《医学实验基本操作技能》实习指导 第一篇医学实验基本要求Word格式.docx

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（1）生物化学基本技能

本内容主要介绍生物化学实验所必须掌握的基本操作技能，主要包括：

玻璃仪器的认领、使用和洗涤；

常用溶液配制、混匀、沉淀及过滤（详细内容参考教材第三章第一节）。

（2）常用生物化学仪器操作

常用生物化学仪器操作主要介绍常用量器的操作使用；

各式离心机的操作使用等（详细内容参考教材第三章第二节）。

3．显微形态实验基本操作技能

显微形态实验基本操作技能现在主要安排二次实验：

（1）实验一、生物显微镜的结构、使用方法和人外周血细胞计数。

本次实验包括两部分内容：

①掌握OLYMPUSCH-20生物显微镜的结构、使用方法和光镜下绘图要求（详细内容参考教材第四章第一节实验一）。

②掌握人外周血细胞计数——显微镜计数法（包括红细胞计数和白细胞计数）（详细内容参考教材第四章第五节实验二）。

（2）实验二、石蜡组织切片、HE染色技术，血涂片制作及瑞特染色技术。

本次实验包括三部分内容：

①了解石蜡组织切片、HE染色技术（详细内容参考教材第四章第二节实验一和第三节实验一）。

②掌握血涂片制作及瑞特染色技术（详细内容参考教材第四章第二节实验三）。

③人外周血涂片的镜下观察、绘图。

4．机能实验操作基本技能

（1）实验动物的基本操作方法

本节内容先被分为两次实验：

实验动物基本操作一：

主要让同学们学习掌握常用动物的捉拿固定、性别鉴别与编号方法，以及实验动物给药剂量的计算、给药方法及处死方法等（详细内容参考教材第五章第一节实验一）。

实验动物基本操作二：

主要让同学们学习掌握实验动物常用的麻醉、脱毛方法，实验标本的采集方法，常用动物的取血方法以及脏器的辨认（详细内容参考教材第五章第一节实验二）。

（2）机能基本实验常用技术

本内容主要包括以下两个实验：

常用动物手术操作技术

本实验主要让同学们学习掌握常用实验动物手术器械的辨认、使用，主要包括蛙类实验常用手术器械和哺乳类动物手术器械；

以及常用手术的缝合、打结与拆线方法（详细内容参考教材第五章第二节实验一）。

生物机能实验系统操作技术

生物机能实验系统是研究生物机能活动的主要设备和手段之一。

它可以使研究人员、老师和学生通过该系统观察到各种生物机体内或离体器官中探测到的生物机能信号，同时还可根据使用者的命令对数据进行指定的处理和分析（详细内容参考教材第五章第二节实验二）。

（3）急性动物实验的基本技术

本容包括以下两个实验：

蛙实验

本实验主要让同学们学习掌握蟾蜍或蛙的捉拿、脑和脊髓的破坏及手术器械的使用方法，同时通过该实验进一步加强对生物机能实验系统的操作练习（详细内容参考教材第五章第三节实验一）。

兔实验

本实验主要让同学们学习掌握家兔的麻醉、脱毛、颈部解剖结构及插管术、血压的测定等基本实验方法，同时进一步掌握压力换能器和生物机能实验系统的使用（详细内容参考教材第五章第三节实验二）。

5．考试

（1）考试内容

本课程为考试课，考试内容包括三个方面：

一理论考试，所占比例为30%；

二操作考试，所占比例为40%；

三平时成绩，所占比例为30%。

（2）考试方法

理论考试：

根据教材和实验指导以及教学过程中教授的内容进行期末结束的笔试考试。

考试时间由教务处统一安排；

考试题型主要包括：

单项选择题、多项选择题、名词解释和问答题等形式。

操作考试：

根据实验课中开设的实验操作内容，进行单人、抽签考试。

平时成绩：

主要包括三大部分，一是预习报告，占5%，二是实验报告，占20%，三是出勤情况，占5%。

凡是迟到、早退者，每次扣0.5分；

凡是旷课2次以上者，取消参加操作和理论考试。

二、实验守则

（一）实验一般规则（详细内容参考教材第一章第二节）

1．实验前准备工作

（1）思想准备：

主要包括：

实验开设时间；

实验开设内容；

进行实验的地点；

充足的睡眠；

充足的体力；

预习实验内容；

实验中可能出现的问题以及解决办法；

实验室内、外环境等。

（2）物质准备：

实验学习用具；

白大衣；

预习报告；

实验教材或实验指导等。

2．实验中注意事项

（1）严格遵守实验室各项规定；

（2）听从老师的安排；

（3）认真听讲；

（4）认真观察老师的示教操作；

（5）积极主动参与实验；

（6）规范操作；

（7）注意安全；

（8）认真记录；

（9）注意实验的每一细节，培养严谨的科学态度和实事求是的工作作风；

（10）加强团结协作的团队精神等。

3．实验后工作

（1）清点实验物品；

（2）刷洗实验物品；

（3）整理和清扫实验室；

（4）填写各种实验使用纪录；

（5）关闭水、电、气开关；

（6）关闭门窗；

（7）按时完成实验报告等。

（二）实验室安全规则（详细内容参考教材第一章第三节）

1．基本安全规程

进入实验室所遵循的“十要”和“十不要”：

十要：

（1）要熟悉实验室内、外环境

（2）要熟悉常用有害物质的表示

（3）要保持实验台面的整洁

（4）要将长发盘起

（5）配制试剂要在实验台或实验架上进行

（6）要在毒气柜内操作一些有毒试剂的操作

（7）要严格遵守实验室各项规定

（8）要服从实验室老师的安排

（9）要按指定地点存放实验污物

（10）离开实验室要洗手

十不要：

（1）未经批准不准进入实验室

（2）单独一人不可作危险性实验

（3）精神、身体状态不佳不要做实验

（4）不可在实验室里打闹、奔跑

（5）不可在实验室内进食

（6）不可湿手摸电器

（7）不可穿拖鞋、短裤进入实验室

（8）未经批准不可将实验室物品带出实验室

（9）不可俯视或嗅闻化学试剂

（10）遇到紧急情况不可慌乱

2．仪器使用规程

（1）在动用仪器设备前必须认真阅读仪器操作规程，经指导教师同意后方可使用；

（2）使用仪器有疑问时应请教指导教师，不可自行勉强操作；

（3）实验中要爱护仪器、设备，严格按照操作规程进行操作；

（4）与当次实验无关的仪器及设备不得任意动手操作；

（5）精密、大型仪器、公用仪器与试剂只能在原处使用，不得随意挪动；

（6）实验过程中要注意安全，若仪器设备发生故障或损坏时，要及时报告指导教师，不可擅自拆卸和处理；

（7）使用一切电器设备时，要确实检查线路是否正常，电压、电流与功率是否匹配，要小心操作严防触电；

（8）凡损坏仪器设备者，应主动向指导教师说明原因并接受检查，填写报损单，根据情况按有关规定赔偿；

（9）对违反操作规程或擅自动用其它设备造成损坏者，由事故人作书面检查，赔偿损失，视认识程度和情节轻重，酌情免予或给予处分；

（10）仪器使用完毕后，关闭各项程序和开关，必要时填写使用记录。

3．化学试剂使用规程

（1）取试剂前应两次核对标签，以保证试剂或药品名称和浓度准确；

（2）从试剂瓶中取出的试剂，不得再倒回原瓶中，若取了过量试剂，可分给其他同学或抛弃；

（3）勿将试剂瓶盖接口内部朝下放置而接触到其他表面，以防污染；

（4）绝对不允许随意混合各种化学试剂和药品，以免发生意外事故；

（5）不可擅自携带化学试剂和药品外离实验室；

（6）若需要用吸量管量取试剂时，必须使用橡皮球或定量加液器吸取，严禁用嘴直接吸取；

（7）使用剧毒、麻醉、致癌，放射药品等，应严格按照规定的审批手续领取，规范操作，注意安全，废液要妥善处理，用剩的毒、麻药品应如数交还；

（8）一切能产生烟雾、毒性、刺激性气体、挥发性有毒物质的实验或腐蚀性气体试剂应放在通风橱内，如实验室无此设备，则必须开窗通风并在远离火源的地方进行等。

4．易燃易爆物品使用注意事项

（1）使用加热的电器（电炉、电热套、电热板）或燃气时要作到火着人在，人走火灭；

（2）点燃的火柴用后立即熄灭，不得乱扔；

（3）使用易燃试剂时要特别注意远离火源，加强空气流通，用毕立即盖紧瓶塞；

（4）严禁在有火源的地方倾倒易燃试剂；

（5）严禁把这些易燃试剂放在烧杯等广口器皿内直接在火上加热；

（6）钾、钠和白磷等暴露在空气中易燃烧，所以钾、钠应保存在煤油中，白磷则可保存在水中；

（7）酒精灯在添加酒精时，应将灯焰先行熄灭，酒精添加切勿过满；

引燃酒精灯时，必须用火柴或纸片引燃之，切勿将酒精灯直接持至另一已燃着的灯焰上引燃；

（8）不纯的氢气遇火易爆炸，操作时必须严禁接近明火。

在点燃前，必须先检查并确保纯度；

（9）银氨溶液不能留存，因久置后会变成氮化银也易爆炸；

（10）某些强氧化剂（如氯酸钾、硝酸钾、高锰酸钾等）或其混合物不能研磨，否则将引起爆炸。

5．放射性实验室的安全防护规则

（1）进入实验室前一般应先通风；

（2）进入实验室必须穿戴防护衣帽、眼镜等；

（3）严格遵守放射源领用制度和专人专管制度；

（4）实验室内应明显划分活性区和非活性区，严禁在实验室内进食、饮水、吸烟和存放食物；

（5）所有操作要规范，放射性物质必须作好放射性标志；

（6）在进行强放射性操作前，一般都要作无放射性物质的模拟实验（又叫冷实验），待操作熟练之后才能进行放射性的实验；

（7）放射性废物必须同普通垃圾分别存放，并严格标识；

（8）实验中发生放射性事故时，应保持镇静，立即报告指导教师，在教师的指导下进行放射性去污；

（9）工作人员的皮肤暴露部位有伤口未愈时，一般要暂停放射性操作；

（10）实验室要保持经常的清洁和整齐，要定期用剂量仪进行检测，发现沾污要及时去污、清洗；

（11）工作人员离开实验室前，必须仔细洗手，洗完后要经仪器测量，达到本底水平方可离开。

（三）实验室废物处理

1．实验室废物处理应遵循的原则

（1）集中回收，分类处理；

（2）降低毒性或腐蚀性，减少污染，达标排放；

（3）尽量重新回收和再利用。

2．实验室废气排放的主要办法

物理处理方法：

（1）吸附法；

（2）溶解法；

（3）回流法；

（4）袋装法；

（5）稀释法；

（6）掩埋法等。

化学处理方法：

（1）燃烧法；

（2）沉淀法；

（3）中和法；

（4）还原法；

（5）生物法等。

3．实验室废液处理原则及办法

（1）实验室废液处理原则：

分类存放；

严格标示；

分类处理；

严禁直接注入下水道。

（2）实验室废液标示的内容：

废弃液体名称；

废弃液体浓度；

废弃时间；

废弃液体组成成分；

废弃人签名。

（3）实验室废液处理常用方法：

稀释法；

中和法；

沉淀法；

水解法；

离子交换法；

焚烧法；

吸附法；

氧化法；

蒸馏法；

萃取法等。

4．实验废弃动物的处理原则：

死、活动物分别放置；

死亡动物确保死亡；

统一放置，统一处理；

不许带出实验室；

严禁出售和食用。

（四）实验室常见事故处理

1．实验中意外事故处理原则

（1）沉着冷静不慌乱；

（2）紧急处理并疏散；

（3）报告老师或报警；

（4）量力而行保安全。

2．玻璃仪器伤害的处理

处理原则及方法：

清理出破碎玻璃；

处理伤口：

轻者药水涂抹或消毒包扎；

重者送医院处理。

3．烫伤的处理

（1）立即使伤处降温；

（2）伤处皮肤未破时可涂擦饱和NaHCO3溶液或用NaHCO3粉调成糊状敷于伤处，也可涂抹獾油或烫伤膏；

（3）如果伤处皮肤已破，可涂些紫药水或5％的苦味酸溶液涂抹伤口；

（4）严重者送医院救治。

4．腐蚀剂致伤的处理

（1）立即先用大量清水冲洗；

（2）再用具有中和作用的溶液冲洗；

（3）再用清水冲洗；

（4）可涂少许油膏保护局部皮肤；

（5）严重者送医院诊治。

5．触电的处理

（1）立即切断电源；

（2）使触电者尽快脱离电源；

（3）保证呼吸通畅；

（4）必要时进行人工呼吸；

（5）严重时应立即送医院抢救。

6．火灾的处理

（1）火灾的紧急处理：

迅速报警；

转移易燃易爆物品；

相应手段灭火；

安全疏散。

（2）那些物质燃烧后不宜使用水进行灭火：

汽油、乙醚、甲苯等有机溶剂；

酒精及其它可溶于水的易燃液体；

电器设备所引起的火灾；

活泼金属（如钾、钠等）及磷化物与水接触易引发火灾。

（3）那些物质燃烧后宜使用水进行灭火：

纸张；

棉花；

纺织品；

木材；

易燃气体等。

（4）衣服着火后应注意的事项：

衣服被燃着时，切忌带火奔走；

未及皮肤的衣服着火时，可赶快脱下衣服压灭火焰，或用专用防火布覆盖着火处；

伤及皮肤时，可以其他衣物等蘸上水包裹身体，或躺在地上滚动以灭火。

7．实验动物咬伤的处理

（1）立即消毒伤口；

（2）必要时包扎伤口；

（3）必要时可注射疫苗；

（4）严重时送医院处理。

第二章实验操作与实验报告

掌握实验操作的基本要求；

了解实验结果处理中常用的一些术语；

掌握实验报告的规范书写要求。

一、实验操作基本要求

（一）实验前准备工作

1．集体准备工作

（1）按照学号进行分室和分组；

（2）每个实验室不超过30人；

（3）每个实验室推选出一位室长：

室长主要负责与带教老师的联系、沟通（第一次上课时，要交给实验带教老师一份本实验室的学生名单，记好带课老师的联系电话）；

实验课的点名；

实验预习报告和实验报告的收缴；

实验中存在问题的反馈；

实验室值日小组的安排；

本实验室实验器材的领用、交还及赔偿等工作。

（4）实验室分组：

每实验室可按4-5人分为一组；

每组推选一位组长；

组长主要负责本实验小组的实验预习报告和实验报告的收缴；

实验中本实验小组存在问题的反馈；

本实验小组实验器材的领用、交还及赔偿；

本实验小组值日生的安排等工作。

2．个人准备工作

（1）认真阅读教材和实验指导用书

（2）初步了解和掌握实验内容和实验方法步骤

（3）发现问题和初步探讨解决问题的方法

（4）认真书写预习报告

（5）做好实验中所需的各种物质准备

（二）实验过程要求

1．积极主动参与每次实验　

2．注重培养科学严谨、实事求是的工作作风　

3．自觉、认真地完成各项技能训练

4．认真做好原始实验记录

5．按时完成实验报告

（三）原始实验记录包括的内容

1．时间和地点；

2．项目来源、编号和名称；

3．重要影响因素的记录；

4．实验过程的设计思路、目标和参考文献；

5．实验所需物品资料的相关信息；

6．实验步骤、方法及实验结果；

7．统计学处理方法；

8．实验失败原因及分析等。

二、实验结果的处理与误差

（一）实验误差

1．概念：

误差（error）一般指系统误差，即一个量在测量、计算或观察过程中由于某些错误或通常由于某些不可控制因素的影响，而造成偏离真值的数量。

又称变异（variance）或差异（discrepancy），亦即测定结果与真值的不符合性。

2．分类：

（1）系统误差

（2）随机误差

（3）过失误差

3．表示方法及计算方法

（二）准确度、精确度和精密度

1．准确度：

准确度是指在一定测量条件下，观测值及其函数的估值与其真值的偏离程度。

2．精确度：

精确度是指指定数字时的准确性，即表达数字时所带的有效位数。

3．精密度：

精密度是指一组测量值之间相互吻合的程度，即重复测量之间相互接近的程度。

（三）有效数字

有效数字也称有效位数，用来表示测量值或基于测量值的计算结果的精确度。

它由确定数字和末位不确定数字组成。

2．位数确定方法及原则

（1）以“0”开头的小数，开头的“0”都不记为有效数字。

（2）小数末位的“0”都记为有效数字。

（3）没有小数点的数字，末尾的“0”无法确定是否为有效数字，一般用科学计数法反映其有效数字。

3．运算原则

（1）做加减计算时，以小数点的后位数最少的数字为准。

（2）乘除法计算时，有效数字的位数取决于有效数字位数最少的数字。

（3）在计算平均值时，求四个或四个以上准确度接近的近似值的平均值时，则平均值的有效位数，可较原数据的有效位数多一位。

（4）有效数字的规则不适用于确切数。

4．数的修约原则

（1）数的修约一般遵守四舍六入五留双的规则。

（2）在作多步计算时，应保留中间步骤的非有效数字，以减小最后结果的误差。

三、实验报告的书写规范

（一）实验报告包括内容

1．实验目的

2．实验原理

3．实验材料

4．实验方法与操作步骤

5．结果

6．讨论

7．致谢

8．参考文献

9．其他根据实验不同要求应填写的内容

（二）实验报告格式

实验报告的各式根据实验内容不同，具体的要求格式也不同。

详细要求见于各实验老师的要求。

第二篇医学实验基本操作技能

第三章生物化学和分子生物学实验基本操作技能

实验一、常用玻璃仪器及器皿的使用、洗涤和干燥

【实验目的】

熟悉生物化学实验室规则和要求；

熟悉常用玻璃仪器及器皿名称和规格，了解使用注意事项；

学习并练习常用仪器的洗涤和干燥方法。

【实验操作要点和注意事项】

1．常用玻璃仪器及器皿的使用

玻璃是由二氧化硅和碳酸钠等原料在高温下熔炼而成，抗酸，不耐碱，对大部分化学试剂稳定。

（１）容器类

仪器

规格

一般用途

使用方法和注意事项

普通试管、离心试管

有刻度的按容积（mL）分；

无刻度用管口直径×

管长（mm）表示。

1.反应容器；

2.离心试管用于沉淀分离。

1.反应液体不超过试管容积的1/2，加热时不超过1/3；

2.加热液体时，管口不要对人；

3.离心管只能用于水浴加热。

烧杯

以容积（mL）表示。

反应容器或作配制溶液的容器。

1.反应液体不能超过烧杯用量的2/3；

2.加热时放在石棉网上。

锥形烧瓶

2.滴定操作。

同上

滴管

由尖嘴玻璃管和橡胶乳头构成

吸取少量（数滴或1-2mL）试剂

1.溶液不得吸进橡皮头；

2.用后立即洗净内、外管壁。

滴瓶

以容积（mL）表示，分无色、棕色两种。

盛放液体试剂和溶液。

1.不能加热；

2.棕色瓶盛放见光易分解或不稳定的试剂；

3.取用试剂时，滴管要保持垂直，不接触接受容器内壁。

细口瓶、广口瓶

以容积表示。

广口瓶盛放固体试剂，细口瓶盛放液体试剂和溶液。

1.不能直接加热；

2.取用试剂时，瓶盖倒放在桌上；

3.盛放碱液时用橡皮塞。

烧瓶

以容积（mL）表示

在常温或加热条件下作反应容器。

盛放液体量不能超过烧瓶容量的2/3。

洗气瓶

净化气体用。

1.接法要正确；

2.洗涤液注入容器高度的1/3，不得超过1/2。

（２）量器类

量筒

以所能量度的最大容积（mL）表示。

量取一定体积的液体。

不能作为反应容器，不能加热，不可量热的液体。

容量瓶

配制标准溶液用。

1.溶质先在烧杯内全部溶解，然后移入容量瓶；

2.不能加热，不能用毛刷洗刷。

吸量管、移液管

精确移取一定体积的液体用。

1.不能在烘箱中烘干，不能加热；

2.吸取血液、尿、组织样品及粘稠试剂的吸量管，用后应及时用自来水冲洗干净。

微量移液器

1、2、10、20、100、200、1000ul（单位：

ul）。

用于准确移取一定体积的溶液，尤其是较小体积的溶液。

1.连续按压数次，以调节空气；

2.调节体积至所需的刻度；

3.接上Tip头，注意密封。

（３）漏斗类

普通漏斗

以直径（cm）表示。

1.过滤；

2.引导溶液入小口容器中。

1.不能用火直接灼烧；

2.过滤时，漏斗颈尖端必须紧靠承接滤液的容器壁。

分液漏斗和滴液漏斗

以容积（mL）、漏斗颈长短表示。

用于液体的分离、洗涤和萃取。

2.分液时，下层液体从漏斗管流出，上层液体从上口倒出。

吸滤瓶和布式漏斗

布式漏斗：

磁质或玻璃质，以容量（mL）或斗径（cm）表示。

吸滤瓶：

两者配套，用于粗颗粒沉淀的减压过滤。

1.滤纸要略小于漏斗的内径；

2.先开抽气管，再过滤。

过滤完毕后，先分开抽气管与抽滤瓶的连接处，后关抽气管。

砂芯漏斗

漏斗为玻璃质。

砂芯滤板为烧结陶瓷。

用作细颗粒沉淀以及细菌的分离。

不能用于含氢氟酸、浓碱液及活性炭等物质体系的分离。

（４）专用器皿

表面皿

以口径（cm）表示。

1.用来盖在蒸发皿、烧杯等容器上；

2.作为称量试剂的容器。

1.不能用火直接加热；

2.作盖用时，其直径应比被盖容器略大；

3.用于称量时应洗净烘干。

培养皿

以玻璃底盖外径（cm）表示。

放置固体样品。

不能加热。

蒸发皿

瓷质，以上口直径（cm）表示。

2.灼烧固体。

注意不要碰碎，高温时不要用冷水去洗，防止破裂。

干燥器

以内径表示，分普通、真空干燥。

存放物品，以免物品吸收水汽。

1.干燥器内的干燥剂按时更换；

2.小心盖子滑动而打破。

坩埚和坩埚钳

瓷质。

灼烧固体用。

1.灼烧时放在泥三角上，直接用火烧；

2.加热时，要用坩埚钳拿取。

研钵

瓷质，以钵口直径（mm）表示

研磨固体。

2.不能代替作反应容器用。

白瓷