八步区松材线虫病秋季监测.docx

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八步区松材线虫病秋季监测

八步区2018年松材线虫病秋季监测

普查工作方案

为保护我区森林资源安全和造林绿化成果，促进经济和生态建设稳步发展，遏制松材线虫病严重发生和扩散蔓延的势头，提高防治成效，根据《广西松材线虫病普查技术方案》（桂林办营字〔2018〕22号及《关于做好2018年松材线虫病秋季普查的通知》要求，特制定本方案。

1、监测普查的组织

由林业局统一组织，各乡镇林业工作站协助，政府采购第三方服务共同完成2018年松材线虫病疫情监测普查工作。

二、疫情普查

（一）普查范围

普查范围为八步区所有松树栽培区，以乡镇为普查单位。

普查重点是重要生态区位、松材线虫病疫点及其周边的松林、人为活动频繁的城镇以及交通沿线、风景区、松木制品生产和使用单位、建筑工地、仓库、驻军营房、木材集散地、移动通讯站、电视发射台、高压线塔、电缆线路、光缆线路及高压线路等地区附近的松林。

（二）普查内容

调查枯死松树地点、数量，涉及松林面积，查明松树枯死原因等。

1.疫情发生乡镇（桂岭镇）。

查清发生分布范围、发生面积（以小班面积为准，孤立松林以实际面积统计）和病死树数量，绘制发生分布图（具体到小班），填写发生分布表，统计病死树株率和经济损失，掌握疫情发生情况，为制定年度防治计划提供依据。

2.非疫情发生乡镇。

查清发现枯死松树分布地点、松树种类、分布面积、枯死株数、松褐天牛危害等情况，绘制松树枯死情况分布图，填写松树枯死情况表（统计到小班）。

（三）普查时间

秋季普查在10月份进行。

（四）普查方法

普查以乡镇为单位，采取地面人工调查方法，并应用林业有害生物GIS信息管理系统、数据采集设备、无人机等技术手段开展调查。

1.踏查。

根据当地松林分布的特点，设计出便于观察全部林分的踏查路线；沿踏查路线用无人机、目测方法或借用望远镜查找有无枯死松树，或针叶褪色、黄化、枯萎或针叶呈红褐色等症状的松树，选择取样对象。

踏查应有GPS轨迹记录，使用广西林业有害生物野外数据采集系统记录航迹，GPS踏查线路命名为：

县（区）+乡镇+踏查＋3位数字编码。

将每条踏查路线GPS轨迹导入林业有害生物GIS信息管理系统中保存。

发现松树枯死情况的记录踏查点信息，填写附表1。

2.详查。

根据记录踏查点信息踏查结果，对疑似发病林分进一步详细调查，凡死因不明的可疑松枯死木、濒死木均要取样检验。

按照本方案第三点所列取样方法，抽取一定数量的样品，进行分离镜检，确定是否带有松材线虫。

每个详查样地应有GPS定位记录及发生情况照片，应用广西林业有害生物野外数据采集系统记录航点，样地详查GPS定位命名为：

县（区）+乡镇+样地＋3位数字编码。

三、疫情监测

（一）地面人工调查

1.定期巡查监测。

疫情发生区以乡镇为单位，组织专业技术人员每月对重点区域的松林进行巡查，凡发现松树有感病症状，立即取样分离鉴定，确定是否有松材线虫。

2.定点监测。

在疫情发生区边缘地带设置固定监测点，定期调查，发现松树枯死立即取样分离鉴定，确定是否有松材线虫。

（二）诱捕器监测

于松褐天牛羽化期在重点调查区域桂岭镇善华、桂岭、瑞山村，大宁镇螺石、李屋村，仁义镇龙珠、双龙村，信都镇马塘、新联、新红村林间设置诱捕器100个，诱捕松褐天牛活体进行监测。

将诱捕到的松褐天牛成虫活体剪碎后用贝尔曼漏斗法进行分离，镜检是否携带有松材线虫。

填写松材线虫病诱捕器记录表（附表2），将诱捕器诱捕松墨天牛和镜检数据整理记录、保存。

若发现松褐天牛携带松材线虫，应在诱捕点周围100-300米范围内对枯死松树和濒死松树进行取样分离鉴定，确定疫情发生地点。

严禁在疫情发生林分边缘使用诱捕器诱捕松墨天牛，防止疫情向外扩散蔓延。

（三）无人机监测

对地面不易调查的高山密林地区，采用无人机技术进行监测，若发现不明原因枯死松树，根据无人机搭载的GPS采集的位置信息开展实地调查，确认是否发生松材线虫病。

四、取样

（一）取样方法

1.取样部位一般情况下在树干下部（胸高处）、上部（主干与主侧枝交界处）、中部（上、下部之间）3个部位取样。

如仅部分枝条表现症状的，要在树干上部和死亡的枝条上取样。

如外部表现症状明显的可在胸高处取样。

在春季松褐天牛化蛹期，可在蛹室周围取样。

2.取样时在取样部位剥净树皮，直接砍取100－200克木片；或剥净树皮，用手摇钻从木质部至髓心钻取100－200克木屑；或在取样部位分别截取2厘米厚的圆盘。

3.取样时应排除人畜破坏、森林火灾、其他病虫害等原因造成的枯死树。

4.取样时应考虑以下因素：

松材线虫病发病高峰期一般在10月，从表现出针叶变黄、树脂分泌减少甚至停止至死亡约1个月至1个半月。

在松林中一般是优势木先发病。

由于不同地区种源的松材线虫的致病性、松树的抗性差异等原因，一些松树仅部分枝条表现感病外部症状。

这种症状在混交林中表现尤其明显。

抽取样品要及时并重点抽取尚未完全枯死或刚枯死的优势木（针叶呈黄绿或黄褐色，尚未完全枯萎，树皮尚未脱落，材质尚未腐朽）。

5.所取的样品要及时贴上标签（记录样品号、采集地点、树种、树龄、取样时间和取样人等）。

并填写取样记录表见附表3。

（二）抽样数量

以林业小班为单位，表现典型症状的松树在10株以下时全部取样；10株以上时先抽取10株，再选取其余数量的1%－5%。

（三）样品的保存与处理

取回的样品应及时分离鉴定，若需要保存可采取以下方法：

将木片装入塑料袋内，扎紧袋口，在袋上扎几个小孔（也可直接保存木段、圆盘），放入4℃冰箱。

若需长期保存，要经常在样品上喷水（一般在半个月至1个月内完成分离鉴定）。

样品分离鉴定结束后应及时对样品进行销毁。

松材线虫普查监测工作具体技术操作规程参见国家标准《松材线虫普查监测技术规程（GB/T23478—2009）》。

五、分离鉴定

（一）线虫分离

将取回的样品在室内采用贝尔曼漏斗法或浅盘法进行线虫分离，分离时间一般需12小时以上。

将分离液体收集到试管或烧杯中，通过自然沉淀或离心后进行镜检。

（二）线虫培养

疫木保温保湿培养：

将样品锯成小段，置于烧杯中加少量清水，木段下端浸在水中，木段上端用湿纱布覆盖，在30℃条件下保温保湿培养3天，倒取杯中水液，可获得较多雌雄成虫；或将样品木段适当浸湿，放于塑料袋里，扎紧袋口，置于30℃培养箱中3天取出重新分离，可获得较多雌雄成虫。

（三）玻片的制作

在洁净的载玻片中央滴一水滴，水滴的量以加盖玻片后恰好充满盖玻片下的空间为好。

用细针挑取，或用毛细滴管吸取线虫置于载玻片的水滴中，并使之沉底。

将有线虫的载玻片在酒精灯的火焰上往返通过5－6秒，杀死线虫。

用细针摆好水滴中的死线虫，然后用镊子夹盖玻片从一侧轻轻盖下。

（四）鉴定

1.常规显微镜形态鉴定（仅适用于雌雄成虫，以雌成虫为主）：

将制作好的玻片置于显微镜下观察其形态，判别是否为松材线虫，并填写镜检记录表（附表3）。

松材线虫分离、培养、镜检技术操作规程参见国家标准《松材线虫病检疫技术规程（GB/T23476—2009）》

2．分子检测（适用于各虫态）：

松材线虫的分子检测技术采用实时PCR检测技术。

五、数据整理与上报

普查数据以乡镇级为单位进行普查数据汇总（附表4、5），普查数据汇总到乡镇级行政区级别，于10月15日之前上报局防治检疫站汇总，局防治检疫站上报贺州市防治检疫站，市防治检疫站汇总上报至自治区防治检疫站。

附表:

1.松材线虫病踏查记录表

2.松材线虫病普查诱捕器记录表

3.松材线虫病采样镜检记录表

4.2018年秋季松材线虫病监测普查统计表

5.2018年秋季松材线虫病监测普查结果统计表

附表1松材线虫病踏查记录表

　　　　　　县（区、林场）名称：

　　乡镇（分场）名称：

　　GPS航迹名称：

　　　里程（km）：

序号

调查日期

踏查点

踏查点地理坐标

松树种类

松树枯死数量（株）

枯死原因分析

采样数量

（株/号）

经度

纬度

海拔（m）

调查人：

填表时间：

年月日

附表2松材线虫病普查诱捕器记录表

编号

悬挂地点

坐标点

诱心更换时间

诱捕器收虫

采样分离数

分离鉴定结果

时间

松褐天牛

其它天牛

无

其它线虫

松材线虫

附表3　　　　　　　　　　　松材线虫病采样镜检记录表

填报单位：

　填报日期：

年月日填报人：

样本号

样本采集地点

经纬度坐标

采样时间

采集样品数量

采样人

取样部位

鉴定结果

镜检人

镜检

材料

上

中

下

松材线虫

拟松材线虫

其它线虫

无线虫

经度

纬度

注：

镜检材料指松木或松墨天牛活体

附表4　　　　　2018年秋季松材线虫病监测普查统计表

填报单位：

　　　　　填报日期：

年月日

所辖单位（县级行政区）

松林面积（万亩）

普查面积（万亩）

枯死松树（株）

清理枯死树（株）

取样数（株）

取样部位

鉴定结果

疑似病死木

其他

上

中

下

松材线虫

拟松材线虫

其他线虫

无线虫

合计