孕前优生健康检查临床检验操作规范文档格式.docx

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红细胞稀释液（枸橼酸钠1g，36%甲醛1ml，氯化钠0.6g加蒸馏水至100ml,过滤两次后备用）

光学显微镜、血细胞计数板

1.改良牛鲍计数板每年要鉴定一次。

2．当白细胞结果过高（WBC﹥100×

106/L），红细胞计数结果应校正。

3．每个中方格间计数相差超过20个应重新充池。

4．血液稀释倍数必须准确，否则可造成假性增高。

5．采血部位不同，结果不同。

（二）检验方法:

白细胞显微镜计数

白细胞稀释液（冰乙酸2ml，蒸馏水98ml，10g/L亚甲蓝溶液3滴，过滤后备用）

1.与红细胞数比较:

在正常情况下,红细胞数/白细胞数约为（500-1000）:

1,根据红细胞数值,可以估计白细胞计数是否正确。

2．与血涂片白细胞分布密度一致性。

（三）检验方法:

血小板显微镜计数

1%草酸铵稀释液、荧光桃红液

1.血小板稀释液应防止微粒和细菌污染,定期监测。

2．采血时针刺应稍深，避免用力挤压使血小板聚集破坏。

3．充池后应静置10min，否则影响计数结果。

（四）检验方法:

氰化高铁血红蛋白测定法

KCN0.05g,高铁氰化钾0.2g,无水磷酸二氢钾0.14g,非离子表面活性剂0.5-1.0ml,加蒸馏水至1000ml.）

分光光度计

1.高铁氰化钾试剂应4℃保存,不能0℃保存。

2．试剂应新鲜，至少一个月配置一次。

3．试剂中白细胞或球蛋白异常增高时，可干扰实验结果。

（五）检验方法:

白细胞分类计数

瑞氏染液

1.血涂片的质量要求：

1）载玻片应干燥清洁、无油性，酸碱性。

2）血推片的边缘应平滑，推时应用力均匀。

2．1）血涂片干燥后进行染色，贫血涂片应适当缩短染色时间。

2）冲洗时不能先到掉染液，应用小水流冲洗，以免血膜脱落，也可防止沉淀沉渣在血膜上。

3．分类计数的质量要求：

1）先用低倍镜浏览全片，尤其注意血膜处，大细胞和幼稚细胞在涂片尾部，防止漏检。

2）当白细胞有聚集现象时，应重新推片。

（六）检验方法:

三分类血细胞分析仪

血细胞仪稀释液、溶血剂、清洗液

1.质控水平：

高、中、低三个水平（至少一个水平）

2．质控规则：

目前行业要求血常规至少选择12S和13S规则。

3．质控记录：

保存三年以上。

4．质控结果分析：

在发现违反质控规则后，分析失控原因，重新测定质控，测试合格后方可进行检测。

三、尿常规检验

干化学试带法

尿干化学试纸条

尿液分析仪

1.正确留取标本，在规定时间送检。

避免标本污染（含强氧化物如漂白粉）出现假阳性和假阴性（含高浓度VitC等）；

标本久置，葡萄糖被细菌分解或细胞酶分解，引起加阴性。

2．尿液质控品监控仪器的工作状态。

3．注意试带的有效期，注意防潮。

4．分析结果的相关性，如有不符，应及时送检。

（二）检验方法:

尿沉渣显微镜检

光学显微镜、尿沉渣计数板

1.留取尿液容器要干净；

2．标本量应达到10ml，离心速度在1500r/min，5min。

3．细胞等有形成分较多时，应在载玻片上选择较薄处进行检查，防止因遮盖漏报或少报。

4．观察管型时光线不能太强，避免透明管型的漏检。

四、血清葡萄糖检测

葡萄糖氧化酶法

实验室可根据条件选择全自动或半自动生化分析仪。

或手工法仪器：

分光光度计。

Glu氧化酶法

1.质控品：

应选择稳定的、瓶间差小、基质效应小的物质。

应选择两个不同浓度水平的质控品。

2．质控方法：

目前血糖测定至少应选择12S、13S、22S、R4S

此外手工法注意：

严格按试剂盒说明操作。

五、血型检测

ABO血型初筛

光学显微镜

抗A、抗B分型定型试剂血清生理盐水

1.抗A、抗B分型定型试剂应符合商品合格试剂的要求，鉴定结束后应放回冰箱。

2．试管、滴管和玻片必须清洁干燥，防止溶血。

3．操作方法应按规定，试管法应先加抗血清，然后加红细胞悬液，避免判定错误。

4．离心时间不宜过长或过短，速度控制在1000-2000转/分为宜，以防止出现假阴性或假阳性。

5．观察时应注意红细胞呈特异性凝集、继发性凝固及缗钱状排列的区别。

6．当凝集不好时，应洗涤受检者红细胞2-3次后，再判定。

7．发报告时由两人核对后在化验单上签字。

RhD血型测定

RhD（IgM）血型定型试剂

1.试管、滴管和玻片必须清洁干燥，防止溶血。

2．试剂如出现浑浊不能使用，若开瓶时间长后，最好用已知的RhD阴性、RhD阳性红细胞检查结果是否相符。

3．发报告时由两人核对后在化验单上签字。

六、谷丙转氨酶

紫外-乳酸脱氢酶法（生化分析仪法）；

赖氏比色法（手工法）

ALT测定试剂盒（如深圳迈瑞）

实验室可根据条件选择全自动或半自动生化分析仪。

或采用手工比色法，仪器：

目前ALT测定至少应选择12S、13S、22S、R4S

此外比色法注意：

1、严格按试剂盒说明操作。

2、每批试剂都要重新绘制标准曲线。

3、血清标本保存：

20℃48小数，4℃一周，-25℃1个月。

4、活性超过150卡门单位，标本应稀释。

七、乙型肝炎血清学检测

乙型肝炎病毒标志物乳胶检测法

乙型肝炎病毒标志物检测试剂盒（乳胶法）（如浙江爱康）

根据试剂盒的要求进行结果的操作和结果的判定。

乙型肝炎病毒标志物ELISA法

乙型肝炎病毒ELISA检测试剂盒（如安图绿科）

1.应避免样品溶血。

溶血、粘稠及高脂标本可导致检测结果不稳定。

如有细菌污染，菌体中可能含有内源性HRP，也会产生假阳性反应。

如在冰箱中保存过久，其中的IgG可发生聚合，在间接法ELISA中可使本底加深。

2．实验环境保持一定的湿度，避风。

避免在高温下进行实验。

3．试剂盒自冰箱取出后应恢复室温后在开封使用。

4．不同厂家、不同批号试剂不可混用，不得使用过期试剂。

5．洗涤微孔板时应充分拍干，否则孔内残留液体会影响结果的判定。

6．不同试剂盒所用抗原可能存在差异，检测敏感度也有差别，应参照阴性、阳性对照设定Cutoff值。

八、丙型肝炎血清学检测

丙型肝炎病毒胶体金检测法

丙型肝炎病毒胶体金检测试剂盒

丙型肝炎病毒ELISA法

丙型肝炎病毒ELISA检测试剂盒（如上海荣盛）

九、淋球菌检测

涂片镜检

玻片、光学显微镜

革兰染液

1.新配置的革兰染液应先用已知的革兰阴性和革兰阳性菌进行对照实验,以检查染液的质量。

2.结晶紫和草酸铵溶液混合不能保存太久,如有沉淀应重新配置。

3.取样是不论男女尿道及子宫颈均需用拭子插入尿道及子宫颈3cm深处取样,要避免阴道分泌物污染拭子。

4.对高度怀疑为淋病奈瑟氏菌的标本还可用细菌培养法的方法进行确认.

十．沙眼衣原体抗体检测

胶体金法

沙眼衣原体抗原检测试剂盒（胶体金法）（如上海凯创）

1.衣原体的生物活性不稳定,实验室检验的标本需要低温储存,并且应缩短采集与检验之间的时间差。

2.如标本不在1天内接受检测,应将其冷藏（2-8℃）,不要冷冻,这样最多可保持5天。

3.对于脓性排泄物样本,在采集时应对患处进行清洗后再采取样本。

十一、梅毒螺旋体抗体筛查

TRUST

梅毒甲苯胺红不加热血清实验诊断试剂盒（如上海荣盛）

1.试验在23-29℃条件下进行。

2.试剂在使用前应充分摇匀。

3.本试验是非特异性反应，需结合临床进行综合分析，必要时需做梅毒螺旋体抗体特异性试验。

十二、人类免疫缺陷病毒抗体筛查

双抗原夹心ELISA法

人类免疫缺陷病毒ELISA检测试剂盒（如上海荣盛）

1.试剂盒保存在2-8℃,在有效期内使用。

检验前将2-8℃平衡到室温。

2.试剂盒勿于高温、阳光照射环境中使用。

3.不同厂家不同批号的试剂不可混用。

4.溶血、脂血、细菌污染的血清不宜使用。

5.洗涤微孔板时应充分拍干。

6.建立室内质控，可购置定值血清作为室内质控物，每日临界值质控物的S/O比值应在其均值±

3SD范围内。

十三、风疹病毒IgG抗体测定

风疹病毒IgG抗体ELISA检测法

风疹病毒IgG抗体ELISA检测试剂盒

十四、巨细胞病毒IgM抗体和IgG抗体测定

巨细胞病毒IgM抗体和IgG抗体ELISA检测法

巨细胞病毒IgM抗体和IgG抗体ELISA检测试剂盒

十五、弓形体IgM抗体和IgG抗体测定

弓形体IgM抗体和IgG抗体ELISA检测法

弓形体IgM抗体和IgG抗体ELISA检测试剂盒