复旦大学实验动物学实验报告.docx

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复旦大学实验动物学实验报告

复旦大学实验动物学实验报告

复旦大学实验动物学实验报告

实验报告一

小鼠的一般技术操作

一、实验目的和要求：

通过实际操作，掌握小鼠实验的一般操作方法，包括动物的抓取和保定、性别鉴定、编号、给药、麻醉、采血、处死、解剖等方法。

二、实验基本步骤：

（一）抓取和保定

先用右手将小鼠的尾巴提起，至于鼠笼或粗糙的平面上，当小鼠向前挣扎行进时，再用左手的拇指和示指捏住小鼠两耳后颈部皮肤，翻转小鼠至于掌心，拉直后肢。

以小指拉住小鼠尾巴即可。

在一些特殊的实验中，如进行尾静脉注射时，可使用专门的小鼠固定器进行保定。

（二）性别鉴定

将小鼠抓取后，观察其肛门及生殖器之间的距离，距离远的为雄性，距离近的为雌性。

另外翻转小鼠观察生殖器附近，性成熟的雄性小鼠的睾丸降至阴囊内，会有明显的突起；雌性小鼠的肛门至会阴处有一条无毛覆盖的细线。

（三）编号方法

常用的有染色法、耳缘打孔法、烙印法、挂牌法。

此外还有断趾法、剪尾法、被毛剪号法、笼子编号法等。

在本次实验中，我们小组使用的是染色法。

（四）去毛方法

常用的有拔毛法、剪毛法、剃毛法、脱毛法。

（五）给药方法

常用的有经口灌胃法、经呼吸道吸入、经皮肤吸收和注射给药法。

1．经口给药法

（1）灌胃法：

左手固定小鼠，右手持灌胃器，将灌胃针从小鼠的一侧犬齿缺失处插入口中，灌胃针竖起靠向口腔后壁，使小鼠消化道成直线，沿咽喉壁缓慢插入食管，使其前段到达膈肌位置，灌胃针插入时应无阻力，如有阻力或动物挣扎则应退针或将针拔出，以免损伤、穿破食管或误入气管。

（2）口服法

在本次实验中，我们小组使用的是灌胃法。

2.注射给药法

（1）皮下注射

（2）肌肉注射

（3）腹腔注射

（4）静脉注射

在本次实验中，我们使用的是皮下注射、腹腔注射、静脉注射。

（六）采血方法

1.断头取血

2.眼眶后静脉丛穿刺采血

3.尾静脉切割采血法

4.摘眼球采血法

5.心脏采血

在本次实验中，我们小组使用的是眼眶后静脉丛穿刺采血、尾静脉切割采血、摘眼球采血法、心脏采血。

（七）麻醉方法

1.常用局部麻醉剂：

普鲁卡因、利多卡因

2.常用全身麻醉剂：

乙醚、苯巴比妥钠、戊巴比妥钠、硫喷妥钠、巴比妥钠、氨基甲酸乙酯。

在本次实验中，对小鼠采用腹腔注射麻醉，方法与腹腔注射给药一样，麻醉剂是2%水合氯醛，剂量为400mg/kg，注射量为0.5ml/25g。

（八）皮肤移植

在本次实验中，在小鼠尾巴上切取长8mm，宽3mm的皮肤，切取效果不好。

（九）处死方法

1.颈椎脱臼法

2.断头法

3.击打法

4.急性大出血法

5.药物致死法

连接处）。

观察其他小组雌性兔的子宫（双子宫，2个子宫开口于单一的阴道）。

实验报告三

豚鼠的一般技术操作

一、实验目的

通过实际操作，基本掌握豚鼠的抓取和保定、性别鉴定、心脏采血、处死、解剖等操作技术。

二、实验基本步骤

（一）抓取和保定

先用右手示指和中指轻轻夹住豚鼠颈部，拇指和示指抓住豚鼠左前肢，中指和无名指抓住豚鼠的右前肢，手掌抓住背部，拿起豚鼠，左手托住豚鼠臀部，并固定其后肢。

（二）性别鉴定

抓取豚鼠后，翻转观察生殖器附近，雄性豚鼠的睾丸降至阴囊内，会有明显突起。

（三）采血的方法

1.耳缘剪口采血

2.心脏采血

3.股动脉采血

4.背中足静脉取血

在本次实验中，我们小组采用的是心脏采血。

（四）处死方法

心脏大量采血，造成豚鼠急性失血而死亡。

（五）解剖方法

解剖操作：

将豚鼠处死后，将其仰卧固定于解剖板上，用剪刀沿腹中线剪开腹部皮肤、腹肌和腹膜，暴露豚鼠腹部的内脏器官，先找到豚鼠的结肠，沿着结肠带寻找盲肠。

在本次实验中，我们小组解剖的是雄性豚鼠，在观察胸腔器官、腹腔器官、大脑、生殖系统、豚鼠颞骨后，又着重观察了胸腺（在颈部皮下气管两侧，于下颌骨角到胸腔入口中间，2个光亮淡黄色、细长成椭圆形、充分分叶的腺体）、睾丸（椭圆形、纵行稍向背外侧排列于阴囊）。

实验报告四

大鼠的一般操作技术

一、实验目的和要求

通过实际操作，掌握大鼠实验的一般操作步骤，包括动物的抓取和保定、性别鉴定、给药、麻醉、采血、处死、解剖等方法。

大鼠急性肺水肿模型的复制；观察阴道涂片阴道涂片的制作及性周期观察。

二、实验基本步骤：

（一）抓取和保定

将大鼠放置于桌面，右手抓住其尾部，牵制大鼠的活动，左手放在大鼠背部，并迅速向前推移，从其颈部保定；迅速将大鼠翻转过来，同时左手作半握状，大拇指用力顶住大鼠下颌骨，并适当的压住大鼠前肢，力度要适当，以头不能抬、前肢不能挣扎为宜，其余四指在下顶住枕骨。

右手也做半握状，保定其后肢和大鼠尾巴，防止其挣扎，左右两手用力将大鼠身体拉直，力度适宜。

注意：

大鼠尾巴覆有短毛和环状角质鳞片，大鼠尾巴表皮角质程度高于小鼠，抓取时应注意避免力度、抓取位置及不要让大鼠尾巴转圈，以免尾巴断裂。

（二）性别鉴定

将大鼠抓取后，观察其肛门及生殖器之间的距离，距离远的为雄性，距离近的为雌性。

另外翻转大鼠观察生殖器附近，成年雄性大鼠的睾丸降至阴囊内，会有明显的突起；成年雌性大鼠有6个乳头。

（三）给药方法

根据我们的实验目的和要求，对于实验的大鼠采取以下4种给药方法。

1.灌胃法

2.腹腔注射

3.肌内注射

4.静脉注射

在本次实验中，我们小组使用的是灌胃法、腹腔注射、静脉注射。

（四）采血方法

1.腹主动脉采血法

2.眼眶后静脉丛穿刺采血

3.尾尖采血法

4.颈静脉采血法

5.心脏采血

6.舌下静脉采血

在本次实验中，我们小组使用的是尾尖采血法、心脏采血、舌下静脉采血法。

（五）麻醉方法

一般采用腹腔注射麻醉，方法与腹腔注射给药一样，麻醉剂是10%水合氯醛，剂量为400mg/kg，用量为1ml/250g。

（六）处死方法

大鼠处死方法可以采用引颈法，此法快速而痛苦小，对一般实验结果无影响。

在本次实验中，我们小组有1只雌性大鼠采用的是引颈法，1只雄性大鼠建立肺水肿模型后，采用引颈法处死。

（七）解剖方法

固定大鼠，以下腹部最低点起始，V字开口，沿中线剪开皮肤至剑突，再剪开腹膜，暴露腹部盆腔器官。

腹腔内器官包括肝脏（无胆囊），脾脏，胰腺（位于中部与脾脏相连的分散的脂肪样结构），胃，肠道，肾脏（推开肠管可见），输尿管，膀胱，生殖器官（雌性：

子宫和卵巢；雄性：

将睾丸挤入盆腔内，即可见两个椭圆形白色睾丸）等，与人类器官位置相近。

继续剪开胸部皮肤和肋骨，见两侧肺脏（左1、右4）和心脏，向上有器官。

在本次实验中，我们小组解剖了一只雄性小鼠和一只雌性小鼠。

未剪开头部，没有观察大鼠的头部。

在了解大鼠的基本解剖结构、器官形态和特点，除了观察一般脏器如心脏、肺脏、脾脏等外，主要寻找并观察了胸腺（在胸腔入口处，乳白色，由左右2叶组成）、甲状腺（在颈部环状软骨高度，位于器官两侧，白色脂肪样物质，0.5-1mm，很小，不细分辨别很容易找不到或当成脂肪丢弃）、肾上腺（位于肾脏上级，距离肾脏大约0.3cm，为白色米粒样物质）。

（八）大鼠急性肺水肿模型的复制

在本次实验中，我们小组雄性大鼠体重350g,注射8%的氯化铵3.5ml。

观察大鼠出现：

口唇紫绀、眼睛突出、四肢无力、头向胸部弯曲及四肢抽搐。

采用引颈法处死，解剖观察，取出双肺称重2.1g，由于实验器材有限，在本次实验中并未计算肺重量系数。

（九）阴道涂片的制作及性周期观察

保定大鼠，充分暴露阴道，用滴管吸生理盐水1ml，然后插入大鼠阴道深部反复冲洗4---5次，确保有吸到阴道分泌物。

将1滴冲洗液涂于载玻片上，用酒精灯烘干。

用姬姆萨染液染色20min，流水冲洗，在显微镜下观察。

常见3种细胞：

角化上皮细胞的体积较大，呈片状，多变形；有核上皮细胞体积中等，圆形或椭圆形；白细胞体积较小、圆形、透亮。

采用阴道涂片法判断大鼠性周期，具有准确、简便、实用等优点。

实验报告五

Beagle犬的常用操作技术的示教实验

一、实验目的和要求

通过示教和实际操作初步掌握Beagle犬的主要采血和注射给药等操作技术。

二、实验基本步骤

（一）Beagle犬年龄的判断

判断犬的年龄，主要依靠犬牙齿的磨损和脱落情况。

出生10几天即生乳牙，2个月后开始由门齿、犬齿、臼齿逐渐换为恒牙，8---10个月恒牙换齐，但需要1年半以后牙齿才能生长坚实。

年龄越大磨损越严重。

（二）Beagle犬的保定

1.保定架固定

2.采用犬固定床

3.徒手保定法：

此法方便，可用于前肢采血、经口给药等。

但注意对那些比较狂躁、性情较不温顺的犬不能采用。

在本次示教中，犬已被麻醉，未被保定。

（三）Beagle犬的采血方法

1.后肢外侧小隐静脉采血

2.前肢背侧皮下静脉采血

3.颈静脉采血

4.股动脉采血

在本次实验中,我们采用的是后肢外侧小隐静脉采血、.前肢背侧皮下静脉采血。

实验报告六

小鼠无菌剖腹取胎术实验

一、实验目的和要求

通过实际操作，了解通过剖腹取胎术得到幼鼠的基本原理、操作和用途。

二、实验原理

由于胎盘屏障的作用，因体内的正常微生物菌群及大多数病原微生物（除个别例外）不能通过胎盘感染胎仔，因此胎仔处于“无菌”状态通过无菌剖腹获得的胎鼠由无菌母鼠代乳，并维持仔鼠在无菌隔离器中，这是获得无菌动物的唯一途径。

但由于条件所限，本实验仅用于熟悉剖腹获得幼仔的过程，对无菌操作并无严格要求，故实验在实验台上进行。

三、实验步骤

（1）颈椎脱臼法处死孕鼠，仰卧位固定于动物板上，暴露腹部手术部位进行乙醇消毒。

（2）沿腹中线剪开腹部皮肤、腹肌、腹膜，暴露子宫，用止血钳分别夹住子宫颈部和两侧卵巢，剪断取出子宫。

取出子宫后用生理盐水洗一下，尽快将胎鼠连胎盘一起取出。

（3）用棉球擦拭幼鼠，轻轻按摩胸腔及腹部促使新生鼠呼吸，待呼吸、循环正常后用止血钳扎断脐带。

四、实验结果

总胎数：

16只，体长大约：

17mm。