临床检验标本采集指南Word格式.docx
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血液检验标本采集指南
检验项目
标本要求
采血管类别颜色
采血量
混匀放置送检要求
全血细胞分析+五分类
静脉随机全血
紫色管(EDTA-K2抗凝管
2ml
采血要快,见血立即混匀5-8次,竖放,2小时内送检
ABO、RH血型、交叉合血
立即混匀5-8次,竖放,2小时内送检
糖化血红蛋白
血凝检验
静脉无脂血全血
兰色管(枸橼酸钠1:
9抗凝)
血沉检验
黑色管(枸橼酸钠1:
4抗凝)
血流变学检验
空腹静脉全血
绿色管(肝素钠抗凝)
3-5ml
急诊生化如电解质、肾功淀粉酶、心梗三项定量等
立即混匀5-8次,竖放,及时送检
肝肾功、血脂、电解质、心肌酶谱、风湿三项等生化类项目
空腹静脉全血(最好上午)
红头生化类普通管,无抗凝剂
竖直放入试管架,2小时内送检
免疫类项目
输血前检查
下图为美国临床及实验室标准研究院(CLSI)[原美国临床实验室标准化委员会(NCCLS)]推荐采血顺序,在实际工作中,如患者静脉条件较差,有可能采血不足,则应首先考虑凝血1(蓝帽)和血沉(黑帽)检测管,因
为这两管要求严格。
临床检验标本采集指南及注意事项
临床检验标本采集和处理问题已普遍引起了人们的重视。
为做到临床检验质量保证,中华人民共和国卫生部卫生技术标准化委员会已将临床检验标本采集和处理的有关问题,列为国家和行业的标准化文件,以达到对临床检验工作的规范化要求。
如中华人民共和国卫生行业标准ws/T230-2002和中华人民共和国国家标准GB19489-2004等,分别对临床化学检验标本、便携式血糖仪血标本、凝血因子测定标本、尿液标本、乙型肝炎表面抗原酶免疫检测标本、临床酶活性浓度测定标本、临床诊断中聚合酶链反应标本和实验室生物安全等标本均提出了标准化的要求。
实践证明,为保证临床检验质量,必须做到全过程质量控制,即对实验检查的全过程进行全面的质量控制和质量管理。
这里包括:
实验前(分析前)、实验中(分析中)和实验后(分析后)三个阶段的质量控制,其中实验前质量控制尤其重要。
国内外均有报道,试验误差中60~70%来自实验前(分析前),而且实验前(分析前)误差是仪器、试剂、质控品和标准品等再好也无法解决的。
因此,必须注意做好实验前质量管理。
实验前质量控制主要包括:
(1)病人准备
(2)标本采集(3)标本运送(4)标本处理等
一、病人准备
标本采集前病人的状态对检测结果会有一定的影响,因此,各种不同检测项目对标本采集前病人的状态有不同的要求。
如血脂测定须病人禁食12~14h后采血(否则出现脂血);
情绪紧张会使血糖升高;
吗啡、可待因可使淀粉酶(AMS)升高;
吃香蕉能使尿液5-羟吲哚乙酸升高等。
所以,在病人要做某些化验检查之前,必须嘱咐病人做好相应的准备。
二、标本采集
1、血液标本
防止干扰物污染(特别是定量分析标本)
采血方法要正确。
信息无误:
标本采集后,必须在试管或容器上贴上化验电子申请单条码,应当场核对无误。
叮嘱病人采血前4小时勿喝茶或咖啡、勿吸烟饮酒。
尽量了解病人对刺激物和成瘾药物的接触史,供评价检验结果时参考。
采血时间在上午7~9时进行,采血前病人应禁食12小时。
采血尽量安排在其他检查和治疗前进行。
应尽量统一采血姿势,输液病人在不能停输的情况下静脉采血一定要注意远端原则。
也就是说输液病人要在对侧手静脉采血。
当需要重复使用止血带时,应使用另一上臂。
血和混浊(收集标本用力震荡或用玻璃棒及竹签搅拌会导致溶血,餐后采血会出现脂血而混浊)。
抗凝剂及防腐剂要准确使用。
温度最好不超过20℃。
2.尿液标本
尿标本受饮食、运动、药物量等因素的影响也较大,特别是饮食的影响,故一般来说晨尿优于随机尿。
尿留取方便,但受饮食、运动、药物影响较甚,易于出现假阳性和假阴性结果,如饮食性蛋白尿、饮食性糖尿、维生素c干扰潜血结果等。
餐后尿(午餐后2小时收集的患者尿液)适用于尿糖,尿蛋白和尿胆原的检查。
12小时尿细胞计数,即Addis(前晚8时排空膀胱后留取至次日8时的所有尿液),因时间较长,细菌易繁殖,须加入防腐剂甲醛。
24小时尿(第一天晨6时排空膀胱后留取至次日晨6时的所有尿液)中化学物质的定量,包括蛋白、糖、钙等,检测不同的物质,应选择不同的防腐剂防腐。
清洁中段尿多用于尿细菌培养,要求无菌,冲洗外阴后留取标本。
所有尿标本的收集都应足量,最少12ml,最好50ml,定时尿须全部收集,对女性患者应避免阴道分泌物、经血污染尿标本。
3.粪便标本
粪便标本的检测对判断消化系统疾病有重要参考价值。
采集时要求用干净的竹签选取含有粘液、脓血等异常病变成分的粪便,对外观无异常的粪便须从表面、深处等多处取材。
4.脑脊液标本
脑脊液标本采集后应立即送检,放置过久将影响检验结果:
(1)如细胞变性、破坏、或纤维蛋白凝集成块,导致细胞分布不均而使计数和分类不准确。
(2)有些化学物质如葡萄糖等将分解使含量减少(3)细菌发生自溶,影响细菌(尤其是脑膜炎球菌)的检出率。
脑脊液抽取后一般分装三个无菌管,第一管作细菌培养,第二管作化学分析和免疫学检查,第三管作一般性状及显微镜检查。
三管顺序不宜颠倒。
5.胸腹水标本
与脑脊液标本一样,采集后的标本注意安全,及时送检。
一般也分装三管,第一管细菌培养,第二管生化检查,第三管作常规细胞学检查,顺序以与脑脊液相同为宜。
生化检测管应用肝素钠抗凝,否则纤维蛋白析出造成总蛋白结果偏低且有可能引起生化仪加样针的堵塞。
三、标本运送注意事项
1、标本采集后连同检验申请单一起由专职护工或护士送住院部检验科进行及时处理,并在合适的环境中存放,一般血液标本应首先分离血清或血浆,否则由于血细胞代谢,气体交换及物质转移使血细胞内外多种成份发生变化,导致分析结果出现误差如血钾增高,血糖降低等。
2、标本送到检验科后,检验科将由专人负责标本的收集,核对和编号处理。
标本上的姓名一定要与检验申请单上病人姓名相符,若不相符,要求重新采集标本或拒收此标本。
检验科到临床各科收标本时间规定为每天上午8:
30—9:
OO收集血液标本(生化、血沉、血凝、血常规),9:
OO—9:
30收集大小便标本,错过收集时间请临床各科安排护士或护工将标本送到检验科进行检验。
3、标本的保存,血液、大小便标本采集后必须在1小时内送到检验科进行检验,尿蛋白定量标本需加甲苯或二甲苯3—5m1防腐,尿艾迪氏计数标本需加甲醛3—5ml防腐,特殊项目当天不能检测标本必须将血清分离后放2—8℃冰箱保存。
一般标本检验后保存3天,合血或特殊项目标本需保存7天。
四、标本运送要求
l标本由临床运送至实验室要尽可能快,必要时可分离出血清(浆)后运送。
2标本运送要注意防止标本外溢、蒸发和污染(标本管要盖盖子)。
3有特殊要求的标本要按特殊要求运送(如血气分析标本应严格密封,与外界空气隔绝;
测定VA、VB6、B一胡萝h素、胆红素等标本,应注意避免暴露于光线下,用黑纸或铝箔保护标本)。
4关于自动化运送(物流)系统(真空采血管;
运送车;
气运;
人工运送等物流系统),应注意保证对实验结果无影响(保证红细胞膜完整性)。
红细胞膜完整性被破坏会严重影响实验结果的项目主要有:
LDH、K、Hb、ACP;
有值得注意的影响的项目主要有:
Fe、ALT、T4;
有轻微影响或不太受影响的项目主要有:
TP、ALB、ALP、AST、TBiL、WBC、Cr、Urea、UA、P、Mg、Ca。
5标本送出及签收
临床人员从病人采集标本并将标本从临床运送到实验室及实验室人员接受临床标本,均应按标准化要求进行,并且一定要做到认真核对。
包括标本来源、标本属性、检查项目、标本采集和运送是否合乎要求等,标本送出人员和标本接受人员都要做认真的记录并签字。
五、实验室标本处理
实验室接受标本后应及时正确地予以处理,否则会影响检测结果的准确性。
如:
血糖标本不及时处理,会因糖酵解作用引起测定结果降低(室温下每小时降低7%,即使在真空采血管中在较低温下也每小时降低1.9%);
酸性磷酸酶测定血标本应尽快分离血清并立即测定,否则测定结果会很快降低(室温放置1-2h测定结果降低50%);
电解质测定血标本应及时分离血清和血浆(尤其血钾测定时)否则血钾测定结果可能增高;
血氨和血气分析不仅标本要按规范化要求采集,而目标本送检后一定要及时检测。
六,实验室接受标本后的处理应注意以下事项:
l时间:
实验室接受标本后应尽快予以分类和离心。
①促凝标本采血后5~15min尽早处理;
②抗凝标本可采血后立即离心;
③非抗凝(无促凝)标本采血30~60min后离心;
④抗凝全血标本(测Li、zn、原卟啉、原孢菌素)可以不离心。
2温度:
一般标本为室温(最好是22~25℃)放置;
冷藏标本(对温度依赖性分析物)应保持2~8℃直到温度控制离心。
3采血管放置:
应管口(盖管塞)向上,保持垂直立位放置。
4采血管必须封口:
管塞移去后会使血PH改变,影响结果,如可使PH、Ca2+增高,使ACP减低:
封口可以减少污染、蒸发、喷溅和溢出等。
七、关于实验室标本拒收规定
实验室负责人签字同意并有下列情况时可考虑标本拒收(客服会及时与临床沟通):
1标本属性不清(标记错误或无标记,标本标记与申请单标记不符等)。
2采血量不足(或血量与抗凝剂等比例错误)。
3标本收集管使用错误。
PT、APTT、FBG、TT、DD应使用枸橼酸钠抗凝管,CK、电解质、血气、氨基糖苷应使用肝素锂抗凝管,否则是错误的;
K+、Na+、Ca2+可用非抗凝血,使用草酸钾、草酸钠抗凝是错误的:
血NH3和含氮物质测定用草酸氨抗凝是错误的;
血细胞分析仪测定必须用EDTA-2Na、EDTA-2K抗凝。
4人为因素所致的标本溶血。
5标本运输不当(该冷藏而未冷藏的标本)。
八、检验报告的领取
门诊病人,凭交费收据或有效证件于每日下午4时前在住院部检验科领取检验报告。
住院病人,由该科医护人员领取报告单并在检验报告登记本上签名已领取。
每日下午5时前检验科将当天所检测报告送到各临床科室,实行签收,若未收到报告应在两天内进行查询。
临床科室收到检验报告后应立即贴入病案保存,不得丢失。
特殊检验项目预约领取检验报告的时间或电话告知,所有检验报告都可通过电脑网络查询或联系检验科工作人员咨询。
临床检验的分析前要求
申请单填写要点
1.病人身份识别信息:
申请者必需清楚填写病人的姓名、性别、年龄、或其它有效识别身份的编号。
2.病人的病历信息:
申请者必需清楚填写病人所在临床科室名称、病历号、床号、临床诊断、临床样本、样本的采集日期和时间、申请者姓名、医生编号,申请检验日期。
3.申请的检验项目:
申请者必需清楚填写检验项目名称,项目名称应规范、准确,特别是申请组合项目时,一定要与本中心《诊断项目总汇》的组合内容一致,否则需填写组合项目的具体单项。
我中心部分项目有两种检测方法(如Ca,Fe),需填写所要求的检测方法。
4.申请单特定要求:
如药物浓度检测申请者须提供药物服用剂量、时间,标本采集时间,便于临床医生能容易和准确判断药物浓度随服用剂量与时间的变化关系。
其他项目如唐氏综合征筛查、骨髓细胞形态学检查、染色体检查等申请检测时均有相应特定要求,详见各具体检测项目内容及专用的申请单。
5.追加检测项目时限:
客户追加检测项目时需要查核该标本是否在有效保存期内,详见《项目总汇》中该项目细项中的保存稳定性。
在样本有效保存期间和检测结果不受影响的情况下,客户可通过传真和电话委托申请追加检测项目,电话委托后1天内需补填检验申请单。
实验室将在追加的检测报告单上注明为追加的检测项目报告单。
6.修改报告单病人全名:
需提供由医院医务科(或单位公章)盖章的修改要求证明,同时由原开单医生填写新的检验申请单。
患者准备对检测结果的影响
1.患者的状态:
原则上患者应在平静、休息状态下采集样本,特别是血液样本。
患者处于激动、兴奋、恐惧状态时,可使血红蛋白、白细胞增高。
运动后,由于能量消耗、体液丢失、剧烈呼吸,可造成许多检验结果的变化,如谷-丙转氨酶(AlT)、谷-草转氨酶(AST)、乳酸脱氢酶(LDH)、肌酸激酶(CK)等一时升高,还可引起血中钾、钠、钙、白蛋白、血糖等成分的变化。
2.患者的饮食:
2.1进食后一定时间内可使血液中许多化学成分发生变化。
研究表明,一顿标准餐后,可使血中甘油三酯(TG)增高50%、血糖(GLU)增高15%。
进食高碳水化合物食物,可引起GLU增高;
进食高蛋白或高核酸食物,可引起血中尿素氮(BUN)及尿酸(UA)的增高;
进食高脂肪食物,可引起TG的大幅度增高。
餐后采集的血液样本,其血清常出现乳糜状,影响到许多检验测定的正确性。
甚至一些饮料如咖啡,也可使淀粉酶(AMY)、AST、ALT、碱性磷酸酶(ALP)、促甲状腺素(TSH)等升高。
由于人们饮食的多样性,生理功能又不完全相同,控制这一因素的唯一办法是空腹采血(空腹12小时左右),许多正常参考范围是以空腹血液测定值为基础的。
最好是早晨空腹采血。
禁食过久也会影响检测结果。
通常补体C3、白蛋白、前白蛋白和运铁蛋白会降低,血糖浓度也有下降的趋势。
饥饿状态下胆红素清除速率降低,因此血清胆红素浓度会上升。
绝食状态下脂肪酸和酮酸成为肌肉能量来源,因此血清中酮体、脂肪酸和甘油的浓度会显著增加。
禁食48小时后,血清甘油三酯增加20%,此后又会下降。
绝食使血清尿酸盐浓度显著上升。
身体饥饿时醛固酮分泌增加,尿排钾增加,结果会降低血浆钾的浓度。
钙、镁、和磷酸盐所受到的影响也类似钾。
禁食刚开始时,血浆生长激素浓度可能升高达15倍之多,但是经过三天后可能会降回正常范围。
素食者:
长期素食者低密度脂蛋白(LDL)和极低密度脂蛋白(VLDL)浓度都会偏低,总脂质和磷脂浓度也会减少,胆固醇和三酸甘油脂浓度可能只有杂食个体的三分之二,短期素食者的效应不显著。
咖啡因:
咖啡、可乐、茶、以及多种药物都含有咖啡因,它是一种温和的刺激物和微弱的利尿剂。
能刺激肾上腺髓质,促使儿茶酚胺分泌增加,使血糖浓度轻微上升。
肾上腺皮质也会受到咖啡因的影响,血浆皮质醇会因而上升。
咖啡因是磷酸二酯酶抑制物,摄食数小时内就可以使血浆三酸甘油脂、游离脂肪酸、皮质醇和总脂质上升;
但是血清胆固醇浓度会下降。
乙醇:
酒精具有引起尿糖的效应,因此饮用后立即会使血糖上升。
酒精会促使肝脏合成三酸甘油酯,减缓乳糜微粒和极低密度脂蛋白移除,所以喝酒容易造成高三酸甘油脂血症。
中度酒精量会伤害骨骼肌细微结构,因此饮用酒精也会使血清肌酸激酶(CK)活性上升。
有报道喝酒会使ALT和AST测定值上升,不过少量饮酒的影响效应很低。
长期饮酒的个体,血清r—GT活性会上升。
慢性酒精中毒者,多项生化检查都可能会有异常,包括脑垂体分泌异常、肾上腺皮质和髓质功能异常。
抽烟:
香烟中所含的尼古丁会影响多种检测项目。
尼古丁会刺肾上腺髓质和皮质,使血液肾上腺素浓度上升,从尿液排出的儿茶酚胺和其代谢产物以及5-羟吲哚乙酸也会增加。
抽烟者皮质醇浓度、血糖比未抽烟者高。
抽烟也会使血浆丙酮酸浓度下降,而乳酸增加。
血液中生长激素浓度变化,对抽烟特别敏感,抽烟后3O分钟内生长激素可上升达10倍之多。
抽烟者血浆β脂蛋白、胆固醇、三酸甘油脂等浓度高于未抽烟者,而高密度脂蛋白胆固醇低于未抽烟者。
抽烟会使血中尼古丁、镉、一氧化碳和氰化物浓度增加。
抽烟除会引起红细胞数和血红蛋白增加外,也会引起白细胞数量增加。
3.药物的影响:
药理作用:
如某些甲状腺素类制剂能造成血糖增高和胆固醇降低;
咖啡因可使血糖和胆固醇增高:
冠心平可使甘油三酯和乳酸脱氢酶降低;
维生素C可使乳酸脱氢酶减低;
血和尿中维生素C能影响测定过程中的化学反应:
口服避孕药会使甲状腺结合球蛋白、纤溶酶原、转铁蛋白、铁和三酸甘油脂等增高,而白蛋白和锌下降,另外口服避孕药会增加ALT和r—GT活性。
有些药物对造血功能,肝、肾功能造成损害,引起有关指标的变化。
对测定方法产生影响:
有些影响是物理性的,如有的药物有颜色,影响比色;
有的药物参与化学反应,如抗坏血酸具还原性,对利用氧化还原法的测定就带来一定影响:
还有的药物可抑制酶的活性,造成酶活性测定结果的降低。
4.体外变化:
溶血:
样本溶血虽有可能是疾病引起,但通常是在采血过程或样本处置不当所引起,常见的技术因素有压血带施压太久:
皮肤穿剌位置有剩余的酒精:
针头、针筒或血液容器含有水气或有污染:
使用的针头孔径太小;
抽血时有空气跑进去;
针筒内的血液经由针头拍排到其它容器;
血液与抗凝剂混合时剧烈震荡;
抽血太快或太大用力;
血液未完全凝固就拿去离心等。
溶血会造成两种类型的干扰:
1)光学干扰:
分析过程中若用到血红素的吸收光谱区便会产生分析误差。
2)红细胞含有某些物的浓度与血浆或血清的含量相差悬殊,如钾、镁、磷、乳酸脱氢酶、醛缩酶、酸性磷酸酶、AST、ALT、葡萄糖、钠、钙等,血红素中所含的蛋白成份也会使血清总蛋白和白蛋白测定值升高,而血红素所含铁也会使血清铁浓度升高。
故中度或大量溶血时,应再次采血。
脂血:
脂血可能是抽血前吃入富含脂肪的食物,也可能是疾病的关系;
若空腹患者有脂血现象,应是属病理因素。
血液中含有的三酸甘油脂浓度过高,会使血浆或血清呈现混浊状:
若胆固醇含量增高,则外观不会有变化:
若含有乳糜微粒,会在血液或血清液面浮上一层奶油状物质。
脂血造成的混浊会使光学测定时引起光线散射,并导致吸光值假性增加脂血也会引起电解质检测错误。
黄疸:
血清含有过量胆红素是患者体内的病理反应,对检验室而言,并无防范之道,但在检验报告单上应注明该样本有黄疸现象。
临床检验样本拒收的准则
1.盛样本容器和/或检验申请单上信息缺失或不符。
样本容器上无标识或标识不清。
样本容器上标签与检验申请单上信息不符。
临床检验申请单上未填写患者姓名、检测项目和检测材料中的任何一项。
检验申请单上送检项目本中心未开展,属需预约的科研项目但未事先联系确认。
2.样本不合要求。
未使用合适的抗凝剂或样本类型不当。
如基因检测项目错用肝素抗凝,促肾上腺皮质激素未抗凝等。
应该分离血清送检的标本如离子检测(钾、钠、氯、钙、镁、磷)、乳酸脱氢酶LDH、肌酸激酶CK、C-肽、胰岛素、嗜酸细胞阳离子蛋白(ECP)、神经元特异性烯醇化酶(NSE)、贫血三项(铁蛋白、叶酸、维生素B12)等项目标本送检时未分离出血清。
未按特定要求采集标本,如促肾上腺皮质激素(ACTH)等未冰浴采血,微量元素未使用专用采集管等。
送检样本容器破损、有渗漏或选择不当。
样本采集后保存不当。
如淋球菌培养、脑脊液培养未室温保存,肾素活性、促肾上腺皮质激素(ACTH)、生长激素(GH)、降钙素(CT)、B型脑利钠肽(BNP)、甲状旁腺素(血清)、肿瘤坏死因子o(等未冰冻保存,样本反复冻溶,未按要求防腐等。
患者准备状态不恰当,影响到实验结果。
如未空腹查血脂。
影响检测结果质量的其他样本状况。
3.发生下列情况原则上拒收样本:
中度以上溶血:
中度以上脂血:
抗凝血中有凝块:
量不够等。
但由于情况特殊或取材困难或感染疾病的咨询等,本中心应临床的要求进行检测,并在报告单上注明样本状态供临床参考。
样本拒收后的处理:
样本拒收后均会开具《不合格样本退单通知》,告知退单原因,并连同检验申请单一同返回给临床,样本按通常保存要求保存在我中心实验室或直接退回临床(除非临床明确提出处理要求),超过保存期后按医用垃圾处理。