高中生物专题2微生物的培养与应用课题1微生物的实验室培养练习1word版可打印Word下载.docx

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C．接种环用灼烧的方法灭菌

D．常用灭菌方法有灼烧灭菌、干热灭菌等

消毒是指用温和的理化方法杀死体表或内部的部分微生物（不包括芽孢和孢子），灭菌则是用强烈的理化因素杀死体内外所有的微生物，包括芽孢和孢子。

B

3．制备牛肉膏蛋白胨固体培养基的步骤是（　　）

A．计算、称量、倒平板、溶化、灭菌

B．计算、称量、溶化、倒平板、灭菌

C．计算、称量、溶化、灭菌、倒平板

D．计算、称量、灭菌、溶化、倒平板

制备牛肉膏蛋白胨固体培养基，应先根据需要计算各成分用量，然后称量、溶化、灭菌、倒平板。

C

4．平板冷凝后，要将平板倒置，其原因是（　　）

A．接种时再拿起来方便

B．在皿底上标记日期等方便

C．正着放置容易破碎

D．防止皿盖上的冷凝水落入培养基造成污染

平板倒置主要是防止皿盖上的水珠落入培养基造成污染。

5．氯苯化合物是重要的有机化工原料，其不易降解，会污染环境。

某研究小组依照下列实验方案（图1）筛选出能高效降解氯苯的微生物SP1菌。

培养基配方如表：

液体培养基

蛋白胨

牛肉膏

氯苯

氯化钠

硝酸铵

无机盐（无碳）

蒸馏水

Ⅰ号

10g

5g

5mg

－

1L

Ⅱ号

50mg

3g

适量

Ⅲ号

20～80mg

1L

图1

（1）配制Ⅱ号固体培养基时，除添加Ⅱ号液体培养基成分外，还应添加1%的________。

（2）培养基配制时，灭菌与调pH的先后顺序是____________。

（3）在Ⅱ号培养基中，为SP1菌提供氮源的成分是_____________。

（4）在营养缺乏或环境恶劣时，SP1的菌体变成一个圆形的休眠体，这种休眠体被称为________。

（5）将SP1菌接种在含不同浓度氯苯的Ⅲ号培养液中培养，得到生长曲线（如图2）。

从图2可知，SP1菌在________培养条件下最早停止生长，其原因是________________________________________。

图2

本题考查培养基的配制原则以及微生物的实验室培养过程，意在考查学生的图表信息转换与分析能力。

配制固体培养基时应在液体培养基的成分中再加入琼脂作为凝固剂。

在配制培养基时应先调节pH，后进行灭菌，防止灭菌后在调节pH的过程中污染培养基。

在营养缺乏、环境恶劣时，微生物可以形成休眠体——芽孢，来度过不良环境。

据图可知，SP1菌在20mg/L氯苯培养条件下菌体数最早达到最大值，即最早停止生长，原因是在Ⅲ号培养液中，氯苯是唯一碳源，由于20mg/L氯苯培养条件下碳源最少，因此也最早被耗尽，使SP1菌停止生长。

（1）琼脂　

（2）先调pH，后灭菌　（3）硝酸铵

（4）芽孢　（5）20mg/L氯苯　碳源最早耗尽

1．下列有关培养基的叙述正确的是（　　）

A．培养基是为微生物的生长繁殖提供营养的基质

B．培养基只有两类：

液体培养基和固体培养基

C．固体培养基中加入少量水即可制成液体培养基

D．微生物在固体培养基上生长时，可以形成肉眼可见的单个细菌

培养基除固体、液体培养基外，还有半固体培养基，B错误；

固体培养基中加入了凝固剂，加入少量水仍为固体培养基，C错误；

微生物在固体培养基上生长时，可以形成肉眼可见的菌落，但不一定是单个菌落，D错误。

A

2．有关培养基配制原则表述正确的是（　　）

A．任何培养基都必须含有碳源、氮源、矿质元素、水及生长因子

B．碳源和氮源必须具有一定比例，碳元素的含量最多，其次为氮元素

C．微生物的生长除受营养因素影响外，还受到pH、氧、渗透压的影响

D．营养物质的浓度越高越好

培养自养型微生物时不需要添加碳源，培养固氮菌时可以不加氮源；

一般来说，培养基中含量最多的是水；

配制培养基时要合理控制营养物质的浓度，必须考虑微生物对渗透压的耐受能力。

3．下面对微生物培养中灭菌的理解不正确的是（　　）

A．防止杂菌污染

B．灭菌就是杀死培养基中的杂菌

C．培养基和培养设备都必须进行灭菌

D．灭菌必须在接种前

灭菌的目的是防止杂菌污染，但实际操作中不可能只消灭杂菌，而是消灭全部微生物。

4．自养型微生物与异养型微生物的培养基的主要差别在于（　　）

A．碳源　　　　　　B．氮源

C．无机盐D．生长因子

自养型微生物主要包括进行光合作用或进行化能合成作用的微生物，他们能够利用CO2来合成自身所需的有机物；

而异养型微生物主要是直接利用外界的有机物来合成自身所需的有机物，所以他们培养基的主要差别就在于自养型微生物主要是利用无机物中的碳，而异养型微生物主要是利用有机物中的碳。

5．下列制备牛肉膏蛋白胨固体培养基的叙述，错误的是（　　）

A．操作顺序为计算、称量、溶化、倒平板、灭菌

B．将称好的牛肉膏连同称量纸一同放入烧杯

C．将培养基冷却至50℃左右时进行倒平板

D．将平板冷却凝固约5～10min后将平板倒过来放置

制备牛肉膏蛋白胨固体培养基的步骤是计算、称量、溶化、灭菌、倒平板，顺序不能颠倒。

牛肉膏容易吸潮，所以当牛肉膏融化并与称量纸分离后，用玻璃棒取出称量纸。

将培养基冷却至50℃，用手触摸锥形瓶感觉刚刚不烫手时倒平板，平板冷却后还需倒置。

6．平板冷却凝固后要将平板倒置，其意义是（　　）

A．利于大肠杆菌的接种

B．有利于大肠杆菌培养

C．利于培养基的冷却

D．防止皿盖冷却水倒流入培养基，防止杂菌污染

平板冷凝后，皿盖上会凝结水珠，凝固后的培养基表面的湿度也比较高，将平板倒置，既可以使培养基表面的水分更好地挥发，又可以防止皿盖上水珠落入培养基，造成污染。

7．纯化大肠杆菌的步骤正确的是（　　）

A．样品稀释→划线或涂布法分离→培养成单菌落

B．样品稀释→培养成单菌落→划线或涂布法分离

C．样品稀释→划线或涂布→分离→培养成单菌落

D．样品稀释→划线→涂布→分离→培养成单菌落

微生物的分离与纯化主要包括样品稀释、划线或涂布及培养三个基本步骤，其中划线或涂布法是对微生物进行分离，培养是将分离后的菌种培养成单个菌落。

8．某研究小组从有机废水中分离微生物用于废水处理。

下列叙述正确的是（　　）

A．培养基分装到培养皿后进行灭菌

B．转换划线角度后需灼烧接种环再进行划线

C．接种后的培养皿须放在光照培养箱中培养

D．培养过程中每隔一周观察一次

在配制培养基的过程中要先灭菌后倒平板，A错误；

转换划线角度后要对接种环进行灼烧灭菌再进行划线，B正确；

接种后放置在恒温培养箱中进行培养，C错误；

培养过程中一般隔12h或24h观察一次，D错误。

9．现有菌液10mL，按下图进行系列稀释，在最后一个试管中测得细菌数为20个，则未稀释前的试管中有细菌（　　）

A．600个B．1200个

C．2×

107个D．2×

106个

从本题的图中可看出，每次都是稀释10倍，总共稀释6次，即稀释106倍，最后一个试管为20个，即原来菌液中应该有细菌2×

107个。

10．为了保持菌种的纯净需要进行菌种的保藏，下列有关叙述不正确的是（　　）

A．对于频繁使用的菌种，可以采用临时保藏的方法

B．临时保藏的菌种一般是接种到试管的斜面培养基上

C．临时保藏菌种容易被污染或产生变异

D．对于需要长期保存的菌种，可以采用低温4℃保藏的方法

低温4℃保藏属于临时保藏的方法。

11．为了获得纯度高的大肠杆菌，需要对大肠杆菌进行培养和分离。

培养大肠杆菌一般用牛肉膏蛋白胨琼脂培养基。

（1）培养大肠杆菌，配制固体培养基的基本步骤：

计算→称量→__________→__________→倒平板。

（2）称量时，由于牛肉膏比较黏稠，可以用______挑取，放在______上称量。

由于牛肉膏和蛋白胨________，称量时动作要迅速，称量后要及时盖上瓶盖。

（3）在牛肉膏蛋白胨琼脂培养基上的大肠杆菌能生长，说明培养基含有________________________________________________

等大肠杆菌生长所需的营养要素。

（4）微生物纯化培养可以通过多种接种方法如________和________等，使大肠杆菌在固体培养基上形成单个________，从而获得纯菌株。

配制牛肉膏蛋白胨琼脂培养基的基本步骤：

计算→称量→溶化→灭菌→倒平板。

称量时，可用玻璃棒挑取，放在称量纸上称量，称量时动作要迅速。

牛肉膏蛋白胨琼脂培养基中含有大肠杆菌所需要的碳源、氮源、无机盐、水等营养要素，所以常用来培养大肠杆菌。

微生物纯化培养的接种方法最常用的是平板划线法和稀释涂布平板法，可使大肠杆菌在固体培养基上形成单个菌落，从而获得纯菌株。

（1）溶化　灭菌　

（2）玻璃棒　称量纸　容易吸潮

（3）碳源、氮源、无机盐、水　（4）平板划线法　稀释涂布平板法　菌落

12．下表为牛肉膏、蛋白胨培养基的成分列表，据此回答：

NaCl

H2O

琼脂

0.5g

1.0g

100mL

2.0g

（1）蛋白胨在培养基中的作用是___________________________

______________________________________________________。

（2）此培养基如要培养霉菌时需将培养基的pH值调至________。

（3）从配制培养基直到培养完成，所采用的预防杂菌感染的方法有：

_______________________________________________________

_____________________________________________________。

（4）在培养基凝固前要搁置斜面，其目的是__________________

（5）若用此培养基纯化大肠杆菌，最常用的方法是___________、__________________，最终，使大肠杆菌在固体培养基上形成单个__________________，从而获得纯菌株。

（1）提供碳源、氮源、生长因子　

（2）酸性　（3）高压蒸汽灭菌、灼烧接种环、酒精棉擦手、棉塞塞试管口、在火焰旁接种　（4）扩大接种面积　（5）平板划线法　稀释涂布平板法　菌落

13．下图是倒平板操作示意图，请回答下列问题：

（1）正确的操作顺序是______________________。

（2）平板冷凝后将平板倒置原因是_________________________

（3）在倒平板过程中如果不小心将培养基溅在皿盖和皿底之间的部位，这个平板还能培养微生物吗？

__________________，原因是___

（1）ACBD　

（2）利于水蒸气的散发、防止杂菌污染　（3）不能　这样容易被杂菌污染