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3.下图为筛选产脉酶细菌的过程,下列说法错误的是()

日梯度稀释RA

挑取单菌篷一

)*

土样制备细菌悬液选择培养鉴别培养斜面保藏

A.选择培养基中应以尿素为唯一碳源

B.挑取单菌落后可用划线法进行接种

C,鉴别培养基中可加入酚红作指示剂

D,培养皿在接种微生物后需倒置培养

【答案】A

【分析】1.鉴定分解尿素的细菌:

细菌合成的服酶将尿素分解成氨,氨会使培养基的碱性增强。

在以尿素为唯一氮源的培养基中加入酚红指示剂培养细菌,若指示剂变红,可确定该种细菌能够产生脉酶,并分解尿素。

2.微生物常见的接种的方法:

①平板划线法:

将已经熔化的培养基倒入培养皿制成平板,接种,划线,在恒温箱里培养。

在线的开始部分,微生物往往连在一起生长,随着划线的延伸,菌数逐渐减少,最后可能形成单个菌落。

②稀释涂布平板法:

将待分离的菌液经过大量稀释后,均匀涂布在培养皿表面,经培养后可形成单个菌落。

【详解】A、筛选产脉酶细菌需要制备以尿素为唯一氮源的选择培养基,A错误;

B、挑取单菌落后需在酒精灯火焰旁,用平板划线法进行接种,B正确;

C、可在鉴别培养基中加入酚红作指示剂,观察是否变红来鉴定菌种是否为尿素分解菌,C正确;

D、培养皿在接种微生物后需倒置培养,以防止冷凝水倒流污染培养基,D正确。

故选A。

4,从红豆杉中分离出一株内生真菌,能利用纤维素发酵生产紫杉醇(如下图)。

下列有关说法错误的是()

紫杉醇产量/ggL1纤维素酶活性/U1I1L1

发酵时间/d

A.纤维素可为该菌的生长提供能源

B.该菌能分泌纤维素酶来分解纤维素

C.第6天纤维素酶活性最高,最适合收获紫杉醇

D.第6天后纤维素酶活性逐渐下降,可能与纤维素浓度下降有关【答案】C

【分析】纤维素酶活性随发酵时间延长先增大后减小,紫杉醇产量随发酵时间延长先增大后保持稳定。

【详解】A、纤维素作为多糖,可为该菌的生长提供能源,A正确;

B、据图分析可知,该菌可分泌纤维素酶来分解纤维素,B正确;

C、第6天纤维素酶活性最高,但紫杉醇的产量较低,不适合收获紫杉醇,C错误;

D、第6天后纤维素酶活性逐渐下降,可能与纤维素被消耗浓度下降有关,D正确。

5,筛选到两株能产生抑菌物质的乳酸菌,将其产生的抑菌物质用酶处理,一段时间后,加入到试验平板上的小孔中,测定抑菌圈大小,结果如下表。

以下分析错误的是()

菌株

抑菌圈直径/mm

未经酶处

过氧化氢酶处

胰蛋白酶处理

胃蛋白酶处

乳酸片球菌C28

16.7

16.3

12.7

格式乳杆菌J57

A.试验平板接种时应使细菌均匀分布在培养皿中

B.过氧化氢酶对两菌株产生的抑菌物质基本没有影响

C.两菌株产生的主要抑菌物质的化学本质为蛋白质

D.C28产生的抑菌物质对胃蛋白酶比对胰蛋白酶更敏感

【分析】分析表格:

抑菌圈的直径大小直接反映了两种乳酸菌产生的抑菌物质的抑菌效果,根据酶的专一性可知,C28和J57对过氧化氢酶不敏感,对胰蛋白酶敏感,且C28对胃蛋白酶较为敏感,而J57对胃蛋白酶不敏感。

【详解】A、试验平板接种时应使细菌均匀分布在培养皿中,保证实验结果的准确性,A正确;

B、表中显示过氧化氢酶对两菌株产生的抑菌物质处理后,透明圈直径变化不大,说明过氧化氢酶对其基本

没有影响,B正确;

C、根据酶的专一性可知,在胰蛋白酶的处理下,透明圈消失,说明胰蛋白酶水解了2种抑菌物质,主要抑

菌物质的化学本质为蛋白质,C正确;

D、表中显示,C28产生的抑菌物质对胰蛋白酶比对胃蛋白酶更敏感,D错误。

6.下图为烟草植物组织培养过程的流程图,下列有关叙述错误的是()

①②③④+,

烟草植柱,I—』烟草根组织块{―煎伤组织1——►

A.对过程①获取的根组织块应进行消毒处理

B,过程②使用的培养基中应含有机碳源和氮源

C.用人工薄膜包裹胚状体可制作人工种子

D,杂合植株经上述过程获得的幼苗会出现性状分离

【分析】①制备离体组织,②脱分化,③再分化,④发育为完整植株。

【详解】A、离体组织需要进行消毒处理,A正确;

B、脱分化形成的愈伤组织还无法进行光合作用,故培养基中应含有机碳源和氮源,B正确;

C、人工薄膜包裹胚状体可以制作人工种子,C正确;

D、杂合植株经上述过程获得的幼苗与原植株基因型一致,不会出现性状分离,D错误。

7.以南方红豆杉的幼茎为外植体,探究激素对愈伤组织诱导及愈伤组织褐变(褐变会使愈伤组织失去分裂

和分化能力,甚至导致死亡)的影响,结果如下表。

根据实验数据,无法获得的推论是()

2,4-D(mg/L)+6-BA(mg/L)

诱导率(%)

褐变率(%)

1.0+0.5

2.0+0.5

100

62.5

3.0+0.5

1.0+1.0

2.0+1.0

87.5

3.0+1.0

A,红豆杉幼茎愈伤组织褐变率与两种激素的浓度比值、浓度高低均有关

B,红豆杉幼茎愈伤组织诱导率与两种激素的浓度比值有关,与浓度高低无关

C,高浓度的2,4-D容易导致红豆杉幼茎愈伤组织发生褐变

D,在6种组合中诱导脱分化最佳激素组合为2,4-D2.0mg/L+6-BA0.5mg/L

【答案】B

【分析】结合题干分析表格数据可知,本实验探究不同浓度组合的2,4-D和6-BA对愈伤组织诱导及愈伤组织褐变的影响,实验自变量为2,4-D和6-BA的不同浓度组合,因变量为愈伤组织诱导率和褐变率,共设置了6组。

【详解】A、由表格数据可知,两种激素的不同浓度组合,红豆杉幼茎愈伤组织褐变率存在差异,说明红豆杉幼茎愈伤组织褐变率与两种激素的浓度比值、浓度高低均有关,A正确;

B、由表格中第2、3、5、6组(较高浓度)诱导率均为100%,只有第1组和第4组(较低浓度)诱导率为0,说明红豆杉幼茎愈伤组织诱导率与两种激素的浓度比值无关,与浓度高低有关,B错误;

C、比较第1〜3组,或第4〜6组,在6-BA浓度一定的情况下,褐变率随2,4-D浓度的增大而增大,说明高浓度的2,4-D容易导致红豆杉幼茎愈伤组织发生褐变,C正确;

D、在6种组合中,第2组(2.0+0.5)愈伤组织诱导率为100%,且褐变率较低,为诱导脱分化的最佳激素组合,D正确。

故选B。

8.在利用小鼠制备抗人乳头瘤病毒单克隆抗体的过程中,以下操作错误的是()

A.用灭活的人乳头瘤病毒免疫小鼠

B.取小鼠脾细胞与骨髓瘤细胞进行细胞融合

C,对杂交瘤细胞进行克隆化培养、抗体检测和筛选

D.从脾细胞中分离出单个B细胞体外培养获取单克隆抗体

【分析】本题考查单克隆抗体的制备过程。

细胞来源:

B淋巴细胞,能产生特异性抗体,在体外不能无限繁殖;

骨髓瘤细胞,不产生专一性抗体,体外能无限繁殖。

【详解】A、用灭活的人乳头瘤病毒免疫小鼠,会刺激小鼠产生能分泌相应抗体的浆细胞,A正确;

B、在小鼠的脾脏细胞中存在能分泌抗人乳头瘤病毒抗体的B淋巴细胞,设法将骨髓瘤细胞与脾细胞中产生的B淋巴细胞融合,获得杂交瘤细胞,B正确;

C、对杂交瘤细胞进行克隆化培养、抗体检测和筛选,可获得单克隆抗体,C正确;

D、从脾脏细胞中分离的单个B细胞已高度分化,无法体外培养增殖、获得单克隆抗体,D错误。

9.关于“克隆羊”与“试管羊”的叙述,错误的是()

A.克隆羊是无性生殖的产物,试管羊是有性生殖的产物

B.培育克隆羊需要进行核移植,培育试管羊需要进行体外受精

C.培育克隆羊是细胞水平的技术,培育试管羊是DNA分子水平的技术

D.克隆羊的染色体来自提供细胞核的亲本,试管羊的染色体来自双亲

【分析】克隆羊是经过动物核移植技术得到的,试管羊是经过体外受精,再将胚胎移植后发育得到的。

【详解】A、克隆羊没有精子核卵细胞结合过程,直接通过核移植技术得到,是无性生殖的产物,试管羊通过体外精子和卵细胞结合形成受精卵发育而来,是有性生殖的产物,A正确;

B、培育克隆羊需要进行核移植,移入去核的卵母细胞发育而来,培育试管羊需要进行体外受精,进行胚胎移植发育而来,B正确;

C、培育克隆羊和培育试管羊都是在细胞水平上操作,都属于细胞水平的技术,C错误;

D、克隆羊经过完整的细胞核移植,染色体来自提供细胞核的亲本,试管羊经过体外受精,染色体来自双亲,D正确。

10,胚胎干细胞的发育和自我更新受多个基因调控(如下图)。

下列有关胚胎干细胞的叙述错误的是()

自我

更新

A.可分化为成年动物体内的任何一种类型的细胞

B.将干细胞用于疾病的临床治疗没有任何风险

C.Nanog基因突变可能使胚胎干细胞自我更新受阻

D.抑制Oct3/4表达会促进胚胎干细胞向滋养层分化【答案】B

【分析】如图Nanog基因促进胚胎干细胞的自我更新,Stat3基因抑制胚胎干细胞自我更新,两基因均抑制其发育为原始内胚层的过程;

Oct3/4基因抑制胚胎干细胞发育为滋养层。

【详解】A、胚胎干细胞具有发育全能性,能发育为成年动物体内任何一种类型的细胞,A正确;

B、干细胞用于疾病的临床治疗可能会引起免疫排斥,干细胞肿瘤化等风险,B错误。

C、Nanog基因促进胚胎干细胞自我更新,突变可能使细胞自我更新受阻,C正确;

D、Oct3/4基因抑制胚胎干细胞发育为滋养层,抑制该基因表达会促进胚胎干细胞向滋养层分化,D正确。

11.基因工程应用广泛,成果丰硕。

下列成果属于基因工程应用的是()

A.腺病毒载体重组新型冠状病毒疫苗的制备

B.白菜与甘蓝体细胞杂交育成白菜-甘蓝

C.人工诱变获得高产青霉素的青霉菌株

D.用单个细胞培养出可供移植的皮肤

【分析】基因工程是按照人们的愿望,进行严格的设计,并通过体外DNA重组和转基因等技术,赋予生物以新的遗传特性,从而创造出更符合人们需要的新的生物类型和生物产品。

基因工程的基本操作程序:

目的基因的获取、基因表达载体的构建、将目的基因导入受体细胞、目的基因的检测与鉴定。

【详解】A、腺病毒载体重组新型冠状病毒疫苗的制备利用了基因工程,以腺病毒为载体,目的基因为新型冠状病毒的S蛋白抗原基因,构建重组腺病毒作为疫苗,A正确;

B、白菜与甘蓝体细胞杂交育成白菜-甘蓝利用了植物体细胞杂交技术,B错误;

C、人工诱变获得高产青霉素的青霉菌株利用了诱变育种,其原理是基因突变,C错误;

D、用单个细胞培养出可供移植的皮肤利用了动物细胞培养技术,D错误。

故选A„

12,拟利用番茄表达人类凝血因子IX,操作步骤排序正确的是()

①制备工程农杆菌②构建植物表达载体

③获取人类凝血因子IX基因④番茄植株中凝血因子IX基因的检测

⑤用农杆菌转化番茄植株并筛选⑥提取凝血因子IX并检测活性

A.③①②⑤⑥④B.⑥③①②⑤④

C.④③②①⑤⑥D.③②①⑤④⑥

【分析】利用番茄表达人凝血因子属于基因工程的技术范畴。

【详解】基因工程的基本步骤:

获取目的基因,构架表达载体,受体细胞的转化,目的基因的表达及检测。

对植物细胞进行转化通常用农杆菌转化法。

综合可知正确的排序应为:

③②①⑤④⑥,故选D。

13.人类基因组中有大量短串联重复序列(STR),重复次数在不同个体间存在差异,具有高度多样性。

提取某犯罪现场证据DNA及嫌疑人DNA,PCR扩增某基因座STR后电泳,结果如图,据此可排除嫌疑的是()

证据,嚏人乎A"

DNA。

5Z3

A.甲

B.乙

C.丙

D.T

【分析】DNA分子具有特应性,人与人之间存在差异,可以采用DNA的这一特性来识别身份,电泳后,不同的DNA形成的条带不一样,相同的DNA形成的条带一致。

【详解】据图分析,和证据DNA对照,甲、乙、丁的结果与证据DNA都有一致的条带,不能排除嫌疑,只有丙的结果与证据DNA有不一样的条带,可以排除嫌疑,ABD错误,C正确。

14.水稻R基因的等位基因Ri与R2存在一个碱基对的差异,为检测水稻的基因型,使用存在1个碱基错

配的引物对3株水稻的R基因局部进行PCR扩增后,用限制酶HinfI切割并电泳(如下图)。

下列相关叙述错误的是()

Ri基因...ACCGCGCCGCCACCGGGTCG

GCCGAAGTAG...治基因...ACCGCGCCGCCACCGGGTCG|GCCGAAGTAG...

上游引物ACCGCGCCGCCACCGGGTCGGCCGGAG下游引物k略)

%基ACCGCGCCGCCACCGGGTCGGCCGGAGTAG...因片段

璃基ACCGCGCCGCCACCGGGTCGGCCGGAGTCG...因片段

Hinfl酶切识别序列为...GIANTC...%基因片段J

、基因片段”8bp

178bp—153bp

123

一二

25bp+153bp

A.在Ri基因和R2基因的差异序列中,不含限制酶Hinfl的酶切位点

B.引物中存在1个碱基错配,导致R基因经PCR扩增后1个碱基对改变

C.扩增后的R2片段有1个Hinfl的酶切位点,而扩增后的R1片段没有

D.电泳结果显示,植株1为纯合子,植株2和植株3为杂合子

【分析】基因工程技术的基本步骤:

(1)目的基因的获取:

方法有从基因文库中获取、利用PCR技术扩增和人工合成。

(2)基因表达载体的构建:

是基因工程的核心步骤,基因表达载体包括目的基因、启动子、终止子和标记基因等。

(3)将目的基因导入受体细胞:

根据受体细胞不同,导入的方法也不一样。

将目的基因导入植物细胞的方法有农杆菌转化法、基因枪法和花粉管通道法;

将目的基因导入动物细胞最有效的方法是显微注射法;

将目的基因导入微生物细胞的方法是感受态细胞法。

(4)目的基因的检测与鉴定:

分子水平上的检测:

①检测转基因生物染色体的DNA是否插入目的基因

-DNA分子杂交技术;

②检测目的基因是否转录出了mRNA--分子杂交技术;

③检测目的基因是否翻译成

蛋白质--抗原-抗体杂交技术。

个体水平上的鉴定:

抗虫鉴定、抗病鉴定、活性鉴定等。

【详解】A、由图可知,在Ri基因和R2基因的差异序列中,不含限制酶Hinfl的酶切位点,A正确;

B、因为引物中存在1个碱基错配,导致R基因经PCR扩增后1个碱基对改变,B正确;

C、根据酶切结果可知,扩增后的R2片段有1个Hinfl的酶切位点,而扩增后的R1片段没有Hinfl的酶

切位点,C正确;

D、电泳结果显示,植株1和植株2为纯合子,植株3为杂合子,D错误。

15.生物技术给人类带来福祉的同时,也引起人们对其安全性和伦理问题的关注。

我国政府反对()

A.生产任何转基因产品

B.生产、储存生物武器

C.人类胚胎干细胞研究

D.生殖性克隆动物

【分析】生物技术如同一把双刃剑,使用得当可使人类获益,使用不当则对人类造成伤害。

【详解】我国政府反对生产、储存生物武器并禁止生殖性克隆人,支持在安全范畴进行转基因产品、人类

胚胎干细胞研究和生殖性克隆动物研究,故选Bo

第二部分非选择题

16.中国是食醋酿造大国,有几千年的酿醋历史。

但目前中国常用的醋酸杆菌菌株AS1.41产酸能力、酒精耐受性均有待提高。

拟从醋酷中筛选高产酸、高耐酒精的醋酸菌,过程如图1所示。

图1筛选高产酸酷酸菌流程

酒精浓度%

图2。

(1)试验中所用培养基均含有水、葡萄糖、酵母浸膏和酒精,其中葡萄糖可为醋酸菌的生长提供o

配制分离培养基时,除营养物质外,还需要添加2%的碳酸钙和,以便观察醋酸与碳酸钙反应后菌落周围形成的透明圈。

(2)分离醋酸菌时,需将富集的醋酸菌培养液进行梯度稀释,采用法接种到分离平板上。

30°

C培养

72h后,挑取透明圈的单菌落进行划线分离。

分离出的单菌落接种到斜面培养基(含3%酒精)上并于

4P保藏。

(3)取保藏的三个菌株分别接种于发酵培养液(含5%酒精)中,30°

C培养5d后测产酸量,筛选出高产酸的醋酸杆菌J2菌株。

将J2与AS1.41分别接种到含不同浓度酒精的培养液中,30°

C培养24h后测定活菌数量,结果如图2。

由图2可知,酒精可醋酸菌的生长。

与AS1.41相比,J2菌株对酒精的耐受性

(4)获得J2菌株后,还可以采取的育种措施,进一步提高其酒精耐受性。

(5)筛选出J2菌株后,其高产酸特性的遗传是否稳定还需检测,请写出基本过程。

【答案】

(1).碳源和能量

(2).酸碱指示剂(3).稀释涂布平板(4).大(5).抑制(6).

更高(7).诱变(8).将J2菌株连续培养多代,将每一代菌株都接种到培养基上,观察并比较产生

透明圈大小,如果透明圈大小基本一致,说明其高产酸特性能稳定遗传,如果透明圈大小不一致,说明其高产酸特性不能稳定遗传

【分析】醋酸发酵是利用醋酸菌将葡萄糖或酒精转化为醋酸的过程,检测产酸量时,利用醋酸和碳酸钙反应,会产生透明圈来检测;

性状能否稳定遗传,需要根据其后代的性状来判断。

【详解】

(1)葡萄糖含有碳元素,可以为醋酸菌提供碳源,同时葡萄糖是其呼吸作用的底物,可以提供能

量,配制分离培养基时,除营养物质外,还需要添加2%的碳酸钙和酸碱指示剂,以便观察醋酸与碳酸钙反

应后园洛周围形成的透明圈;

(2)富集培养后浓度较高,需要梯度稀释,采用稀释涂布平板法接种到分离平板上,30°

C培养72h后,挑取透明圈大的单菌落进行划线分离,透明圈越大说明产酸能力越强;

(3)由图2可知,加入酒精后,活菌数量相对值都没有不加酒精时高,说明酒精可抑制醋酸菌的生长,J2菌株相对值到酒精浓度为10%时才下降到0,说明J2菌株对酒精的耐受性更高;

(4)J2菌株是细菌,可以通过诱变的方式,使其发生基因突变,进一步提高其酒精耐受性;

(5)检测J2菌株高产酸特性能否稳定遗传,需要检测其后代的产酸能力,所以将J2菌株连续培养多代,将每一代菌株都接种到培养基上,观察并比较产生的透明圈大小,如果透明圈大小基本一致,说明其高产酸特性能稳定遗传,如果透明圈大小不一致,说明其高产酸特性不能稳定遗传。

【点睛】此题微生物的分离纯化,并结合诱变育种等知识,综合性较强,前两小题为基础题,根据所学知识可得出答案,第(3)小题需要结合图中信息来解答,第(4)小题,需要结合育种知识解决,第(5)小题为书写实验流程,难度较大,但结合题目要求,检测其后代的产酸能力,就能知道J2菌株高产酸特性的遗传是否稳定。

17.花椰菜和黑芥均为十字花科植物,花椰菜易患黑腐病(致病菌为黄单胞杆菌属细菌)。

拟通过植物体细

胞杂交技术(如图1),

将黑芥的抗黑腐病基因引入到花椰菜中。

抗病型黑芥紫外线

幼叶细胞<

下胚轴细胞图1

—煎伤缎只数再生植株率

0.010.050.070.080.100.200.300.40紫外线剂量

图2

冷0至宅三、二_-美啖642O.O.O.

(1)在用酶解法制备原生质体时,需先用较高渗透压的溶液处理植物细胞,使细胞处于微弱的状态,

然后用消化去除细胞壁,获得原生质体。

(2)用不同剂量紫外线处理黑芥原生质体,统计愈伤组织数和再生植株率,结果如图2。

由图2可知,处理黑芥原生质体的适宜紫外线剂量为J-cm-2'

此处理下融合细胞的能力较强,既能得到大量愈伤组织,再生植株率也最高。

(3)杂种细胞经组织培养发育成植株,该过程所用培养基中包括水、无机盐、有机营养等营养物质,此外还需加入一定浓度和比例的,以调节细胞的发育方向。

(4)杂种细胞分裂过程中会丢失来自黑芥的部分染色体,有时会发生染色体易位,这使杂种植株染色体组成呈现多样性。

如何对杂种植株进行选择和培育,才能得到既抗黑腐病、又最大程度减少非目标性状的花椰菜植株?

请写出基本思路。

【答案】

(1).失水

(2).纤维素酶和果胶酶(3).0.1(4).再生(5).植物激素(6),对

杂种植株接种黑腐病菌,能正常生长的即为具有高抗性的杂种植株

分析】1、当外界溶液浓度大于细胞液浓度时,细胞发生质壁分离,细胞失水。

2、可以用纤维素酶和果胶

酶去除植物的细胞壁,制备原生质体。

3、对杂种植株进行接种黑腐病菌筛选出具有高抗性的杂种植株。

(1)使用高渗透压的溶液处理植物细胞,使细胞处于微弱的失水状态。

植物细胞壁的主要成分是纤维素和果胶,故采用纤维素酶和果胶酶去除细胞壁。

(2)由图可知,处理黑芥原生质体的适宜紫外线剂量为O.Lbcm?

此浓度下融合细胞的再生能力较强。

(3)植物组织培养过程中需调节植物激素的种类和比例,以保证愈伤组织再分化并得到完整的植株。

(4)对杂种植株接种黑腐病菌,能正常生长的即为具有高抗性的杂种植株。

【点睛】本题主要考查植物体细胞杂交的相关知识,意在考查考生能理解所学知识的要点,把握知识间的内在联系的能力。

18.目前流感疫苗主要的生产介质是鸡胚。

研究者用犬肾细胞(MDCK细胞)培养流感病毒,制备疫苗并测定了其免疫效果。

(1)利用合成培养基培养细胞时,培养基中需加入水、葡萄糖、、维生素、无机盐等营养物质。

为防

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