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(3)卵母细胞采集:

①向动物注射_______激素,使其超数排卵,然后从输卵管中冲出,可直接受精。

②从废弃的卵巢中采集。

③从活体的卵巢中采集。

(4)体外受精:

获能的精子与______的卵子可在相应溶液中完成受精过程。

2.早期胚胎的培养

(1)培养液成分巧记:

两“盐”:

无机盐和______

两“素”:

______和激素

两“酸”:

氨基酸和______

另有水、血清等

(2)用于胚胎移植的胚胎一般在____以前。

三、胚胎移植

1.生理学基础

(1)同种动物排卵后,生殖器官的生理变化是相同的,为移入的胚胎提供了相同的__________。

(2)早期胚胎处于__________状态,为胚胎收集提供了可能。

(3)受体对外来胚胎基本上不发生免疫排斥反应,为胚胎在受体内存活提供了可能。

(4)供体胚胎可与受体子宫建立正常的____和组织联系,但其_____不受影响。

2.基本程序(以牛为例)

(1)选择供、受体牛,注射促性腺激素,进行______。

(2)注射促性腺激素,供体______。

(3)对供体人工授精或配种。

(4)胚胎的收集:

用特制的装置将胚胎冲出,也叫_____。

(5)对胚胎检查,合格后或______或液氮保存。

(6)胚胎移植。

(7)对受体牛进行妊娠检查。

(8)受体母牛产下胚胎移植的犊牛。

3.胚胎移植中供体职能:

___________,受体职能:

完成妊娠和___任务。

四、胚胎分割

1.需要的主要仪器设备:

______和显微操作仪。

2.对囊胚进行分割时要注意将______进行均等分割,否则会影响分割后胚胎的恢复和进一步发育。

3.用胚胎分割增加动物后代,其实质是动物的无性繁殖或______。

五、胚胎干细胞

1.来源:

由______即囊胚期的内细胞团或原始性腺中分离出来。

2.特点:

(1)形态上:

体积小、细胞核大、______。

(2)功能上:

具有发育的全能性。

(3)体外培养:

可以_________。

基因工程基础知识梳理

一、DNA重组技术的基本工具

基因工程又叫_______,指按照人们的愿望,进行严格的设计,通过体外DNA重组和_______等技术,赋予生物以新的遗传特性,从而创造出更符合人们需要的新的生物类型和生物产品。

其操作水平是在_______上进行设计和施工,操作环境是在生物体外。

1.限制性核酸内切酶——“分子手术刀”

(1)主要来源:

_____生物。

(2)特点:

能够识别DNA特定的_______,切开两个核苷酸之间的_____。

(3)DNA末端:

限制酶切割DNA产生的DNA末端有两种形式:

_____和_____。

2.DNA连接酶——“分子缝合针”

(1)作用:

将双链___“缝合”起来,恢复被限制酶切开的两个核苷酸之间的_____。

(2)种类

①E·

coliDNA连接酶:

只能缝合DNA的______。

②T4DNA连接酶:

即可缝合DNA的黏性末端,又可缝合双链DNA的_____。

3.基因进入受体细胞的载体——“分子运输车”

(1)载体的种类

①质粒:

是一种裸露、结构简单、独立于细菌拟核DNA之外,并具有_____能力的_____。

②_____的衍生物。

③动植物病毒。

(2)质粒载体的特点

①能够在细胞内_______。

②具有一个或多个_______,便于供外源DNA片段插入其中。

③具有特殊的_______,供重组DNA的鉴定和选择。

(3)质粒载体的处理:

真正被用作载体的质粒,都必须在天然质粒的基础上进行__________。

二、基因工程的基本操作程序

1.目的基因的获取

(1)目的基因:

指编码蛋白质的_____。

(2)获取目的基因的方法

①从基因文库中获取目的基因

a.基因文库的含义:

将含有某种生物不同基因的许多_____,导入_____的群体中储存,各个受体菌分别含有这种生物的不同基因,称为基因文库。

b.基因文库和种类

(ⅰ)基因组文库:

含有一种生物的_____基因

(ⅱ)部分基因文库:

c.目的基因的获取依据:

(ⅰ)基因的_____序列;

(ⅱ)基因的功能;

(ⅲ)基因在染色体上的位置;

(ⅳ)基因的_____产物mRNA;

(ⅴ)基因的翻译产物蛋白质。

②利用PCR技术扩增目的基因

a.PCR的含义:

是一项在生物体外_____特定DNA片段的核酸合成技术。

b.条件:

已知基因的_____。

c.过程:

目的基因受热形成_____,与引物结合,在_____的作用下延伸形成DNA。

d.方式:

指数扩增=2n(n为扩增循环的次数)

③人工合成法:

若基因较小、_____序列已知,可以人工合成。

2.基因表达载体的构建

(1)表达载体的组成:

目的基因+_____+终止子+标记基因。

(2)表达载体的功能

①使目的基因在受体细胞中稳定存在,并且_____给下一代。

②使目的基因_____和发挥作用。

(3)启动子:

位于基因的_____,它是_____识别和结合的部位,驱动基因转录产生mRNA。

(4)终止子:

位于基因的尾端,终止_____。

(5)标记基因:

_____是否含有目的基因。

3.将目的基因导入受体细胞

转化的含义:

目的基因进入受体细胞内,并在受体细胞内维持_____的过程。

(1)将目的基因导入植物细胞方法:

①农杆菌转化法

a.农杆菌特点:

易感染_____植物和裸子植物,对大多数单子叶植物没有感染能力;

Ti质粒的_____可转移至受体细胞,并整合到受体细胞的染色体DNA上。

b.转化过程:

目的基因插入_____→农杆菌→导入植物细胞→稳定维持和表达

②基因枪法。

③花粉管通道法。

(2)将目的基因导入动物细胞

①方法:

_____注射技术。

②操作程序:

目的基因表达载体提纯→取卵(受精卵)→显微注射→_____→新性状的动物。

(3)将目的基因导入微生物细胞

①原核生物特点:

繁殖快、多为_____、遗传物质少。

②转化:

_____处理细胞→感受态细胞→表达载体与感受态细胞混合→_____细胞吸收DNA分子。

4.目的基因的检测与鉴定

(1)检测

采用__________技术,抗原-抗体杂交技术。

②内容:

a.检测转基因生物的_____上的目的基因。

b.检测目的基因是否转录出了mRNA。

c.检测目的基因是否翻译成蛋白质。

(2)鉴定:

_____鉴定、抗病鉴定等。

三、基因工程的应用

1.植物基因工程的成果

提高农作物的_____能力、改良农作物的品质、利用植物生产_____等。

(1)抗虫转基因植物

将_____导入植物体,使其具有抗虫性。

②成果:

各种抗虫作物,如抗虫水稻、抗虫棉、抗虫玉米等。

③意义:

减少_____,降低生产成本,减少环境污染。

④主要杀虫基因:

_____、蛋白酶抑制剂基因、淀粉酶抑制剂基因、植物凝集素基因等。

(2)抗病转基因植物

将_____导入植物体中,使其具有抗病特性。

多种抗病作物,如抗病的烟草、小麦、甜椒、番茄等。

提高作物抗病力,增产。

④主要抗病基因:

抗病毒的_____和病毒的复制酶基因;

抗真菌的_____基因和抗毒素合成基因。

(3)抗逆转基因植物

将_____基因导入植物体,获得抗逆作物。

多种抗逆植物,如抗盐碱和干旱的烟草、抗寒番茄、抗除草剂大豆和玉米等。

提高作物抗逆能力,稳定高产。

④主要抗逆基因:

抗盐碱、抗干旱的_____基因、耐寒的_____基因、抗除草剂基因。

(4)利用转基因改良植物的品质

将优良性状基因导入植物体,获得_____。

_____含量较高的玉米、耐储存番茄、新花色的矮牵牛。

改良植物的某些品种。

④主要优良性状基因:

_____的蛋白质编码基因、控制番茄果实成熟的基因、与植物花青素代谢有关的基因。

2.动物基因工程的成果

(1)提高动物的生长速度

①生长基因:

外源_____基因。

转基因绵羊、转基因鲤鱼。

(2)改善畜产品的品质

①优良基因:

肠_____基因。

转基因牛乳汁中_____含量少。

(3)转基因动物生产药物

①基因来源:

药用蛋白基因+乳腺蛋白基因的_____。

乳腺生物反应器。

(4)转基因动物作器官移植的供体

①器官供体:

抑制或除去_____。

利用_____培育没有免疫排斥反应的猪器官。

3.基因工程药物

(1)来源:

转基因_____。

(2)成果:

_____、抗体、疫苗、激素等。

(3)作用:

预防和治疗人类肿瘤、心血管疾病、遗传病、各种传染病、_____、类风湿等疾病。

4.基因治疗

(1)特点:

把_____导入病人体内,使该基因的表达产物发挥功能,从而达到治疗疾病的目的。

将腺苷酸脱氨酶基因导入患者的_____,治疗复合型免疫缺陷症。

(3)方法:

分为体外基因治疗法和_____基因治疗法。

四、蛋白质工程

1.蛋白质工程的崛起

(1)实质:

将一种生物的_____转移到另一种生物体内,后者产生它本不能产生的蛋白质,从而产生新性状。

(2)目的:

生产符合人们生活需要的、并非自然界已存在的_____。

(3)实例:

天冬氨酸激酶和________的活性受细胞内__________的影响,当赖氨酸浓度达到一定量时会抑制这两种酶的活性,改变两种酶的特性后,玉米游离赖氨酸含量提高。

2.蛋白质工程原理

(1)目的:

根据人们对蛋白质功能的特定需求,对蛋白质结构进行分子设计。

(2)原理:

_______________。

预期蛋白质功能→设计_____结构→推测应有的氨基酸序列→找到对应的_____序列(基因)。

3.蛋白质工程进展

前景广阔,但目前成功的例子不多。

植物细胞工程知识梳理

一、植物组织培养技术

1.原理:

植物细胞的_____,即具有某种生物全部遗传信息的任何一个细胞,都具有发育成完整生物体的潜能。

____

再分化

2.过程:

_____的组织      形成_____幼根和芽完整植物体

(1)细胞脱分化:

已______的细胞,经过诱导后,失去其特有的_____而转变成未分化细胞的过程。

(2)生物的体细胞不能表达全能性的原因:

植物体细胞内的__________。

3.概念:

在____和人工控制的条件下,将离体的植物器官、组织、细胞,培养在人工配制的培养基上,给予适宜的培养条件,诱导其产生愈伤组织、____,最终形成完整的植株。

二、植物体细胞杂交技术

1.概念:

将不同种植物的_____,在一定条件下融合成_____,并把_____培育成新的植物体的技术。

人工诱导

纤维素酶

果胶酶

_____细胞      不同细胞_____ 原生质体融合   杂种细

胞   杂种植株 

3.融合成功的标志:

杂种细胞再生出______。

4.意义:

克服不同种生物_____的不亲和性。

三、植物繁殖的新途径

1.微型繁殖:

(1)概念:

快速_____优良品种的植物组织培养技术。

保持优良品种的_____。

(3)意义:

高效快速地实现种苗的______。

2.作物脱毒:

(1)选材:

无病毒的茎尖。

(2)结果:

高产优质的_____。

3.人工种子:

①后代无_____。

②不受气候、季节和地域限制。

(2)结构:

人工薄膜+_______或不定芽或顶芽或腋芽。

(3)获得方法:

植物________。

四、作物新品种的培育

1.单倍体育种:

(1)方法:

_____的离体培养。

(2)优点:

①后代稳定遗传,都是_______。

②明显____育种年限。

2.突变体的利用:

(1)产生:

植物组织培养过程中。

(2)利用:

筛选________进而培育新品种。

3.细胞产物的工厂化生产:

(1)产物种类:

_____、脂肪、糖类、药物、香料、生物碱等。

(2)生产技术:

植物组织培养技术。

动物细胞工程知识梳理

一、动物细胞培养

从动物机体中取出相关的组织,将它分散成_______,然后放在适宜的培养基中,让这些细胞生长和_____。

注:

①②代表的是______或胶原蛋白酶。

10~50代的细胞群叫细胞株。

50代以后的细胞群叫_____。

3.条件:

(1)无菌、无毒的环境:

培养液应进行_____处理。

(2)营养(合成培养基成分):

糖类、氨基酸、促生长因子、无机盐、微量元素,通常需加入___、血浆等。

(3)温度:

适宜温度36.5±

0.5℃;

pH____。

(4)气体环境:

空气95%,___5%。

4.应用:

如病毒疫苗、干扰素、_____。

二、动物体细胞核移植技术和克隆动物

1.动物体细胞核移植:

将一个动物细胞的_____移入一个去核的卵母细胞中,使其重组并发育成一个新的胚胎,这个胚胎最终发育为动物个体。

2.种类:

(1)体细胞核移植:

难。

(2)_____移植:

易。

3.过程:

生出与供体遗传

物质相同的个体

(1)加速家畜____改良进程,促进_____繁育。

(2)保护濒危物种。

(3)生产______。

(4)作为异种移植的____。

(5)用于组织器官的移植。

5.问题:

克隆动物存在_____、生理缺陷、_____等。

三、动物细胞融合

______动物细胞结合形成一个细胞的过程,又叫细胞杂交。

2.结果:

形成____细胞。

杂交细胞

克服了____杂交的不亲和性。

四、单克隆抗体

1.抗体的产生:

______产生的抗体具有特异性。

2.单克隆抗体的制备:

(1)过程:

体外培养

小鼠腹腔内增殖

(2)杂交瘤细胞特点:

既能,又能。

(3)单克隆抗体的优点:

3.单克隆抗体的应用:

(1)作为诊断试剂:

准确识别各种_____物质并特异性结合。

(2)用于治疗疾病和运载药物:

制成“______”。

胚胎工程答案

一、1.初情期  曲细精管  有丝分裂  有丝分裂  减数分裂  精子头部的主要部位  顶体  中心体  线粒体鞘膜  原生质滴  无关

2.胎儿  卵巢  有丝分裂  初级卵母细胞  排卵前后  

3.获能  减数第二次分裂中期  输卵管内  顶体反应  透明带  防止多精入卵  卵黄膜封闭作用  雄原核  减数第二次分裂  合子

4.不断增加  不增加  全能  各种组织  滋养层  外胚层  内胚层  原肠腔

二、1.假阴道法  手握法  电刺激法  培养法  化学诱导法  促性腺激素  培养成熟   

2.有机盐  维生素  核苷酸  原肠胚

三、1.生理环境  游离  生理  遗传特性   

2.同期发情处理  超数排卵  冲卵  向受体移植  

3.只产生具有优良遗传特性的胚胎  育仔

四、1.实体显微镜  

2.内细胞团  

3.克隆  

五、1.早期胚胎  

2.核仁明显  增殖而不分化

基因工程答案

一、基因重组技术  转基因  DNA分子水平

1.原核  核苷酸序列  磷酸二酯键  黏性末端  平末端

2.DNA片段  磷酸二酯键  黏性末端  平末端

3.自我复制  双链环状DNA分子  λ噬菌体  自我复制  限制酶切割位点  遗传标记基因  人工改造  

二、1.结构基因  DNA片段  受体菌  所有  一部分  核苷酸  转录  复制  核苷酸序列  单链DNA  DNA聚合酶  核苷酸 

2.启动子  终止子  遗传  表达  首端  RNA聚合酶  mRNA的转录  鉴别受体细胞  

3.稳定和表达  双子叶  T-DNA  Ti-质粒的T-DNA上  显微  移植到雌性动物体内  单细胞  用Ca2+  促感受态  

4.DNA分子杂交  染色体DNA  抗虫

三、1.抗逆  药物  杀虫基因  农药用量  Bt毒蛋白基因  抗病基因  病毒外壳蛋白基因  几丁质酶  抗逆  渗透压调节  抗冻基因  优良品质植物  赖氨酸  提高必需氨基酸含量  

2.生长激素  乳糖酶  乳糖  启动子  抗原决定基因  克隆技术  

3.工程菌  淋巴因子  糖尿病  

4.正常基因  淋巴细胞  体内  

四、1.基因  蛋白质  二氢吡啶二羧酸合成酶  赖氨酸浓度  

2.基因改造  预期的蛋白质  脱氧核苷酸  

植物细胞工程答案

一、1.全能性  

2.高度分化  脱分化  愈伤组织  分化  结构和功能  基因的选择性表达

3.无菌  丛芽

二、1.体细胞  杂种细胞  杂种细胞

2.不同种植物  原生质体  

3.细胞壁

4.远缘杂交

三、1.繁殖  遗传特性  大量繁殖

2.脱毒苗  性状分离  胚状体  组织培养  

四、1.花药  纯合子  缩短  

2.对人们有利的突变体

3.蛋白质

动物细胞工程答案

一、1.单个细胞  繁殖 

2.传代  胰蛋白酶  细胞系  

3.无菌  血清  7.2~7.4  二氧化碳  

4.单克隆抗体

二、1.细胞核  

2.胚胎细胞核

3.体细胞核  重组细胞 

4.遗传  良种畜群  医用蛋白  供体  

5.健康问题  遗传缺陷  

三、1.两个或多个  

2.杂交

3.DNA  

4.远缘

四、1.B淋巴细胞   

2.

(1)杂交瘤细胞  

(2)大量增殖产生单一抗体

(3)特异性强、灵敏度高、产量大

3.抗原  生物导弹

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