植物到第三周竟然萎蔫，其原因是
。
这个事实也说明了植物根系吸收水分和吸收矿质离子的关系是。
（3）为了解决第三周出现萎蔫的问题，可以采取的措施是。
27．下表是某培养液成分含量表，请回答：
（1）若用于培养微生物，该培养液中有类营养物质，可培养的微生物同化作用类型是。
（2）此营养液若用来培养固氮微生物，则应除去的成分是，应加入的物质是。
编号
成分
含量
①
（NH4）HCO3
0．5g
②
KH2PO4
3．0g
③
CaSO4
0．5g
④
FeCl2
0．5g
⑤
维生素
少许
⑥
水
1000ml
（3）若用该培养液培养大肠杆菌，应加入的物质是，为检测大肠杆菌的存在与否还应加入和，将呈现反应。
（4）此培养液若用于培养金黄色葡萄球菌并观察菌落形态，除有机物外还应加入，为使其正常生长繁殖，同时又抑制其他杂菌，还应加入。
（5）此培养液若用于植物组织培养，还应加入和。
（6）各种成分在熔化后分装前必须进行，接种前要进行。
28．人工种子是人们模仿天然种子结构制造出来的生命有机体，它能像种子一样萌发生长，长成植物。
人工种子的核心部件是个被外层物包埋的具有类似种胚功能的胚状体。
胚状体不同于一般的种胚，是由非合子细胞分化形成的类似于胚的结构物，所以又称“体细胞胚”或“花粉胚”。
胚状体在一定条件下，可以通过胚胎发育过程形成植株。
胚状体可从悬浮培养的单细胞中得到，也可通过试管培养的愈伤组织、花粉或胚囊获得。
将胚状体包埋在一个能提供营养的胶质中，便成了所谓的“人工种子”。
自从1968年F.C.斯图尔德和J.赖尔特分别对胡萝卜进行诱导得到胚状体,30多年来约有200多种植物培养出了胚状体.我国利用组织培养技术已成功地在烟草、水稻、小麦和玉米等作物上诱导出了胚状体。
各国正着手将人工种子推向商品化。
根据以上材料回答：
（1）植物的胚状体是繁殖的产物。
培育胚状体利用了这一项生物技术。
（2）包埋胚状体的胶质可看作种子的哪部分？
（3）由人工种子萌发出的植株是否可育？
说明理由。
。
29．阅读下列材料，分析后简要回答问题：
（1）写出以下过程或结构的名称：
A；B；C；D。
（2）材料2中在获得杂种细胞的容器中还有其他什么细胞？
（3）A过程是否需要光照？
；再分化是否需要光照？
。
（4）名贵花卉进行离体培养时不应采用该株的（）
A．茎尖B.子房壁C.花粉粒D.叶片
答案:
1.A2.B3.C4.C5.D6.A7.C8.D9.C10.C11.C12.A13.C14.D
15.C16.A17.D18.A19.D20.C21.B22.C23.A24.C25.B
26.
（1）因为矿质元素的吸收需要消耗能量，而此装置中根系一直浸在水中，不能进行有氧呼吸，通过无氧呼吸提供的能量少，根系不能吸收到足够的矿质元素满足该植株生长的需要。
向培养液中通气。
（2）水分吸收的速度相对大于矿质离子的吸收速度，溶液的离子浓度越来越大，使根吸水发生困难。
两个相对独立的过程（3）加水稀释。
27．
（1）五自养型
（2）①有机物（3）有机物伊红美蓝深紫色
（4）琼脂高浓度食盐（5）蔗糖、Mg2+等琼脂（6）调整pH
28．
（1）无性组织培养
（2）提供营养的胚乳或子叶（3）若是由花粉发育来的则不可育，若是由胚囊等体细胞发育而来的则可育。
29.
（1）脱分化;愈伤组织;原生质体a;原生质体b
（2）细胞a、细胞b、
细胞a→细胞a、细胞b→细胞b（3）不需要；需要；（4）C
（5）会发生性状分离
探索·创新
2003年2月14日苏格兰罗斯林研究所证实世界上首只成年体细胞克隆动物多利已经死亡。
多利的尸体将被制成标本，存放在苏格兰国家博物馆。
多利于1996年7月5日出生，于1997年2月23日被介绍给公众，它是用一只6岁母羊的体细胞进行克隆，由罗斯林研究所与英国PPL医疗公司共同培育而成的。
罗斯林研究所所长哈里·格里芬说，绵羊通常能活11到12年。
但2002年1月科学家发现多利羊的左后腿患上了关节炎这种典型的“高龄病症”，现在，多利羊壮年死于老年羊常得的肺部感染疾病。
研究人员对它实施了“安乐死”。
世界第一只体细胞克隆动物多利羊的诞生曾震惊了世界，它的死也引起了人们对克隆动物的关注、以及对克隆技术发展前景的再思考。
请根据以上材料，分析并说明多利羊死亡的原因可能有哪些。
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