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MCV=红细胞比容/红细胞数

红细胞数参考值:

80-94fl

[2].红细胞比容测定(Hct):

抗凝全血经离心沉淀后,测得下沉的红细胞在全血中所占容积的百分比值。

参考值男性42-49%女性37-48%

[3].平均红细胞血红蛋白量(MCH):

指平均每个红细胞内所含血红蛋白的量。

MCH=血红蛋白(g/l)/红细胞百万数/µ

l参考值:

26-32pg[4].平均红细胞血红蛋白浓度(MCHC):

指平均每升红细胞中所含血红蛋白浓度

参考值:

310-350g/LMCHC=血红蛋白(g/L)/红细胞比容(%)×

100g/L

[5].红细胞容积分布宽度(RDW):

RDW=S.D./平均红细胞体积

平均红细胞体积参考值:

11.5-14.5%

RDW的统计学实质是红细胞大小的变异系数CVRDW<

14%

类型MCVMCHMCHC临床类型

大细胞贫血>

100>

32310-350巨幼细胞贫血

正常细胞贫血80-9426-32310-350AA急性失血性贫血,溶血性贫血,骨髓病性贫血

单纯小细胞贫血<

80<

26310-350慢性炎症性贫血肾性贫血

小细胞低色素贫血<

26<

300缺铁性贫血,铁粒幼细胞性贫血,珠蛋白生成障碍性贫血,慢性失血性贫血

4.临床意义:

(红细胞增加)

相对性增高:

各种原因导致的血浆容量减少,使红细胞相对增多。

剧烈呕吐、严重腹泻、大面积烧伤、多汗、多尿。

绝对性增高:

由于缺氧而致红细胞代偿性增多,红细胞增多的程度与缺氧程度成正比

生理性:

胎儿、新生儿、高原地区居民、剧烈体力劳动、情绪激动时,红细胞可一过性增多

病理性:

严重慢性心、肺疾患,如阻塞性肺气肿、肺源性心脏病、紫绀型先天性心脏病,真性红细胞增多症

(红细胞减少)

妊娠中、后期,血容量增加约25%,引起血液稀释;

6个月~2岁的儿童由于生长发育迅速,血容量急剧增加而致造血原料相对不足;

老年人造血功能明显减低致红细胞减少;

月经期暂时引起下降。

各种类型贫血:

如缺铁性贫血、巨幼红细胞性贫血、溶血性贫血、再生障碍性贫血、继发性贫血等。

5.网织红细胞计数及正常参考值:

[1]网织红细胞是晚幼红细胞脱核后,在完全成熟之前的过渡型红细胞。

由于胞浆中尚存核糖体、核糖核酸等嗜碱物质,用煌焦油兰等染料进行活体染色后,胞浆中可见蓝绿或蓝色的网状结构,故名网织红细胞。

成人:

0.5%-1.5%新生儿(<

3月):

2%-6%

[2]网织红细胞计数的意义

增多:

骨髓增生旺盛。

常见于溶血性贫血,尤其是急性溶血性贫血(可达20%以上)、急性大失血。

贫血治疗有效。

如缺铁性贫血、巨幼细胞性贫血,经相应治疗后1-2日即开始,1周左右达最高峰

减少:

骨髓增生低下,如再生障碍性贫血、溶血性贫血有再生障碍危象时

6.白细胞测定

[1]白细胞计数LeukocyteCount

方法:

显微镜计数法、全自动血细胞分析仪法

计数法:

以2%冰醋酸对血液作定量稀释,同时破坏红细胞。

然后将悬液充入细胞计数池内,低倍镜计数4个大方格内白细胞总数。

计算原则同红细胞。

原理(显微镜计数原理):

用2%乙酸对血液作定量稀释,同时破坏红细胞。

混匀并滴入计数室中,低倍显微镜下计数4大方格内的白细胞数,经换算得每升血液中白细胞总数。

公式:

WBC/L=4格白细胞总数4×

10×

20×

106

Δ.ΔΔ×

109/L

参考值:

成人4.0~10.0×

109/L;

新生儿15.0~20.0×

109/L

临床意义

(白细胞增高)

生理性增高:

见于妊娠期、分娩时、新生儿;

剧烈运动、淋浴;

严寒、高温;

午后高于清晨;

饮食后高于饮食前等;

病理性增高:

急性感染如肺炎、扁桃体炎、急性阑尾炎。

严重组织损伤、大量细胞破坏。

如术后12~76h,WBC常>

10.0×

109/L;

急性心肌梗死后1~2d,常见WBC明显增高;

急性溶血亦见WBC增多,增多成分以中性分叶核粒细胞为主。

急性大出血:

如脾脏破裂或宫外孕输卵管破裂后,WBC迅速增多常达20.0×

109/L。

这可能是应激状态、或内出血一过性缺氧。

急性中毒:

如安眠药、滴滴畏中毒,WBC可高达20×

109/L以上,代谢性酸中毒。

如糖尿病、酮体症、酸中毒及慢性肾炎尿毒症时,也常见WBC增多,均以中性粒细胞为主。

白血病及恶性肿瘤:

急、慢性白血病、肝癌、胃癌等肿瘤细胞可产生促粒细胞生成素,并能吸引骨髓储备池WBC释放。

(白细胞减少)

某些革兰氏阴性杆菌感染如伤寒、副伤寒杆菌感染时,白细胞总数可低至2.0×

病毒感染。

某些血液病如再生障碍性贫血;

巨幼红细胞性贫血;

恶性网状细胞病(恶组);

急性非白血性白血病。

脾功能亢进破坏过多、脾素抑制骨髓生成;

慢性理化损伤;

电离辐射,如X线、放射性核素等;

服氯霉素。

自身免疫性疾病如系统性红斑狼疮。

[2]白细胞分类计数与临床意义

中性粒细胞(neutrophil):

游走、吞噬50~70%

嗜酸性粒细胞(eosinophil):

致敏反应0.5~5%

嗜碱性粒细胞(basophil):

释放组织胺、肝素0~1%单核细胞(monocyte):

吞噬、清除死亡细胞及异物3~8%

淋巴细胞(lymphocyte):

参与体液、细胞免疫20~40%

中性粒细胞Neutrophil

生理特性:

渗出性、变形性、趋化性、吞噬性

骨髓血液

分裂池成熟池储备池边缘池循环池

4-5d1-3d2-3d

核左移:

原粒早幼粒中幼粒/晚幼粒杆状核/杆状核分叶核/分叶核细胞核左移:

周围血中杆状核粒细胞增多甚至出现晚幼粒、中幼粒、早幼粒等细胞时均称为核左移

杆状核粒细胞增多:

6%:

轻度左移;

10%:

中度左移;

25%:

重度左移或称为类白血病反应

类白血病反应:

患儿男,2.5岁,日本籍,于10天前因受冷而发热,自测体温38℃(腋下),无畏寒、头痛、呕吐、腹泻,就诊于当地医院,血常规WBC28.9×

109/L,阿莫西林0.125g3/日治疗,无明显好转,4天后患儿面、背及双上肢皮肤反复出现散在红色丘疹,停药否无区别。

1999年7月5日急诊住我院。

实验室检查,血象:

Hb110g/L,WBC23×

109/L,血小板121×

109/L,幼稚型异常淋巴56%,成熟淋巴21%,嗜酸性粒细胞2%,中性粒细胞21%,骨髓穿刺二次,骨髓细胞分类象同血涂片象。

细胞核右移:

正常人周围血中性粒细胞以三叶核者为主,若五叶者超过5%时为核右移,此时常伴有白细胞总数减少。

一过性地出现核右移是正常现象。

如在疾病进行期突然出现核右移的变化,则表示预后不良

中性粒细胞临床意义

见于妊娠期、分娩时、新生儿期;

剧烈运动、热水浴;

饮食后高于饮食前等

急性感染;

严重组织损伤;

急性大出血;

急性中毒;

白血病及恶性肿瘤

病例:

患者朱全妹,女性,47岁,因砖墙砸伤腰骶臀部致左下肢活动受限伴腰骶臀部皮肤发紫5天于2001—12—04由急诊收治入院。

1.创伤性失血性休克2.腰骶部、髂后部、右臀后部皮肤严重挫擦伤伴皮下积血3.骨盆严重骨折4.会阴部、肛门严重挫裂伤

血常规检查结果:

Hb:

92g/LRBC:

3.0×

1012/LPLT:

271×

109/L

WBC:

32.7×

109/L:

中幼粒细胞:

2%;

晚幼粒细胞:

5%

杆状核粒细胞:

35%;

多核粒细胞:

45%;

淋巴细胞:

9%单核细胞:

4%

中性粒细胞减少:

某些革兰氏阴性杆菌感染;

某些血液病;

脾功能亢进;

自身免疫性疾病

淋巴细胞Lymphocyte

病理性增多见于:

病毒性感染;

某些慢性感染;

各类淋巴细胞性白血病

淋巴细胞减少见于:

接触放射线;

应用肾上腺皮质激素及肾移植术后、AIDS

单核细胞Monocyte

单核细胞病理性增多见于:

心内膜炎、疟疾、黑热病;

急性感染的恢复期;

活动性肺结核及粟粒性结核;

慢性单核细胞白血病

嗜酸性粒细胞Eosinophil

增高见于:

过敏性疾病;

寄生虫病;

皮肤病;

慢性嗜酸性白血病及淋巴瘤

7.血小板计数platelet

是由骨髓中成熟巨核细胞生成;

在止血过程中起着重要的作用

计数方法:

显微镜计数法;

全自动血细胞分析仪法

参考值100~300×

血小板增多>

400×

109/L;

见于血小板增多症、慢性粒细胞增多症、真性红细胞增多症、骨髓纤维化、脾切除等。

血小板减少<

100×

见于血小板减少紫癜(ITP)、再生障碍性贫血、急性白血病、X射线照射。

病例患者:

女32岁已婚,有一8岁女儿,无业

主述:

经常头痛、疲乏、失眠。

右肋骨下疼痛,胸骨疼痛。

患者长期服用减肥药,无间断

血液检验结果:

WBC:

15.4×

109/LRBC:

5.53×

NC:

85.2%Hb:

150g/L

LC:

11.6%PLT:

1321×

MO:

1.8%RDW:

17.8%

EOS:

0.9%BAS:

0.5%

8.血红蛋白测定

氰化高铁血红蛋白法全自动血细胞分析仪

原理:

除Hbs外,多种血红蛋白(Hb)均可被高铁氢化钾氧化成高铁血红蛋白(Hi),再与CN-结合生成稳定的棕红色氧化高铁血红蛋白(HiCN),在540nm处有一吸收峰

9、全自动血细胞分析仪

多项参数测定

仪器组成:

1.主机2终端机3打印机

阅读报告:

1.18、23项参数中英文报告2.图解3.警告标志4.含义报告

库尔特原理:

孔径阻抗细胞计数原理

白细胞自动化分类

二项式分类粒细胞和非粒细胞

三项式分类淋巴、中性粒细胞和中间细胞

五项式分类嗜中、嗜碱、嗜酸、淋巴、单核细胞

第三章贫血

Keypoints

1,贫血的检验诊断标准

2,贫血发病病因分类

3,何谓WCV|、RDW

4,巨幼细胞性贫血的发生原因

5,缺铁性贫血血象特征

一、贫血总论

1.贫血Anemia:

是一种症状,是指人体单位体积循环血中,红细胞计数、血红蛋白含量和红细胞比积低于正常参考值——即称为贫血

2.RBC:

主要功能:

携带O2、运输CO2

膜组成:

膜糖、膜脂、膜蛋白

膜结构:

不对称性、流动性、骨架

膜功能:

物质运输、抗原性、变形性、免疫功能

Hb:

是红细胞中的运输蛋白,主要功能是吸收肺部大量CO2并输送到身体各组织

Hct:

是指抗凝全血经离心沉淀后,测得下沉的红细胞在全血中所占容积的百分比值

3.贫血各系统的表现:

全身软弱无力、疲乏困倦、皮肤粘膜苍白

呼吸及循环系统:

心悸、气短、心率加快、呼吸加重等,严重者发生心力衰竭

消化系统:

食欲不振、腹胀、恶心、呕吐、消化不良、腹泻或便秘等

泌尿生殖系统:

尿可出现少量蛋白,肾功能轻度减低,甚至发生尿少、尿闭和急性肾功能衰竭

神经系统:

头痛、头晕、畏寒、反应迟钝、耳鸣、眼花

4.贫血的病因与发病机制分类

红细胞生成减少:

骨髓造血功能障碍、红细胞生成素产生缺陷、造血物质缺乏或失利用

红细胞破坏增多:

红细胞内在异常:

膜缺陷、酶缺陷、珠蛋白链生成异常、阵发性睡眠性血红蛋白尿

红细胞外在异常:

免疫性、机械性、化学与物理、感染、单核吞噬细胞系统功能亢进

红细胞丢失过多:

急性、慢性失血

贫血分类

贫血发病病因分类

缺铁性贫血、巨幼细胞性贫血

溶血性贫血、血红蛋白病

红细胞膜缺陷致溶贫

自身免疫性溶贫

阵发性睡眠性血红蛋白病

红细胞形态分类

类型MCV(fl)MCH(pg)

大细胞型>100>32

正常80~9426~32

单纯小细胞<80<26

小细胞低色素<80<26

红细胞骨髓增生特点分类

骨髓增生活跃性贫血:

缺铁性、溶血性、失血后贫血

骨髓增生不良性贫血:

原发性及继发性再生障碍性贫血

巨幼红细胞性贫血:

营养性巨幼红细胞性、恶性贫血

贫血的诊断

了解贫血程度、类型、病因

询问病史、体格检查、实验室诊断

5、贫血的检验诊断

血红蛋白含量Hb

轻度:

成年男性<

120g/L;

成年女性<

110g/L

中度:

<

90g/L重度:

60g/L

红细胞计数

RBC(男)4.0~5.5×

1012/L;

红细胞比积

HCT成年男性:

41~53%;

成年女性:

36~46%

周围血涂片检查

有助于贫血的形态学检查;

可观察红细胞的大小、呈多染色性、红细胞发育成熟、中央淡染区、异型红细胞。

二、贫血各论

1、缺铁性贫血IrondeficiencyAnemia

是由于体内用来制造Hb的贮存铁已被用尽,红细胞生成受到障碍而引起的典型的小细胞低色素性贫血。

此为贫血中最常见的类型,可发生于各年龄组,但以育龄期妇女和婴幼儿尤为多见

血象:

实验室检查

典型的小细胞低色素性贫血

Hb含量、红细胞计数均低于正常

红细胞中心淡染区扩大、或呈环状

血涂片中多见椭圆形、靶形红细胞

MCV、MCH均降低

网织红细胞未治疗前:

1-2%;

铁剂治疗后7-10天可达“高峰”

骨髓象:

骨髓增生活跃或明显活跃

红系增生明显,粒:

红降低或倒置

各阶段的红细胞都较正常为小

中幼与晚幼红细胞显得特别小

铁染色细胞外铁消失

白细胞和血小板系统无改变

血液化学检查

血清铁的含量明显减少

血清铁蛋白的含量明显减少

运铁蛋白饱和度(%)明显减少

骨髓细胞外铁检查

在酸性环境中,加入20%亚铁氢化钾,而产生的普鲁士蓝反应。

此为敏感的可靠的诊断方法,凡是缺铁性贫血,细胞外铁均减少

贫血病历:

患者王婷艳,女性,8岁,因面色苍白、疲乏无力、头晕、心悸和心率加快,于1998年8月收住我院。

患者在外院经铁剂治疗近半年,症状无改变。

56g/L;

RBC:

1.64×

MCV:

63FL;

RDW:

18.4%

血液涂片:

RBC为典型小细胞低色素型,RBC中心淡染区域扩大,可见5%靶形细胞和形状不规则的RBC

2.巨幼细胞性贫血megaloblasticanemia

是指叶酸、维生素B12缺乏或其他原因引起脱氧核糖核酸(DNA)合成障碍所致的一类贫血。

DNA生物合成受累引起细胞核分裂障碍,致骨髓红细胞系发生巨型改变。

我国以叶酸缺乏为多见。

病因和发病机理:

叶酸、维生素B12在细胞核DNA合成过程中都是重要的辅酶,如缺乏则导致细胞核DNA合成受抑,细胞向G2期转变障碍,而阻滞在S期,而RNA合成量正常,主要分布于细胞浆内。

因此出现细胞体积增大,胞浆成熟,胞核幼稚的“老浆幼核”现象

大红细胞正色素性贫血

MCV、MCH通常增高

红细胞呈大卵圆形、形状不规则

可见有核红细胞、巨幼红细胞

红细胞内出现Howell-Jolly小体

白细胞、血小板计数都减低

中性粒细胞分叶过多,达6-8叶

有核细胞增生明显活跃

红比例1:

1

巨幼红细胞的出现为特点

染色质排列疏松细致呈“幼核老浆”象

粒系巨型变以晚幼粒、杆状核明显

再生障碍性贫血Aplasticanemia

再障是由多种病因引起的骨髓造血干细胞明显减少。

其特点是外周血液中红细胞、粒细胞和血小板都明显减少。

临床上常出现较重的贫血、感染和出血。

正常细胞正常色素性贫血

三系细胞数量减少,程度不一

网织红细胞计数降低

白细胞数量减少,淋巴细胞相对增多

3.溶血性贫血Hemolyticanemia

是指红细胞破坏加速而骨髓造血功能代偿不足时发生的一类贫血

表现为三大特征:

贫血、黄疸、脾肿大

实验室检查血象:

正常细胞正常色素性贫血;

网织红细胞显著增加;

血清间接胆红素增加出现黄疸

尿内尿胆原排泄增多;

血浆、尿内出现游离Hb;

尿内含铁血黄素呈阳性

溶血原因分析的检验

膜缺陷:

RBC渗透脆性T、自身溶血T、酸溶血T、蔗糖水溶血T

酶缺陷:

自身溶血T及纠正T、变性珠蛋白小体生成T、酶的活性测定

珠蛋白合成异常:

血红蛋白电泳红细胞镰变T、异丙醇沉淀T

免疫性溶血:

抗人球蛋白T、冷凝集T、冷溶血T

红细胞膜缺陷性贫血RBCMembranDeficiencyAnemia

红细胞膜的病变:

通透性、柔韧性、变形性

红细胞酶的缺陷:

参与红细胞糖代谢酶

4.血红蛋白病Hemoglobinopathy

珠蛋白生成障碍性贫血:

珠蛋白合成不足;

地中海性、海洋性

异常血红蛋白病:

珠蛋白一级氨基酸构成异常;

碱基突变、基因缺失、重组、融合

第五章骨髓细胞学检查

Keypoints:

血细胞发育演变一般规律;

各系各阶段的正常骨髓象;

常用组织化学染色特点;

骨髓细胞检查的临床意义

1、骨髓增生程度分级及其临床意义

2、粒红之比正常、增高及减少见于哪些情况

3、AML与MDSBM细胞学诊断标准

4、ALL各型的骨髓检查

第一节 血细胞的生成与发育HematogenesisandDevelopment

干细胞——STEMCELL

1、自我更新能力RENEWAL

2、高度增殖PROLIFERATION

3、多向分化潜能PLURIPOTENTIAL

二、血细胞成熟规律TheMaturationLawofHemocytes

胞体:

大→小(巨核细胞相反)

胞浆:

(1)量 少→多(淋巴细胞例外)

(2)颜色 深蓝→浅蓝→淡红→红细胞→橘红

(3)颗粒 无→嗜天青(早幼)→特异性(中性、嗜酸、嗜碱)(basophilicmyeloblast核/质散在粗大紫黑色spots)

胞核:

(1)大小 大→小

(2)核形 规则→不规则

(3)染色质 细致而疏松→粗而紧密

(4)核仁 有→无

(5)核膜 不明显→明显

核浆比:

核大质少→核小质多(巨核细胞相反)

第二节正常血细胞形态学

各系各阶段的正常骨髓象

第三节 常用血细胞化学染色检查

过氧化物酶染色

PeroxidasePOXstaining↓

H2020→二氨基联苯胺→金黄沉淀

阳性:

粒(强)单(弱、细)系。

胞质中蓝黑or棕黑颗粒。

苏丹黑(SBB)对脂类染色反应同POX;

中性粒细胞碱性磷酸酶染色NeutrophilAlkalinephosphataseNAP

1.判断标准及分级

标准评分胞质中阳性染色颗粒

-0分无

+1分少量或弥散浅色

++2分中等量或弥散深色

+++3分较多或弥散较深色

++++4分充满大颗粒或弥散深色

2.NAP阳性正常成熟中性粒细胞

3.临床意义

增高:

严重化脓性感染类白血病反应真红骨髓纤维化ALL慢粒急变 MM再障恶性淋巴瘤原发性血小板减少性紫癜

减低:

CMLAMLPNH恶组

鉴别诊断:

CMLvs类白血病反应PNHvsAAALLvsAML

碱性磷酸酶的表达

许多资料表明,rat、mice的桑格胚细胞和囊胚细胞均有AKP表达,Mice的EC和ES中均含有丰富的AKP。

而在已分化的EC和ES中AKP呈弱阳性或阴性。

猪、兔的桑格胚和早期囊胚AKP呈阳性。

因此,AKP常用来作为鉴定EC或ES分化与否的标志之一。

糖原染色Periodicacid-Schiffreaction,PAS

正常:

幼红:

阴性巨核系、血小板:

阳性早幼粒以下各期粒细胞渐强,均匀、红色。

判断标准胞质中红色颗粒

1.有核红细胞2.淋巴细胞

0无0无

+分散少数或色浅+有一圈

++1-2个浓颗粒环/弥散红色++有两圈

+++较粗颗粒小块/大块红色+++有三圈

++++有红色大团块

其他染色

非特异性脂酶染色

中性~,α-醋酸萘脂酶NAE

酸性~,酸性醋酸萘脂酶ANAE

碱性~,α-丁酸萘酶NBE

特异性脂酶染色

氯醋AS-D萘酚酯酶(NAS-DCE)染色

表P32

骨髓细胞铁染色

细胞外铁(储存铁):

骨髓铁以含铁血黄素形式贮存于网状细胞

细胞内铁:

BM中、晚幼红细胞内铁颗粒

BM铁染色的临床意义:

1.缺铁性贫血诊断、治疗指导

BMsmear细胞外铁消失铁粒幼细胞%下降。

治疗后细胞外铁增加

2.铁粒幼细胞贫血诊断幼红细胞含铁粒粗而多

3.判断机体内铁贮存和利用骨髓贮铁用完细胞内外铁明显降低or消失。

小细胞贫血而BM内外铁正常or增多铁利用障碍

4.MDS铁粒幼比例增高出现环形铁粒幼细胞

5.非缺铁性

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