各种培养基配方Word文件下载.docx

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121℃灭菌20min

。

4、马丁氏（Martin

）琼脂培养基（分离真菌用）

葡萄糖

磷酸二氢钾

七水合硫酸镁

1/3000孟加拉红

（rosebengal

，玫瑰

100mL

红水溶液）

15—20g

蒸馏水

800mL

112℃灭菌30min。

临用前加入0.03%链霉素稀释液100mL，使每毫升培养基中含链霉素30μg。

5、马铃薯培养基（简称

PDA）（培养真菌用）

马铃薯

200g

蔗糖（或葡萄糖）

培养基的配制：

马铃薯去皮，切成块煮沸30min，然后用纱布过滤，再加糖及琼脂，熔化后补足水至1000mL。

121℃灭菌30min。

6、麦芽汁琼脂培养基培养基的配制：

（1）、取大麦或小麦若干，用水洗净，浸水6—12小时，至15℃阴暗处发芽，上面盖纱布一块，每日早、中、晚淋水一次，麦根伸长至麦粒的两倍时，即停止发芽，摊开晒干或烘

干，贮存备用。

（2）、将干麦芽磨碎，一份麦芽加四份水，在65℃水浴中糖化3—4小时，糖化程度可

用碘滴定之。

加水约20mL，调匀至生泡沫时为止，然后倒在糖化液中搅拌煮沸后再过滤。

（3）、将糖化液用4—6层纱布过滤，滤液如混浊不清，可用鸡蛋白澄清，方法是将一个鸡蛋白加水约20mL，调匀至生泡沫时为止，然后倒在糖化液中搅拌煮沸后再过滤。

（4）、将滤液稀释到5—6波美度，pH约6.4，加入2%琼脂即成。

7、无氮培养基（自生固氮菌、钾细菌）

甘露醇（或葡萄糖）

0.2g

二水合硫酸钙

碳酸钙

7.0—7.2

113℃灭菌30min。

8、半固体肉膏蛋白胨培养基

肉膏蛋白胨液体培养基100mL

0.35

—0.4

g

7.6

121℃灭菌20min。

9、合成培养基

偏磷酸铵

豆芽汁

10mL

7.0

加12mL0.04%的溴钾酚紫（pH5.2—6.8，颜色由黄变紫，作指示剂）。

121℃灭

菌20min。

10、豆芽汁蔗糖（或葡萄糖）培养基

黄豆芽

100g

蔗糖（或葡萄糖）50g

称新鲜豆芽100g，放入烧杯中，加入水1000mL，煮沸约30min

用纱布过滤。

用水补足原量，再加入蔗糖（或葡萄糖）50g，煮沸熔化。

121℃灭菌20min

，

11、油脂培养基

香油或花生油

1.6%中性红水溶液

1mL

15—20g

7.2

注：

（1）、不能使用变质油。

（2）、油和琼脂及水先加热。

（3）、调好pH值后，再加入中性红。

（4）、分装时，需不断搅拌，使油均匀分布于培养基中。

12、淀粉培养基

13、明胶培养基

牛肉膏蛋白胨液100mL

明胶

12—18g

在水浴锅中将上述成分溶化，不断搅拌。

溶化后调pH7.2—7.4。

121℃灭菌30min。

14、蛋白胨水培养基

15、糖发酵培养基

蛋白胨水培养基

1.6%溴钾酚紫乙醇溶液

1—2mL

另配制20%糖溶液（葡萄糖、乳糖、蔗糖等）各10mL。

（1）、将上述含指示剂的蛋白胨水培养基（pH7.6）分装于试管中，在每管内放一倒

置的小玻璃管（Durhamtube），使之充满培养液。

（2）、将已分装好的蛋白胨水和20%的各种糖溶液分别灭菌，蛋白胨水121℃灭菌

20min；

糖溶液112℃灭菌30min。

（3）、灭菌后，每管以无菌操作分别加入20%无菌糖溶液0.5mL（按每10mL培养基中加入20%的糖液0.5mL，则成1%的浓度）。

配制用的试管必须洗干净，避免结果混乱。

16、葡萄糖蛋白胨水培养基

葡糖糖

将上述各成分溶于1000mL水中，调pH7.0—7.2，过滤。

分装试管，每管10mL，112℃灭菌30min。

17、麦氏（Meclary）琼脂（酵母菌）

1.8g

酵母浸膏

2.5g

醋酸钠

8.2g

113℃灭菌20min。

18、柠檬酸盐培养基

磷酸二氢铵

柠檬酸钠

1000mL

1%溴麝香草酚蓝乙醇液

10mL

将上述各成分加热溶解后，调pH6.8，然后加入指示剂，摇匀，用

脱脂棉过滤。

制成后为黄绿色，分装试管，121℃灭菌20min后制成斜面，注意配制时控

制好pH，不要过碱，以黄绿色为准。

19、醋酸铅培养基

pH7.4的牛肉膏蛋白

胨琼脂

100mL

硫代硫酸钠0.25g

10%醋酸铅水溶液1mL

将牛肉膏蛋白胨琼脂100mL加热溶解，待冷却至60℃时加入硫代

硫酸钠0.25g，调至pH7.2，分装于三角瓶中，115℃灭菌15min。

取出后待冷却至

55—60℃，加入10%醋酸铅水溶液（无菌的）1mL，混匀后倒入灭菌试管或平板中。

20、血琼脂培养基

pH7.6的牛肉膏蛋白胨琼脂

脱纤维羊血（或兔血）

将牛肉膏蛋白胨琼脂加热熔化，待冷却至50℃时，加入无菌脱纤维羊

血（或兔血）摇匀后倒平板或制成斜面。

37℃过夜检查无菌生长即可使用。

21、玉米粉蔗糖培养基

玉米粉

60g

维生素B1

100mg

1.5g

121℃灭菌30min，维生素B1单独灭菌15min后另加。

22、酵母膏麦芽汁琼脂

麦芽粉

酵母浸膏0.1g

24、棉籽壳培养基

棉籽壳50%，石灰粉1%，过磷酸钙1%，水65%—70%，按比例称好料，充分搅拌均匀后装瓶，较薄地平摊盘上。

25、复红亚硫酸钠培养基（远藤氏培养基）

乳糖

3.5g

20—30g

5%碱性复红乙醇溶液

20mL

先将琼脂加入900mL蒸馏水中，加热溶解，再加入磷酸氢二钾及蛋

白胨，使溶解，补足蒸馏水至1000mL，调pH至7.2—7.4。

加入乳糖，混匀溶解后，115℃灭菌20min。

称取亚硫酸钠置一无菌空试管中，加入无菌水少许使溶解，再在水浴中煮沸10min后。

立刻滴加于20mL5%碱性复红乙醇溶液中，直至深红色褪成淡粉红色为止。

将此亚硫酸钠与碱性复红的混合液全部加至上述已灭菌的并仍保持熔化状态的培养基中，充

分混匀，倒平板，放冰箱中备用，贮存时间不宜超过2周。

26、伊红美蓝培养基（EMB培养基）

蛋白胨水培养基100mL

20%乳糖溶液2mL

2%伊红水溶液2mL

0.5%美蓝水溶液1mL

将已灭菌的蛋白胨水培养基（pH7.6）加热熔化，冷却至60℃左右

时，再把已灭菌的乳糖溶液，伊红水溶液及美蓝水溶液按上述量以无菌操作加入。

摇匀后，

立即倒平板。

乳糖在高温灭菌易被破坏必须严格控制灭菌温度，115℃灭菌20min。

27、乳糖蛋白胨培养液（

“水的细菌学检查”用）

1.6%溴甲酚紫乙醇溶

液

1mL

将蛋白胨、牛肉膏、乳糖及氯化钠加热溶解于1000mL蒸馏水中，

调pH至7.2—7.4。

加入1.6%溴甲酚紫乙醇溶液1mL，充分混匀，分装于有小倒管的试管中。

115℃灭菌20min。

28、石蕊牛奶培养基

牛奶粉

石蕊

0.075g

6.8

121℃灭菌15min

29、LB（Luria-Bertani

）培养基

酵母膏

30、基本培养基

10.5g

4.5

硫酸铵

二水合柠檬酸钠

需要时灭菌后加入：

糖（20%）

维生素B1（硫胺素）（1%

）

0.5mL

七水合硫酸镁（20%

链霉素（50mg/mL）4mL，终浓度200μg/mL

氨基酸（10mg/mL）4mL，终浓度40μg/mL

pH自然（—7.0）

31、庖肉培养基

（1）、取已去肌膜、脂肪之牛肉500g，切成小方块，置1000mL蒸馏水中，以弱火

煮1小时，用纱布过滤，挤干肉汁，将肉汁保留备用。

将肉渣用绞肉机绞碎，或用刀切成细粒。

（2）、将保留的肉汁加蒸馏水，使总体积为2000mL，加入蛋白胨20g，葡萄糖2g，氯化钠5g，及绞碎的肉渣，置烧瓶摇匀，加热使蛋白胨溶化。

（3）、取上层溶液测量pH，并调整其达到8.0，在烧瓶壁上用记号笔标示瓶内液体高

度，121℃灭菌15min后补足蒸发的水分，重新调整

水量后调整pH7.4。

pH值8.0，再煮沸10—20min，补足

（4）、将烧瓶内容物摇匀，将溶液和肉渣分装于试管中，肉渣约占培养基的1/4

左右。

经121℃灭菌15min后备用，如当日不用，应以无菌操作加入已灭菌的石蜡凡士林，以隔

绝氧气。

32、乳糖牛肉膏蛋白胨培养基乳糖

琼脂粉

33、马铃薯牛乳培养基

200g

粉15g，加水1000mLpH7.0

合。

34、尿素琼脂培养基尿素

磷酸二氢钾蛋白胨

酚红

15g

马铃薯（去皮）煮出汁，脱脂鲜乳100mL，酵母膏5g，琼脂。

制平板培养基时，牛乳与其他成分分开灭菌，倒平板前再混

0.012g

6.8±

0.2

在蒸馏水或去离子水100mL中，加入上述所有成分（除琼脂外）。

混合均匀。

过滤灭菌。

将琼脂加入900mL蒸馏水或去离子水中，加热煮沸腾。

在15磅121℃灭菌15min。

冷却至50℃，加入灭菌好的基本培养基，混匀后，分装于灭菌的试管中，放在倾斜位置上使其凝固

培养基及成分

1.AcetobacterMedium（醋酸菌培养基）

Glucose（葡萄糖）100gYeasstextract（酵母膏）10g

CaCO320gAgar（琼脂）15g

Distilledwater（蒸馏水）1000mlAdjust（调）pHto6.8

适用范围：

恶臭醋酸杆菌混浊变种

2.NutrientAgar（营养肉汁琼脂）

Pepton（蛋白胨）5gBeefextract（牛肉膏）30g

NaCl5gAgar（琼脂）15g

Distilledwater（蒸馏水）Adjust（调）pHto7.0-7.2

[Note]：

WhencultivationofBacillus，5mgoftoMnSO4.H2Omaybeadded.

Itisfavorabletopromotesporeformation.

产气气杆菌、粪产碱杆菌、蜡状芽孢杆菌、蜡状芽孢杆菌蕈状变种、地衣形芽孢杆菌、巨大芽孢杆菌、多粘芽孢杆菌、尘埃芽孢杆菌、短小芽孢杆菌、嗜热脂肪芽孢杆

菌、枯草芽孢杆菌、枯草芽孢杆菌深黑变种、苏云金芽孢杆菌、苏云金芽孢杆菌蜡螟亚种（青虫菌）、苏云金芽孢杆菌戈尔斯德变种、苏云金芽孢杆菌猝倒亚种、产氨短杆菌、黄色短杆

菌、谷氨酸棒状杆菌、北京棒杆菌、大肠埃希氏菌（大肠杆菌）、铜绿假单胞菌（绿脓杆菌）、凸形假单胞杆菌、荧光假单胞菌、弯曲假单胞菌、恶臭假单胞菌、假单胞杆菌、藤黄八叠球菌、亚黄八叠球菌、尿素八叠球菌、金黄色葡萄球菌、运动发酵单孢菌

3.AzotobacterMedium（固氮菌培养基）KH2PO40.2gK2HPO40.8g

MgSO4.7H2O0.2gCaSO4.2H2O

0.1ｇ

Ｎa2MoO4.2H2OTrace（微量）Yeastaxtract（酵母膏）0.5gMannitol（甘露醇）20gFeCl3Tract（微量）

Distilledwater（蒸馏水）1000mlAgar（琼脂）15g

Adjust（调）pHto7.2

固氮菌、胶质芽孢杆菌

4.CornMealMedium（玉米粉培养基）

Maizeflour（玉米粉）5gPeptone（蛋白胨）0.1g

Glucose（葡萄糖）1gTapwater（自来水）1000ml

[Note]:

Boilthemixtureinautoclaveat121℃for1hr.distributethemediuminto18ⅹ18mmtubes,eachcontains10mloftheliquid,thenautoclaveat121℃for1hr.again（15磅蒸煮1小时,分装入18ⅹ18毫米试管,每管深度达6厘米。

15磅再次灭菌15小时。

）

5.Lactic-bacteriaMediumI（乳酸菌培养基I）

Yeastextract（酵母膏）7.5gPeptone（蛋白胨）7.5g

Glucose（葡萄糖）10gKH2PO42g

Tomatojuice（西红柿汁）100mlTween（吐温）800.5ml

Distilledwater（蒸馏水）900mlpH7.0

植物乳杆菌（胚芽乳杆菌）、嗜热乳酸链球菌

6.Lactic-bacteriaMidiumⅡ（乳酸菌培养基Ⅱ）

Lacto-caseinpeptone（乳酪蛋白胨）10g

Beefextract（蛋白胨）10g

Yeastextract（酵母膏）5gGlucose（葡萄糖）5g

Tween（吐温）801gK2HPO42g

Na-acetate（醋酸钠）5gDiaminecitrate（柠檬酸二胺）2g

MgSO4.7H2O0.2gMnSO4.H2O0.05g

Distilledwater（蒸馏水）1000mpH6.5-6.8

植物乳杆菌（胚芽乳杆菌）

7.PeotoneGlucoseYeastextractMediumPGY（蛋白胨、酵母膏、葡萄糖培养基）

Peptone（蛋白胨）

Yeastextract（酵母膏）

Glucose（葡萄糖）

Distilledwater（蒸馏水）

1L

8.GlycerolAgar（甘油琼脂）

Peptone（蛋白胨）

5gBeefextract（酵母膏）3g

Glycerol（甘油）

20gTopwater（自来水）

1000ml

Agar（琼脂）15gpH7.0-7.2

9.Rhizobiummedium（根瘤菌培养基）AS9

Yeasteztract（酵母膏）1gSoileztract

（土壤浸提液）200ml

Mannitol（甘露醇）10gAgar（琼脂）

Distilledwater

（蒸馏水）800mlpH7.2

Soil

extract：

Suspend50gfinely

and

driedgardonsoilin200mloftapwater.

Autoclaveat121℃for1hr.Decantthroughcotton-cloth,fillerthoughpaper,makeupvolumeto200ml.Resterilizefor20minutesat121℃,thenmixedwithothringredientsanddistributed.（土

壤浸提液的制法：

取土壤50克，加水200毫升，15磅蒸煮1小时，经滤纸过滤后加水补足

到200毫升。

大豆根瘤菌（慢生型）、豇豆慢生根瘤菌、花生根瘤菌、紫云英根瘤菌、

大豆根瘤菌（快生型）、大豆根瘤菌、豌豆根瘤菌、苜蓿根瘤菌、田菁根瘤菌

10.MannitolAgar（甘露醇琼脂）

Yeastextract（酵母膏）5gPeptone（蛋白胨）3g

Mannitol（甘露醇）25gAgar（琼脂）15g

Distilledwater（蒸馏水）1000ml

11.GlucoseAsparagine（葡萄糖、天门冬素琼脂）

Glucose（葡萄糖）10gAsparagine（天门冬素）0.5g

K2HPO40.5gWater（水）1000ml

pH7.2-7.4

刺孢小单孢菌绛红变种、紫色小单孢菌（绛红小单孢菌）

12.Gause′sSyntheticAgar（高氏合成一号琼脂）

KNO31gSolublestarch（可溶性淀粉）20g

K2HPO40.5gMgSO4.7H2O0.5g

NaCl0.5gFeSO40.01g

Agar（琼脂）20gwater（水）1000ml

刺孢小单孢菌绛红变种、紫色小单孢菌（绛红小单孢菌）、白黄链霉菌、白

色链霉菌、抗生链霉菌、双重轮丝链霉菌、产色链霉菌、烬灰链霉菌、天蓝色链霉菌、灭蚊

链霉菌、红霉素链霉菌、青色链霉菌、球孢链霉菌、浅灰链霉菌、灰色链霉菌、吸水链霉菌、淡紫灰链霉菌、黄色长孢链霉菌、藤黄色链霉菌、细黄链霉菌、黑化链霉菌、玫瑰色链霉菌、华美链霉菌、嗜热链霉菌、委内瑞拉链霉菌、紫色直丝链霉菌、紫色链霉菌、绿色链霉菌

13.WortAgar（麦芽汁琼脂）

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