对乙酰氨基酚对小鼠谷胱甘肽S转移酶活性影响.docx
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对乙酰氨基酚对小鼠谷胱甘肽S转移酶活性影响
对乙酰氨基酚对小鼠谷胱甘肽S—转移酶活性的影响
4J-3*q
BIBLID'ISSN02539756中国药理^"口Pharmncoto~z…1993Nov;14Supp]【S.11--N.It
对乙酰氨基酚对小鼠谷胱甘肽转移酶活性的影响
汪珲,彭仁璃（湖北医科大学药理教研室,~430071.中国）
._——一——一
EffectsofpmraeetamolonglutathioneS-transfcrase
activityInmice
WANGHut,PENGRen—Xiu
（印aelmeatP^口仲tacotog,I1NbetMedicalUnirer一
鲥,Wuhan43007I,Ckisa）
ABSTRACTParacetamol（acetaminophen）90一l50
mg?
kg一increasedtheactivitYofserumglutathlone—
transfer8se（GST）andyetreducedtheactivit.es0fliv—
ermicrosomaiandhomogenateGSTjnfnice.The
GSTactivitywasdose-andtime—relatetoparaceta—
m.Anegativecorrelationwasfoundbetween8erum
GSTandliverhomogenateGST.aswellasbetween
setumGSTandlivermicrosomalGST.Agoodposi—
tireCOFF~tatior1betweenserumGSTandserumalanine
aTJlottans量ef舾e（AATwasalsoseer].InaddRion.
butylatedhydroxyanisolc（BHA）andsodiumferulate
（SF）remarkablyreversedthechangesofsetumGST
andserumAATactivitiesinparacetamol—treatedmice.
Theseresultssuggestedthattheconj【lgationlevelin
liverw驰decreasedinparacetamol—indueedhepatotoxi=
cityInmice.
KEYWORDSacetamlnophen{glutathionetrans—
ferases}alanineaminottansferase|anisoles}sodium
ferulate
H摘要对乙酰氨基酚（par）90—150mg?
kg能增加
小鼠血清GST活性,降低肝微粒体和肝匀浆GST水
平.GST活性改变与Par之间存在量一效和时一效关
系.血清GST与肝微粒体,肝匀浆GST变化间呈负
相关}与血清AAT变化呈高度正相关.丁羟茴香醚
.和阿魏酸钠能降低Par引起的血清GST和AAT升
高.提示,Par肝损害时.肝结合功能降低,同时胞浆
GST外漏致血清GST活性增高.
关键词盟墨蹩复苎墼f备胱甘肽转移酶类;垦!
§壁
茎!
暨E￡壁阿魏酸钠
Reoejwd199l一1】一1
只罗.
谷胱甘肽.转移酶（glutathione.trans—
ferasc,GST）在生物转化酶系统中属II相酶,
参与结合反应.临床上曾有患者服用过量对
乙酰氨基酚（paracetamoloracetaminophen.
Par）引起血清GST活性增高".一.为此本文
采用Par肝损害实验模型,系统地研究不同剂
量,不同时间Par对小鼠血清肝匀浆和肝微
粒体GST活性的影响,分析血清GST与血清
丙氨酸转氨酶（alanineaminotransferase.
AAT）变化的相关性,并观察丁羟茴香醚
（butylatedhydroxyanisole,BHA）和阿魏酸钠
（sodiumferulate.SF）在降血清AAT的同时.
血清GST的变化情况,以期了解Par对肝脏
结合功能的影响和肝损害及恢复时血清GST
活性变化的意义.
M^TERIALSANDMETHoDS
1一氯一2,4-二硝基苯（CDNB）.还原型谷胱甘肚
（GSH）和BHA均为Sigma产品.CDNB用无水乙醇
配制.BHA用橄榄油溶解.Par（山东济南药厂）用
时以生理盐水（NS）配制,40"C溶解.SF（广东利民制
药厂）用时以NS配制.
专昆明种小鼠,24土83g,由湖北省医科院提供.
Par0,90,110,130和150mg?
kg～ip,180rain后断头
处死.另一批小鼠par130mg?
kg～ip,于给药后即
刻,30?
60,120和180rain处死.BHA80mg?
kg和
SFiS0mg?
kg-.分别jg.qd×10d,末次给药后Par
I30mg?
kgip,180rain后处死.放血收集血清,每2
—
3鼠血合成一个标本,立即剖腹取肝.
每3—5个小鼠肝脏台一标本,用冰冷的Tris—HCI
50mmol?
L-.匀浆缓冲液（p87.4）制成25（wt:
w1）
匀浆.差速离心法制备肝微粒体,一80℃保存备
用.
以CDNB为底物,用岛津uv一3000积波长双光束
分光光度计测定血清GST和肝脏GST活性".以丙
S42?
5IBL]DssHO2s39756中国药理学辊AcP……lⅡsz…l993N叽Fl●S~pp]
酮酸钠为标准品,按改岛金氏法测定血清AAT活
性.牛血清白蛋白作标准,用酚试剂法测定肝蛋
白含量.
Par致小鼠血清GST和肝脏GST的变化
Par90—150mg?
kg引起血清GST活性的增
加.呈剂量依赖性.Par1l0mg?
kg时血清
GST活性为对照组的l45倍（P<0.05）.与此
同时,上述剂量的Par则引起肝匀浆GST活
性减少,其下降程度也依赖于剂量,Par130
mg?
kg时减少最为明显,为对照的70,150
mg?
kg时不再随剂量增加而进一步降低（Tab
1）.时一效关系上,Par130mg?
kgip后180
min内血清GST活性随时问不断上升,60min
时血清GST活性已明显增高（P<0.01）,120
min时血清GST活性增加达高峰,为0时对照
的543倍.在此期间,肝匀浆GST活性则随时
间呈下降趋势,120min时为O时对照的74
（P<0.05）,]80min时进一步降低.肝微粒
体GST活性在60min内未见改变,120min降
至0N的48（P<0.05）.180min时不再继
续下降.血清GST活性增高时间（60min）先
于肝匀浆,肝微粒体GST的降低（120min）
（Tab2）.
Tab1.Effec~ofparacefamol（Par）onglutathlone
S-transferueinJerum（I1mol?
mIn?
ml一）andliver
homogenate（nmol?
mln一?
mg一）ofmice8m8.
±s.'P>0.05,P<0.05,'P<0.0lcontrol
Tab2.Effectsofparaeetamol（Par）130mg?
kg
onglutathloneS-transferaseInserum（nmolmim一
-ml一）andliver（nmol?
min?
mg一）olmice.n一4
—
9,i±5.'P>0.05,.P<0.05,'P<0.01.as0min.
Time/01"a1hj.ne8一'"feas.
minInserumInliv
m
I
jc
n
r.
H
s
v
Dm
et
e
相关分析提示,血清GST与肝匀浆GST
活性在量一效关系上呈高度负相关（一88.36
—
0.0098X,…097,P<0.005）.血清
GST与肝匀浆,肝微粒体GST活性在时一鼓关
系上也皆呈线性负相关（一129.26—0.013X,
r一一0.86,P<0.05;一116.44—0.OI6X,
r一一0.82+P<0.05）.
Par致血清AAT的变化Par90—150
mg?
kg7范围内血清AAT活性呈剂量依赖性
增加,Par110mg?
kg可致血清AAT活性增
加（P<0.们）,Par150mg?
kg时血清AAT
活性为对照的5倍（Tab3）.从时一效关系上可
见,Par130mg?
kg给药60min时血清AAT
活性已明显增高（P<0.01）,120min时血清
AAT活性增加达峰值,为O时对照的5倍,180
min时不再明显改变（Tab4）.
Tab3.Effectofparaeetamol（Par）OHalaJalne
aminotransferaJe（AAT）Inler1]ll~ofmice.i士s.
P>0.05,P<0.0l#eontrol
BIBLIDlISSN02539756中国药理ActaP…口coto~枷sice1993Nov;14Suppl?
S43?
Tab4Effectofparacetamol（Par）130rng?
kgon
alanineamLnotransferase（AAT）inserumofmice.
i±s'P>0.05.'P<0.01懈0min
相关分析结果表明.血清AAT与血清
GST变化问在量一效和时一效关系上皆呈高度正
相关（y一一855+3五,r一0.97,P<0.01;Y
=一
689+3x,一0.98,P<0.01）.
BHA和SF对血清GST和血清AAT活性
的影响Par130mg?
kg可使血清GST活性
增加79倍（P<0.01）.血清AAT活性增加8
倍（P<0.01）.BHA有降低Par所致血清
GST和AAT活性增高的作用,使GST活性
降至损伤组的2,AAT活性降至10,接近
正常水平.SF也有对抗Par所致血清GST和
AAT增高的作用,使GST降至损伤组的2,
AAT降至7.接近正常（Tab5）.
Tab5.Effectsofbutylatedhydtoxyanlsole（BHA）80
mg?
kg一andsodiumferulate（SF115Orag?
kg一on
sermGsrandAATactivitiesinparacetamol（Par,
130rag?
kg一'）-treatedmice.n4—5.蕾土s.'P<
0.01ccmtroll'P<0.01Pargroup,
已知GST富含于动物肝细胞浆,生物{
短,小（45000--50000）.肝损害时,细胞
膜完整性遭到破坏,GST可大量释放入血+致
使血清GST增高,肝匀浆GST降低.本文表
明,抗氧化剂BHA能对抗Par肝损害,降低血
清AAT,此结果与文献报道一致.我们还
进一步发现BHA在逆转血清AAT的同对也
使血清GST得到恢复,并观察到SF也具有相
似的效应.故此提示BHA和SF有可能通过
保护肝脏,维持细胞膜完整?
陛.GST漏出减
少,使血清GST'改复接近正常.曾有文献提
及血清GST活性变化与肝脏组织病理改变其
有良好的平行关系.本文结果也表明血清
GST能较好地反映肝损害程度.
肝微粒体膜上存在的GST在分子量,基
因排列及免疫学等特性都有别于胞浆GSTf89,
由于大多数外源性化台物呈疏水性.有些经
P一450酶系统作用生成的代谢物.可固其尚具
有的一定亲脂性而仍停留于微粒体膜上,不扩
散到胞浆中+致使不能与胞浆中的GST有效
地接触,正如Boyer等.所指出"微粒体膜
GST是防止中毒性肝损害的一种重要酶".本
文所见肝匀浆GST含量减少的同时肝微粒体
GST也下降.它反映了Par引起结合功能水
平的降低,从而可增加肝脏对毒物的敏感性.
1BeckettGJ.DysonEH,ChapmanBJ,TemPletonAJ,
HayesJDP10smaglutathioneStransferase…ure
refinesbyradioimmunoassay:
asensitiveindexofhepato—
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<钟一扫@.
BIBLIDIISSN0253—9756中国药理Ac撕P~armaeogo9;删sF…1993Novi14SupplI$44--$46
云芝多糖对果蝇的繁殖力和寿命的影响
雍怀.薪.谭诗.瞧海4乃7.f兰堕生王新民,堡,陈海生7\/
（第二军医大学基础部生物学教研室,药理学教研室..药学院植化教研室.P~200433,中国）
Eileet~otCorlo[teg甜￡.o【,orpolysscghsiidesonpro—
dtletJvllyandinnsevllyinDrosoph~om~anogwsler
LIHuai—Yi,WANGXin—Min.TANJian-Ouan.
CHENH~-Sheng
（Depac'tmenlofBioloog,DepartmentofPkarmaeolo—
Deprmo,Phyf.㈣,~econdMilitargt
Med'cd￡￡h't竹羁留,sg^200433,c^）
ABs1RAC'I~Corioluecotorpolysaceharldes
（CVP）.extractedfromC~riolusermcolor（L）Fr,
werecornposedof67.53日一一glucose,l2.49D—
mann0se,儿.49L—abequose.8.21D-galactose,
andtraceL-acofrioso-OnOregonKstockof
Dresop^ilamela~ofla~ter,0.5一5ofCVPin
crea~edthenumberoftakingf00d.CVP2,3.
and5%increasedthe~equencyofmatingandO.5～
3increasedthenumberofflies_盯firstfilialgenera-
tlon（F1）.CVP（2and3inmatedtes~'land
2inunmatedtest）prolongedthe[Tteanliftspan,the
maximalllfespan,andmedianlethaitime（LT∞）of旱
flies,butnotfiles.
KEYWORDSCcreiotasver~color}polysaccharJdes
r.脚^melaao9口竹'reproduction'IongevitY
摘要用黑腹果蝇的标准野生型品系OregonK研究
云芝多糖对果蝇性活力,繁殖力和寿命的影响.结果
表明云芝多糖可明显增加果蝇的吃食次数,交配次数
ReCeived1991—05—1lAceetIted1993—05—15
和第一子代的仔蝇数.云芝多糖还可延长早蝇的平均
寿命,最高寿命和半教死亡时间在蝇中,除了最
高寿命有一定延外.云芝多糠并不延长其平均寿命和
半数死亡时间.
关键词三兰;乏华黑生苎;意蔓
云芝多糖（Corioluavers~olorpolysaccha
rides,CVP）具有提高机体免疫功能与改善学
习记忆的作用".果蝇是筛选抗衰老药物的
良好动物实验模型0.国内学者"和本实
验室利用果蝇对某些中药和营养制剂进行
了抗衰老实验研究.本文研究云芝多糖对果
蝇的抗衰老作用.
MATER1ALSANDMETH0DS
黑搬果蝇（DrosophilamefdD鼎）系从荷兰引
进的标准野生型品系OregonK.
药品CVP制荆由本校药学院植化教研室提供.
CVP系从野生云芝（Cori~nsyes,ice,or（L）Fr.产于东
北长白山区,由本校药学院檀化教研室陈悔生剐教授
鉴定）中提取精制而成.其多糖蛆分经气相色谱分析
测定,D一葡萄糖占67.53,D一甘露糖占l2.49.工
岩藻糖占ll,49%D一半乳糖占8.21,尚有微量的L一
鼠李糖.
进蝇对照组和CVP各浓度组果蝇的体重范围:
升级会员 