生化考试神卷.docx
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生化考试神卷
生化考试神卷
为方便同学们复习,本人将生化综合练习做成了神卷!
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一、填空题(每空1分,共20分)
1、在各种蛋白质分子中,含量比较相近的元素是氮,测得某蛋白质样品含氮量为14.0克,该样品蛋白质含量应为87.4克。
2、当氨基酸溶液的pH=pI时,氨基酸以_兼性离子_离子形式存在;当pH﹥pI时,氨基酸以_阴_离子形式存在。
3、维持DNA双螺旋结构的主要作用力是氢键、疏水键。
4、当酶促反应速度为最大反应速度的80%时,底物浓度是Km值的4倍。
5、真核细胞生物氧化的主要场所是线粒体,呼吸链和氧化磷酸化偶联因子都定位于线粒体内膜。
6、糖酵解在细胞内的细胞质中进行,该途径是将葡萄糖转变为丙酮酸,同时生成ATP和NADH的一系列酶促反应。
7.脂肪酸在线粒体内降解的第一步反应是脂酰辅酶A脱氢,该反应的载氢体是FAD。
8、大肠杆菌中已发现3种DNA聚合酶,其中DNA聚合酶III负责DNA复制,DNA聚合酶II负责DNA损伤修复。
9、原核细胞多肽链合成第一个氨基酸是_甲酰甲硫氨酸_,真核细胞多肽链合成的第一个氨基酸是_甲硫氨酸_。
1、蛋白质的生物合成是以_mRNA_作为模板,_tRNA_作为运输氨基酸的工具,_核糖体_作为合成的场所。
2、谷氨酸的pK1(α-COOH)=2.19,pK2(α-NH+3)=9.67,pKR(R基)=4.25,谷氨酸的等电点为_3.22_。
3、写出下列符号的中文名称:
Tyr_酪氨酸_,Trp_色氨酸_,ATP_三磷酸腺苷_。
4、蛋白质在紫外光_280_nm处有强的光吸收,核酸在紫外光_260_nm处有明显的光吸收。
蛋白质的平均含氮量是_16%_。
5、由非糖物质生成葡萄糖或糖元的作用,称为_糖原异生_作用。
6、氨基酸的脱氨基作用主要有,转氨基作用,_氧化脱氨基_,_联合脱氨基_等。
7、维生素对物质代谢十分重要,是因为多数的维生素作为_辅酶_的组成成分,参与代谢过程。
8、ATP的产生有两种方式,一种是_氧化磷酸化_,另一种是_底物磷酸化_。
9、mRNA转录后加工过程主要有以下步骤:
5‘端帽结构的生成,_内含子切除_,_3’端尾巴的生成_。
10、DNA复制时,连续合成的链称为_前导_链;不连续合成的链称为_滞后链。
1、决定蛋白质的空间构象和生物学功能的是蛋白质的一级结构,该结构是指多肽链中氨基酸残基的排列顺序。
2、稳定蛋白质三级结构的次级键包括氢键、离子键(盐键)、疏水键和范德华力等。
3、测得某一DNA样品中,A=0.53mol,C=0.25mol,那么T=0.53mol,
G=0.25mol。
4、当酶促反应速度为最大反应速度的80%时,底物浓度是Km的4倍。
5、缺乏尼克酸(烟酸)可导致癞皮病病。
6、在呼吸链上位于细胞色素C1的前一个成分是细胞色素b,后一个成分是细胞色素C。
7、由乙酰CoA可以合成脂肪酸、胆固醇和酮体。
8、DNA分子中指导合成RNA的那条链称为模板链或负链或无意链。
9、在蛋白质生物合成中,mRNA起模板作用,tRNA起携带转运氨基酸作用,由rRNA与蛋白质组成的核蛋白体起合成蛋白质场所。
1、稳定蛋白质胶体的主要因素是_水化膜_和_同性电荷_。
2、_m_RNA分子指导蛋白质生物合成,_t_RNA分子用作蛋白质生物合成中活化氨基酸的载体。
3、酶的活性中心包括_结合_和_催化_两个功能部位。
4、典型的呼吸链包括_NADH_和_FADH2_两种。
5、按溶解性质,维生素可以分为_脂溶性_维生素和_水溶性_维生素两大类。
6、糖酵解在细胞_浆_中进行,该途径能将_葡萄糖_转变为丙酮酸。
7、酮体包括_乙酰乙酸_、β-羟丁酸和_丙酮_三种物质。
8、氨基酸的共同代谢包括_脱氨基_作用和_脱羧基_作用两个方面。
9、真核生物DNA的复制从固定的_起点_开始并且_双_向进行。
10、细胞内多肽链合成的方向是从_N_端到_C_端。
1、糖是人和动物的主要能源物质,它通过生物氧化而放出大量能量,以满足生命活动的需要。
2、根据理化性质,氨基酸可分成_非极性_,_不带电荷极性_,_带正电荷_和_带负电荷四种。
3、体内有生物活性的蛋白质至少具备3结构,有的还有4结构。
4、蛋白质变性主要是其高级结构遭到破坏,而其一级结构仍可完好无损。
5、酶催化的机理是降低反应的活化能,不改变反应的平衡_。
6、酶的特异性包括:
结构特异性,立体异构特异性与立体异构特异性。
7、Km值等于酶促反应速度为最大速度一半时的底物浓度。
8、酶促反应速度(ν)是最大速度(Vmax)的80%时,底物浓度([S])是Km的4_倍;当ν达到Vmax的90%时,[S]是Km的_9_倍。
9、lmol葡萄糖氧化生成CO2和H2O时,净生成_32(38)molATP。
二、单项选择题(每题1.0分,20小题,共20分)
1、下列含有两个羧基的氨基酸是(E)
A、精氨酸 B、赖氨酸 C、甘氨酸 D、色氨酸 E、谷氨酸
2、酶的竞争性可逆抑制剂可以使(C)
A、Vmax减小,Km减小B、Vmax增加,Km增加
C、Vmax不变,Km增加D、Vmax不变,Km减小
3、下列有关蛋白质的叙述哪项是正确的(A)?
A、蛋白质分子的净电荷为零时的pH值是它的等电点
B、大多数蛋白质在含有中性盐的溶液中会沉淀析出
C、由于蛋白质在等电点时溶解度最大,所以沉淀蛋白质时应远离等电点
D、以上各项均不正确
4、关于DNA指导的RNA合成,下列叙述哪一项是错误的(B):
A、只有在DNA存在时,RNA聚合酶才能催化磷酸二酯键的生成
B、转录过程中,RNA聚合酶需要引物
C、RNA链的合成是从5′→3′端
D、大多数情况下只有一股DNA链作为模板
5、核酸中核苷酸之间的连接方式是(D)
A、2′,3′磷酸二酯键B、2′,5′磷酸二酯键
C、肽键D、3′,5′磷酸二酯键
6、关于酶的叙述哪项是正确的(C)?
A、所有的酶都含有辅基或辅酶
B、只能在体内起催化作用
C、大多数酶的化学本质是蛋白质
D、能改变化学反应的平衡点加速反应的进行
E、都具有立体异构专一性(特异性)
7、1分子葡萄糖酵解时净生成多少个ATP(B)?
A、1B、2C、3D、4E、5
8、决定tRNA携带氨基酸特异性的关键部位是(E)
A、–XCCA3`末端B、TψC环;
C、DHU环D、额外环E、反密码子环
9、酶的活性中心是指(B)
A、酶分子上含有必需基团的肽段B、酶分子与底物结合的部位
C、酶分子与辅酶结合的部位D、酶分子发挥催化作用的关键性结构区
E、酶分子有丝氨酸残基、二硫键存在的区域
10、关于脂肪酸合成的叙述,不正确的是(E)
A、在胞液中进行B、基本原料是乙酰CoA和NADPH+H+
C、关键酶是乙酰CoA羧化酶D、脂肪酸合成酶为多酶复合体或多功能酶
E、脂肪酸合成过程中碳链延长需乙酰CoA提供乙酰基
11、Km值的概念是(D)
A、与酶对底物的亲和力无关B、是达到Vm所必须的底物浓度
C、同一种酶的各种同工酶的Km值相同D、是达到1/2Vm的底物浓度
E、与底物的性质无关
12、模板DNA的碱基序列是3′—TGCAGT—5′,其转录出RNA碱基序列是(B)
A、5′—AGGUCA—3′B、5′—ACGUCA—3′
C、5′—UCGUCU—3′D、5′—ACGTCA—3′
E、5′—ACGUGT—3′
13、DNA复制和转录过程具有许多异同点。
下列关于DNA复制和转录的描述中哪项是错误的(D)?
A、在体内以一条DNA链为模板转录,而以两条DNA链为模板复制
B、在这两个过程中合成方向都为5′→3′
C、复制的产物通常情况下大于转录的产物
D、两过程均需RNA引物
E、DNA聚合酶和RNA聚合酶都需要Mg2+
14、有一混合蛋白质溶液,各种蛋白质的pI为4.6,5.0,5.6,6.7,7.8。
电泳时欲使其中四种电泳泳向正级,缓冲溶液的pH应该是多少(D)?
A、4.0B、5.0C、6.0D、7.0E、8.0
15、冈崎片段是指(C)
A、DNA模板上的DNA片段B、引物酶催化合成的RNA片段
C、随从链上合成的DNA片段D、前导链上合成的DNA片段
E、由DNA连接酶合成的DNA
16、蛋白质的一级结构及高级结构决定于(C)
A、亚基B、分子中盐键
C、氨基酸组成和顺序D、分子内疏水键
E、分子内氢键
17、下列关于DNA碱基组成的叙述,正确的是(A)
A、不同生物来源的DNA碱基组成不同
B、同一生物不同组织的DNA碱基组成不同
C、A和C含量相等
D、A+T=G+C
18、测得某一蛋白质样品的氮含量为0.40g,此样品约含蛋白质多少(B)?
A、2.00g B、2.50g C、6.40g D、3.00g E、6.25g
19.、组织之间氨的主要运输形式有(D)
A、NH4ClB、尿素C、丙氨酸D、谷氨酰胺
20.如果15N标记的大肠杆菌转入14N培养基中生长了三代,其各种状况的DNA分子比例应是下列哪一项(A)
纯15N15N-14N纯14N
-DNA杂种DNA-DNA
A、1/81/86/8
B、1/807/8
C、01/87/8
D、02/86/8
三、判断题:
(每个1分,共10分,对的打“√”,错的打“×”)
1、因为DNA两条链是反向平行的,在双向复制中一条链按5′→3′的方向合成,另一条链按3′→5′的方向合成。
(×)
2、DNA是生物遗传物质,RNA则不是。
(×)
3、变性蛋白质的溶解度降低,是由于中和了蛋白质分子表面的电荷及破坏了外层的水膜所引起的。
(√)
4、当某种蛋白质分子的酸性氨基酸残基数目等于碱性氨基酸残基数目时,此蛋白质的等电点为7.0。
(√)
3、同一种单糖的α-型和β-型是对映体。
()
4、酶之所以有高的催化效率是因为它可提高反应活化能。
()
5、NADH和NADPH都可以直接进入呼吸链。
(×)
6、原核细胞DNA复制是在特定部位起始的,真核细胞则在多个位点同时起始进行复制。
(√)
7、所有的氨酰-tRNA的合成都需要相应的氨酰-TRNA合成酶的催化。
(√)
8、分解代谢和合成代谢是同一反应的逆转,所以它们的代谢反应是可逆的。
(×)
9、三羧酸循环提供大量能量是因为经底物水平磷酸化直接生成ATP。
(×)
10、蛋白质合成过程中所需的能量都由ATP直接供给。
(×)
二、单项选择题(每小题1分,共20分)
1、组成蛋白质的单位是:
(A)
AL-α-氨基酸BD-α-氨基酸CL-β-氨基酸DD-β-氨基酸
2、蛋白质在280nm处的光吸收值主要归之于下列哪个氨基酸?
(A)
A、酪氨酸B、组氨酸C、丙氨酸D、精氨酸
3、下列关于超二级结构的叙述,哪一个是正确的?
(D)
A、结构域可单独行使特定的功能
B、结构域一般由α-螺旋肽段组成
C、结构域一般由β折叠肽段组成
D、是介于二级结构和三级结构之间的结构层次
4、下列关于辅酶和辅基功能的叙述,哪一项是不正确的?
(B)
A、起转移电子的作用B、决定酶所催化的反应类型
C、起转移氢的作用D、可转移特定的化学基团
5、下列哪种维生素参与体内钙、磷代谢的调节?
(C)
A、维生素AB、维生素CC、维生素DD、维生素E
6、竞争性抑制剂作用特点是_________。
(C)
A、与酶的底物竞争激活剂B、与酶的底物竞争酶的辅基
C、与酶的底物竞争酶的活性中心D、与酶的底物竞争酶的变构剂
7、直链淀粉分子中葡萄糖基之间以_________糖苷键连接。
(C)
A、α-1,2B、α-1,3C、α-1,4D、α-1,6
8、下列关于真核细胞mRNA的叙述,不正确的是_________。
(B)
A、它由细胞核的mRNA前体(核内不均一RNA)生成
B、在其链的3′端有7-甲基鸟苷,在其5′端连有多聚腺苷酸的PolyA尾巴
C、它从前RNA通过剪接酶切除内含子连接外显子而形成
D、是单顺反子
9、下列各项中,_________与蛋白质的变性无关。
(A)
A、肽键断裂B、氢键被破坏
C、离子键被破坏D、疏水键被破坏
10、与片段TAGA互补的片段为_________。
(D)
A、AGATB、UAUAC、ATCTD、TCTA
11、下列哪种途径在线粒体中进行(E)。
A、糖的无氧酵解B、糖元的分解
C、糖元的合成D、糖的磷酸戊糖途径
E、三羧酸循环
12、关于DNA复制,下列哪项是错误的(D)
A、真核细胞DNA有多个复制起始点
B、为半保留复制
C、亲代DNA双链都可作为模板
D、子代DNA的合成都是连续进行的
E、子代与亲代DNA分子核苷酸序列完全相同
13、肌糖元不能直接补充血糖,是因为肌肉组织中不含(D)
A、磷酸化酶B、已糖激酶
C、6一磷酸葡萄糖脱氢酶D、葡萄糖—6—磷酸酶
E、醛缩酶
14、在TCA循环中,下列反应中(C)发生了底物水平磷酸化。
A、柠檬酸→α-酮戊二酸B、α-酮戊二酸→琥珀酰辅酶AC、琥珀酰辅酶A→琥珀酸D、延胡索酸→苹果酸
15、下列哪一个不是呼吸链的成员之一?
(C)
A、CoQB、FADC、生物素D、细胞色素C
16、比较复制和转录过程,可以发现错误的是(E)。
A、在真核和原核生物,复制均以半保留方式进行
B、DNA聚合酶以脱氧核糖核苷三磷酸为底物
C、RNA聚合酶催化过程不需要引物
D、原核生物复制过程主要依赖DNA聚合酶Ⅲ
E、真核生物的复制为单起点
17、转录过程中RNA聚合酶的催化特点是(C)。
A、以四种NMP为原料合成多核苷酸链
B、从3’-向5’-端方向合成多核甘酸链
C、以DNA的一股链为模板
D、必须以RNA为引物
18、下列关于遗传密码的描述哪一项是错误的?
(C)
A、密码阅读有方向性,5'端开始,3'端终止
B、密码第3位(即3'端)碱基与反密码子的第1位(即5'端)碱基配对具有一定自由度,有时会出现多对一的情况。
C、一种氨基酸只能有一种密码子
D、一种密码子只代表一种氨基酸
19、逆转录酶是一类:
(A)
A、RNA指导的DNA聚合酶B、DNA指导的RNA聚合酶
C、DNA指导的DNA聚合酶D、RNA指导的RNA聚合酶
20、在蛋白质合成中,下列哪个反应需要GTP参与?
(B)
A、氨基酸的活化B、活化的氨基酸进入核糖体的A位
C、肽键的共价修饰D、已合成肽链的释放·
三、判断对错(每小题1分,共10分,对的打“√”,错的打“×”)
1、蛋白质是生物大分子,一般都具有四级结构。
(×)
2、如果DNA(a)的Tm值比另一DNA(b)的Tm值低,那么DNA(a)比DNA(b)含有较高比例的G-C碱基对。
(×)
3、酶促反应的速度随温度的升高而增加。
(×)
4、核糖体RNA是核糖体的结构成分,因此核糖体可看作是RNA和蛋白质的复合物。
(√)
5、三羧酸循环最主要的关键酶是琥珀酸脱氢酶。
(×)
6、在反竞争性抑制物存在的条件下,酶反应动力学的特点是Vmax↓,Km不变。
(×)
7、酶辅基一般不能用透析或超滤的方法与酶蛋白分离。
(√)
8、同一物种不同组织的DNA碱基组成不同。
(×)
9、在许多生物合成途径中,最先一步都是由一种调节酶催化的,此酶可被自身的产物,即该途径的最终产物所抑制。
(√)
10、真核生物蛋白质合成的第一个氨基酸是甲硫氨酸。
(√)
二、单项选择题(每小题1分,共20分)
1、关于密码子的下列描述,其中错误的是_C_。
A、每个密码子由三个碱基组成B、每一密码子编码一种氨基酸;
C、每种氨基酸只有一个密码子D、有些密码子不编码任何氨基酸
2、下列性质_B_为氨基酸和蛋白质所共有。
A、胶体性质B、两性性质C、双缩脲反应D、变性性质
3、含有稀有碱基比例较多的核酸是_D_。
A、DNAB、rRNAC、mRNAD、tRNA
4、酶催化作用对能量的影响在于_A_。
A、降低活化能B、增加活化能C、增加产物能量水平D、上述3项都错
5、下列关于σ因子的叙述正确的是_A_。
A、是RNA聚合酶的亚基,起辨认转录起始点的作用
B、是DNA聚合酶的亚基,容许按5′→3′和3′→5′双向合成
C、是50S核蛋白体亚基,催化肽链生成
D、是30S核蛋白体亚基,促进mRNA与之结合
6、胞浆中形成NADH+H+经苹果酸穿梭后,每摩尔产生ATP的摩尔数是_C_。
A、0.5B、1.5C、2.5D、3.5
7、支链淀粉分子中以_D_糖苷键形成分支。
A、α-1,2B、α-1,3C、α-1,4D、α-1,6
8、DNA变性伴随的变化是_B_。
A、对260nm紫外吸收减少B、溶液粘度下降
C、磷酸二酯键断裂D、形成嘧啶二聚体
9、竞争性抑制剂作用特点是_B_。
A、与酶的底物竞争激活剂B、与酶的底物竞争酶的活性中心
C、与酶的底物竞争酶的辅基D、与酶的底物竞争酶的变构剂
10、下列叙述中_D_正确。
A、所有的辅酶都包含维生素组分
B、所有的维生素都可以作为辅酶或辅酶的组分
C、只有B族维生素可以作为辅酶或辅酶的组分
D、所有的B族维生素都可以作为辅酶或辅酶的组分
11、某一种tRNA的反密码子是5’UGA3’,它识别的密码子序列是_C_。
A、UCGB、ACUC、UCAD、GCU
12、糖的有氧氧化最终产物是_A_。
A、CO2+H2O+ATPB、乳酸C、丙酮酸D、乙酰CoA
13、_C_是环核苷酸。
A、ADPB、AMPC、cAMPD、cDNA
14、下列辅因子中_D_参与脂肪酸的β-氧化。
A、ACPB、FMNC、生物素D、NAD+
15、参与尿素循环的氨基酸是_B_。
A、组氨酸B、鸟氨酸C、蛋氨酸D、赖氨酸
16、_A_是人类嘌呤碱代谢的终产物。
A、尿酸B、尿囊素C、尿囊酸D、尿素
17、在双链DNA的半保留复制中,_C_。
A、全部的子一代DNA分子中都没有来自亲代的DNA链
B、一半的子一代DNA分子中都有一条来自亲代的DNA链
C、全部的子一代DNA分子中都有一条来自亲代的DNA链
D、全部的子一代DNA分子中两条链均来自亲代DNA
18、为蛋白质生物合成中肽链延伸提供能量的是_B_。
A、CTPB、GTPC、ATPD、UTP
19、在生理条件下,生物膜中朝向水相的是_A_。
A、极性头B、非极性尾C、极性头和非极性尾D、上述三项都错
20、变性作用不会导致蛋白质的_D_级结构破坏。
A、四B、三C、二D、一
三、判断题(每小题1分,共10分,对的打“√”,错的打“×”)
1、蛋白质的变性是蛋白质立体结构的破坏,因此涉及肽键的断裂。
(×)
2、生物体内存在的DNA分子全为负超螺旋。
(×)
3、酶可以改变化学反应的平衡常数。
(×)
4、ATP虽然含有大量的自由能,但它并不是能量的贮存形式。
(√)
5、糖酵解过程在有氧无氧条件下都能进行。
(×)
6、原核生物中mRNA一般不需要转录后加工。
(√)
7、甘油在甘油磷酸激酶的催化下生成甘油-α-磷酸,反应消耗ATP。
(√)
8、在翻译起始阶段,由完整的核糖体与mRNA的5´端结合,从而开始蛋白质的
合成。
(×)
9、如果没有维生素的参与,所有酶都没有催化活性。
(×)
10、氧化脱氨是人体内氨基酸脱氨的主要方式。
(×)
二、单项选择题(每小题1分,共20分)
1、某一溶液中蛋白质的百分含量为55%,此溶液的蛋白质氮的百分浓度为(A)
A、8.8%B、8.0%C、9.0%D、9.2%
2、蛋白质分子中的氨基酸属于下列哪一项?
(C)
A、L-β-氨基酸B、D-β-氨基酸
C、L-α-氨基酸D、D-α-氨基酸
3、维持蛋白质三级结构主要靠(C)
A、氢键B、离子键
C、疏水作用D、二硫键
4、下列氨基酸中,哪个含有吲哚环?
(C)
A、甲硫氨酸B、苏氨酸
C、色氨酸D、组氨酸
5、哪一种情况可用增加[S]的方法减轻抑制程度?
(B)
A、不可逆抑制作用B、竞争性可逆抑制作用
C、非竞争性可逆抑制作用D、反竞争性可逆抑制作用
6、在生理条件下,下列哪种基团既可作为质子的受体,又可作为质子的供体?
(A)
A、His的咪唑基B、Arg的胍基
C、Trp的吲哚基D、Cys的巯基
7、丙二酸对琥珀酸脱氢酶的影响属于(C)
A、反馈抑制B、底物抑制
C、竞争性可逆抑制D、非竞争性可逆抑制
8、酶的特异性是指(B)
A、酶与辅酶特异的结合B、酶对其所催化的底物有特异的选择性
C、酶在细胞中的定位是特异性的D、酶催化反应的机制各不相同
9、肌肉组织中肌肉收缩所需要的大部分能量以哪种形式贮存?
(C)
A、ADPB、ATPC、磷酸肌酸D、cAMP
10、下列化合物中哪一个不是呼吸链的成员?
(D)
A、CoQB、细胞色素c
C、FADD、肉毒碱
11、下列途径中哪个主要发生在线粒体中?
(B)
A、糖酵解途径B、三羧酸循环
C、戊糖磷酸途径D、C3循环
12、丙酮酸脱氢酶系是个复杂的结构,包括多种酶和辅助因子。
下列化合物中哪个不是丙酮酸脱氢酶组分?
(C)
A、TPPB、硫辛酸
C、FMND、NAD+
13、为了使长链脂酰基从胞浆转运到线粒体内进行脂酸的β—氧化,所需要的载体为(B)
A、柠檬酸B、肉碱
C、酰基载体蛋白D、CoA
14、下列关于脂酸β—氧化作用的叙述,哪个是正确的?
(A)
A、起始于脂酰CoAB、对细胞来说,没有产生有用的能量
C、被肉碱抑制D、主要发生在细胞核中
15、下列哪一种氨基酸与尿素循环无关?
(A)
A、赖氨酸B、精氨酸
C、天冬氨酸D、鸟氨酸
16、关于Km值的意义,不正确的是(D)
A、Km是酶的特性常数B、Km值与酶的结构有关
C、Km值与酶所催化的底物有关D、Km值等于反应速度为最大速度一半时的酶的浓度
17、竞争性抑制剂对酶促反应速度影响是(A)
A、Km↑,Vmax不变B、Km↓,Vmax↓
C、Km不变,Vmax↓D、Km↓,Vrnax↑
18、糖酵解时下列哪一对代谢物提供~P使ADP生成ATP(B)
A、3-磷酸甘油醛及6-磷酸果糖B、1,3-二磷酸甘油酸及磷酸烯醇式丙酮酸
C、3-磷酸甘油酸及6-磷酸葡萄糖D、1,6-双磷酸果糖及1,3-二磷酸甘油酸
19、某一种tRNA的反密码子为5-IUC3-,它识别的密码子序列是(C)
A、AAGB、CAGC、GAAD、AGG
20、测定酶活性时,通常以底物浓度变化小于多少时