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植物色素可以主要分为植物原生质的脂溶性色素存在于质体(原生质体)和水溶性的溶解在细胞液(汉弗莱,2004, 

etal.,2003, 

Wrolstad2004和Zhohetal.,2010)。

脂溶性色素是叶绿素和类胡萝卜素和水溶性颜料包括花青苷(常见的类黄酮)和花青素。

花青素可以出现从红色到蓝色的颜色,根据pH值?

他们发生在所有的高等植物组织提供颜色的树叶,植物茎、根、花、和水果(Burdulisetal.,2009和詹森etal.,2011)。

花青素参与广泛的生物活性(etal.,2003影响积极健康的属性)。

花青素降低癌症的风险(Lazzeetal.,2004, 

马丁etal.,2003, 

Katsubeetal.,2003和金正日etal.,2012),减少炎症的侮辱(Yuodimetal.,2002)和调节免疫反应(小王和马扎,2002)。

类胡萝卜素是红色、橙色或黄色tetraterpenoids。

最熟悉的类胡萝卜素,胡萝卜素(橙色颜料),叶黄素(黄色素),番茄红素(红色颜料)。

类胡萝卜素作为抗氧化剂和促进人类健康的视力。

叶绿素是主要的颜料,使绿色植物。

Betalains红色或黄色色素,如花青素水溶性,但与花青素indole-derived化合物合成的酪氨酸。

Betalains负责甜菜的深红色,和商业用作食用色素代理。

Puupponen-Pimiaetal。

(2005)报道,抗菌贝瑞化合物,尤其是饮食类黄酮,将来可能会有重要的应用自然抗菌药物为食品工业以及医学领域。

其他报告确认颜料的性质(Ferdesetal.,2009, 

公园和,2011年和Kosticetal.,2010)。

因此在这项研究在植物适合这个实验的天然色素,可作为天然色素,多酚和类黄酮含量,抗氧化和抗菌活动对于每个色素进行调查。

多酚含量的比较分析和每种颜色类别的抗菌活动将提供未来的潜在可能性的基础数据开发功能性健康食品和天然抗菌材料。

2。

材料和方法

2.1。

实验材料

在这项研究中使用了13种植物材料(黑米(栽培稻l.)、紫地瓜(番薯甘薯l.)、成熟的苦瓜(苦瓜l.),黄色的辣椒粉(甜椒l.)、红球甘蓝(芸苔属植物oleraceal.)、黄栀子花(栀子Ellis),蓝色的栀子花(栀子Ellis);

中国毛地黄(地黄Liboschitz);

桑叶(桑属阿尔巴l.);

洋葱皮(洋葱l.),葡萄皮(葡萄l.);

桑(桑属阿尔巴l.);

红甜菜(甜菜属l.))的天然植物色素。

(blackrice,purplesweetpotato,yellowbittermelon,yellow

paprika,redcabbage,yellowgardenia,bluegardenia,Chinesefoxglove,mulberryleave,onionpeel,grapepeel,mulberryandredbeet)

液态氮用于预防氧化的茶多酚和黄酮类物质。

每个样本冷冻,然后磨。

每个色素粉储存在−20°

C进行进一步的实验。

所有样本的提取溶解在蒸馏水只对安全没有任何有机溶剂申请保健食品和化妆品。

这些植物被选中是因为可能获得天然色素和各种生理功能。

2.2。

总酚含量测定

总酚醛树脂的浓度测量使用福林酚试验(单例etal.,1999)。

简单来说,3ml超纯水,1.0ml的样品,和1.0ml福林酚试剂添加到25ml容量瓶,混合后静置5分钟。

然后添加1.0ml饱和碳酸钠溶液,超纯水定容后静置2h。

样本过滤后利用紫外分光光度计在波长640nm处测总酚浓度。

总酚醛树脂含量是标准化对阿酸和表达为μg/毫升的阿酸当量(身上)。

测定的线性围被确定为0.5--5.0mg/L技术工程师(R2=0.9990),给的吸光度围0.050--0.555。

2.3。

总类黄酮含量的测定

总类黄酮含量是决定根据Zhishenetal。

(1999)。

总之,大约0.1克的干和地面每个样本中提取75%的甲醇在室温下过夜。

样品与试剂混合含氯化铝和亚硝酸钠和pink-coloredflavonoid-aluminum复杂成立于碱性介质。

解决方案对应于30μl亚硝酸钠(10%)、60μl氯化铝六水合物(20%)、200μl氢氧化钠(1米)和400μl水被添加到100μl每个样本。

吸光度读数在510nm开始5分钟后的样本,并进行每20秒为1分钟。

包含甲醇代替示例所使用的试剂空白。

总类黄酮含量测定用柚皮苷的标准曲线。

硝酸铝显色法是先用亚硝酸钠还原黄酮,再加硝酸铝络合,最后加氢氧化钠溶液色.

在中性或弱碱性及亚硝酸钠存在条件下,黄酮类化合物与铝盐络合生成螯和物,加入氢氧化钠溶液后使黄酮类化合物开环,生成2’羟基查耳酮而显粉红色,在510nm波长处测吸光度总类黄酮含量测定用柚皮苷的标准曲线。

2.4。

DPPH实验

100μl各种浓度(100、250、500、100和2500mg/L)调查植物的色素成分添加到900μl100%甲醇含100μMDPPH,反应混合物大力动摇了。

储存在室温下30分钟后在黑暗里,DPPH的吸光度由分光光度计在517海里。

的DPPH自由基清除活性计算根据以下方程:

对DPPH自由基清除效果(%)=((一个 

− 

B)/一个]×

100,一个是没有色素成分和吸光度在517海里B吸光度的变化在517纳米颜料成分孵化(Brand-Williamsetal.,1995)

原理:

DPPH自由基有单电子,在517nm处有一强吸收,其醇溶液呈紫色的特性。

当有自由基清除剂存在时,由于与其单电子配对而使其吸收逐渐消失,其褪色程度与其接受的电子数量成定量关系,因而可用分光光度计进行快速的定量分析。

2.5。

抗菌筛选试验

2.5.1。

菌株和媒体

对抗菌药物评价的目的,2g的积极的细菌,4g-细菌了。

这些微生物从朝鲜购买收藏型文化(KCTC、大田、国),在营养琼脂培养。

2.5.2。

琼脂扩散法

接种物的大约10CFU菌落接种到遵循琼脂表面。

无菌8mm滤纸光盘放置在盘子和浸满30μl样本提取。

允许在室温下1h后提取,以促进整个表面扩散,板块在37°

C孵化24h的细菌。

然而,沙门氏菌typhymurium在30°

C孵化24h。

的抗菌活性测定的大小明确区域经济增长的抑制。

卡那霉素是用作控制。

CFU 

即为菌落形成单位,是平板计数法的常用单位。

2.6。

数据分析

统计分析使用统计分析的程序系统。

方差分析过程之后,邓肯测试用于确定显著差异(p<

0.05)之间的治疗手段。

3结果与讨论

3.1。

总酚类物质和类黄酮含量

多酚物质,广泛存在于植物已知抗氧化效果起着重要的作用,植物或人体防御行动,和酚类化合物通常具有不同的物理化学性质和生理功能取决于它们的结构(本etal.,2010, 

波哈特etal.,2009, 

凯瑟琳·

千etal.,2009和PiluzzaBullitta,2011)。

这些酚类物质在植物,给一个特殊的颜色,作为底物的氧化还原反应。

酚醛塑料保护植物本身的能力是很重要的在防止对微生物的攻击。

酚类化合物属于次生代的产物在植物界分布广泛,有腐烂的结构和分子量。

酚羟基自由基夫妇与巨大的分子如蛋白质,和有功能的生理活性,如抗氧化作用。

在这项研究中,在选定的植物天然色素,适合这个目的(表1, 

无花果。

1)的容总多酚和黄酮类化合物测定(无花果。

2)。

观察的结果总酚类化合物以13种选择植物天然色素,洋葱皮多酚含量是最高的,表现出相对较高的水平也在红卷心菜和桑树。

红球甘蓝类黄酮含量最高,其次是黄色的栀子花,桑叶、桑椹。

我们的结果对酚类和黄酮类容可以与他人相比(詹森etal.,2011),显示稳定的戴维森的子(DavidsoniapruriensF。

Muell),

戴维森的子,水提取温度、时间和比例被发现显著影响TPC的萃取效率。

采用RSM,研究发现最优水萃取条件在90°

C的温度,时间30分钟,比20:

1毫升g−1。

RSM模型是有效的,可靠的预测的最优条件和实验条件。

这些条件可以申请提取TPC从其他子品种;

然而,需要进一步的研究来证实。

这些最优条件下,polyphenol-enriched提取制备。

提取的低湿度含量和高水溶性。

它包含45毫克GAEg−1TPC、22毫克g街−1类黄酮,3.2毫克CAEg−1原花青素,2毫克CGEg−1花青素和56个毫克ACEg−1维生素c的提取具有强力的抗氧化活性剂量依赖性的方式;

然而,它的抗氧化活性明显低于高纯度α-Tocopherol和二叔丁基对甲酚。

因此,进一步的调查为进一步开发和利用必要的戴维森的子在食品和营养食品行业。

提取对热处理在95°

C高于商业桑着色剂,但不如着色剂来自红卷心菜和紫甘薯。

多种酚酸的添加显著增加颜色强度指示copigmentation复合物的形成。

商业绿原酸以及从澳大利亚本地特有的一种草本植物提取富含绿原酸、塔斯马尼亚胡椒叶(Tasmannia生长状况,R。

Br),既测试模型的饮料解决方案受到光辐照和热处理。

添加copigment导致持久的颜色强度增加。

戴维森的子提取成功可以利用的天然食品的颜色。

这份报告的结论,利用戴维森的子水果的自然色会让这个行业增加天然色素的围,并将创造新的机会为新兴的本地食品行业对应于我们的结果。

多酚物质广泛存在于植物,具有抗氧化作用在植物或人体的防御行动中发挥了重要的作用,和酚类化合物通常具有不同的理化性质和生理功能取决于其结构(博也纳etal.,2010,博哈特etal.,2009,等。

,2009和piluzza和bullitta,2011)。

这些酚类物质在植物中赋予特殊的颜色,并作为氧化还原反应的底物。

酚类物质的能力,以保护植物本身是很重要的,防止微生物攻击。

酚类化合物广泛分布于植物次生代的部分产品,具有不同的结构和分子量。

酚性羟基自由基对夫妇具有巨大的分子,如蛋白质,具有生理活性,如抗氧化作用。

在这项研究中,在选定的植物天然色素,是适合这个目的(表1,图1)的总多酚和黄酮类化合物的含量测定(图2)。

观察13种植物天然色素中总酚类化合物的测定结果,多酚含量最高,在大白菜和桑树中也表现出较高的含量。

红甘蓝中黄酮含量最高,其次为黄栀子、桑、桑。

我们的研究结果对酚类和黄酮类化合物含量可与别人相比(延森etal.,2011),他发现戴维森的梅花的稳定性(davidsoniapruriens,F.Muell.),提取液对热处理在95°

C高于商业桑色素,但不如来自红甘蓝、紫甘薯色素。

各种酚酸显著增加颜色强度指示辅色配合物的形成除了。

商业绿原酸以及从澳大利亚本土植物富含绿原酸提取物、塔斯马尼亚辣椒叶(tasmannia杉木,R.Br.),无论是在模型的软饮料溶液进行光照射和热处理试验。

的辅色的加入导致色彩强度持续增加。

戴维森梅提取物可以成功地被用作天然食物颜色的来源。

本报告的结论,利用戴维森的梅果为天然颜色的来源,将使该行业增加天然色素的围,并将创造新的机会,为新兴的天然食品工业与我们所获得的结果。

表1。

选定的天然植物色素。

材料来源

类色素

红色和紫色组

紫甘薯

花青素

红甜菜

Betalines

红球甘蓝

葡萄皮

黄色的组

成熟的苦瓜

类胡萝卜素(包括叶黄素)

红辣椒

黄栀子花

中国毛地黄

洋葱皮

黑色组

黑米

蓝色组

蓝色的栀子花

环烯醚萜苷、黄酮类化合物

绿色组

桑离开

卟啉(叶绿素)

表选项

粉末在这个实验中使用的天然植物色素。

图选项

总多酚和黄酮类天然植物色素的容。

*数据代表平均值±

SE的三个独立的实验。

意味着同样的字母在列没有显著的不同p<

0.05水平通过邓肯的多个测试围。

酒吧代表标准错误。

黑米,B:

紫甘薯,C:

成熟的苦瓜,D:

辣椒,E:

红球甘蓝,F:

黄栀子花,G:

蓝色的栀子花,H:

中国毛地黄,我:

桑离开,J:

洋葱皮,凯西:

葡萄皮、桑椹、和M:

红甜菜。

3.2。

DPPH自由基清除活性

抗氧化能力(无花果。

3)天然色素显示相对较高的洋葱皮、红球甘蓝,桑椹,辣椒粉,葡萄皮。

洋葱皮和桑色素在一个相对低浓度显示高清除活动(Booetal.,2011)。

在我们的研究中,DPPH自由基清除活性浓度。

类似的结果与其他研究表明,酚类化合物含量越高的电子供体能力也更高(Joungetal.,2007, 

etal.,2005和Rhim,2010)。

我们的结果在红球甘蓝可以相比雅各etal。

(2011)使用不同的萃取过程,绿色和红球甘蓝提取物的抗氧化性能进行了评估。

结果表明,绿色和红色卷心菜相关的总抗氧化能力与总酚醛树脂和总类黄酮含量的提取。

2,2′-azino-bis(3-ethylbenzo-thiazoline-6-sulphonic酸)(abt)自由基清除能力的红球甘蓝远远高于绿色卷心菜提取。

多酚之间的相关性,研究植物抗氧化和酶活性。

我们的结果符合Debnathetal。

(2011),那里的水和乙醇提取物进行了栀子花jasminoides埃利斯(GJE)。

的集成电路50值DPPH、abt、羟基和过氧化物自由基清除活动是0.14,0.21,1.08和1.43毫克/毫升的水性提取、和0.36,0.39,1.56和1.99毫克/毫升乙醇作为动力提取,分别。

提取物也表现出很强的还原能力,nitrite-scavenging活动,抑制亚油酸氧化、超氧化物dismutase-like(SOD-like)和过氧化氢酶的活动。

水提取物的抗氧化活性高于乙醇提取。

此外,抗氧化活动是高度相关的观察到酚类和黄酮类的容。

因此,我们的研究以及Debnathetal。

(2011)这种水果,强烈表明,提取物和其他色素可能是一个很好的抗氧化剂来源作为膳食补充剂。

这是我们的最近的出版物(所示Booetal.,2012)的化妆品成分桑叶颜料超氧化物歧化酶(SOD)最高,67.1%的酶活性,而洋葱皮色素显示SOD酶活性最低的15.3%。

猫(过氧化氢酶)的活性和APX型(抗坏血酸盐过氧化物酶)的化妆品成分的天然植物色素在桑树显示更高的活动,和红甘蓝色素化妆品成分相比与其他植物色素。

3所示。

根据每种DPPH自由基清除活性的天然植物色素。

意味着在列相同的字母没有明显不同p<

桑叶,J:

3.3。

抗菌活性

比较分析的结果选择微生物的抗菌活性(大肠杆菌, 

枯草芽孢杆菌, 

弧菌parahaemolyticus,沙门氏菌typhymurium, 

变形杆菌, 

微球菌危害使用琼脂扩散试验在十三天然植物色素所示表2和表3和无花果。

4。

B。

细小,M。

危害革兰氏阳性细菌和E。

杆菌,V。

parahaemolyticus革兰氏阴性细菌的,显示清晰区形成抑制增长。

抗菌素的活动P。

君子兰和年代。

typhymurium与其他菌株相比相对较低。

大多数的天然色素除了洋葱皮的情况E。

杆菌和B。

细小显示较高的抗菌活性。

的抗菌活动V。

parahaemolyticus和P。

君子兰是最高的葡萄皮和桑树。

的年代。

typhymurium显示高活动在红球甘蓝,桑椹和桑离开M。

危害在栀子花和中国毛地黄高。

尤其是桑和葡萄皮显示大多数菌株的抗菌活性。

然而,抗菌活性被认为有所不同根据抗菌菌株类型和种类的天然植物色素。

很明显,所选植物色素在自然而不抑菌杀菌,基于抑制从清除区获得的结果。

目前广泛的天然物质已知抗菌活性,而很少有研究相关的抗菌效力和天然植物色素的应用程序已经完成,有些没有。

(2011)报道称,国purple-fleshed红薯(SPs)含有花青素的最高金额和总酚类化合物(2.43--3.35毫克/克,454.13--638.79%,分别)相比,白色/cream-fleshed干式SPs。

的抗氧化活动purple-fleshedSPs高于其他SPs。

我们的研究结果与国甘薯与相对应金等。

(2012)在那里发现花青素朝鲜purple-fleshed甘薯品种“Shinzami”是由单链不饱和脂肪或是di-acylated形式的羟基苯甲酸,咖啡酸和阿酸的基本结构花青色素3-sophoroside-5-glucoside或peonidin3-sophoroside-5-glucoside。

蒸后,总花青素含量降低了近一半,而焙烧稍微降低了总花青素含量。

这是非常重要的功能性食品。

同时,全etal。

(2005)报道,彩色马铃薯提取与高抗菌活性表示反对B。

细小和E。

杆菌。

本研究的天然色素,以及在许多其他研究(全etal.,2005, 

金姆和Rhyu,2008年和Zhohetal.,2010)表现出相对较高的抗菌活性。

这些结果表明高价值avaluable天然材料彩色化妆品的未来发展。

很明显,抗菌性色素成分密切相关,尤其是在官能团的存在。

表2。

品种和栽培条件的列表用于筛选抗菌活性测试。

菌株

培养条件

革兰氏阳性细菌

枯草芽孢杆菌 

(KCCM11316)

37°

C,trypticase大豆琼脂

藤黄微球菌 

(KCCM11326)

C,营养琼脂

革兰氏阴性细菌

大肠杆菌 

(KCCM11234)

鼠伤寒沙门氏杆菌(KCCM40253)

30°

C,211中

副溶血性弧菌(KCCM11965)

C,营养琼脂3%氯化钠

变形杆菌 

(KCCM40888)

表3。

抗菌活性的天然植物色素。

植物色素

抑菌圈大小,毫米

大肠杆菌

枯草芽孢杆菌

弧菌parahaemolyticus

沙门氏菌typhymurium

变形杆菌

微球菌危害

++

+++

+

++++

不成熟的苦瓜

++++:

大于10毫米;

+++:

5-10毫米;

++:

2-5毫米;

+:

小于2毫米;

−:

没有检测到。

4所示。

抑制活性的天然植物色素对微生物纸碟扩散试验。

卡那霉素(中心)作为抗菌活性的标准。

a-1:

成熟的苦瓜(黄色);

2:

辣椒粉;

3:

中国毛地黄;

4:

黄栀子花,b-1:

不成熟的苦瓜(绿色),2:

桑离开;

洋葱皮;

蓝色的栀子花,颈-1:

紫甘薯;

桑树;

葡萄皮;

红卷心菜、d1:

红甜菜;

黑米;

紫甘薯(顺时针方向)。

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