Eppendorf plus 移液枪校准方法Word文档格式.docx
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5、比照可允许的最大误差限度，根据实际需要确定进展调整。
附：
相关计算公式质量体积转换公式1：
V=（w+e）×
Z式中：
V=体积〔μl〕w=质量〔mg〕e=蒸发损失〔mg〕Z转换因子以上公式参考ISO8655标准。
蒸发损失对测量小体积液体影响较大，因此应将蒸发损失计算在内。
方法：
在称过重的容器中注入定量清水，按下秒表观察30秒，读出损失量，然后算出每秒的损失量。
〔假如30s内质量损失3mg，如此损失量为3mg÷
30s=0.1mg/s〕。
记录移液时间，将移液时间乘以每秒损失量，算出实际蒸发损失量，代入上述公式计算实际体积。
假如使用防蒸发装置，通常可以忽略蒸发损失量。
不同温度、压力下水的质量和体积不同，具体转换因子Z值请查看附录1。
公式2：
V20=m×
K（t）式中：
V20=标准温度20℃下实际体积〔μl〕m=质量〔mg〕K（t）值以上公式参考JJG646-2006移液器检定规程。
根据天平测试蒸馏水的质量，以与检测时温度所对应的K（t）值，即可计算出标准温度下蒸馏水的实际体积。
具体K（t）值请查看附表2。
计算式时，请根据实际需要，选择公式进展计算。
不准确度〔系统误差〕不准确度是指实际移取体积和显示体积的差异。
A=-V0式中：
A=不准确度=平均值V0=标称容量A%=100%×
A/V0不准确度〔随机误差〕不准确度指每次实际移取体积与实际体积平均值的差异，其变化是不可预计的测量误差的一局部。
它可以表示为标准差S或变异系数CV：
式中：
S=标准偏差=平均值n=测量次数Vi=单次测量数值
CV=100%×
S／附表1：
转换因子Z（μl/mg）数值表〔无菌水〕
温度
气压〔KPa〕1KPa=10hPa
〔℃〕
80
85
90
95
100
101.3
105
15.00
1.0017
1.0018
1.0019
1.0020
15.50
1.0021
16.00
1.0022
16.50
17.00
1.0023
17.50
1.0024
18.00
1.0025
18.50
1.0026
19.00
1.0027
19.50
1.0028
20.00
1.0029
20.50
1.0030
21.00
1.0031
21.50
1.0032
22.00
1.0033
22.50
1.0034
23.00
1.0035
1.0036
23.50
1.0037
24.00
1.0038
24.50
1.0039
25.00
1.0040
25.50
1.0041
1.0042
26.00
1.0043
26.50
1.0044
27.00
1.0045
1.0046
27.50
1.0047
28.00
1.0048
28.50
1.0049
1.0050
29.00
1.0051
29.50
1.0052
1.0053
30.00
1.0054
附表2：
K〔t〕值表〔β=0.00045/℃〕
水温
K（t）
℃
cm3/g
15.0
1.004213
18.4
1.003261
21.8
1.002436
15.1
1.004183
18.5
1.003235
21.9
1.002414
15.2
1.004153
18.6
1.003209
22.0
1.002391
15.3
1.004123
18.7
1.003184
22.1
1.002369
15.4
1.004094
18.8
1.003158
22.2
1.002347
15.5
1.004064
18.9
1.003132
22.3
1.002325
15.6
1.004035
19.0
1.003107
22.4
1.002303
15.7
1.004006
19.1
1.003082
22.5
1.002281
15.8
1.003977
19.2
1.003056
22.6
1.002259
15.9
1.003948
19.3
1.003031
22.7
1.002238
16.0
1.003919
19.4
1.003006
22.8
1.002216
16.1
1.003890
19.5
1.002981
22.9
1.002195
16.2
1.003862
19.6
1.002956
23.0
1.002173
16.3
1.003833
19.7
1.002931
23.1
1.002152
16.4
1.003805
19.8
1.002907
23.2
1.002131
16.5
1.003777
19.9
1.002882
23.3
1.002110
16.6
1.003749
20.0
1.002858
23.4
1.002089
16.7
1.003721
20.1
1.002834
23.5
1.002068
16.8
1.003693
20.2
1.002809
23.6
1.002047
16.9
1.003665
20.3
1.002785
23.7
1.002026
17.0
1.003637
20.4
1.002761
23.8
1.002006
17.1
1.003610
20.5
1.002737
23.9
1.001985
17.2
1.003582
20.6
1.002714
24.0
1.001965
17.3
1.003555
20.7
1.002690
24.1
1.001945
17.4
1.003528
20.8
1.002666
24.2
1.001924
17.5
1.003501
20.9
1.002643
24.3
1.001904
17.6
1.003474
21.0
1.002619
24.4
1.001884
17.7
1.003447
21.1
1.002596
24.5
1.001864
17.8
1.003420
21.2
1.002573
24.6
1.001845
17.9
1.003393
21.3
1.002550
24.7
1.001825
18.0
1.003367
21.4
1.002527
24.8
1.001805
18.1
1.003340
21.5
1.002504
24.9
1.001786
18.2
1.003314
21.6
1.002481
25.0
1.001766
18.3
1.003288
21.7
1.002459
附表3：
移液器容量允许误差和测量重复性简表
JJG-646
ISO8655
检定点
系统误差〔容量允差〕
随机误差〔重复性〕
标称容量
μl
±
〔%〕
≦〔%〕
0.1
10.0
0.2
0.5
1
12.0
6.0
5.0
2
4.0
2.0
5
8.0
2.5
1.5
10
1.2
0.8
20
1.0
25
40
3.0
50
0.4
0.3
125
150
200
250
300
500
1000
1250
2000
2500
5000
0.6
10000
注：
①标称容量为制造商在移液器上标注的可使用的最大容量，如量程X围是50-1200μl，其标称容量为1200μl。
②JJG-646中，同一个检定点在不同的量程X围，容量允差、重复性要求一致，即无论是1-10μl的移液器还是10-100μl的移液器，10μl这一检定点容量允差都为8%，重复性都为4%。
③ISO8655中，所有有效量程点的容量允差、重复性都与标称容量的一致，即10-100μl的移液器，10μl、20μl、50μl、100μl，其容量允差要求都为0.8%，重复性都为0.3%。
四、维护保养1清洁和消毒为确保移液器的准确度和准确度，应根据具体使用情况进展定期保养。
尤其在移取腐蚀性溶剂后，应该对移液器进展清洁。
通过简单的清洁和保养，可适当地延长移液器的使用。
注意：
在清洁或消毒前，请务必将电池取出。
①外部清洗方法：
根据使用情况，可以用沾有70%乙醇或60％异丙醇的湿棉布拭擦移液器外表，去除外部污垢，再用双蒸水拭擦一遍，然后晾干。
每天开始工作前，检查移液器外表是否有灰尘或污垢，尤其是吸头连杆局部。
②内部清洗清洁步骤：
1、按照步骤拆卸需要清洁的部件。
2、外套柄、吸头连杆用沾有70%乙醇或60％异丙醇的湿棉布拭擦，再用双蒸水淋洗，然后晾干。
3、一般情况，O型圈、活塞无需清洁。
如沾有固体颗状物，请用干净的干棉布轻轻拭去即可。
4、给O型圈、活塞上润滑脂，只需涂上薄薄一层即可。
5、按步骤组装好移液器。
③消毒移液器清洁干净后，在121℃,1bar下，消毒20分钟。
消毒后在室温下冷却至少2个小时后方可使用。
局部手动移液器可整支消毒，电动移液器只可以下端消毒，请根据产品的具体情况进展消毒。
整支在紫外线下进展消毒灭菌，无需拆卸。
2日常维护针对不同性质的液体，有不同的清洗和保养方法，见下表：
处理液体
预防方法
清洗和保养方法
水溶液和缓冲液
拆卸移液器下端，用双蒸水冲洗受污染的部件，在60℃以下枯燥或者自然晾干，并给活塞涂抹少量润滑脂
无机酸或碱
=使用带有滤芯的吸头
移液完毕后，将移液器下端拆下，并放在通风处。
必要时可用双蒸水冲洗受污染的部件，在60℃以下枯燥或者自然晾干，并给活塞涂抹少量润滑脂
传染性液体
=使用带有滤芯的吸头=正向移液
将移液器下端拆下，放在实验室常规的消毒剂中浸泡30分钟，随后用双蒸水清洗，对受污染的部件进展121℃、1bar、20分钟高压灭菌
细胞培养物
有机溶剂
=快速移液
放射性溶液
将移液器下端拆下，将受污染部件放在复合溶液或专用的清洁溶液中浸泡30分钟后，用双蒸水清洗，在60℃下烘干或自然晾干，并给活塞涂抹少量润滑脂
核酸或蛋白质溶液
核酸：
在氨基乙酸或盐酸缓冲液（pH2.0）中煮沸10分钟，用双蒸水清洗干净，在60℃下烘干或自然晾干，并给活塞涂抹少量润滑脂蛋白质：
将移液器下端拆下，用去污剂清洗，再用双蒸水淋洗，在60℃下烘干或自然晾干
故障排除
现象
原因
解决方法
活塞运动异常
=活塞安装过紧=活塞润滑不充分=活塞外表润滑脂凝固=活塞外表有异物或损坏=在活塞、O型圈和吸头连杆之间有杂质和颗粒=O型圈损坏
——拆开下端，重新组装——给活塞上润滑脂——去除旧润滑脂，上新润滑脂——清洁活塞或更换活塞——清洁并润滑O型圈和吸头连杆——更换O型圈
移液体积不准确或漏液
=吸头安装不当=吸头不匹配=在吸头与吸头连杆之间有杂质颗粒=吸头损坏=移液过快=吸头离开液面过快=活塞外表有异物或损坏=在活塞、O型圈和吸头连杆之间有杂质和颗粒=O型圈与活塞润滑不充分=O型圈损坏=操作不正确
——重新安装吸头——清洁吸头连杆，更换适宜吸头——清洁吸头连杆，更换吸头——更换新吸头——调节移液速度，慢吸慢放——移取粘性大、体积大的液体时吸液后停留几秒，再移离液面——清洁活塞或更换活塞——清洁并润滑O型圈和吸头连杆——上润滑脂——更换O型圈——请按说明书操作
吸头内有残液
=选用了带附加液的模式〔反向、分样、不等体积〕=吸头不匹配=吸头安装不当
——按启动键排空吸头——使用适宜的吸头——重新安装吸头
=吸头吸附性高=液体粘性过大
——更换低吸附吸头——选用反向移液模式，预洗吸头，调慢吸放速度
操作时有杂音
=活塞润滑不充分
——给活塞上润滑脂
特殊液体分液不准确
=校准不当，高粘度的液体需要重新校准=移取易挥发性或密度与水有明显差异的液体
——用问题液体重新校准——预洗吸头或重新校准
吸头脱落或难以安装
=劣质吸头=吸头已经损坏
——使用优质吸头——更换新吸头
3储放日常储放：
使用完毕，请将移液器竖直挂在移液枪架上。
当移液器吸头内有液体时，切勿将移液器水平放置或倒置，以免液体倒流腐蚀活塞。
当产品长期不使用时，请将电池取出，然后将清洁消毒后的移液器在枯燥、洁净、常温下储存。
防止放置在温度变化大、湿度高、灰尘量大的环境中。
4须知事项
∙在移液器的化学腐蚀力限度以内使用
∙请勿移取高度易燃的液体
∙假如移取液体与移液器、吸头温度不一致时，移取结果可能会出现偏差，因此三者应保持温度一致
∙请勿在有爆炸危险的气体X围中使用本产品
∙请勿蛮力使用、拆卸移液器
∙假如移液器无法正常运作，应立即停止操作，查阅故障分析章节
∙操作温度应保持在15℃到40℃之间，相对湿度应在80%以下
∙请妥善放置移液器、充电器等物件，防止意外跌落造成损坏
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