第1课普通植物病理学实验指导王海光.docx
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第1课普通植物病理学实验指导王海光
中国农业大学自编教材
一般植物病理学实验指导
（农学专业用）
王海光编
二零一一年
序言
《一般植物病理学实验》本来是《一般植物病理学》的实验教课部分，作为《一般植物
病理学》的一部分，不是单唯一门课。
学校正本科生教课计划调整以后，《一般植物病理学》
的实验教课部分独立作为一门必修课，由本来的18学时，调整为32学时。
该课程的教课目标是使学生从感性上认识植物病害的症状、病害发生规律、主要病原真菌、细菌、病毒、线虫的形态特色等有关知识，掌握植物病害诊疗、病原分别、纯化、接种、判定等植物病理学
研究的惯例方法和技术，提升学生的实验能力和实质着手能力，同时，联合实验课程内容培育学生科学的思想方法。
《一般植物病理学实验》依据教课计划、教课要求、实验条件等，共设置了8个实验，每个实验4个学时。
实验资料可能依据实质状况有所调整，实验内容安排次序也可能依据田间病害发生状况和实验资料的准备状况进行暂时性调整。
本实验指导是在昨年教课的基础上整理改正编写的，在编写过程中，参照了过去的一些实验指导书和网上的教课资源，在此一并感谢！
本实验指导尚显单薄，内容尚欠丰富，在此后的教课中将日臻完美。
编者
2011年8月
实验课注意事项
1.
实验课前一定经过实验指导或经过教课网络平台下载课件认识讲堂实验内容，明的确验
目的，认识操作步骤。
2.准时参加实验课教课，禁止迟到。
上课时期注意讲堂纪律，禁止吵闹、任意走动等搅乱教课的行为发生。
3.注意实验室安全。
实验时，要严格依照教师要求操作，爱惜实验仪器和资料。
碰到仪器发生故障，一定实时报告教师，破坏仪器或器具一定登记。
依照学校有关规定办理或补偿。
4.实验报告一律用铅笔书写，一定使用学校一致印制的实验报告纸，准时交实验报告。
5.画图必定仔细，不准虚假或艺术加工。
画图时采纳硬度适合的铅笔，笔尖要保持圆滑。
所画图形的全部特色用线条和圆点表示，线条要圆滑、粗细一致，用圆点疏密表示色彩深浅，禁止涂抹，圆点要求大小一致。
图形要求大小适中，各部分构造比率合理，细微部分需放大表示时，可独自绘制。
图形中各部分名称一律用虚线引出标明在图形右边，图名写在图形下方，并在图名下边注明放大倍数。
6.
实验结束后，整理好自己的物件，将所用仪器或资料整理好放在适合的地点，
若有需要，
应做好使用状况登记。
7.
轮番值日，保持实验室整齐。
实验一植物病害症状的察看和真菌显微玻片制作1
实验二真菌一般形态和根肿菌门、壶菌门、卵菌门、接合菌门真菌及其所致病害2
实验三子囊菌门真菌及其所致病害3
实验四担子菌门真菌及其所致病害4
实验五植物病害标本收集及病原判定5
实验六半知菌类真菌及其所致病害6
实验七侵染性病害侵染过程的察看7
实验八病毒、细菌、线虫和寄生性种子植物及其所致病害9
一般植物病理学实验指导
实验一植物病害症状的察看和真菌显微玻片制作
一、实验目的
1.认识各样植物病害症状。
2.学习察看和描绘植物病害症状的方法。
3.加深对植物病害的感性认识，为田间诊疗确立基础。
4.学习主要病原真菌显微玻片标本的制作方法。
认识不一样症状种类的病害标本应采纳的制片方法和重点技术。
二、实验内容
1.经过看幻灯片、病害症状挂图及察看植物病害症状标本，察看一些主要典型病害。
2.经过播放教课片,认识非侵染性病害的发病特色。
3.练习主要病原真菌显微玻片标本的制作方法。
三、作业
描绘起码10种病害，要求写出病原名称、危害部位、症状种类，并简要描绘症状。
附录：
病原真菌显微玻片的制作方法
1.涂抹法：
将病原悬浮液平均地涂在载玻片上。
2.撕取法：
撕取发病部位表皮或表皮毛，察看着生在寄主或基质表面的菌丝和孢子，寄主表皮细胞内的真菌菌丝、吸器和休眠孢子囊堆等。
3.粘贴法：
用透明塑料胶带粘贴，用于察看着生于病组织或基质表面的菌丝或子实体。
4.挑取法：
用挑针挑取病组织或基质表面的病原物，也可先将埋生或半埋生的子实体连同病组织一并挑出，再用挑针将子实体剥离。
挑取病原物的量要适合，在保证选材典型的前提下，越少越好，免得相互重叠，辩解不清。
5.组织透明法：
利用化学药品办理病组织，使组织透明，察看病原在组织内的构造和形态。
6.徒手切片：
关于埋生或半埋生的子实体，能够用刀片将病组织切成很薄的丝或片，而后用挑针挑取适合的做成玻片。
1
一般植物病理学实验指导
实验二真菌一般形态和根肿菌门、壶菌门、卵菌门、接合菌门真菌及其所致病害
一、实验目的
1.认识真菌的一般形。
2.认识根菌、菌、卵菌、接合菌真菌形特色及其所致病害型。
3.学使用病原分索表。
二、实验内容
1.真菌的一般形，主要包含：
菌体、吸器、菌核、菌索及真菌的有性和无性子等，并注意真菌的形特色。
2.根菌真菌及其所致病害，察病原和病害症状特色。
3.菌真菌及其所致病害，察病原和病害症状特色。
4.卵菌真菌及其所致病害，察病原和病害症状特色。
5.接合菌真菌及其所致病害，察病原和病害症状特色。
三、作业
1.
1）真菌有隔菌，无隔菌；
2）所察的一种霜霉病，制霜霉病菌囊梗和子囊；
3）根霉属真菌形；
4）番茄晚疫病病菌囊梗和子囊。
2.定所制霜霉菌到属，并写出索序。
附录：
霜霉目霜霉科分属索表
1.囊梗粗壮，端分枝不，粗而密，寄生于禾本科植物
⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯指梗霉属（Sclerospora）（谷子白病）1’.囊梗，并有律的分枝
2.分枝尾端膨大呈状，的生小梗，梗上生子囊
⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯梗霉属（Bremia）（苣霜霉病）
2’.分枝尾端不膨大
3.囊梗分枝，与主梗近直角，分枝尾端平
⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯霉属（Plasmopara）（葡萄霜霉病）
3’.囊梗非分枝
4.囊梗二叉状分枝，子囊无乳状崛起
⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯霜霉属（Peronospora）（白菜霜霉病）
4’.囊梗先分枝一次，而后不完整称二叉状分枝，子囊有乳状崛起
⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯假霜霉属（Pseudoperonospora）（黄瓜霜霉病）
2
一般植物病理学实验指导
实验三子囊菌门真菌及其所致病害
一、实验目的
1.认识子囊菌子囊果的形及代表性真菌所致病害的症状特色。
2.熟玻片的制作技及索表的使用。
二、实验内容
1.察子囊菌真菌（包含外囊菌属、白粉菌、喙壳属、赤霉属、禾囊壳属、黑星菌属、核菌属等）的形特色，并察子囊菌真菌所致病害的症状。
2.制作白粉菌囊壳的玻片，并察隶属的形特色，敲开囊壳后察子囊和子囊子。
3.索所供给的白粉病病原菌到属。
三、作业
1.：
1）桃叶病菌子囊；
2）小麦赤霉病菌有性段形；
3）油菜菌核病菌子囊、子囊、和子囊子；
4）桃白粉病菌囊壳、隶属和子囊。
2.定供给的白粉病病原到属，写出索序。
附录：
白粉菌分属索表
1.囊壳内子囊
2.隶属菌状⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯壳属（Sphaerotheca）
2’.隶属分叉状⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯叉囊壳属（Podospaera）
1’.囊壳多子囊
2.隶属端双分叉⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯叉壳属（Microsphaera）
2’.隶属不分叉
3.隶属端呈状⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯壳属（Uncinula）
3’.隶属非上述
4.隶属基部球形,部状⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯球壳属（Phyllactinia）
4’.隶属菌状
5隶属⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯白粉菌属（Erysiphe）
5’隶属不达，呈短菌状⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯布氏白粉菌属（Blumeria）
3
一般植物病理学实验指导
实验四担子菌门真菌及其所致病害
一、实验目的
1.掌握担子菌中主要病原菌锈菌和黑粉菌的主要形态特色及其所致主要病害的症状特色。
2.学习和掌握切片的制作方法。
二、实验资料和器具
1.锈菌病原玻片及其所致病害症状标本。
2.黑粉菌病原玻片及其所致病害症状标本。
3.显微镜、载玻片、盖玻片、切片用刀片、挑针、擦镜纸、吸水纸、蒸馏水等。
三、实验内容
1.察看供给的担子菌病原玻片。
2.察看供给的担子菌所惹起病害的挂图、散装标本。
3.制作担子菌病原暂时玻片，并察看病原形态特色。
四、作业
1.绘制柄锈菌属冬孢子形态图。
2.绘制条黑粉菌属冬孢子形态图。
3.绘制小麦腥黑穗病菌萌生冬孢子及“H”状联合。
4.绘制苹果锈病菌锈孢子器和锈孢子。
4
一般植物病理学实验指导
实验五植物病害标本收集及病原判定
一、实验目的
1.学习植物病害的诊疗方法。
2.熟习和掌握植物病害标本收集的方法和注意事项。
3.学习和掌握植物病害病原判定的方法。
4.熟习暂时玻片的制作方法。
二、实验资料和器具
标本夹、剪刀、塑料袋、显微镜、载玻片、盖玻片、切片用刀片、挑针、擦镜纸、吸水纸、蒸馏水等。
三、实验内容
1.5个同学一个小组，到田间收集起码三栽种物病害标本，保留好，并记录收集人姓名、收集地址、收集时间、寄主名称、收集部位。
2.在实验室内利用放大镜或显微镜察看所收集标本的症状特色，判定病原到属。
四、作业
每个小组提交实验报告一份，并同时提交所收集的植物病害标本，实验报告写上小组全部成员的姓名、班级、学号。
实验报告要求写明每种标本的收集人姓名、收集地址、收集时间、寄主名称、收集部位等信息，写出病原的属名，并写出判定的依照。
5
一般植物病理学实验指导
实验六半知菌类真菌及其所致病害
一、实验目的
1.
掌握半知菌中主要病原菌丛根孢菌、
球壳孢菌、盘梗孢菌和丝核孢菌
（芽孢纲、丝孢纲、
腔孢纲）的主要形态特色及其所致主要病害的症状特色。
2.
熟习和掌握切片的制作方法。
二、实验资料和器具
1.半知菌病原玻片及病原所致植物病害标本。
2.显微镜、载玻片、盖玻片、切片用刀片、挑针、擦镜纸、吸水纸、蒸馏水等。
三、实验内容
1.察看供给的半知菌病原玻片。
2.察看供给的半知菌所惹起病害的挂图、散装标本和盒装标本。
3.制作半知菌病原暂时玻片，并察看病原形态特色。
四、作业
1.绘制芹菜斑枯病菌分生孢子器和分生孢子。
2.绘制高梁炭疽病菌分生孢子盘、分生孢子和刚毛。
3.绘柑桔青霉病菌分生孢子梗和分生孢子。
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一般植物病理学实验指导
实验七侵染性病害侵染过程的察看
一、实验目的
1.学习侵染性病害病原接种方法。
2.认识植物病害的侵染过程。
二、实验资料
1.温室培育好的3-4叶期烟草，TMV毒源（感染TMV的烟叶），800目金刚砂，研钵，洗瓶，pH7.0的0.1M的磷酸缓冲液等。
2.温室培育好的3-4叶期铭贤169小麦苗，吐温-20，小麦条锈病菌毒性小种，喷壶等。
三、实验内容
1.学生三个人一个小组进行病毒病接种。
以烟草花叶病毒病为例，采纳汁液摩擦接种法接种。
放于温室培育发病，按期进行察看病害进展状况，认识病毒病害的侵染过程。
2.学生三个人一个小组进行真菌病害接种。
以小麦条锈病为例，采纳喷雾接种法接种，按期察看接种后小麦苗的生长状况，并检查小麦条锈病的发生状况，认识真菌病害的侵染过程，练习真菌病害人工接种方法。
四、实验步骤
（一）烟草花叶病毒病示范接种
1.用磷酸肥皂将全部器具及手洗净；
2.在研钵中加入少量pH7.0的0.1M的磷酸缓冲液，用研钵将烟草花叶病毒源研成匀浆；
3.
在健康叶片正面撒上隐约可见的
800目金刚砂；
4.
用洗净的手指蘸少量毒源匀浆，在健康的烟草叶片上摩擦三次（不要使劲过大）
。
同时
用清水摩擦作比较，注意应先作比较摩擦试验，后做病毒汁液摩擦接种，免得比较感染
TMV；
5.用洗瓶冲掉叶面上残留的汁液；
6.将接种后的烟草苗放于温室中进行培育察看。
（二）小麦条锈病菌喷雾接种
1.取少量新鲜的小麦条锈病菌夏孢子，放于小培育皿中，加少量清水，滴入1-2滴吐温－
20，用玻棒轻轻搅拌，直至浆糊状，用清水洗入喷壶，摇匀，配成孢子悬浮液；
2.用喷壶将配好的孢子悬浮液在培育好的小麦苗长进行喷雾接种，喷雾要平均一致。
同时用清水作为比较；
3.接种后，将小麦苗移入大铁筒内，摆放齐整，用一块表面喷清水的塑料薄膜覆盖铁筒，密封保湿，保湿12-15小时后揭去薄膜，置于温室内培育，按期察看发病状况。
作业
1.写出烟草花叶病毒病接种的简要步骤，并说明其原理，记录并剖析结果。
2.写出小麦条锈病菌接种的简要步骤，检查小麦条锈病菌的潜育期、寄主反响型、病害广泛率、严重度，计算发病率和病情指数，并将结果记入下表。
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一般植物病理学实验指导
小麦条锈病接种试验结果
品种名称潜育期（天）反响型广泛率（％）严重度（％）病情指数（％）
接种日期：
月日检查日期：
月日
附录：
植物病原的接种方法
1.种传病原：
拌种法、浸种法；
2.土传病原：
菌土法、浸根法；
3.气传病原：
喷雾法、涂抹法、注射法、针刺法、喷粉法、扫接法；
4.虫传病原：
媒介虫传接种法；
5.嫁接传病原：
菟丝子媒介法、嫁接接种法。
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一般植物病理学实验指导
实验八病毒、细菌、线虫和寄生性种子植物及其所致病害
一、实验目的
学习辨别病毒、细菌、线虫和寄生性种子植物等病原物形态特色和它们惹起的植物病害的症状。
二、实验资料和器具
1.病毒、细菌、线虫和寄生性种子植物所致病害的标本和挂图。
2.新鲜的烟草一般花叶病烟苗或烟草叶片，接种根癌土壤杆菌的向日葵苗。
3.载玻片、盖玻片、显微镜、镊子、吸管、培育皿、蒸馏水、吸水纸、擦镜纸等。
三、实验内容
1.认识植物病毒病的症状、病毒粒体和内含体形态，熟习病毒病害的症状特色。
2.病毒内含体察看。
3.察看植物病原细菌病害标本；察看供给的接种根癌土壤杆菌的向日葵苗发病后的症状特色。
4.察看植物病原线虫示范玻片和植物病原线虫病害标本。
5.察看菟丝子、桑寄生等寄生性种子植物的形态。
四、作业
1.
绘制TMV结晶状内含体形态图。
2.
绘制小麦粒线虫形态图或甘薯茎线虫形态图。
3.
描绘供给的接种根癌土壤杆菌的向日葵苗发病后的症状特色，
并写出癌土壤杆菌的
致病体制。
附录：
利用根癌土壤杆菌接种向日葵苗的方法
1.向培育好根癌土壤杆菌的试管中加入少量灭菌生理盐水；
2.将试管置于震荡器上震荡使细菌充足悬浮；
3.将细菌悬浮液转移至一个灭菌试管中，并与标准浓度比较浑浊度，若悬浮液浑浊度高于标准，则加入灭菌生理盐水稀释；
4.用无菌的接种针在向日葵苗的茎秆中部刺伤（扎孔6个）；用无菌脱脂棉蘸取已配
好的菌液包裹伤口，于温室中培育，一周后察看结果。
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一般植物病理学实验指导
主要参照文件：
1.许志刚主编，《一般植物病理学实验实习指导》（第二版），高等教育第一版社，2008.
2.马占鸿主编，《植物病理学实验指导》，中国农业大学自编教材，2001.
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