兽医药理学实验教案Word文件下载.docx
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如有破损应报告指导老师,以酌情处理。
()注意安全,严防触电、火灾、动物咬伤及中毒等事故的发生。
()搞好清洁卫生,关好门窗、水电后才能离开实验室。
.常用实验动物的捉持和给药方法
实验一、小白鼠的捉持和给药方法
一、捉持方法
右手提起鼠尾,放在粗糙物(如鼠笼)上面,轻向后拉其尾,此时小鼠前肢抓住粗糙面不动;
用左手拇指和食指捏住双耳及头部皮肤,无名指、小指和掌心夹其背部皮肤及尾部,便可将小鼠完全固定.腾出右手,可以给药(图)。
此外,也可单手捉持,难度较大,但速度快。
先用拇指和食指抓住小鼠尾巴,用小指、无名指和手掌压住尾根部,再用腾出的拇指、食指及中指抓住鼠双耳及头部皮肤而固定(图)。
图
图
图
小白鼠的捉持法
二、给药方法
.灌胃法
小鼠固定后,使腹部朝上,颈部拉直,右手用带灌胃针头的注射器吸取药液(或事先将药液吸好),将针头从口交插入口腔,再从舌背进沿上腭进入食道(图)。
若遇阻力,应退出后再插,切不可用力过猛,防止损伤或误入气管导致动物死亡。
灌胃量一般不超过。
.腹腔注射法
抓鼠方法同上,右手持注射器(~号针头),从耻骨联合上一侧向头端以°
角刺入腹腔(应避开膀胱)。
可先刺入皮下~,再刺入腹腔,以防药液外漏(图)。
针头刺入部位不宜太高太深,以免刺破内脏。
注射量一般为~。
小白鼠的灌胃法
小白鼠的腹腔注射法
.皮下注射法
一般两人合作。
一人左手抓住小鼠头部皮肤,右手拉住鼠尾;
另一人左手提高背部皮肤,右手持住注射器(针头号同上),将针头刺入提起的皮下(图)。
若一人操作,左手小指和手掌夹住鼠尾,拇指和食指提起背部皮肤,右手持注射器给药。
一般用量为~。
图小白鼠的皮下注射法
图小白鼠的尾静脉注射法
.肌肉注射法
两人合作时,一人抓鼠方法同上,另一人左手拉直一侧后肢,右手持注射器,注射部位多选后腿上部外侧(针头号同上)。
如一人操作,抓鼠方法类似腹腔注射,只是药液注射在肌肉内。
每腿的注射量不宜超过。
.尾静脉注射法
将小鼠置于待置的固定筒内,使鼠尾外露,并用酒精或二甲苯棉球涂擦,或插入℃~℃温水中浸泡片刻,使尾部血管扩张。
左手拉尾,选择扩张最明显的血管;
右手持注射器(~号针头),将针头刺入血管,缓慢给药。
如推注有阻力而且局部变白,说明针头不在血管内,应重新插入。
穿刺时宜从近为尖部/处静脉开始,以便重复向上移位注射(图)。
一般用药量为~,不宜超过。
实验二、家兔的捉持和给药方法
一般左手抓住兔颈背部皮肤,将其提起,右手托住臀部称坐位姿态。
不要抓两耳,以防兔挣扎。
二、给药方法
.耳缘静脉注射法
一人操作时,将兔放入固定箱或试验台上,选好耳缘静脉(在耳背的下缘),拔除局部的毛,用酒精棉球涂擦,并用食指轻弹耳壳,使血管扩张.用左手的食指和中指夹住耳根部,拇指和无名指夹住耳尖部拉直右手将抽好药液的注射器(~号针头)阵头刺入血管,用拇指和食指使针头和兔耳固定,将药液推入.如针头在血管内,推注轻松,并可见血液被药液冲走如不在血管内,则推注有阻力,耳局部变白或肿胀,应立即拔除重新注射.注射完毕,则用手指或棉球压在针眼上,再拔出针头,并继续按压片刻,防止出血(图)。
如两人操作,一人夹住兔子,右手暴露血管,压住耳根部使血管充盈,另一人注射给药。
图
两人合作,一人坐下,两腿夹住兔身,左手固定兔耳,右手抓住前肢;
另一人将开口器从嘴角插入口腔,压在舌上,并向后翻转几下,使兔舍伸直。
取号导尿管由开口器中部的小孔插入食道约。
如插入气管,兔子则剧烈挣扎、呼吸困难。
也可将导尿管外端浸入水中,不见气泡则表示插在胃中。
插好后,把注射器接在导尿管上,将药液推入。
再注入少量空气,使导尿管中所有药液进入胃内(图)。
灌完药液后,先慢慢抽出导尿管,再取出开口器。
一般用药量为~㎏。
.腹腔、肌肉、皮下注射法
基本同小白鼠,唯针头可稍大(~号),给药量可稍多,一般腹腔为~㎏,肌肉、皮下为~㎏。
.眼结合膜内给药法
将兔固定在兔箱内或夹在腋下,左手拇指和食指拉开兔下眼睑成杯状,中指压住眼内眦,以防药液由鼻泪管流入鼻腔内而被吸收。
滴入药液~滴,将下眼睑向上合拢,使眼球充分接触药液。
约后将手放开,让药液自然流出。
实验三、大白鼠的捉持和给药方法
大白鼠比小白鼠攻击性强,不要突然袭击去抓它,以免被咬伤。
捉持前先戴上手套,右手夹住尾巴,放在粗糙面上;
左手拇指和食指捏住颈及前颈部,其余三指握住整个身体。
有力适当,过松容易挣脱而被咬伤,但用力过大会使其窒息死亡。
类似于小白鼠,只是工具和用药量大点,静脉给药除尾静脉注射外还可舌下静脉给药。
.药理学总论实验
实验一、药物的基本作用
【目的】
.了解药物的兴奋作用和抑制作用;
局部作用和吸收作用等。
.观察硫喷妥钠的抗惊厥作用。
【材料】
器材:
、注射器、普通剪
药品:
普鲁卡因溶液、的硫喷妥钠溶液
动物:
家兔只
【方法】
取家兔只,称体重。
先观察正常活动情况,如四肢站立和行走姿态;
并用针刺其后肢,测其有无痛觉反射。
然后于一侧坐骨神经周围(使家兔作自然俯卧式,在尾部坐骨嵴与股骨头间摸到一凹陷处)注入普鲁卡因溶液(),观察同侧后肢有无运动和感觉障碍;
待局部作用明显后(分钟),在将普鲁卡因溶液注入肌肉。
待出现中毒症状(惊厥),立即由耳缘静脉缓慢注射的硫喷妥钠溶液至肌肉松弛为止(约)。
【注意事项】
.测试痛觉反射针刺后肢踝关节处,轻度适中。
.定坐骨神经部位时后肢拉直,在坐骨嵴与股骨头间摸到一凹陷处即是。
注射部位尽量靠近股骨头,针尖插到髂骨稍回退一点。
.普鲁卡因注于坐骨神经周围,可产生传导阻滞,剂量过大或误入血管可致中毒,主要表现有中枢先兴奋后抑制,如不安、惊厥、昏迷、呼吸抑制等。
【思考题】根据实验观察,分析药物的基本作用:
.药物的兴奋作用和抑制作用表现有那些?
.哪些表现是药物的局部作用?
哪些表现是药物的吸收作用?
.普鲁卡因的选择作用表现在哪些方面?
..哪些是治疗作用?
哪些是不良反应?
.有没有观察到药物的拮抗作用?
实验二、剂量对药物作用的影响
【目的】观察不同剂量戊巴比妥钠对小鼠作用的差异。
天平、注射器
、、戊巴比妥钠溶液
小白鼠只
取小鼠只,以苦味酸溶液涂毛作不同记号。
称其体重及观察小鼠正常时的活动情况。
各鼠经腹腔注射不同剂量的戊巴比妥钠溶液,分别置于小笼中,密切观察先后出现的反应。
【结果】
鼠号
标记
体重
剂量
潜伏期
给药前表现
给药后表现
()
()
()
.小鼠对戊巴比妥钠可能出现的反应,按由轻到重程度有:
活动增加、呼吸抑制、翻正反射消失、反射亢进、麻醉、死亡等。
.比较各鼠所出现反应的程度和发生快慢。
【思考题】
了解药物的剂量和作用的关系对于进行药理学试验和临床用药有何重要意义?
实验三、不同给药途径对药物作用的影响
【目的】
观察不同给药途径对硫酸镁作用的影响
天平、注射器、小鼠灌胃针头
的硫酸镁水溶液
体重相近的小白鼠只
取小白鼠只,一只由腹腔注射的硫酸镁水溶液();
另一只用同样剂量的硫酸镁水溶液灌胃。
分别置小笼中,观察两鼠的表现,并记录结果。
给药途径
给药后表现
.掌握正确的灌胃操作技术,不要误入气管或插破食管,前者可致窒息,后者可出现如同腹腔注射的吸收症状,重则死亡。
.注射后作用发生较快,需留心观察。
给药途径不同时,药物的作用为什么有的会出现质的差异,有的会出现量的不同?
实验四、肝脏功能状态对药物作用的影响
【目的】观察肝功能损伤对戊巴比妥钠作用的影响
天平、注射器、小鼠观察木盒或鼠笼
药物:
四氯化碳油溶液、戊巴比妥钠溶液
取正常小鼠和肝功能已破坏的(实验前小时皮下注射四氯化碳油溶液)小鼠各只,称其体重。
分别由腹腔注射戊巴比妥钠溶液(),比较小鼠麻醉时间(以翻正反射消失为指标)。
实验结束时将小鼠拉断颈椎处死,剖取肝脏,比较两组动物肝脏外观的不同。
【结果】
组别
鼠号
体重()
药量()
潜伏期()
维持时间()
肝脏肉眼观察
正常组
损伤组
.如室温在℃以下,应给麻醉小鼠保暖,否则动物将因体温下降,代谢减慢而不易苏醒。
.四氯化碳是一种肝脏毒物,其中毒动物常被作为中毒性肝炎的动物模型,用于观察肝脏功能状态对药物作用的影响及筛选和试验肝脏功能保护药。
其油溶液可用植物油配制;
亦可用甘油配成%的制剂,试验前小时皮下注射。
.四氯化碳中毒小鼠的肝脏比较肿大,有的充血,有的变成灰黄色,触之有油腻感,其小叶比正常肝脏更清楚。
.为什么损害肝脏的小白鼠注射戊巴比妥钠后作用时间延长?
.讨论肝脏功能与临床用药的关系?
.亦可用硫喷妥钠代替戊巴比妥钠。
实验五、药物作用的个体差异及常态分布规律
【目的】了解药物反应的个体差异和常态分布规律
【方法】将全班各试验小组在试验中正常小鼠腹腔注射戊巴比妥钠后翻正反射消失持续时间数据集中,按下表进行统计,以了解药物反应的个体差异。
翻正反射消失持续时间()以下
-
以上
小鼠数(只)
再以翻正反射消失持续时间组距为横坐标,每个组距内的小鼠数为纵坐标,仿照示例绘制直方图,观察各组距内的小鼠数是否呈常态分布。
药物反应的个体差异规律对于判断药理实验和临床上用药治病的结果有何指导意义?
.传出神经系统药物实验
实验一、拟胆碱药和抗胆碱药对家兔瞳孔的影响
【目的】观察阿托品和毛果芸香碱对瞳孔的影响。
【材料】器材:
家兔固定盒、瞳孔测量尺、注射器
家兔只
【方法】取无眼疾的家兔只,自然体位置于兔固定盒内,测两侧瞳孔的大小。
然后用注射器向两侧眼结膜囊中滴入%硫酸阿托品溶液滴,另一侧滴入%的硝酸毛果芸香碱溶液滴。
给药后,再测其瞳孔大小。
最后,将两药交换滴入,给药后,重复测量瞳孔大小。
兔眼
滴入药物
给药前
瞳孔直径()
给药后
第一次
第二次
左
右
硫酸阿托品
毛果芸香碱
毛果芸香碱
硫酸阿托品
.滴药液时,要把下眼睑拉成杯状,同时压迫内眦部,以免药液经鼻泪管流入鼻腔而吸收。
待滴药后,再将手放开。
.测量瞳孔时,请勿触及角膜。
.试验始终,要求兔头朝一个方向固定,以免由于光强度的变化影响结果。
滴入毛果芸香碱及阿托品后,瞳孔为何有不同的变化?
如果将毛果芸香碱换成毒扁豆碱,结果会如何?
为什么?
实验二、敌百虫的中毒及其解救
【目的】观察敌百虫中毒的症状及阿托品、解磷定作用。
、注射器、测瞳尺
%精制敌百虫溶液、%硫酸阿托品溶液、%解磷定溶液
【方法】
.取家兔只,称重。
分别观察并记录活动情况、呼吸(频率、幅度、节律是否均匀)、瞳孔大小、唾液分泌、大小便、肌张力及有无肌震颤等。
.给家兔腹腔注射%精制敌百虫().随时观察,并记录上述各指标的变化。
待中毒症状明显后,立即耳缘静脉注射%硫酸阿托品溶液()观察上述指标的变化。
.耳缘静脉注射%解磷定溶液()。
观察上述指标的变化。
观察阶段
活动情况
呼吸情况
瞳孔大小
唾液分泌
大小便次数及形状
肌张力及震颤
给药前
给敌百虫后
给阿托品后
给解磷定后
.有机磷农药为剧毒药,切勿污染。
如手接触后,可用肥皂水清洗,但敌百虫则不能用碱性物。
.本试验为分析阿托品和解磷定的解救机制而设计的,临床上须将两药合用,才能获得最好的效果。
.有机磷农药静脉注射时中毒症状发生块,抢救需及时。
如果采用带小鼠灌胃针头的注射器,有家兔的嘴角滴入口腔,则潜伏期稍长,中毒症状的观察更明显。
敌百虫亦可改用腹腔注射给药。
这样还能保存耳缘静脉以备抢救注药。
如经尚为出现中毒症状,可追加/量。
有机磷农药中毒的机制是什么?
阿托品和解磷定为什么能抢救有机磷农药中毒?
在临床上如何应用?
实验三、乙酰胆碱和阿托品对家兔离体肠管的影响
【目的】观察乙酰胆碱和阿托品对家兔离体肠管的作用,分析其作用原理。
学习离体器官的测定方法
离体器官测定仪、木槌、手术刀、手术剪、注射器
×
乙酰胆碱溶液、%硫酸阿托品溶液、%氯化钡溶液,台式液
.离体肠管的制备
取体重为㎏左右的家兔只,用木追击枕骨处死,迅速剖腹,取空肠和回肠的上端,置于盛有冷的台式液的器皿中,沿肠壁分离肠系膜,并将肠管剪数段,轻压出肠内容物,并冲洗干净,将肠管剪成~厘米的小段备用。
.安装离体肠管试验装置
打开离体器官测定仪,调整状态,让浴槽温度维持在±
℃。
在肠管两端结扎穿线,一端系于通气钩上,然后放入盛有台式液的浴槽中,另一端系于测定仪的换能器上,并连接记录仪。
给肠肌约左右的前负荷,并调节通气速度(约个气泡),稳定后,调整记录仪的走纸速度,描记肠肌正常活动曲线。
.加药:
用注射器依次向浴槽中加入下列物质,描记曲线变化。
()×
乙酰胆碱溶液,当肠管显著收缩后,再加入
()%硫酸阿托品溶液,当记录曲线下降到基线后再加入:
()×
乙酰胆碱溶液,如作用不明显,接着追加:
()%氯化钡溶液,待作用稳定后,立即加入:
()%的硫酸阿托品溶液
剪下肠管收缩曲线,分析比较其作用。
.剪取家兔肠管及冲洗、挂线等操作必须轻柔。
.肠管两端穿线时切勿将肠腔缝死。
.浴槽中液体,根据浴槽大小而定,应覆盖肠管。
用受体学说分析阿托品为什么能对抗乙酰胆碱对肠管的收缩作用?
.中枢神经系统药物
实验一、巴比妥类药物的催眠作用时间和强度的比较
【目的】比较几种巴比妥类药物对动物作用强度和维持时间的长短
、注射器、婴儿秤、兔笼、秒表
%硫喷妥钠溶液、%戊巴比妥钠溶液、%苯巴比妥钠溶液、苦味酸溶液
家兔只(㎏)
取健康家兔,称重,编号。
观察各兔正常活动及翻正反射情况。
按家兔体重经耳缘静脉给药。
号家兔给%硫喷妥钠溶液(),号家兔给%戊巴比妥钠(),号家兔给%的苯巴比妥钠()。
药后观察翻正反射消失时间及恢复时间,按下表记录。
兔号
体重
药物与剂量
(㎏)
翻正反射
时间给药
消失时间
恢复时间
作用特点
.注药时不宜太快,特别是硫喷妥钠。
.进行本试验时需保持环境安静。
根据实验结果讨论上述巴比妥类药物作用强度、快慢、欠缺的差别及原因。
实验二、安定抗士的宁惊厥作用
【目的】观察安定对士的宁中毒动物的解救作用。
与注射器、小儿头皮针、大烧杯或玻璃钟罩、天平、鼠笼
%或%士的宁溶液、%或%安定溶液、生理盐水、苦味酸溶液
小白鼠只或家兔只
取小白鼠只,各于腹腔注射%士的宁溶液~体重(~),其中一只接着注射%安定溶液~()另一只注射生理盐水,观察两鼠的反应情况。
取家兔只,与先在耳缘静脉插入头皮针,然后各兔腹腔注射%士的宁溶液(),待出现强直性惊厥后,一只耳缘静脉注射%安定溶液(),另一只则由耳缘静脉注射生理盐水,记录两兔最后表现情况。
动物号(鼠、兔)
体重(或㎏)
药物与剂量
反应情况
%士的宁
生理盐水
%安定
.苯实验亦可仅用只家兔,不用生理盐水对照,以节约动物。
.右侧腹腔注射部位不宜太高,进针不宜过深。
.士的宁亦可按由耳缘静脉给药。
士的宁致惊厥作用快,要事先准备好安定。
.有的动物,安定一次注射量不够,可适当加量。
安定为什么能解救士的宁所致的惊厥?
实验三、氯丙嗪对小白鼠激怒反应的影响
【目的】观察氯丙嗪的安定作用
型药理生理多用仪及其附件激怒盒、注射器、天平、鼠笼
%盐酸氯丙嗪溶液、生理盐水、苦味酸溶液
小白鼠(异笼喂养,雄性,体重在左右)只。
【方法】多用仪的使用方法见附录。
测阈值电压
取小鼠只,称重,标记,随机分为两组。
每次取一组放入激怒刺激盒内,接通多用仪电源并打开电源开关,由小到大调节交流电压输出强度,至小鼠出现激怒反应(两鼠竖立对峙、互相撕咬)为止(约)。
记录两组小鼠出现激怒反应时的阈值电压()。
然后一组小鼠腹腔注射%盐酸氯丙嗪(),另一组小鼠注入相同容量的生理盐水,给药后分别以给药前的电压刺激,观察两组小鼠给药前后反应的差异。
鼠号
体重
()
药物
激怒阈值电压
激怒反应
给药前
给药后
氯丙嗪
生理盐水
.药理生理多用仪后面板上的开关拨向激怒,而不能拨向恒温一边。
.刺激电压应从小到大,过低不引起激怒,过高易致小鼠逃避,同组小鼠用药前后应一致。
.每组小鼠体重不要相差太大。
.本实验如果采用异笼喂养,体重雄性大白鼠,效果更佳。
亦可用血管钳同时夹两鼠的尾部(距尾尖/处),使之疼痛,引起两鼠竖立互斗,代替药理生理多用仪。
根据实验结果,说明氯丙嗪安定作用的机理与临床应用。
实验四、氯丙嗪对小白鼠的耐缺氧的影响
【目的】观察氯丙嗪对动物基础代谢的影响
磨口瓶(容积需校正)、秒表、注射器、天平
%盐酸氯丙嗪溶液、%硫酸异丙肾上腺素溶液、生理盐水、苦味酸溶液、凡士林
小白鼠()只
【方法】:
取体重相似(±
≤)、性别相同的小鼠只,标记,分别于腹腔注射%盐酸氯丙嗪()、%硫酸异丙肾上腺素()、生理盐水。
后分别放入磨口瓶中,并用凡士林涂抹瓶塞周围,盖入密封,立即用秒表记录时间,记录各鼠停止呼吸时间。
鼠号
药物与剂量
存活时间
全班实验存活时间均值
存活时间延长百分率
(%,)
存活时间延长百分率(%)=(给药组平均存活时间均值-对照组平均存活时间)/对照组平均存活时间×
%
.磨口瓶用广口,且容积必须相同,加盖密封使不漏气,瓶底可放钠石灰(),易吸收二氧化碳与水气。
.动物性别与体重的一致,可减少动物的差异性。
氯丙嗪对动物提高缺氧的耐受力与基础代谢有何关系,其在临床有何意义?
实验五、哌替啶、阿司匹林、金铃子散的镇痛作用
【目的】掌握用热板法测试镇痛药物、比较镇痛效价的方法。
恒温水裕、大烧杯、温度计、注射器、鼠笼、秒表、纱布条。
%盐酸哌替啶溶液、%阿司匹林混悬液、金铃子散水煎醇沉液()、生理盐水、苦味酸溶液。
雌性小鼠(~)只。
【方法】将恒温水浴调节在±
℃,放入大烧杯固定,将雌性小白鼠投入烧杯,以秒表测定其痛觉反应时间(以舔足为指标),共测次,间隔,取其平均值不超过的鼠作为正式实验使用。
取合格小鼠只,称重,编号。
号鼠腹腔注射%盐酸哌替啶溶液(),号鼠用%阿司匹林混悬液(),灌胃,号鼠腹腔注射金铃子散液()、号鼠腹腔注射生理盐水。
在给药后、、、、各测痛觉反应一次。
在测试中